研究肿瘤免疫治疗的耐药机制

国外医药抗生素分册２００８年第２９卷第１期　

肿瘤的多药耐药机制及逆转剂的研究进展　

廖绍兰，王平　

（中国医药集团四川抗菌素工业研究所安全性评价中心，成都６１００５１）　

摘要：肿瘤多药耐药性（Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ，ＭＤＲ）指癌细胞对于许多结构不相关的化疗药物表现出的交叉抵抗现　象，是肿瘤难治疗、易复发的主要原因之一，故多药耐药机制便成为当前肿瘤化疗的研究热点。许多肿瘤的耐药细胞中　存在着多药耐药基因（ｍｄｒ－１）￣Ｄ多药耐药相关蛋白基因（ｍｒｐ）的高表达，而这些基因的表达又受到某些基因及蛋白的调节，　￣ｎＰ５３、ｐ－ｇＰ等。另外，ＤＮＡ甲基化也与肿瘤的多药耐药性有关。本文就近几年来有关肿瘤细胞多药耐药机制的研究进　展以及针对这些耐药性研发的不同逆转方法进行综述。　关键词：肿瘤；多药耐药性；逆转剂　中图分类号：Ｒ９７９．１　４　文献标识码：Ａ　文章编号：１００１—８７５１（２００８）０１—０００７—０５　

Ｒｅｓｅａｒｃｈ　Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｎ　Ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　Ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　Ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　Ｃａｎｃｅｒ　

Ｃｅｌｌｓ　ａｎｄ　Ｉｔｓ　Ｒｅｖｅｒｓａｌ　Ａｇｅｎｔｓ　

ＬＩＡＯ　Ｓｈａｏ—ｌａｎ，ＷＡＮＧ　Ｐｉｎｇ　

（Ｃｅｎｔｅｒ　ｆｏｒ　Ｓａｆｅｔｙ　Ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ　ｏｆＤｒｕｇｓ，Ｓｉｃｈｕａｎ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ，Ｃｈｉｎａ　Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｇｒｏｕｐ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｃｈｅｎｇｄｕ　６　１　００５　１，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｍｕｌｔｉｐｌｅ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ（ＭＤＲ）ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ　ｉＳ　ｏｎｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｍａｉｎ　ｆａｃｔｏｒｓ　ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ　ｉｎ　ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｄｉ币ｃｕｌｔｉｅｓ　ａｎｄ　ｄｉｓｅａｓｅ　ｒｅｌａｐｓｅｓ，ａｎｄ　ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ　ｂｅｃｏｍｅｓ　ｔｈｅ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｅｍｐｈａｓｉｓ　ｉｎ　ｃｕｒｒｅｎｔ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．Ｍａｎｙ　ｓｔｕｄｉｅｓ　ｒｅｖｅａｌｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｇｅｎｅ　ｍｄｒｌ　ａｎｄ　ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ—ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｇｅｎｅ　ｍｒｐ　ｓｈｏｗｅｄ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ｉｎ　ｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ，ａｎｄ　ａｔ　ｔｈｅ　ｓａｍｅ　ｔｉｍｅ　ｔｈｅｙ　ｗｅｒｅ　ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｓｏｍｅ　ｇｅｎｅｓ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎｓ，ｓｕｃｈ　ａｓ　Ｐ５３，Ｐ—ｇｐ　ａｎｄ　ＳＯ　ｆｏｒｔｈ．Ｉｎ　ａｄｄｉｔｉｏｎ．ＤＮＡ　ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ　ｉＳ　ａｌｓｏ　ａ　ｆａｃｔｏｒ　ｉｎｖｏｌｖｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ＭＤＲ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌｓ．Ｉｎ　ｔｈｉｓ　ｒｅｖｉｅｗ，ｔｈｅ　ｃｕｒｒｅｎｔ　ｒｅｓｅａｒｃｈ　ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ　ｏｆ　ｃａｎｃｅｒ　ｃｅｌｌ　ＭＤＲ　ａｎｄ　ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｉｎｇ　ＭＤＲ　ｒｅｖｅｒｓａｌ　ａｇｅｎｔｓ　ｗｅｒｅ　ｄｅｓｃｒｉｂｅｄ．　

内蒙古中医药　

脾虚证的肿瘤患者免疫机制的研究　

陈学彰　

摘要：通过研究脾虚证的肿瘤患者体内免疫功能的调节机制，从而说明肿瘤患者可以通过健脾补脾的中医药方法来起到提高　

免疫功能的作用。　关键词：脾虚证；免疫　

中图分类号：仿Ｒ７３文献标识码：Ａ文章编号：１００６—０９７９｛２００７）０５—００４０—０２　

肿瘤的形成主要是由于机体正常的生理状态受到破坏，　引起脏孵、气血、津液等功能和结构产生质的变化而发生的。　

肿瘤的病因包括内伤病因和外源病因。内伤病因主要是正气　亏虚。外源病因主要是外邪因素，如六淫之邪。而正气亏虚是　

肿瘤发生的基础条件。＜内经）有日：“正气存内，邪不可干”。　

“邪之所凑，其气必虚”。这说明机体正气亏虚，脏腑功能紊　乱，而致各种外邪入侵，从而发生肿瘤。脾是后天之本。由于　

本身正气的衰弱，加上外邪的入侵，在肿瘤患者体内，脾这一　

后天之本受到大大的削弱。生化失司。从而导致肿瘤患者的体　质衰弱。因此本文通过研究脾虚证的肿瘤患者体内免疫功能　

的调节机制。从而来指导临床上如何来提高肿瘤患者的免疫　

功能。　中医上“脾”是以消化系统为主的多系统的综合功能单　

位。脾虚证反映了机体的消化吸收、代谢及免疫功能的低下。　中医学认为脾主运化，为气血生化之源。脾旺则不受邪，脾虚　

则气血生化不足，气血不足则会导致免疫功能降低。现代研　究…发现脾虚患者及其动物模型的机体变化中，细胞免疫及　

体液免疫等方面均呈低下状态。脾虚时体内红细胞Ｃ３ｂ受体　

下降，提示红细胞介导的消除循环免疫复合物及免疫黏附功　

能下降。从而导致脾虚时免疫功能的低下，淋巴细胞亚群比例　的失调。有人认为。脾虚患者Ｔ淋巴细胞亚群被抑制。可能是　

一系列的细胞因子释放减少的促发因素。在细胞因子方面，　脾虚患者表现为分泌紊乱，特别是ＩＬ一２。ＩＬ一３。ＴＮＦ—ａ等　

重要观察参考指标。从上述可以说明了中医学概念的脾不仅　仅是现代医学中的脾脏器官，而且是一个具有广泛的免疫学　

抗肿瘤药物研究进展

作者单位：276000 山东医学高等专科学校

通讯作者：尹华伟

标签： 抗肿瘤药物； 综述

随着人类生活环境、生活水平和生活方式的变化以及医学的进步，疾病谱发生了显著的变化，一般性传染病逐渐被控制，而恶性肿瘤则成为日益常见且严重威胁人类生命和生活质量的主要疾病之一。目前在中国乃至全世界，癌症已成了导致人类死亡的第二大原因。

近几年来，肿瘤化疗取得了相当大的进步，肿瘤患者生存时间明显延长，特别是对白血病、恶性淋巴瘤的治疗有了明显的突破，但对危害人类生命健康最严重的、占恶性肿瘤90%以上的实体瘤的治疗未能达到一定的效果。药学家和肿瘤学家越来越深刻地意识到要提高肿瘤的治疗效果，必须从肿瘤发生发展的机制入手，这样才能取得突破性进展。随着对肿瘤特性和本质的研究，抗肿瘤药物正从传统的细胞毒药物向针对机制的多环节作用的新型抗肿瘤药物发展。目前抗肿瘤药物的发展已进入了一个新的时代，从天然植物药物的开发（如紫杉醇），已发展到基因治疗、免疫治疗以及新的靶点药物，如以肿瘤细胞膜为靶点和以肿瘤血管生成为靶点的多项研究［1］。因此，在肿瘤的综合治疗中，各种药物的治疗手段已日益受到重视。

近年来，分子肿瘤学和分子药理学的发展不断地阐明肿瘤的本质，而且大规模快速筛选、组合化学、基因工程等先进技术的发明和应用更是加速了抗肿瘤药物的研究与开发进程。目前国内外关注的抗肿瘤作用的新靶点和相应的新型抗肿瘤剂型或手段有多种，本文仅就其中部分热点简述如下。

1 新生血管生成抑制剂

新生血管生成抑制剂是当今新型抗肿瘤药物研究最活跃的领域之一。1971年，Folkman最早提出肿瘤生长是血管依赖性的，并指出控制肿瘤生长的新途径-抗血管生成（angiogenesis）。已有研究表明，几乎所有实体肿瘤的生长和转移均依赖于肿瘤的血管生成。原发肿瘤的生长和转移是以新生血管的不断生成为前提的，肿瘤不但通过血管从宿主获取营养和氧气，而且通过肿瘤血管不断地向新的组织和器官输送癌细胞。实体瘤的生长通常分为无血管期和血管期，肿瘤直径达到1～2 mm时，肿瘤分泌若干因子刺激血管形成，获得血供的肿瘤继续增大乃至转移［2］。

研究肿瘤细胞耐药

3.1. 耐药细胞株的建立

本实验以紫杉醇为诱导药，以人食管鳞癌细胞系 EC109 为诱导对象，采用高剂量间歇诱导结合时间递增的方法建立耐药细胞株。终浓度为 0.625 μg/ml 的紫杉醇（此浓度是紫杉醇对 EC109 细胞 IC50 的 12.5 倍）作用于对数生长期的EC109 两个小时，之后弃含药培养基，用 4℃PBS 洗三次，0.25%胰蛋白酶消化处理，800r/min 离心 4min 收集细胞，加培养基重悬，重新接种于培养瓶继续培养；24 小时后可见大量细胞死亡，不断去除凋亡细胞，扩增活细胞，至生长状态良好，达到 70%~80%饱和时，传代培养 3 代；重复上述操作两次，即

EC109细胞在此阶段共被药物作用 3 次，得到细胞 EC109/Taxol。MTT 实验测定亲本细胞与耐药细胞对多种细胞毒类化合物的敏感性。

3.2. 裸鼠移植瘤耐药模型的建立

无菌条件下收集亲本株 EC109 和 耐药株EC109/Taxol 细胞，用无菌生理盐水稀释至 5×107个/ml，采用皮下移植方法，分别接种 EC109 和 EC109/Taxol

细胞于裸鼠右侧腋窝皮下，每只接种 1×107个细胞。待其成瘤后（直径达 1cm)即认为此瘤块为肿瘤，记录两细胞成瘤时间及成瘤率。