深部真菌感染的诊断与治疗

侵袭性肺部真菌感染的诊断标准与治疗原则

中华内科杂志编辑委员会

近年来由于造血干细胞移植(HSCT)、实体器官移植的广泛开展、高度免疫抑制剂和大剂量化疗药物的应用以及各种导管的体内介入、留置等，临床上侵袭性肺部真菌感染（invasive pulmonary

fungal infections,IPFI）的发病率明显上升。IPFI也日益成为导致器官移植受者、恶性血液病和恶性肿瘤患者以及其他危重患者的死亡原因之一。IPFI的诊断标准与治疗原则至今尚未统一。为了规范我国IPFI的诊断与治疗，中国侵袭性肺部真菌感染工作组经反复讨论，参照欧美国家的相关诊断与治疗指南，结合中国国情，制定出我国IPFI的诊断标准和治疗原则（草案），供国内同道在临床实践中借鉴。

诊断标准

一、定义

IPFI是不包括真菌寄生和过敏所致的支气管肺部真菌感染，分为原发性和继发性2种类型。引起IPFI常见的真菌主要是念珠菌属、曲霉属、隐球菌属、接合菌（主要指毛霉）和肺孢子菌等。IPFI的诊断由宿主因素、临床特征、微生物学检查和组织病理学四部分组成。临床诊断IPFI时要充分结合宿主因素，除外其他病原体所致的肺部感染或非感染性疾病。诊断IPFI分确诊、临床诊断及拟诊3个级别。

二、确诊IPFI

至少符合1项宿主因素（附录1），肺部感染的1项主要或2项次要临床特征（附录2）及下列1项微生物学或组织病理学依据。

1.霉菌：肺组织标本用组织化学或细胞化学方法检出菌丝或球形体（非酵母菌的丝状真菌），并发现伴有相应的肺组织损害。肺组织标本、胸液或血液霉菌培养阳性，但血液中的曲霉菌属和青霉属（除外马尼菲青霉）真菌培养阳性时需结合临床，要排除标本污染。

表1 IPFI的诊断标准

宿主因素 临床特征 微生物学 组织病理学

确诊 +★ + +▲ +

临床诊断 + + + -

拟诊 + + - -

注：★原发性者无宿主因素，▲肺组织、胸液、血液真菌培养阳性（除外肺孢子菌）

波长）测每孔的ＯＤ值。　

将真皮成纤维细胞用ＤＭＥＭ的培养液培养，置于３７％、　５％ＣＯ　培养箱中，每（３—４）ｄ用胰酶消化传代一次。选对数　

生长期的细胞用于实验（本实验中选用１—３代细胞）。调整　

细胞密度为３　Ｘ　１０　／ｍｌ，分５组接种于９６孔板上，每组设８　个复孔，每孔加２００　细胞悬液。２４ｈ待细胞贴壁后，随机选　

４组用ＰＢＳ液冲洗２次后，分别加入Ｋ—ＳＦＭ、Ｋ—ＳＦＭ＋１％　

ＦＢＳ、、Ｋ—ＳＦＭ＋５％ＦＢＳ—Ｋ—ＳＦＭ＋１０％ＦＢＳ，余一组为对　

照组（加ＤＭＥＭ），另设调零组（ＰＢＳ缓冲液）。将９６孔板置　

于３７％、５％ＣＯ２培养箱再培养２ｄ、４ｄ、６ｄ、８ｄ后，每孔加入　

５ｍｇ／ｍｌ　ＭＴＩ＂试剂２Ｏ　，放人３７％，５％ＣＯ　和１００％湿度下培　

养４ｈ，用移液器小心吸除上清液，每孔加入二甲基亚砜（ＤＭ—　

ｓｏ）１５０　放于震荡器上震荡１５ｍｉｎ后，再于３７ｏＣ，１００％空气　湿度下放置１２ｈ充分溶解细胞内的甲瓒结晶；振荡１０ｍｉｎ，用　酶标仪器（５７０ｎｍ波长）测每孔的ＯＤ值。　

相同步骤重复３次。　

１．３统计学处理统计数据以（　±Ｓ）表示，采用ｓｐｓｓ　１３．０　

软件进行方差分析，并进行两两比较，以　＝０．０５为检验　

标准。　

２结果　对成纤维细胞应用Ｋ—ＳＦＭ＋１０％ＦＢＳ组培养基与　

ＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ组为对照组对细胞的活性增殖影响相同　

（Ｐ＞０．０５）；而Ｋ—ＳＦＭ、Ｋ—ＳＦＭ＋１％ＦＢＳ、Ｋ—ＳＦＭ＋５％　

ＦＢＳ三组培养基与ＤＭＥＭ＋１０％ＦＢＳ组对细胞的活性增殖影　

响不同（Ｐ＜０．０５）（如图１所示）　

图１　不同培养基对成纤维细胞活性增殖的影响　

对角质形成细胞应用Ｋ—ＳＦＭ＋１％ＦＢＳ组培养基与Ｋ　

—ＳＦＭ组为对照组对细胞的活性增殖影响相同（Ｐ＞０．０５）；　

而Ｋ—ＳＦＭ＋５％ＦＢＳ、Ｋ—ＳＦＭ＋ｌ０％ＦＢＳ两组培养基与Ｋ—　ＳＦＭ组对细胞的活性增殖影响不同（Ｐ＜０．０５）（如图　

２９Ｏ　检验医学与临床２００７年４月第４卷第４期Ｌａｂ　Ｍｅｄ　Ｃｌｉｎ，Ａｐｒｉｌ　２００７，Ｖｏｌ　４，Ｎｏ　４　

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李　节　

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性。费用问题和延长手术时问是限制计算机系统在临床上使　

用的主要问题，此外这些系统未在手术计划巾将软组织的生　

物力学分析包括在内。随着外科技术的发展和新型生物材料　

的采用，人工膝关节置换技术不断进步，但许多细节问题有待　

深入研究。　

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