1-2ANA检测策略

ANA检测的质量控制ANA检测的质量控制概述ANA（抗核抗体）检测是一种常用的实验室检测方法，用于诊断和监测自身免疫系统性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE），类风湿关节炎（RA）和硬皮病（SSc）等。

由于ANA检测对结果的灵敏度和特异性要求较高，质量控制在该检测中至关重要。

质量控制ANA检测的质量控制主要包括以下方面：1. 样本准备在进行ANA检测之前，样本的合理选择和准备非常重要。

通常使用乙酰胆碱酯酶（AChE）标记的HEp-2细胞作为血清中ANA的检测靶点。

在采集血清样本时，应避免接触过多的细胞，以防止污染和误差的产生。

2. 试剂质量控制使用高质量的试剂是保证ANA检测质量的关键。

试剂的来源和存储条件应符合标准要求，并定期进行验证和检查。

试剂的稳定性也需要进行评估和监测，以确保每次检测的准确性和可靠性。

3. 仪器校准和维护ANA检测通常使用酶联免疫吸附法（ELISA）或间接免疫荧光法（IIFA）等技术。

针对不同的检测方法，仪器的校准和日常维护是确保检测结果准确性的重要环节。

仪器应按照制造商的要求进行校准，定期检查磨损和维护设备，以确保其在正常运行状态下提供准确的结果。

4. 质量控制标准品质量控制标准品是检测质量控制的核心。

这些标准品通常包括阴性对照、低阳性对照和高阳性对照。

在每次进行ANA检测时，都应从质量控制标准品中选取合适的样本，与患者样本一同进行检测，以验证和确保分析结果的准确性和可重复性。

5. 人员培训和质量管理进行ANA检测的人员应接受专业培训，并了解和掌握ANA检测的原理和方法。

建立完善的质量管理体系，包括合理的实验室操作规程、纪录和档案管理等，以确保实验室操作的一致性和可追溯性。

结论ANA检测的质量控制是保证检测结果准确性和可靠性的重要环节。

通过合理选择和准备样本、使用高质量的试剂、进行仪器校准和维护、使用质量控制标准品以及进行人员培训和质量管理，可以最大程度地降低误差和偏差，确保ANA检测结果的可靠性和准确性，从而更好地指导临床诊断和治疗。

医院检验中心ANA操作规程
[步骤]
1)按1:41稀释待测血清,阳性对照和校正液(5ul上述样
品加入到200ul的样品稀释液中混匀)
2)取100ul已稀释的上述样品加入到相应的微孔中,空白
对照孔加样品稀释液100ul.
3)置20℃-28℃,30分钟.
4)洗涤6次.
5)每孔加酶结合物100ul.
6)置25℃-28℃,30分钟,洗涤6次.
7)每孔分别加入100ul溶液A和B.
8)20℃-28℃ 30 分钟.
9)每孔加入50ul 2NHCL终止反应混匀,于450nm处测OD [结果判定]
待测血清OD
────── <1.0 为阴性
校正液OD
待测血清OD
────── =1-2.0为不明确阳性需重测
校正液OD
待测血清OD
────── >2.0 为阳性
校正液OD
[质量控制]
空白OD必须<0.10，若校正液的OD<0.08，则检测结果无效,须重做.。

ANA检测的质量控制自身免疫性疾病（autoimmune diseases，简称AD）是一类病因尚不清楚、多系统器官受累、自身免疫反应异常的疾病。

其中，抗核抗体（antinuclear antibodies，简称ANA）是许多自身免疫性疾病的特征性标志物。

ANA检测成为自身免疫疾病的重要辅助诊断方法之一。

ANA的检测结果受到多种因素的影响，质量控制对ANA 检测的准确性和可靠性至关重要。

1. 检测方法的标准化ANA检测方法包括间接免疫荧光法（indirect immunofluorescence assay，简称IFA）和固相酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA）。

为了保证不同实验室的结果具有可比性，需要制定标准化的检测方法和操作规范。

2. 标准参比物质的使用在ANA检测过程中，使用标准参比物质进行质控是必要的。

这些参比物质具有已知的抗核抗体阳性和阴性结果，可以用于评估实验室的准确性和可靠性。

3. 质控样品的使用质控样品是用于评估ANA检测过程中分析系统的稳定性和一致性的关键组成部分。

通过定期使用质控样品进行检测并记录结果，可以及时发现分析系统的偏差和变异。

4. 内部质量控制的建立建立内部质量控制（internal quality control，简称IQC）程序是确保ANA检测质量的重要手段。

IQC程序包括设置质控样品的目标值和范围、监测质控样品结果的稳定性和一致性，并采取纠正措施来解决问题。

5. 外部质量评估的参与外部质量评估（external quality assessment，简称EQA）是评估实验室质量和水平的重要方式。

通过参与EQA活动，实验室可以与其他实验室进行比较，发现问题并改进分析过程。

6. 人员培训和持续教育为了保证ANA检测的质量，实验室人员需要接受专业的培训，并进行持续教育，了解最新的技术和方法。

只有具备足够的知识和技能，才能保证ANA检测的准确性和可靠性。

一、USP方法5.2.12抗IIa活性（20.0~35.0IU/mg）5.2.12.1仪器：紫外可见分光光度计、低温循环槽、电子天平5.2.12.2试液：醋酸溶液：取冰乙酸42ml于100ml容量瓶中，加水稀释至刻度，混匀。

pH7.4聚乙二醇6000缓冲液：称取三羟甲基氨基甲烷6.08g和氯化钠8.77g于1000ml容量瓶中，加水500ml溶解后，加聚乙二醇6000 1.0g，用盐酸调节pH至7.4，加水稀释至刻度。

pH7.4缓冲溶液：称取三羟甲基氨基甲烷6.08g和氯化钠8.77g于1000ml容量瓶中，加水500ml溶解后，用盐酸调节pH至7.4，加水稀释至刻度。

pH 8.4缓冲溶液：称取三羟甲基氨基甲烷3.03g、氯化钠5.12g和乙二胺四乙酸二钠1.40g于500ml容量瓶中，加水250ml溶解后，用盐酸调节pH至8.4，加水稀释至刻度。

抗凝血酶III溶液：取1支抗凝血酶III，加水溶解成5Units/ml。

用pH7.4聚乙二醇6000缓冲液稀释成0.5Unit/ml。

人凝血酶溶液：用水将人凝血酶复溶，用pH7.4聚乙二醇6000缓冲液稀释成5Units/ml。

显色底物：选择适合凝血酶的阿米酚试验的显色底物，用水稀释成浓度约3mmol/L。

临用前用pH 8.4缓冲溶液稀释至0.5 mmol/L。

标准溶液：用pH 7.4缓冲溶液将USP依诺肝素钠活性标准品稀释为浓度0.015~0.070USPIU/ml之间的四个浓度梯度。

样品溶液：用pH 7.4缓冲溶液将依诺肝素钠样品稀释为与标准溶液浓度一致的浓度梯度。

5.2.11.3检测过程：取18支检测管，B1、B2为空白；T1、T2、T3、T4为样品溶液，各双份平行；S1、S2、S3、S4为标准溶液，各双份平行。

按B1、S1、S2、S3、S4、T1、T2、T3、T4、T1、T2、T3、T4、S1、S2、S3、S4、B2的顺序，每管中加入抗凝血酶III的体积为V（20~50μl），和同样体积的pH 7.4缓冲溶液（空白）、标准溶液或样品溶液；混合，但不要产生气泡。

临床医学检验考试技术(中级)(习题卷24)说明：答案和解析在试卷最后第1部分：单项选择题，共100题，每题只有一个正确答案,多选或少选均不得分。

1.[单选题]医学伦理难题的发生，从最终意义上看，是由于医学伦理关系中( )所决定的。

A)医学伦理理论的多样化B)医疗卫生体制的不完善C)医学伦理观念的急剧变化D)道德行为主体利益的复杂矛盾2.[单选题]下列胆固醇成分中参与胆固醇逆向转运的是A)HDL-CB)VLDL-CC)LDL-CD)TCE)FC3.[单选题]离子交换层析是一种A)液-液相层析B)液-固相层析C)气-液相层析D)气-固相层析E)以纸为支持介质的层析4.[单选题]关于再生障碍性贫血，下列叙述错误的是A)全血细胞减少B)骨髓在某些部位可见增生灶C)骨髓非造血细胞增多D)巨核细胞多数增加E)骨髓铁染色细胞外铁增加5.[单选题]原发性纤溶亢进症时，实验室指标正常的是A)PTB)APTTC)TTD)FDPE)D-二聚体6.[单选题]共用题干某研究生为了观察静脉营养对胃大部切除的狗的治疗效果，其采集了动物血浆准备探讨双组的血浆中蛋白质总量的差异。

他应选择的检测方法是A)凯氏定氮法D)紫外分光光度法E)比浊法7.[单选题]血栓调节蛋白的生理特点，不正确的是A)与PC分子具有同源性B)其基因位于第20号染色体C)存在于所有血管内皮细胞中D)存在于淋巴管内皮细胞E)可与凝血酶形成复合物8.[单选题]胰腺纤维囊性病产前诊断的最佳指标是A)羊水甲苯胺蓝定性试验B)羊水糖醛酸半定量试验C)羊水细胞内酸性水解酶活性测定D)羊水γ-谷氨酰转移酶测定E)羊水胆碱酯酶测定9.[单选题]患者男性，15岁。

食欲减退，免疫力降低，异食癖（嗜土），生长发育迟缓，临床诊断为营养性侏儒症，原发性男性不育症。

此男孩可能缺乏A)铅B)锌C)镉D)铝E)砷10.[单选题]常规血清蛋白电泳和脑脊液蛋白电泳相比较，以下描述正确的是A)脑脊液中有前清蛋白电泳带，血清中无B)血清中β球蛋白较多C)脑脊液中γ球蛋白较多D)血清中有前清蛋白电泳带，脑脊液中无E)脑脊液与血清蛋白电泳条带相同11.[单选题]不出现骨髓象巨幼样变的疾病是A)红血病B)溶血危象C)缺铁性贫血D)白血病前期E)恶性贫血12.[单选题]细胞黏附分子按其结构特点可以分为多种类型，但不包括A)钙离子依赖性家族B)整合素家族C)免疫球蛋白超家族D)炎症因子家族E)选择素家族13.[单选题]下列关于牛顿流体中的η描述不正确的是A)η称为内摩擦系数E)又被称为表观黏度14.[单选题]血沉测定时，抗凝剂与血液的比例为A)1:4B)1:2C)1:9D)4:1E)9:115.[单选题]不参与酸碱平衡调节的系统和器官是A)细胞外液的缓冲体系B)细胞内液的缓冲体系C)肺D)肝胆系统E)肾16.[单选题]关于免疫溶血法测量补体活性的说法正确的是A)常用于替代途径各成分的测定B)以100%溶血指示终点C)抗原为SRBCD)检测补体的蛋白含量E)该试验中有一组补体系统参与竞争17.[单选题]表示药物在体内代谢、排泄的速度的是A)清除率B)-清除速度常数C)半衰期D)清除百分数E)AUC18.[单选题]km值反映酶与底物的亲和力A)km值越小，酶与底物亲和力越大B)km值越大，酶与底物亲和力越大C)km值适中，酶与底物亲和力越大D)km值适中，酶与底物亲和力越小E)km值适中，酶与底物亲和力适中19.[单选题]白血病儿童从骨髓库中得到别人捐献的骨髓，属A)自体移植B)同种移植C)异种移植D)同系移植E)胚胎组织移植20.[单选题]进行血涂片显微镜形态学观察，最合适的观察区域是A)头部B)体部C)尾部21.[单选题]患者心脏移植1个月左右出现排斥现象，用免疫抑制剂治疗后缓解，此为A)亚急性排斥反应B)急性排斥反应C)慢性排斥反应D)超急性排斥反应E)移植物抗宿主反应22.[单选题]Hayem红细胞稀释液中硫酸钠的主要作用是A)固定红细胞形态B)调节细胞渗透压C)防腐D)防止细胞黏附E)抗凝23.[单选题]Ⅰ型超敏反应的效应细胞包括A)嗜碱性粒细胞、肥大细胞、活化T细胞B)肥大细胞、嗜碱性粒细胞、树突状细胞C)肥大细胞、嗜酸性粒细胞、树突状细胞D)嗜碱性粒细胞、肥大细胞、嗜酸性粒细胞E)嗜酸性粒细胞、肥大细胞、活化T细胞24.[单选题]新型隐球菌繁殖方式是A)芽生孢子B)厚壁孢子C)关节孢子D)分生孢子E)孢子囊孢子25.[单选题]对流免疫电泳中，抗体向阴极移动原因是A)抗体带正电荷B)抗体带负电荷C)扩散作用D)电泳作用E)电渗作用26.[单选题]胰高血糖素对糖代谢的作用是A)促进糖原分解和糖异生B)促进糖原分解，抑制糖异生C)抑制糖原分解，促进糖异生D)抑制糖原分解和糖异生E)促进胰岛细胞对糖原的摄取27.[单选题]关于肠道菌科的共同特征描述错误的是A)均含有菌体抗原B)易发生遗传变异C)鉴别依据抗原构造和生化反应D)均为G-菌E)均为条件致病菌B)B细胞免疫缺陷病C)吞噬细胞功能缺陷病D)联合免疫缺陷病E)补体系统缺陷病29.[单选题]哪一种情况下可发生血钾浓度降低A)高热B)创伤C)酸中霉D)严重呕吐、腹泻E)急性肾衰竭30.[单选题]幼红细胞糖原染色可呈阳性的疾病是A)骨髓增生异常综合征B)巨幼细胞性贫血C)髓纤维化D)再生障碍性贫血E)地中海贫血31.[单选题]于25℃、37℃均能生长，孢子呈圆形或卵圆形，尿素酶试验阳性的真菌是A)白色念珠菌B)球孢子菌C)热带念珠菌D)类星形念珠菌E)新型隐球菌32.[单选题]第一胎即可引起新生儿溶血病的血型不合最常见的是A)ABO血型B)Rh血型C)Kidd血型D)Lewis血型E)MN血型33.[单选题]患者，女性，26岁，经常感到头晕，面色苍白，血常规检查示小细胞低色素性贫血，血红蛋白91g／L，初诊为缺铁性贫血。

自身免疫病的研究进展：ANA检测技术在自身免疫病的研究进展中，ANA检测技术起到了举足轻重的作用。

自身免疫病是一类免疫系统错误地攻击身体的正常组织的疾病，如系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎等。

ANA检测是自身免疫病诊断的重要手段之一，它可以帮助医生发现和确诊这些疾病，从而及时采取治疗措施。

ANA是抗核抗体的简称，是一种针对细胞核成分的自身免疫抗体。

ANA检测是通过检测血液中的ANA抗体来进行的。

ANA抗体的存在提示身体的免疫系统可能出现了问题，可能正在攻击自身的组织。

ANA检测不仅可以帮助医生诊断自身免疫病，还可以帮助医生判断病情的严重程度和治疗的效果。

在实际应用中，ANA检测技术已经取得了显著的进展。

ANA检测技术的灵敏度和特异性越来越高，可以帮助医生更准确地诊断自身免疫病。

ANA检测技术的发展也使得检测时间越来越短，患者不需要长时间等待结果。

ANA检测技术的应用范围也在不断扩大，不仅可以用于诊断自身免疫病，还可以用于评估疾病的进展和治疗的效果。

让我举一个例子来说明ANA检测技术在实际应用中的重要性。

假设有一个女性患者出现了疲劳、关节疼痛和皮肤红斑等症状，医生怀疑她可能患有系统性红斑狼疮(SLE)。

为了确诊，医生对她进行了ANA检测。

结果显示，她的ANA抗体呈阳性。

这个结果提示她的身体可能正在攻击自身的组织，支持了医生对SLE的诊断。

根据这个结果，医生可以及时为她制定治疗方案，帮助她控制病情，提高生活质量。

重点和难点解析：在上述内容中，有几个重点细节需要特别关注。

ANA检测技术的灵敏度和特异性是诊断自身免疫病的关键。

ANA检测技术的发展对疾病的早期发现和治疗具有重要意义。

ANA检测技术的实际应用案例也凸显了其重要性。

下面我将对这些重点细节进行详细补充和说明。

ANA检测技术的灵敏度和特异性是诊断自身免疫病的关键。

灵敏度指的是检测技术能够准确识别出ANA抗体的能力，而特异性指的是检测技术能够排除其他非自身免疫疾病的ANA抗体。