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本技术属于水产养殖技术及病害防控技术领域，涉及一种干酪乳杆菌及其在水产养殖中的应用，乳杆菌名称为干酪乳杆菌GCGR16，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2019年09月26日，保藏编号为CCTCC NO：M2019755，代替抗生素，克服抗生素过度使用、药物残留、耐药性、食品安全以及环境污染等一系列缺陷，改善水产动物的免疫功能，增强其抗病功能，减少药物的使用量，推动水产养殖业绿色、生态发展。
权利要求书1.一种干酪乳杆菌，其特征在于，名称为干酪乳杆菌GCGR-16，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2019年09月26日，保藏编号为CCTCC NO：M2019755。
2.根据权利要求1所述的一种干酪乳杆菌，其特征在于，从罗氏沼虾肠道组织分离而得。
3.如权利要求1所述的一种干酪乳杆菌的应用，用于增强水产动物免疫功能。
4.如权利要求1所述的一种干酪乳杆菌的应用，用于增强水产动物抗病功能。
5.根据权利要求4所述一种干酪乳杆菌的应用中，抗病的病原为小瓜虫、虹彩病毒中的任一种或几种。
6.如权利要求1所述的一种干酪乳杆菌的应用，用于制备增强水产动物抗病药物、饲料添加剂或者饲料。
7.根据权利要求6所述一种干酪乳杆菌的应用中，抗病的病原为小瓜虫、虹彩病毒中的任一种或几种。
8.一种水产动物饲料，含有权利要求1所述的一种干酪乳杆菌。
9.一种水产动物饲料添加剂，含有权利要求1所述的一种干酪乳杆菌。
技术说明书一株乳酸菌及其在水产养殖中的应用技术领域本技术涉及一种干酪乳杆菌及其在水产养殖中的应用，属于水产养殖技术及病害防控技术领域。
背景动物疫病的防控是现代养殖业抵御风险的关键，是预防和控制传染性疫病的重要武器，是解决目前水产养殖中存在的抗生素过度使用、药物残留、耐药性、食品安全以及环境污染等一系列问题的关键手段。
目前我国的水产药物已经不能满足人民群众对优质蛋白不断增长的需求，对安全、放心、绿色食品的保障需求。
乳酸菌及其在水产养殖中的应用研究进展乳酸菌是一类常见的革兰氏阳性菌，其主要代表是乳酸乳球菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)。
乳酸菌具有很强的耐酸能力和抗菌能力，并且在水产养殖中具有广泛的应用潜力。
本文将综述乳酸菌及其在水产养殖中的应用研究进展。
乳酸菌被广泛应用于水产养殖中，主要原因是其具有以下几个优势。
首先，乳酸菌具有优良的发酵能力。
乳酸菌能够利用水体中的葡萄糖和其他碳水化合物进行发酵，生成乳酸和其他有益物质。
这些有益物质可以提高水质和饲料的品质，促进水产动物的消化吸收，增强其免疫力，减少因环境变化和疾病而引起的应激反应。
其次，乳酸菌可以抑制有害菌的生长。
乳酸菌通过产生有益物质，如有机酸、抗菌肽和酶等，可以抑制水产养殖环境中的病原菌和有害菌的生长。
这些有益物质具有广谱抗菌活性，可以降低水产动物感染疾病的风险，减少对抗生素的依赖，提高养殖效益。
第三，乳酸菌可以提高饲料的营养价值。
乳酸菌通过发酵作用，可以降低饲料中的纤维素和抗营养因子的含量，提高饲料的可消化性和能量利用率，减少养殖过程中的浪费，提高饲料的经济效益。
最后，乳酸菌可以改善水体生态环境。
乳酸菌可以降低水体中的氨氮、硝酸盐和亚硝酸盐等有害物质的含量，减少养殖废水对水体的污染，维护水体的生态平衡，减少养殖对环境的负面影响。
目前，乳酸菌在水产养殖中的应用研究主要集中在以下几个方面。
一是乳酸菌的筛选和鉴定研究。
乳酸菌株的筛选和鉴定是乳酸菌应用于水产养殖中的关键步骤。
研究人员通过分离和鉴定，筛选出优良的乳酸菌菌株，并研究其产酸能力、抗菌能力和对水产动物的影响，为乳酸菌应用于水产养殖提供科学依据。
二是乳酸菌对水产动物的生理效应研究。
乳酸菌作为益生菌，可以通过对水产动物肠道微生态的调控，影响其饲料消化吸收和免疫功能，提高水产动物的生长速度和抗病能力。
研究人员通过动物实验证实了乳酸菌对水产动物生理的积极影响，为乳酸菌在水产养殖中的应用提供了理论基础。
乳酸菌对水产养殖动物抗氧化应激与免疫力影响研究进展邝哲师，赵祥杰，叶明强，罗国庆，曹俊明，黄燕华（广东省农业科学院农业生物技术研究所，广东广州510610）摘要：简述了在水产养殖动物中使用乳酸菌所具有的抗氧化应激与免疫力影响的研究现状和作用机理，并描述了其应用前景，以期为乳酸菌制剂在水产动物上的应用提供参考。
关键词：乳酸菌；抗氧化应激；免疫力；水产动物中图分类号：S963文献标识码：A文章顺序编号：1672-5190（2011）08-0039-03Research Advances on the Effects of Lactobacillus on the Anti-oxidative Stress and Immunity of Aquaculture AnimalsKUANG Zhe-shi ，ZHAO Xiang-jie ，YE Ming-qiang ，LUO Guo-qing ，CAO Jun-ming,HUANG Yan-hua（Bio-technical Research Institute ，Guangdong Academy of Agricultural Sciences ，Guangzhou 510610，China ）Abstract ：The research status and the mechanism of the effects of apllying lactobacillus on the anti-oxidative stress and immunity ofaquaculture animals were simply discussed and its application prospects were expounded,so as to provide reference for the application of lactobacillus preparations in the aquaculture animals.Key words ：lactobacillus ；anti-oxidative stress ；immunity ；aquaculture animals 乳酸菌（lactic acid bacteria ，LBA ）是一类群可发酵碳水化合物（主要指葡萄糖）产大量乳酸的细菌的通称。
水产乳酸菌的应用和原理1. 介绍水产乳酸菌是一类微生物，生长在水产产品中，并且具有广泛的应用价值。
乳酸菌是一种益生菌，对人体有很多益处，因此在食品工业中得到广泛应用。
本文将重点介绍水产乳酸菌的应用范围以及其原理。
2. 应用范围水产乳酸菌的应用范围广泛，下面列举一些常见的应用领域：•水产养殖：水产乳酸菌可以用于水产养殖中，帮助提高水质，增加鱼类和虾类的体质健康，并增加饲料的消化率。
此外，水产乳酸菌还能够抑制一些有害菌的生长，降低水产疾病的发生率。
•水产品加工：水产乳酸菌可以用于水产品加工过程中，帮助水产品保持新鲜和延长保质期。
乳酸菌的酸性环境有助于控制微生物的生长，从而减少水产品腐败和变质的可能性。
•水产酿造：水产乳酸菌可以用于水产酿造中，例如制作鱼酱和虾酱等。
乳酸菌发酵后产生的乳酸和其他物质可以改善水产制品的味道和口感，并增加产品的营养价值。
•环境净化：水产乳酸菌还可以用于环境净化和废水处理。
乳酸菌能够降解废水中的有机物，并将其转化为有机酸和二氧化碳等物质，从而净化水体。
3. 作用原理水产乳酸菌的应用是基于其作用原理的，下面是水产乳酸菌的主要作用原理：•产生有益物质：水产乳酸菌可以产生乳酸、乳醛酸和乳酸菌素等有益物质。
这些物质具有抗菌作用，可以抑制有害菌的生长，并促进有益菌的生长。
•调节肠道菌群：水产乳酸菌可以通过调节肠道菌群来提高养殖动物的免疫力。
乳酸菌能够促进有益菌的繁殖，抑制有害菌的生长，维持肠道菌群的平衡。
•降低pH值：水产乳酸菌通过发酵过程产生的乳酸可以降低鱼塘或水产品的pH值。
较低的pH值可以抑制一些有害菌的生长，减少疾病的发生。
•产酶作用：水产乳酸菌可以产生一些酶，例如淀粉酶和蛋白酶等。
这些酶可以帮助消化吸收，并提高饲料的利用率。
4. 注意事项在应用水产乳酸菌时，需注意以下事项：•选择适宜的菌株：不同的水产乳酸菌菌株有不同的应用特点，应根据具体的需求选择适宜的菌株。
•合理控制添加量：添加水产乳酸菌时，应根据养殖水体的情况合理控制添加量，避免过量使用。
乳酸菌在水产养殖行业的应用乳酸菌类微生态制剂的研究也已成为近年来研究的焦点之一，目前，在众多微生物添加剂中, 乳酸菌制剂是饲用微生物添加剂中应用最为广泛、效果较好的一类，它是多种水产动物消化道主要的共生菌，能形成正常菌群，也是中国最早公布的两种可直接使用的饲料级微生物添加剂菌种之一。
乳酸菌可以在水产动物肠道内大量定植，有效调整肠道菌群平衡，可分泌乳酸，并产生多种消化酶，帮助食物消化和代谢，促进营养物质的吸收和利用；同时它还能通过竞争营养、占位竞争、分泌细菌素等与致病菌竞争，抑制有害菌的繁殖，改善肠道内环境，调整胃肠道菌群平衡，提高动物健康水平。
它为饲料和畜禽水产养殖业的健康发展提供了一条高效、无公害、无污染的新途径。
1 乳酸菌的生理特性乳酸菌指发酵糖类主要产物为乳酸的一类无芽孢、革兰氏染色阳性细菌的总称，形态、代谢性能和生理学特征不完全相同。
细胞形态多为杆状或球状，不生产孢子，不运动或少运动，不耐高温，但耐，在pH3.0-4.5时仍可生长，对胃中的酸性环境有一定的耐受性，营养要求严格，除了碳水化合物，还需要多种氨基酸、维生素和肽等。
在动物体内通过生物颉颃，降低pH，阻止和抑制致病菌的侵入及定植，降解亚硝氨、氨、吲哚和粪臭素等有害物质，活菌体内和代谢产物中含有较高。
目前在自然界已发现的这一类菌在细菌分类学上至少包括 23 个属：乳酸杆菌属，双歧杆菌属、肉食杆菌属、链球菌属、明串珠球菌属、乳球菌属和芽孢乳杆菌属等。
乳酸菌绝大多数生长繁殖于厌氧或微耗氧、矿物质和有机营养物丰富的酸性环境中，分布十分广泛，在发酵生产（青贮饲料、泡菜和酸奶）的培养物和动物消化道中含量较高。
2 乳酸菌的作用机制2.1 抑菌机制细菌在动物肠道内定居和继续生存的因素，包括胃酸、胆盐、消化酶、免疫反应、内源微生物及其产生的抗菌素。
这些因素中任何一个因素的改变都会导致细菌活的超氧化歧化酶（SOD），能增强体液免疫和细胞免疫。
乳酸菌的抑菌机制正是它的生化特性改变了致病菌的生存环境和生长机制, 从而达到抑菌的效果。
乳酸菌发酵应用于水产防腐水产食品作为人类重要的蛋白质来源之一，具有丰富的营养和独特的风味。
然而，水产食品在加工和储运过程中易受污染，导致微生物繁殖，引发腐败变质。
为了延长水产食品的保存期，保证食品安全和质量，防腐技术的开发和应用显得尤为重要。
近年来，乳酸菌发酵作为一种生物防腐技术，逐渐应用于水产防腐，取得了良好的效果。
乳酸菌发酵是一种利用乳酸菌产生乳酸等有机酸的生物发酵过程。
乳酸菌是一类能利用可发酵碳水化合物（糖类）产生大量乳酸的细菌的总称。
在乳酸菌发酵过程中，乳酸菌产生的乳酸等有机酸能够降低环境pH值，抑制有害微生物的生长繁殖，从而达到防腐保鲜的目的。
乳酸菌发酵过程中还能产生多种抗菌物质，如细菌素、乳酸菌素等，这些物质具有广谱抗菌作用，能够抑制大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等常见腐败菌的生长，从而进一步延长水产食品的保存期。
乳酸菌发酵应用于水产防腐主要有两种方式：一是直接将乳酸菌接种到水产食品中发酵；二是利用乳酸菌发酵产物进行防腐。
直接接种乳酸菌发酵的水产食品包括鱼类、虾类、贝类等。
通过将乳酸菌直接接种到鱼肉、虾仁、贝类等水产食品中，利用乳酸菌的发酵作用及其产生的抗菌物质达到防腐保鲜的目的。
同时，乳酸菌发酵还能改善水产食品的口感和营养价值。
利用乳酸菌发酵产物进行防腐主要是将乳酸菌发酵产生的有机酸、抗菌物质等应用到水产食品中，从而达到防腐保鲜的目的。
这些有机酸和抗菌物质可以来源于乳酸菌培养液、乳酸菌菌体等。
相较于传统的化学防腐剂，乳酸菌发酵应用于水产防腐具有更加安全、有效的优点。
乳酸菌作为益生菌，对人类肠道健康有益，其发酵产物不仅具有防腐作用，还有助于改善肠道微生态平衡。
乳酸菌发酵过程不产生有害物质，对环境友好。
乳酸菌发酵能够提高水产食品的营养价值，改善口感，增强消费者的接受度。
随着消费者对食品安全、营养和风味需求的提高，以及生物技术的发展，乳酸菌发酵在水产防腐领域的应用前景广阔。
未来，对乳酸菌发酵应用于水产防腐的研究可从以下几个方面展开：筛选高效防腐的乳酸菌菌株，提高其发酵效率和抗菌效果；研究乳酸菌发酵过程中产生的抗菌物质的作用机制和理化性质，为开发新型生物防腐剂提供依据；探讨乳酸菌发酵与其他生物防腐技术的结合应用，如结合纳米技术、生物拮抗技术等，以达到更好的防腐效果；研究乳酸菌发酵对水产食品营养成分的影响及其在肠道健康方面的作用机制；开发基于乳酸菌发酵的智能防腐技术，实现水产食品的个性化保鲜与高品质保存。
乳酸菌与酵母菌在水产养殖中的应用随着生态养殖发展的需求，微生态制剂作为抗生素的替代品逐渐成为水产养殖动物病害防治的一种生物控制模式，在水产养殖中的应用已经成为一个热点。
我国农业部第318号公告《饲料添加剂品种目录》中公布了15种允许使用的微生物。
现对其中的乳酸菌(10种)和酵母菌( 2种)在水产养殖中的应用进行总结，为乳酸菌和酵母菌在水产养殖中的健康发展和高效应用提供理论参考和技术借鉴。
1 作为饲料添加剂在水产养殖中的应用乳酸菌与酵母菌都富含酶系和高价值生理活性物质，是水产动物重要的蛋白质来源，其发酵产品是优质的饲料添加剂，在水产养殖上经常用于饲喂水产动物。
乳酸菌与酵母菌作为饲料添加剂在水产养殖中具有许多相似的作用。
1．1 乳酸菌作为饲料添加剂在水产养殖中的应用1．1．1 提供营养，促进营养物质的吸收乳酸菌能产生淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶等多种酶类，将机体不易吸收的大分子量蛋白质降解为易于吸收的游离氨基酸和多肽，合成机体所需的烟酸、泛酸、叶酸、维生素 B1、维生素 B6及维生素 B12等多种物质，为水产动物提供营养，并能产生乙酸、乳酸和促生长因子。
此外，乳酸菌能降解饲料在消化中产生的一些抗营养因子，提高饲料适口性，增加动物的摄食率，提高饲料的消化率和利用率。
乳酸菌还能促进维生素D的吸收和脂类的消化，提高矿物质磷、钙和铁的利用率。
1．1．2 抑制病原菌，调节肠道微生态平衡乳酸菌可通过脂磷壁酸以及菌体分泌的表面蛋白黏附在肠道黏膜细胞上，从而在水产动物肠壁上定植。
乳酸菌在肠壁定植后，可以竞争性地利用肠道中的可溶性碳水化合物合成大量的有机酸和细菌素等物质，从而降低肠道 pH，刺激肠道蠕动，加速致病菌的外排，也抑制了大肠杆菌、沙门菌、梭菌等致病菌的繁殖; 乳酸菌的兼性厌氧的特性还能消耗肠道中的氧气，从而抑制有害需氧菌的繁殖，起到调节肠道菌群的作用。
1．1．3 增强免疫力乳酸菌能通过多种途径来增强水产动物的免疫力，主要是通过乳酸菌菌体或代谢产物对水产动物肠道黏膜的免疫作用。
水产渔业S h u ic h a n yu ye浅谈乳酸菌对水产养殖动物机体及养殖水体的调节及应用黄富存在自然环境中存在大量乳酸菌，乳酸菌其实是革兰氏阳性细菌的统称，这种细菌是一种益生菌，不仅可以改善人类的肠胃功能，对于其他生物也有明显的益处。
将乳酸菌混入投喂的饲料之中，能明显改善水生动物的机体状态，因此乳酸菌在水产养殖领域有较大的应用价值。
随着我国市场经济的发展，国民生活水平明显提高，对于水产品的需求量也大大增加，但是近年来，环境污染和水资源污染影响着水产养殖行业的发展，因为污染造成的水产品质量安全问题越发严重，在水产养殖工作中，为了提高水生动物的抗病性，还大量使用了抗生素等药剂，严重影响了水产品品质。
因此，为了改变当前水产养殖行业中的现状，引入乳酸菌的运用，十分有必要。
下面就来具体阐述一下乳酸菌对水产养殖动物机体和水体改善方面的积极效果，并且简单介绍一下乳酸菌的应用方法。
1.乳酸菌对水生物机体调节和水质净化的原理及效果1.1乳酸菌在水质净化方面的积极效果和原理目前，在我国的水产养殖工作中，为了提高水产品的产量，为数较多的养殖企业和个体户在养殖水体中加入了大量抗生素、激素等药剂，通过这些药剂提高水生动物的抗病性和生长速度。
但是这些药剂不仅会影响水生动物的质量安全，也会对水质造成严重污染，例如我国珠江口的水产养殖区的水域内就存在大量不同类型的抗生素。
这些抗生素投入水中不仅会直接积攒到水体中，被水生动物摄入体内的部分抗生素还会被通过粪便排出，最终都会污染到该区域的水资源。
使用乳酸菌与投喂的饲料进行混合，不仅可以让部分菌群滞留在水生动物的肠道中改善其肠道环境，另一部分菌群还会提高水体中益生菌的数量，进而抑制水体中的革兰氏阴性菌，并且还可以通过化学作用有效的清除水体中的亚硝酸钠含量。
并且乳酸菌投入到水中，可以有效地控制水体的PH值，并且对于降低水体中亚硝态氮的含量，也有比较明显的作用。
在乳酸菌的应用时，需要根据水体中的相关有害物质的含量进行相应的菌种选择，进而保证其良好的调控效果。
乳酸菌在水产养殖中的应用及其应用于海参养殖的可行性作者：大连海洋大学农业部海洋水产增养殖学重点开放实验室张艳婷任同军辽宁省农业科学院大连生物技术研究所孙永欣[摘要] 本文综述了近年来乳酸菌对不同水产动物生长促进和免疫力诱导的作用机制的研究，并探讨了乳酸菌应用于海参养殖的可行性。
[关键词] 乳酸菌；水产动物；刺参；可行性乳酸菌（lactic acid bacteria）是一群形态、代谢性能和生理学特征不完全相同的革兰氏阳性菌的统称。
目前乳酸菌在细胞分类学上至少有23 个属，随着细菌分类研究的不断深入，乳酸菌的范围也不断扩大。
目前其中应用最广的为乳酸杆菌和双歧杆菌。
1 乳酸菌在水产养殖中的应用1.1 净化水质，改善生态环境乳酸菌与芽孢杆菌、光合细菌、反硝化菌等有益菌混合使用，可以促进养殖水体饵料生物大量繁殖、生长，并且可分解残饵、粪便及水中有机质，改良水体环境，抑制水体中有害菌的繁殖生长，调节菌藻平衡。
1.2 提高免疫力乳酸菌对水生动物免疫功能的影响研究较多。
在饲料或水体中添加乳酸菌活菌或灭活菌都可以提高水生动物的细胞免疫和体液免疫功能。
乳酸菌对水生动物免疫反应影响见表1。
1.2.1 细胞吞噬活性细胞吞噬作用在机体的抗菌防御中起着非常重要的作用，能够在抗体产生之前激活早期炎症反应。
饲料中添加乳酸菌组，（包括沙克乳酸杆菌，乳酸球菌，明串珠球菌可以激活宿主吞噬细胞并提高细胞吞噬活性，研究同时表明，乳酸菌无论是活菌还是灭活菌都能在水产养殖生产中提高鱼类的细胞吞噬活力。
Pirarat 等研究表明，投喂鼠李糖乳酸杆菌（1010CFU/g）可以显著提高罗非鱼的细胞吞噬活性。
但是乳酸菌不能提高大菱鲆头肾吞噬细胞的吞噬活性。
1.2.2 呼吸爆发活力呼吸爆发活力是鱼类先天免疫防御中的一个重要指标。
乳酸菌与枯草芽孢杆菌均可以使鱼类的呼吸爆发活力提高。
并且高温灭菌的德式乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌、乳酸球菌在体外环境下仍然可以提高金头鲷头肾白细胞的呼吸爆发活力。
乳酸菌和微量元素在水产养殖中的运用第一部分，乳酸菌实战篇1、乳酸菌的定义相信很多朋友都了解过，但在这里还是要再讲一下，还有一部分朋友不大了解。
乳酸菌并不是某一种菌，几种或者十几种菌所形成的菌群，在严格的细菌分类上是没有乳酸菌的。
严格意义上来讲只有在乳酸的产量大于等于代谢物百分之五十时才能称其为乳酸菌，但是有些菌类如双歧杆菌乳酸产量达不到50%，但是他的作用效果和乳酸菌类似也把他划为乳酸菌。
其实通过上面的介绍大家就会发现乳酸菌本身在定义上就是一个模糊的概念。
其实乳酸菌没那么高大上！对于养殖户朋友来讲，只要把这包菌拿回家发酵，能够产生足够的乳酸就可以了。
2、乳酸菌的特性乳酸菌有很多优点比如调节肠道促生长，预防肠道内弧菌，其中最明显的就是可以在肠道内定殖（当然也是需要维持和不断补充的）而芽孢杆菌则没有这个功能。
但是他的缺点也是很突出的，那就是保存难度大。
朋友们可以到超市去看一看真正的活性乳酸菌饮料的保质期是多少？21天！蒙牛、光明和伊利这样的大企业也没能解决活性液体乳酸菌的保存问题，更何况我们这些鱼药厂家。
但是你会发现一些乳酸饮料的保质期有半年以上，没错！这种产品里面只含乳酸等不含活菌。
现在鱼药市场上的乳酸菌产品也和上面提到的情况类似。
3、乳酸菌水剂和粉剂的特点乳酸菌分为水剂和粉剂，通过上面的介绍大家一定会有这样的疑问，既然水剂的很难保藏，那为什么用下去还是有效果的？！这是因为它里面虽然没有了活菌，但是菌的代谢产物乳酸还在，它会起到一定的调水效果。
但是如果用它来发酵扩培，效果就会很差了。
话又说回来，如果就是想起到调水效果，芽孢杆菌足以，何必要用乳酸菌。
而乳酸菌真正的优势如改善肠道，抑制弧菌，还没显现出来。
而粉剂的乳酸菌则可以解决它保存难的这个缺点。
4、乳酸菌到底该如何使用才能起到它应有的效果。
简单一句话，真正的乳酸菌必须发酵扩配，才能起到效果！微生物学界有两种不同的看法，到底是菌本身在起作用还是菌的代谢产物在起作用。
㊀基金项目:农业部海水鱼产业体系(ＣＡＲＳ￣４７)ꎻ２０１６年上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(２０１６)第１￣１号]ꎻ上海市科㊀委平台能力建设项目(１６ＤＺ２２８０３００)ꎻ上海市科委公共服务平台建设项目(１７ＤＺ２２９３４００)㊀作者简介:方士元㊀男ꎬ硕士研究生ꎮ研究方向为海产品保鲜ꎮＥ￣ｍａｉｌ:ｂ１５８５０７７７＠１６３.ｃｏｍ㊀∗通讯作者ꎮ女ꎬ教授ꎬ博士ꎬ博士生导师ꎮ研究方向为食品工程ꎮＥ￣ｍａｉｌ:ｊｘｉｅ＠ｓｈｏｕ.ｅｄｕ.ｃｎ㊀收稿日期:２０１８￣１０￣２４乳酸菌及其细菌素在海水鱼保鲜中应用的研究进展方士元１ꎬ４ꎬ谢㊀晶１ꎬ２ꎬ３ꎬ４∗(１.上海海洋大学食品学院ꎬ上海㊀２０１３０６ꎻ２.上海水产品加工及贮藏工程技术研究中心ꎬ上海㊀２０１３０６ꎻ３.上海冷链装备性能与节能评价专业技术服务平台ꎬ上海㊀２０１３０６ꎻ４.食品科学与工程国家级实验教学示范中心(上海海洋大学)ꎬ上海㊀２０１３０６)摘㊀要㊀随着人们对生鲜海水鱼产品需求的日益增加ꎬ其保鲜技术的研发成为热点ꎮ乳酸菌及其细菌素以其天然㊁强抗菌性及安全可靠等优势ꎬ在海水鱼保鲜方面有广阔的应用前景ꎮ综述了海水鱼中乳酸菌细菌素分类㊁分离纯化方法ꎬ分析了乳酸菌产生的有机酸㊁细菌素和Ｈ２Ｏ２的抑菌作用ꎬ概述了乳酸菌及其细菌素在海水鱼保鲜中的应用现状和监管问题ꎬ提出了在应用上存在的问题和今后的发展重点ꎮ进一步阐明了乳酸菌生物保鲜剂在海水鱼保鲜中的应用价值ꎬ以推动海水鱼保鲜技术的发展ꎮ关键词㊀乳酸菌ꎻ细菌素ꎻ海水鱼ꎻ生物保鲜中图分类号㊀Ｑ９３９ １１＋７㊀㊀㊀文献标识码㊀Ａ㊀㊀㊀文章编号㊀１００５－７０２１(２０１９)０２－０１１１－０６ｄｏｉ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.１００５－７０２１.２０１９.０２.０１７ＡｄｖａｎｃｅｓｉｎＬａｃｔｏ￣ＢａｃｔｅｒｉａａｎｄＩｔｓＢａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｆｏｒＰｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆＭａｒｉｎｅＦｉｓｈＦＡＮＧＳｈｉ￣ｙｕａｎ１ꎬ４ꎬＸＩＥＪｉｎｇ１ꎬ２ꎬ３ꎬ４(１.Ｃｏｌｌ.ｏｆＦｏｏｄＳｃｉ.＆Ｔｅｃｈ.ꎬＳｈａｎｇｈａｉＯｃｅａｎＵｎｉ.ꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎻ２.ＳｈａｎｇｈａｉＡｑｕａ￣ＰｒｏｄｕｃｔｓＰｒｏｃｅｓｓ.＆Ｓｔｏｒ.Ｅｎｇｉｎ.Ｔｅｃｈ.Ｒｅｓ.Ｃｔｒ.ꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎻ３.ＳｈａｎｇｈａｉＰｒｏｆｅｓｓ.Ｔｅｃｈ.Ｓｅｒｖ.ＰｌａｔｆｏｒｍｏｎＣｏｌｄＣｈａｉｎＥｑｕｉｐᶄｔＰｅｒｆｏｒｍ.＆ＥｎｅｒｇｙＳａｖｉｎｇＥｖａｌᶄｎꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６ꎻ４.ＮａｔᶄｌＥｘｐｅｒᶄｌＴｅａｃｈ.ＤｅｍｏｎｓｔᶄｎＣｔｒ.ｆｏｒＦｏｏｄＳｃｉ.＆Ｅｎｇｉｎ.(ＳｈａｎｇｈａｉＯｃｅａｎＵｎｉ.)ꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１３０６)Ａｂｓｔｒａｃｔ㊀Ｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇｄｅｍａｎｄｆｏｒｍａｒｉｎｅｆｉｓｈｐｒｏｄｕｃｔｓꎬｋｅｅｐｉｎｇｆｒｅｓｈｈａｓｂｅｃｏｍｅａｎｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｅｓｅａｒｃｈｔｏｐ￣ｉｃ.Ｌａｃｔｏ￣ｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｔｈｅｉｒｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎꎬｗｉｔｈｔｈｅｉｒｎａｔｕｒａｌꎬｓｔｒｏｎｇａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｎｄｓａｆｅａｎｄｒｅｌｉａｂｌｅａｄｖａｎｔａｇｅｓꎬｈａｖｅｗｉｄｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｐｒｏｓｐｅｃｔｓｉｎｍａｒｉｎｅｆｉｓｈｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ.Ｔｈｅｃｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎꎬｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｌａｃｔｏ￣ｂａｃｔｅｒｉａｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｗｅｒｅｒｅｖｉｅｗｅｄ.ＴｈｅｂａｃｔｅｒｉｏｓｔａｔｉｃａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄꎬｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎａｎｄＨ２Ｏ２ｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙｌａｃｔｏ￣ｂａｃｔｅｒｉａｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄꎬｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｔａｔｕｓａｎｄｒｅｇｕｌａｔｏｒｙｐｒｏｂｌｅｍｓｏｆｌａｃｔｏ￣ｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｉｎｍａ￣ｒｉｎｅｆｉｓｈｗｅｒｅｓｕｍｍａｒｉｚｅｄꎬａｎｄｓｏｍｅｐｒｏｂｌｅｍｓａｎｄｆｕｔｕｒｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｌａｃｔｏ￣ｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｉｎｍａｒｉｎｅｆｉｓｈｗｅｒｅａｌｓｏｐｏｉｎｔｅｄｏｕｔ.Ｔｈｅａｉｍｓｏｆｔｈｉｓｐａｐｅｒａｒｅｔｏｅｎｈａｎｃｅｔｈｅａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｌａｃｔｏ￣ｂａｃｔｅｒｉａｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｓｉｎｍａｒｉｎｅｆｉｓｈａｎｄｔｏｃｌａｒｉｆｙｔｈｅｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆｋｅｅｐｉｎｇｆｒｅｓｈｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙｏｎｍａｒｉｎｅｆｉｓｈ.Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ｌａｃｔｏ￣ｂａｃｔｅｒｉａꎻｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎꎻｍａｒｉｎｅｆｉｓｈꎻｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ㊀㊀随着人们生活水平和保健意识的提高ꎬ鱼类因其营养价值更符合人体需要而日益受到青睐ꎮ其中海水鱼肉质鲜美ꎬ富含ＥＰＡ㊁ＤＨＡ等不饱和脂肪酸ꎬ较淡水鱼更受人们喜爱ꎮ但海水鱼营养丰富ꎬ适宜微生物生长繁殖ꎬ更易腐败变质ꎬ货架期短[１￣２]ꎬ延长海水鱼货架期主要依靠控制微生物的生长繁殖ꎮ保藏海水鱼除了常规的物理㊁化学手段ꎬ还有生物保鲜法ꎮ生物保鲜技术包括用植１１１微生物学杂志㊀２０１９年４月第３９卷第２期㊀ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＭＩＣＲＯＢＩＯＬＯＧＹＡｐｒ.２０１９Ｖｏｌ.３９Ｎｏ.２物源性㊁动物源性㊁微生物源性和酶类生物保鲜剂以及复合生物保鲜剂保鲜[３]ꎮ近年来ꎬ微生物保鲜剂由于其高效㊁安全和良好的拮抗作用成为生物保鲜技术的研究热点[４]ꎮ乳酸菌是一种微生物保鲜剂ꎬ且一般被认为是食品级微生物[５]ꎬ常用于制造酸奶㊁泡菜和其他发酵食品ꎮ乳酸菌生成的有机酸㊁细菌素和Ｈ２Ｏ２等物质能有效抑制和杀灭食品中的腐败菌和病原菌ꎬ延长食品保质期ꎬ因而可以被用作生物保鲜剂ꎮ例如ꎬ乳酸菌产生的细菌素对革兰阳性菌有很强杀灭作用ꎬ仅在低浓度下就可使其迅速死亡ꎮ其中研究最广泛的是乳酸链球菌素(Ｎｉｓｉｎ)ꎬ是国际上第一个被允许使用的细菌素ꎮ以往乳酸菌主要应用于乳制品和果蔬产品保鲜ꎬ近年来ꎬ将其应用于海水鱼保鲜已逐渐成为研究热点ꎮ本文综述了海水鱼源的乳酸菌细菌素分类㊁分离纯化方法㊁保鲜机理ꎬ以及在海水鱼中的应用和安全监管问题ꎬ旨在为今后进一步关注和研究乳酸菌生物保鲜剂在海水鱼中的应用提供参考ꎮ１㊀乳酸菌及其细菌素概述１.１㊀海水鱼中的乳酸菌乳酸菌是指一类无芽胞㊁革兰阳性细菌的总称ꎮ主要包括乳杆菌属(Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ)㊁肠球菌属(Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ)㊁肉食菌属(Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ)和乳球菌属(Ｌａｃｔｏｃｏｃｃｕｓ)等[６]ꎮ乳酸菌广泛分布在自然界中ꎬ其中海水鱼是乳酸菌的重要来源之一ꎮ前人从生鲜海水鱼中分离得到的乳酸菌有乳杆菌属㊁乳球菌属㊁肠球菌属㊁明串珠菌属等[７]ꎮ而海水鱼加工产品一般有微加工海产品和半加工海产品ꎬ在微加工海产品中的优势乳酸菌包括乳杆菌属㊁乳球菌属㊁肠球菌属和肉食杆菌属等[８]ꎬ其中在－１５~－２０ħ贮藏的微加工海产品中优势乳酸菌是肉食杆菌属[９]ꎮ在半加工海产品中的乳酸菌主要是乳酸杆菌属和片球菌属ꎮ１.２㊀细菌素定义细菌素(ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎ)是指细菌代谢过程中产生的具有抗菌活性的多肽或蛋白质复合物[１０]ꎮ一般来说ꎬ乳酸菌的细菌素是阳离子的ꎬ有两亲性㊁膜渗透性的多肽ꎮＫｌａｅｎｈａｍｍｅｒ在１９９３年根据乳酸菌细菌素结构和分子量将其分为四类ꎬ过去的２０ａ中分类标准不断被修订[１１￣１２]ꎮ而Ｃｏｔｔｅｒ等[１３]在２００５年将细菌素分为两类:含有羊毛硫氨酸的羊毛硫抗生素和不含羊毛硫氨酸的非羊毛硫抗生素ꎮＣｏｔｔｅｒ认为Ｋｌａｅｎｈａｍｍｅｒ分类法的Ⅰ㊁Ⅱ类细菌素都是通过在细胞膜上形成孔洞或阻碍细胞壁合成来产生抑菌效果ꎬⅢ类细菌素则是通过水解细菌细胞壁使细菌死亡ꎬ而Ⅳ类细菌素至今未发现ꎬ所以Ｃｏｔｔｅｒ将乳酸菌产生的细菌素分为两类ꎮ而Ｃｏｔｔｅｒ的命名法很好地解释了Ｎｉｓｉｎ为什么具有双重作用ꎬ即它不仅能在细胞膜上产生细孔ꎬ同时也能结合类脂Ⅱ阻碍细胞壁的合成ꎻ但这种分类方法目前还未得到广泛认可ꎬ而且除了Ⅱａ类细菌素之外ꎬ其他细菌素抑菌机理的研究仍较少ꎮ今后乳酸菌细菌素分类仍需不断完善ꎬ相信随着对其作用机制研究的日益深入ꎬ细菌素作为生物保鲜剂的应用也会越来越广ꎮ１.３㊀乳酸菌细菌素的分离纯化要研究乳酸菌素的作用机制ꎬ高纯度的乳酸菌素是必不可少的ꎮ针对不同产品设计特异的纯化技术流程ꎬ要综合考虑纯化活性㊁产率以及成本等因素ꎬ以取得良好的分离纯化效果ꎮ赵冬兵[１４]将清酒乳杆菌Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｓａｋｅｉ产生的细菌素通过硫酸铵分级沉淀法㊁纤维素ＤＥＡＥ￣５２㊁葡聚糖Ｇ￣５０柱层析和高效液相色谱法进行纯化ꎬ纯度达９７.５％ꎮ张瑜[１５]分离鼠李糖乳杆菌Ｌ.ｒｈａｍｎｏｓｕｓ所产细菌素时ꎬ用乙酸乙酯萃取ꎬ通过ＡＫＴＡ蛋白纯化系统的多肽分离柱分离ꎬ制备液相获得细菌素的纯度达９５％ꎮＳａｒａｎｉｙａ等[１６]研究了印度发酵食品中的戊糖乳杆菌Ｌ.ｐｅｎｔｏｓｕｓＳＪ６５所产细菌素ꎬ用丙酮沉淀㊁凝胶渗透㊁疏水色谱等多种方式分离纯化ꎬ细菌素由分子量为１.６ｋＤａ和３.９ｋＤａ的两个独立的肽组成ꎮＣａｓａｂｕｒｉ等[１７]对意大利传统发酵香肠中的弯曲乳杆菌Ｌ.ｃｕｒｖａｔｕｓ５４Ｍ１６所产细菌素经反向液相色谱纯化ꎬ解析电离飞行时间质谱后得出其分子量为２.５ｋｕꎮ２㊀乳酸菌保鲜的机理㊀㊀在自然界中ꎬ乳酸菌通过竞争和拮抗作用抑制其他微生物生长ꎮ其中乳酸菌的拮抗作用主要是凭借了它产生的抗菌性代谢产物(有机酸㊁Ｈ２Ｏ２)和细菌素ꎬ抑制了其他微生物的生长繁殖ꎬ从而延长了食品保质期ꎮ２.１㊀有机酸在代谢过程中ꎬ乳酸菌会生成乳酸㊁乙酸等有机酸ꎬ它们显著降低环境中的ｐＨ值ꎬ抑制有害细菌增殖ꎬ但对乳酸菌自身生长没有影响ꎬ同时由于乳酸菌的生长繁殖ꎬ竞争作用使大肠埃希菌㊁金黄２１１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀微㊀生㊀物㊀学㊀杂㊀志㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀３９卷色葡萄球菌㊁沙门氏菌生长受到抑制ꎮ有机酸有解离和未解离两种形式ꎬ其抑菌能力与是否解离有关[１８]ꎬ未解离的有机酸能通过自由扩散进入细菌ꎬ在其体内解离释放质子ꎬ降低了细胞内的ｐＨ值ꎬ而细菌需要消耗大量能量来维持ｐＨ值平衡ꎬ使其能量耗尽而死ꎻ同时有机酸的解离使细胞内酸性离子不断积累ꎬ增大胞内渗透压ꎬ使细菌细胞破裂ꎮ此外ꎬ有机酸的解离会钝化或变性细胞内某些酶ꎬ影响大分子物质的合成ꎬ使细菌的代谢与生长繁殖受到抑制ꎮ研究发现ꎬ细胞介质的ｐＨ值㊁酸的解离度㊁酸的浓度是有机酸抑菌活性的重要影响因素[１９￣２２]ꎮ２.２㊀细菌素由于细菌素对人体无害ꎬ也不像抗生素会产生抗性ꎬ可以作为良好的食品保鲜剂[２３]ꎮ乳酸菌产生的细菌素对大多数革兰阳性菌抑制效果较好ꎬ而且若结合螯合剂使用则对革兰阴性菌也有抑制作用[２４]ꎮ同时ꎬ需要注意的是ꎬ细菌素一般只在较小的ｐＨ范围内有活性ꎬ细菌素所带电荷对其活性影响也很大ꎬ因而研究哪些因素会影响乳酸菌细菌素的活性就显得十分必要[２５￣２８]ꎮ近几年ꎬ研究最多的乳酸菌细菌素是Ｎｉｓｉｎꎬ它带正电荷ꎬ具有疏水性ꎬ易与其他种细菌的细胞质膜上阴离子结合ꎬ引起膜上的类脂破坏ꎬ导致细胞膜上产生细孔ꎬ并进一步引起细胞内的Ｋ＋㊁ＡＴＰ等小分子迅速外流ꎬ破坏跨膜电势ꎬ导致细菌细胞死亡[２９]ꎮ它不仅能够有效抑制革兰阳性菌的营养细胞ꎬ也能杀灭其芽胞ꎬ且对芽胞的作用效果更佳[３０]ꎬ是一种高效的天然保鲜剂ꎮ２.３㊀Ｈ２Ｏ２乳酸菌有黄素蛋白氧化酶活性ꎬ能生成Ｈ２Ｏ２ꎬ但是不含过氧化氢酶ꎬ使Ｈ２Ｏ２不断累积ꎮＨ２Ｏ２是一种强氧化剂ꎬ对细胞壁有强氧化作用及对核酸和蛋白质有破坏作用ꎬ在一定浓度能够抑制或杀灭假单孢菌属㊁沙门氏菌属等革兰阴性菌ꎮ同时ꎬ氧的浓度㊁介质的形态和温度是影响Ｈ２Ｏ２产生的重要因素ꎬ一般在较低温度ꎬ较高氧浓度的液态或半液态的介质环境生成Ｈ２Ｏ２数量大[３１￣３２]ꎮＳｕｉｇｉｔａ等[３３]研究了从日本鲶鱼肠道内分离得到的乳酸乳球菌Ｌ.ｌａｃｔｉｓꎬ发现其生成的有抑菌效果的物质主要是Ｈ２Ｏ２ꎮ而Ｈａｒｐ[３４]发现食品中有Ｈ２Ｏ２酶会破坏乳酸菌产生Ｈ２Ｏ２的能力ꎮ通过对上述机理的研究ꎬ表明在对海水鱼中乳酸菌进行保护性培养时ꎬ要注意为其产生抑菌活性物质提供有利条件ꎬ且在不同种类海水鱼中ꎬ起主要抑菌作用的物质不尽相同ꎬ需要进一步实验研究以获得最佳贮藏工艺ꎮ３㊀乳酸菌及其细菌素在海水鱼保鲜中的应用乳酸菌能够在低温㊁低ｐＨ值㊁高盐等极端条件下生长繁殖[３５]ꎬ所以冷藏㊁腌制㊁盐浸㊁烟熏㊁发酵水产品往往含有大量乳酸菌ꎮ之前对乳酸菌保鲜研究主要集中于其在鲑鱼的应用ꎬ且主要作用病原菌为单增李斯特菌[３６￣４１]ꎬ对它抑制效果良好ꎮ但前人研究冷藏鲑鱼中微生物种类[４２]时发现ꎬ鲑鱼经真空包装冷藏三周后ꎬ检测其微生物种类ꎬ其中乳酸菌属占６０％ꎬ其余４０％为革兰阴性菌ꎬ乳酸菌主要抑制革兰阳性菌ꎬ对革兰阴性菌的抑菌效果不佳ꎬ所以在实际应用中与其他保鲜剂联合使用更佳ꎮＧｈａｌｆｉ等[４３]研究发现ꎬ把弯曲乳杆菌Ｌ.ｃｕｒｖａｔｕｓＣＷＢＩ￣Ｂ２８菌株产生的细菌素喷涂到熏制鲑鱼上ꎬ并用塑料薄膜包装４ħ贮藏ꎬ李斯特氏菌Ｌｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ被有效抑制ꎮＧó３ｍｅｚ[４４]用乳酸菌Ｌ.ａｔｕｓＢＣＳ３５对鳕鱼和比目鱼进行保护性培养保鲜ꎬＮａＣｌ浓度的３％ꎬ贮藏于聚苯乙烯盒ꎬ０~２ħ保藏１４ｄꎬ细菌数明显低于未处理的对照组ꎮ复合乳酸菌是指将两种或两种以上的乳酸菌共同培养ꎬ一般其抑菌效果优于单一乳酸菌ꎮＶｅｓｃｏｖｏ等[４５]在冷冻烟熏鲑鱼中单独或者联合接种干酪乳杆菌Ｌ.ｃａｓｅｉ㊁植物乳杆菌Ｌ.ｐｌａｎｔａｒｕｍ和栖鱼肉杆菌Ｃａｒｎｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｐｉｓｃｉｃｏｌａꎬ４ħ冷藏３０ｄꎬ结果表明ꎬ无害李斯特氏菌Ｌ.ｌｎｎｏｃｕａ受到有效控制ꎬ产品质量良好ꎮＳｐｅｒａｎｚａ等[４６]将凤尾鱼注射乳酸菌和双歧杆菌后腌制ꎬ在稀释的盐水中４ħ贮藏ꎬ至少在６~１０ｄ内有较高的感官质量ꎬ保质期超过了２１ｄꎮ唐文静等[４７]研究了复合乳酸菌(干酪乳杆菌ＬＣ１＋植物乳杆菌ＬＰ１＋乳酸菌Ｌ３)对冷藏海鲈鱼块的保鲜效果ꎬ在４ħ冷藏条件下ꎬ接种复合乳酸菌的海鲈鱼块较对照组的货架期显著增加ꎬ感官品质劣变延缓了６ｄꎬＴＶＢ￣Ｎ值的升高延缓２ｄꎬ显著强于单一乳酸菌ꎮＮｉｓｉｎ是乳酸菌产生的一种目前唯一被允许用作食品添加剂的细菌素ꎬ许多研究证明了它对腐败菌和致病菌的抑制作用[４８]ꎬ在海水鱼保鲜方面有很大潜力ꎮ祝银等[４９]用０.４ｇ/Ｌ的Ｎｉｓｉｎ处３１１２期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀方士元等:乳酸菌及其细菌素在海水鱼保鲜中应用的研究进展㊀㊀㊀㊀㊀㊀理金枪鱼ꎬ－１８ħ冻藏ꎬ处理组肌肉的硬度㊁弹性和凝聚性明显高于对照组ꎬ且在第３０天仍保持一级鲜度ꎮ裘帅波等[５０]研究发现ꎬ采用０.５ｇ/ＬＮｉ￣ｓｉｎ保鲜液处理后的青占鱼ꎬ在４ħ贮藏第８天ꎬ感官品质变化不大ꎬ且比照组延长了４~５ｄ的货架期ꎮ尽管Ｎｉｓｉｎ能很好地抑制李斯特菌等腐败菌的生长ꎬ且不会对鱼肉组织造成损伤ꎬ但只用其保鲜水产品仍存在一些不足ꎮ它溶解度低㊁易扩散到水相ꎬ单独使用时会与酶和磷脂类成分发生反应ꎬ降低作用浓度ꎬ且对革兰阴性菌抑制效果较差ꎮ而如果将Ｎｉｓｉｎ与酸味剂㊁盐等联合使用ꎬ其抑菌范围和抗菌活性可以得到大幅增强ꎮ官爱艳等[５１]以配比为竹叶抗氧化物０.３ｇ/Ｌ㊁茶多酚０.４ｇ/Ｌ㊁Ｎｉｓｉｎ０.７ｇ/Ｌ配制复合生物保鲜剂ꎬ能将冰藏条件下海鲈鱼的货架期延长６ｄꎮＡｂｄｏｌｌａｈｚａ￣ｄｅｈ等[５２]用０.８％百里香酚和５００ＩＵ/ｇＮｉｓｉｎ处理银鲤样品ꎬ在４ħ冷藏第２天将单增李斯特菌数量降低至ＺＬｏｇｃｆｕ/ｇ以下ꎮ将高分子物质与保鲜剂结合ꎬ可以增加被包封物质的稳定性ꎬ免受食品成分的干扰和酶的破坏ꎮ此外ꎬ高分子物质可以使保鲜剂缓慢释放出来ꎬ达到延长保鲜效果的目的ꎮＣｏｎｃｈａ等[５３]在海藻酸盐基质中加入乳酸菌和Ｎｉｓｉｎ(１００ＩＵ/ｍＬ)制成薄膜ꎬ覆盖在接种了单增李斯特菌的冷熏鲑鱼片(４.０ｃｍˑ４.０ｃｍ)上ꎬ４ħ真空包装贮藏ꎬ抑菌物质扩散到食品内ꎬ２０ｄ内有效地抑制了李斯特菌的扩散ꎬ直径８ｍｍ膜的抑菌区域为５.７ｃｍ２ꎬ说明细菌素与包装材料相结合可能有更好的保鲜效果ꎮ凡玉杰等[５４]用Ｎｉｓｉｎ０.３ｇ/Ｌ㊁壳聚糖５ｇ/Ｌ㊁海藻酸钠７ｇ/Ｌ复合保鲜液处理银鲳鱼ꎬ在４ħ冷藏的货架期延长了约７ｄꎮ但将这些物质直接喷涂到食品表面ꎬ会出现分散不均匀的现象ꎬ也会增加表面水分含量ꎬ影响保鲜效果ꎮ前人已经筛选出多种具有良好抑菌活性的乳酸菌ꎬ但针对不同鱼类和保藏环境ꎬ筛选工作仍在继续ꎮ研究表明ꎬ乳酸菌在海水鱼常规贮藏条件下仍能良好繁殖ꎬ抑菌成分在室温下保持稳定ꎬ并能显著提高海水鱼感官质量ꎬ且冷链断链时仍能具备抑菌效果ꎮ目前ꎬ海水鱼中使用的保鲜剂正由化学型转变为天然无毒的生物型保鲜剂ꎬ相信在今后的研究中ꎬ乳酸菌及其细菌素将会发挥越来越重要的作用ꎮ４㊀乳酸菌保鲜应用的食品安全问题在食品中使用如细菌素等抑菌物质ꎬ是有严格的监管要求的ꎬ需要考虑它们对食品营养和感官特征的影响ꎮ在我国ꎬ«食品添加剂使用卫生标准»(ＧＢ２７６０￣２０１４)规定ꎬ乳酸菌素用于食用菌和杂粮罐头㊁酱和复合调味料ꎬ最大使用量为０.２ｇ/ｋｇꎻ用于乳及乳制品㊁熟肉制品和熟制水产品ꎬ最大使用量是０.５ｇ/ｋｇꎮ虽然大部分乳酸菌是食源性的ꎬ可以直接使用对人体无害ꎬ但许多研究也表明[５５]ꎬ乳酸菌对多种抗生素具有不同程度的抗性ꎬ而乳酸菌的抗性基因有可能会转移给肠道内其他细菌ꎬ甚至致病菌ꎬ使其产生抗药性ꎬ这是今后在使用乳酸菌时需要特别注意的方面ꎮ此外ꎬ还需注意虽然不同乳酸菌会产生不同生物胺(酪胺㊁组胺)ꎬ但一般不会达到过量的程度ꎬ反之ꎬ乳酸菌还能抑制其他产生物胺的微生物生长繁殖ꎬ因而控制了生物胺的生成[５６￣５７]ꎮ如需进一步减少生物胺的含量ꎬ可以将乳酸菌与一些葡萄球菌联用ꎬ或者筛选不产生物胺的乳酸菌株作为保鲜剂ꎮ目前已知的乳酸菌产生的细菌素有４０余种ꎬ其中Ｎｉｓｉｎ被国际公认是天然㊁安全的食品保鲜剂ꎬ我国也许可将Ｎｉｓｉｎ作为食品保鲜剂ꎮ一些安全性研究表明ꎬ人体每日摄入Ｎｉｓｉｎ量不超过２.９ｍｇ/人的情况下是安全的ꎮ而且Ｎｉｓｉｎ易被蛋白水解酶水解ꎬ在肠道中很快被水解为氨基酸ꎬ在人体中无残留ꎬ对食品的感官不产生有害影响ꎮ但目前除了Ｎｉｓｉｎꎬ其他细菌素仍缺乏安全性评价认证ꎬ有待进一步研究ꎮ同时ꎬ要使用这种新型保鲜剂ꎬ完善㊁合理安全的监管体制是必不可少的ꎮ５㊀展㊀望随着生活水平的提高ꎬ人们对水产品的质量和安全有了更高的要求ꎮ利用乳酸菌这种天然微生物作为保鲜剂ꎬ既可以达到保鲜的目的ꎬ又能够维持并改善其风味ꎮ但乳酸菌株遗传特性不稳定ꎬ无法大量培育ꎬ目前急需相应的乳酸菌制剂制造业随之发展ꎬ才能广泛应用于市场ꎮ此外ꎬ乳酸菌培养液黏度较低ꎬ无法在鱼样上形成液膜ꎬ导致处理过的鱼样汁液流失率较高ꎬ可以适当添加黏稠剂形成液膜ꎮ限制乳酸菌素资源开发的关键技术是纯化流程ꎬ对乳酸菌素的纯化流程依据细菌素的性质多采用综合纯化技术ꎬ以便高效地获得纯品ꎮ乳酸菌素与其他保鲜剂联用有更好的保鲜效果ꎬ但产生协同增效的机理还有待进一步研究ꎬ４１１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀微㊀生㊀物㊀学㊀杂㊀志㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀３９卷可以在分子水平上进一步研究其代谢通路ꎬ为将来实际应用打下基础ꎮ另外ꎬ将复合保鲜剂与传统的保鲜技术如低温保鲜和气调保鲜等结合起来ꎬ可以在提高保鲜效果的前提下降低生产成本ꎮ虽然Ｎｉｓｉｎ的保鲜效果良好ꎬ但它的稳定性容易受到ｐＨ㊁盐和温度等物化因素的影响ꎬ有研究[５８]认为葡聚糖和海藻糖对Ｎｉｓｉｎ有较强的保护作用ꎬ金属离子会提高Ｎｉｓｉｎ的抗菌活性ꎮ目前ꎬ为了增加乳酸菌及其细菌素的产量ꎬ可以采用新兴育种技术和群体感应技术ꎬ改善遗传性状ꎬ调节代谢ꎬ以及高产菌株筛选㊁发酵条件调控㊁基因工程技术㊁诱导调控和胁迫刺激应答等方法ꎬ增加遗传稳定性ꎬ提高产量ꎬ为后续工业化发展奠定基础ꎮ总之ꎬ随着研究的深入ꎬ乳酸菌及其细菌素作为天然㊁无害的新型保鲜剂会有广阔的应用前景ꎮ参考文献:[１]㊀ＹｉｎＭＭꎬＬｉｕＹＤꎬＺｈａｎｇＬＭ.Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｈｅｓｅｃ￣ｏｎｄａｒｙｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓｆｒｏｍｍａｒｉｎｅｍｉｃｒｏｏｒｇａｎｉｓｍｓ:Ｒｅｓｅａｒｃｈａｄ￣ｖａｎｃｅｓ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０１４ꎬ４１(６):６４１￣６４７.[２]㊀ＨａｎＦꎬＨｕａｎｇＸꎬＭａｈｕｎｕＧＫ.Ｅｘｐｌｏｒａｔｏｒｙｒｅｖｉｅｗｏｎｓａｆｅｔｙｏｆｅｄｉｂｌｅｒａｗｆｉｓｈｐｅｒｔｈｅｈａｚａｒｄｆａｃｔｏｒｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｅｔｅｃｔｉｏｎｍｅｔｈ￣ｏｄｓ[Ｊ].ＴｒｅｎｄｓｉｎＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ＆Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ２０１７ꎬ５９:３７￣４８.[３]㊀ＨｗａｎｈｌｅｍＮꎬＨ￣ＫｉｔｔｉｋｕｎＡ.Ｂｉｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｏｆｓｅａｆｏｏｄｂｙｕｓｉｎｇｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓａｎｄｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｏｇｅｎｉｃｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａａｓｐｏｔｅｎｔｉａｌｂｉｏ￣ｃｏｎｔｒｏｌａｇｅｎｔｓ[Ｍ].Ｃｈａｍ:ＳｐｒｉｎｇｅｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇꎬ２０１５.[４]㊀ＧｈａｎｂａｒｉＭꎬＪａｍｉＭꎬＤｏｍｉｇＫＪꎬｅｔａｌ.Ｓｅａｆｏｏｄｂｉｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｂｙｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａ￣Ａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＬＷＴ￣ＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ２０１３ꎬ５４(２):３１５￣３２４.[５]㊀ＶｅｒｍａＡＫꎬＢａｎｅｒｊｅｅＲꎬＤｗｉｖｅｄｉＨＰꎬｅｔａｌ.Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ￣Ｐｏ￣ｔｅｎｔｉａｌｉｎｆｏｏｄｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎ[Ｊ].ＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉ￣ｏｌｏｇｙꎬ２０１４:１８０￣１８６.[６]㊀ＦｒａｎｃꎬｏｉｓｅＬ.Ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅａｎｄｒｏｌｅｏｆｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａｉｎｓｅａ￣ｆｏｏｄｐｒｏｄｕｃｔｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０１０ꎬ２７(６):６９８. [７]㊀任士菊.冷水鱼肠道乳酸菌多样性及产细菌素乳酸菌特性研究[Ｄ].石河子:石河子大学ꎬ２０１４.[８]㊀ＤａｂａｄéＤＳꎬＢｅｓｔｅｎＨＭＷＤꎬＡｚｏｋｐｏｔａＰꎬｅｔａｌ.Ｓｐｏｉｌａｇｅｅｖａｌ￣ｕａｔｉｏｎꎬｓｈｅｌｆ￣ｌｉｆｅｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎꎬａｎｄｐｏｔｅｎｔｉａｌｓｐｏｉｌａｇｅｏｒｇａｎｉｓｍｓｏｆｔｒｏｐｉｃａｌｂｒａｃｋｉｓｈｗａｔｅｒｓｈｒｉｍｐ(Ｐｅｎａｅｕｓｎｏｔｉａｌｉｓ)ａｔｄｉｆｆｅｒｅｎｔｓｔｏｒａｇｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ４８:８. [９]㊀ＧüｒａｋａｎＧＣꎬ㊆ＯｚｅｒＢ.Ｂｉｏｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｂｙｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａ[Ｊ].ＡｎｔｏｎｉｅＶａｎＬｅｅｕｗｅｎｈｏｅｋꎬ２００７ꎬ７０(２￣４):３３１￣３４５. [１０]ＢａｌｃｉｕｎａｓꎬＭａｒｃｏｓＥꎬＭａｒｔｉｎｅｚＣꎬｅｔａｌ.Ｎｏｖｅｌｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ:Ａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｏｎｔｒｏｌꎬ２０１３ꎬ３２(１):１３４￣１４２.[１１]ＶｅｓｋｏｖｉｃᶄＭｏｒａｃ㊅ａｎｉｎＭꎬＤｕｋｃｉｃᶄＤＡꎬＭｅｍｉｓ㊅ｉＮＲ.Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓｐｒｏｄｕｃｃｅｄｂｙｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａ￣Ａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＡｃｔａＰｅｒｉｏｄｉｃａＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａꎬ２０１２ꎬ３８(４):５０￣５６.[１２]丹彤ꎬ张和平.乳酸菌细菌素的分类㊁生物合成及其应用[Ｊ].中国乳品工业ꎬ２０１３ꎬ４１(３):２９￣３２.[１３]ＣｏｔｔｅｒＰＤꎬＨｉｌｌＣꎬＲｏｓｓＲＰ.Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓ:ｄｅｖｅｌｏｐｉｎｇｉｎｎａｔｅｉｍ￣ｍｕｎｉｔｙｆｏｒｆｏｏｄ[Ｊ].ＮａｔｕｒｅＲｅｖｉｅｗｓＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２００５ꎬ３(１０):７７７￣７８８.[１４]赵冬兵.发酵肉中产细菌素乳酸菌的筛选鉴定及细菌素的分离纯化和特性研究[Ｄ].长春:吉林农业大学ꎬ２０１７. [１５]张瑜.ＬＳ￣８乳酸菌细菌素的分离纯化[Ｄ].杨凌:西北农林科技大学ꎬ２０１３.[１６]ＳａｒａｎｉｙａＡꎬＪｅｅｖａｒａｔｎａｍＫ.ＰｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｍｏｄｅｏｆａｃｔｉｏｎｏｆａｎｔｉｌｉｓｔｅｒｉａｌｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓｐｒｏｄｕｃｅｄｂｙＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｅｎｔｏｓｕｓＳＪ６５ｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｕｔｔａｐａｍｂａｔｔｅｒ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１５ꎬ３８(６):６１２￣６１９.[１７]ＣａｓａｂｕｒｉＡꎬＭａｒｔｉｎｏＶＤꎬＦｅｒｒａｎｔｉＰꎬｅｔａｌ.ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓａｎｄｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃｕｒｖａｔｕｓꎬ５４Ｍ１６ａｎｄｉｔｓｕｓｅａｓｓｔａｒｔｅｒｃｕｌｔｕｒｅｆｏｒｆｅｒｍｅｎｔｅｄｓａｕｓａｇｅｍａｎ￣ｕｆａｃｔｕｒｅ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｏｎｔｒｏｌꎬ２０１６ꎬ５９:３１￣４５.[１８]张军ꎬ田子罡ꎬ王建华ꎬ等.有机酸抑菌分子机理研究进展[Ｊ].畜牧兽医学报ꎬ２０１１ꎬ４２(３):３２３￣３２８.[１９]王晶ꎬ许丽.乳酸菌抑菌机理及其在鸡生产上的应用[Ｊ].饲料博览ꎬ２００９(９):１１￣１３.[２０]ＧｅｒｅｚＣＬꎬＴｏｒｒｅｓＭＪꎬＶａｌｄｅｚＧＦＤꎬｅｔａｌ.Ｃｏｎｔｒｏｌｏｆｓｐｏｉｌａｇｅｆｕｎｇｉｂｙｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａ[Ｊ].ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｎｔｒｏｌꎬ２０１３ꎬ６４(３):２３１￣２３７.[２１]ＳｕｄａｌａｙａｎｄｉＫꎬＭａｎｊａＫＳ.Ｒｅｐｒｅｓｓｉｖｅｅｆｆｉｃａｃｙｏｆｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａａｇａｉｎｓｔｔｈｅｈｕｍａｎｐａｔｈｏｇｅｎｉｃａｎｄｆｉｓｈ￣ｂｏｒｎｅｓｐｏｉｌａｇｅｍｉｃｒｏｂｉｏｔａｏｆｆｒｅｓｈＩｎｄｉａｎｍａｃｋｅｒｅｌｆｉｓｈｃｈｕｎｋｓ[Ｊ].ＡｆｒｉｃａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙꎬ２０１２ꎬ１１(９０):１５６９５￣１５７０１. [２２]ＬａｃｏｍｂｅＡꎬＷｕＶＣꎬＴｙｌｅｒＳꎬｅｔａｌ.ＡｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＡｍｅｒｉｃａｎｃｒａｎｂｅｒｒｙｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓꎻｐｈｅｎｏｌｉｃｓꎬａｎｔｈｏｃｙａｎｉｎｓꎬａｎｄｏｒｇａｎｉｃａｃｉｄｓꎬａｇａｉｎｓｔＥｓｃｈｅｒｉｃｈｉａｃｏｌｉＯ１５７:Ｈ７[Ｊ].Ｉｎｔｅｒ￣ｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０１０ꎬ１３９(１￣２):１０２. [２３]吴京平.新型微生物源天然食品防腐剂及其抑菌性能[Ｊ].北京联合大学学报ꎬ２０１１ꎬ(１):５５￣５８.[２４]ＷｏｒａｐｒａｙｏｔｅＷꎬＭａｌｉｌａＹꎬＳｏｒａｐｕｋｄｅｅＳꎬｅｔａｌ.Ｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｓｆｒｏｍｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａａｎｄｔｈｅｉｒａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｉｎｍｅａｔａｎｄｍｅａｔｐｒｏｄｕｃｔｓ[Ｊ].ＭｅａｔＳｃｉｅｎｃｅꎬ２０１６ꎬ１２０:１１８￣１３２.[２５]ＡｂｄｕｌｌａｈＳＵꎬＢａｄａｒｕｄｄｉｎＭꎬＡｌｉＲꎬｅｔａｌ.Ｅｆｆｅｃｔｏｆｅｌｅｍｅｎｔａ￣ｒｙａｎｄａｄｖａｎｃｅｄｇｌｙｃａｔｉｏｎｐｒｏｄｕｃｔｓｏｆｎｉｓｉｎｏｎｉｔｓｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅｅｆｆｉｃａｃｙａｎｄｄｉｇｅｓｔｉｂｉｌｉｔｙ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｈｅｍｉｓｔｒｙꎬ２０１０ꎬ１２２(４):１０４３￣１０４６.[２６]ＬｕｃａｓＲꎬＭａＪ.ＧｒａｎｄｅꎬＡｂｒｉｏｕｅｌＨꎬｅｔａｌ.Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｂｒｏａｄ￣ｓｐｅｃｔｒｕｍｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｅｎｔｅｒｏｃｉｎＡＳ￣４８ｔｏｉｎｈｉｂｉｔＢａｃｉｌｌｕｓｃｏａｇｕｌａｎｓꎬｉｎｃａｎｎｅｄｆｒｕｉｔａｎｄｖｅｇｅｔａｂｌｅｆｏｏｄｓ[Ｊ].Ｆｏｏｄ＆ＣｈｅｍｉｃａｌＴｏｘｉｃｏｌｏｇｙＡｎＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌＰｕｂｌｉｓｈｅｄｆｏｒｔｈｅＢｒｉｔｉｓｈＩｎｄｕｓｔｒｉａｌＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈＡｓｓｏｃｉａｔｉｏｎꎬ２００６ꎬ４４(１０):１７７４.[２７]ＬｅａｌＳáｎｃｈｅｚＭＶꎬＪｉｍéｎｅｚｄíａｚＲꎬＭａｌｄｏｎａｄｏｂａｒｒａｇáｎＡꎬｅｔａｌ.ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＢａｃｔｅｒｉｏｃｉｎＰｒｏｄｕｃｔｉｏｎｂｙＢａｔｃｈＦｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍＬＰＣＯ１０[Ｊ].Ａｐｐｌｉｅｄ＆ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２００２ꎬ６８(９):４４６５￣４４７１.[２８]ＴｈｉｒｕｍｕｒｕｇａｎＡꎬＲａｍａｃｈａｎｄｒａｎＳꎬＧｏｂｉｋｒｉｓｈｎａｎＳ.Ｏｐｔｉｍｉｚａ￣ｔｉｏｎｏｆｍｅｄｉｕｍｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｆｏｒｍａｘｉｍｉｚｉｎｇｂａｃｔｅｒｉｏｃｉｎｐｒｏｄｕｃ￣ｔｉｏｎｂｙＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａｒｕｍＡＴＭ１１ｕｓｉｎｇｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｄｅｓｉｇｎ[Ｊ].ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＦｏｏｄＲｅｓｅａｒｃｈＪｏｕｒｎａｌꎬ２０１５ꎬ２２(３):５１１２期㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀方士元等:乳酸菌及其细菌素在海水鱼保鲜中应用的研究进展㊀㊀㊀㊀㊀㊀１２７２￣１２７９.[２９]ＨｅｌｇａｓｏｎＥꎬφｋｓｔａｄＯＡꎬＣａｕｇａｎｔＤＡꎬｅｔａｌ.Ｂａｃｉｌｌｕｓａｎｔｈｒａ￣ｃｉｓꎬＢａｃｉｌｌｕｓｃｅｒｅｕｓꎬａｎｄＢａｃｉｌｌｕｓｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ￣ｏｎｅｓｐｅｃｉｅｓｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｇｅｎｅｔｉｃｅｖｉｄｅｎｃｅ.[Ｊ].Ａｐｐｌｉｅｄ＆ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０００ꎬ６６(６):２６２７￣２６３０.[３０]刘元雪ꎬ李晓晖ꎬ施文正ꎬ等.不同培养条件对罗非鱼肠道乳酸菌分离的影响[Ｊ].应用与环境生物学报ꎬ２０１６ꎬ２２(１):１３３￣１３９.[３１]傅容辉.生物保鲜乳酸菌的筛选鉴定及培养条件的优化[Ｄ].武汉:华中农业大学ꎬ２００７.[３２]孙怡ꎬ蒋冬花ꎬ徐晓波.高产ＳＯＤ乳酸菌的筛选和培养条件的优化[Ｊ].浙江师范大学学报(自然科学版)ꎬ２００９ꎬ３２(２):２１２￣２１５.[３３]ＳｕｉｇｉｔａＨꎬＯｈｔａＫꎬＫｕｒｕｍａＡꎬｅｔａｌ.ＡｎａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｆｆｅｃｔｏｆＬａｃｔｏｃｏｃｃｏｓｌａｃｔｉｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｔｒａｃｔｏｆｔｈｅＡｍｕｒｃａｔｆｉｓｈꎬＳｉｌｕｒｕｓａｓｏｔｕｓＬｉｎｎａｅｕｓ[Ｊ].ＡｑｕａｃｕｌｔｕｒｅＲｅｓｅａｒｃｈꎬ２０１０ꎬ３８(９):１００２￣１００４.[３４]ＨａｒｐＥꎬＧｉｌｌｉｌａｎｄＳＥ.ＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆａＳｅｌｅｃｔＳｔｒａｉｎｏｆＬａｃｔｏｂａ￣ｃｉｌｌｕｓｄｅｌｂｒｕｅｃｋｉｉｓｕｂｓｐ.ｌａｃｔｉｓａｓａＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＣｏｎｔｒｏｌＡｇｅｎｔｆｏｒＰａｔｈｏｇｅｎｓｏｎＦｒｅｓｈ￣ＣｕｔＶｅｇｅｔａｂｌｅｓＳｔｏｒｅｄａｔ７ħ[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬ２００３ꎬ６６(６):１０１３￣１０１８.[３５]许冬梅ꎬ曹蕾ꎬ荆佩欣ꎬ等.青藏高原几种牧草附着耐低温乳酸菌的筛选[Ｊ].微生物学杂志ꎬ２０１７ꎬ３７(３):８７￣９４. [３６]ＭｅｊｌｈｏｌｍＯꎬＤａｌｇａａｒｄＰ.Ｍｏｄｅｌｌｉｎｇａｎｄｐｒｅｄｉｃｔｉｎｇｔｈｅｓｉｍｕｌｔａ￣ｎｅｏｕｓｇｒｏｗｔｈｏｆＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓａｎｄｐｓｙｃｈｒｏｔｏｌｅｒａｎｔｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａｉｎｐｒｏｃｅｓｓｅｄｓｅａｆｏｏｄａｎｄｍａｙｏｎｎａｉｓｅ￣ｂａｓｅｄｓｅａｆｏｏｄｓａｌａｄｓ[Ｊ].ＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０１５ꎬ４６:１.[３７]Ａｂｄ￣Ｅｌ￣ＡｚｉｚＮＡꎬＭｏｈａｒｒａｍＹＧ.Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｑｕａｌｉｔｙｏｆｉｍ￣ｐｏｒｔｅｄｆｒｏｚｅｎｓｈｒｉｍｐｉｎＥｇｙｐｔ[Ｊ].ＡｎｎａｌｓｏｆＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉ￣ｅｎｃｅｓꎬ２０１６ꎬ６１(１):３５￣４０.[３８]ＲａｏｒａｎｅＡꎬＤｏｉｊａｄＳꎬＰｏｈａｒｋａｒＫꎬｅｔａｌ.Ｉｓｏｌａｔｉｏｎａｎｄｇｅｎｏ￣ｔｙｐｉｃｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎｏｆＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓｆｒｏｍｐｏｒｋａｎｄｐｏｒｋｐｒｏｄｕｃｔｓ[Ｊ].２０１５ꎬ４:７８８￣７９８.[３９]ＧｕｄｍｕｎｄｓｄóｔｔｉｒＳꎬＧｕｄｂｊ㊆ｏｒｎｓｄóｔｔｉｒＢꎬＬａｕｚｏｎＨＬꎬｅｔａｌ.Ｔｒａｃ￣ｉｎｇＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓꎬｉｓｏｌａｔｅｓｆｒｏｍｃｏｌｄ￣ｓｍｏｋｅｄｓａｌｍｏｎａｎｄｉｔｓｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｉｎＩｃｅｌａｎｄｕｓｉｎｇｐｕｌｓｅｄ￣ｆｉｅｌｄｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ[Ｊ].ＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２００５ꎬ１０１(１):４１￣５１.[４０]ＨｕＹꎬＧａｌｌＫꎬＨｏＡꎬｅｔａｌ.ＤａｉｌｙｖａｒｉａｂｉｌｉｔｙｏｆＬｉｓｔｅｒｉａｃｏｎ￣ｔａｍｉｎａｔｉｏｎｐａｔｔｅｒｎｓｉｎａｃｏｌｄ￣ｓｍｏｋｅｄｓａｌｍｏｎｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇｏｐｅｒａ￣ｔｉｏｎ.[Ｊ].ＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎꎬ２００６ꎬ６９(９):２１２３. [４１]ＢｅａｕｆｏｒｔＡꎬＲｕｄｅｌｌｅＳꎬＧｎａｎｏｕ￣ＢｅｓｓｅＮꎬｅｔａｌ.ＰｒｅｖａｌｅｎｃｅａｎｄｇｒｏｗｔｈｏｆＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓｉｎｎ￣ａｔｕｒａｌｌｙｃｏｎｔａｍｉｎａｔｅｄｃｏｌｄ￣ｓｍｏｋｅｄｓａｌｍｏｎ[Ｊ].ＡｐｐｌｉｅｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２００７ꎬ４４(４):４０６￣４１１.[４２]ＧｒａｍＬ.ＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｐｏｉｌａｇｅｏｆＦｉｓｈａｎｄＳｅａｆｏｏｄＰｒｏｄｕｃｔｓ[Ｍ].ＮｅｗＹｏｒｋ:ＳｐｒｉｎｇｅｒＮｅｗＹｏｒｋꎬ２０１０:８７￣１１９. [４３]ＧｈａｌｆｉＨꎬＡｌｌａｏｕｉＡꎬＤｅｓｔａｉｎＪꎬｅｔａｌ.ＢａｃｔｅｒｉｏｃｉｎａｃｔｉｖｉｔｙｂｙＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｃｕｒｖａｔｕｓＣＷＢＩ￣Ｂ２８ｔｏｉｎａｃｔｉｖａｔｅＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏ￣ｇｅｎｅｓｉｎｃｏｌｄ￣ｓｍｏｋｅｄｓａｌｍｏｎｄｕｒｉｎｇ４ｄｅｇｒｅｅｓＣｓｔｏｒａｇｅ[Ｊ].ＪＦｏｏｄＰｒｏｔꎬ２００６ꎬ６９(５):１０６６￣１０７１.[４４]Ｇóｍｅｚ￣ＳａｌａＢꎬＨｅｒｒａｎｚＣꎬＤ ａＡｚ￣ＦｒｅｉｔａｓＢꎬｅｔａｌ.Ｓｔｒａｔｅｇｉｅｓｔｏｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｈｙｇｉｅｎｉｃａｎｄｅｃｏｎｏｍｉｃｖａｌｕｅｏｆｆｒｅｓｈｆｉｓｈ:Ｂｉｏｐｒ￣ｅｓｅｒｖａｔｉｏｎｕｓｉｎｇｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａｏｆｍａｒｉｎｅｏｒｉｇｉｎ[Ｊ].Ｉｎｔｅｒ￣ｎａｔｉｏｎａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０１６ꎬ２２３(２):４１￣４９. [４５]ＶｅｓｃｏｖｏＭꎬＳｃｏｌａｒｉＧꎬＺａｃｃｏｎｉＣ.ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＬｉｓｔｅｒｉａｉｎｎｏｃ￣ｕａｇｒｏｗｔｈｂｙａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ￣ｐｒｏｄｕｃｉｎｇｌａｃｔｉｃａｃｉｄｃｕｌｔｕｒｅｓｉｎｖａｃ￣ｕｕｍ￣ｐａｃｋｅｄｃｏｌｄ￣ｓｍｏｋｅｄｓａｌｍｏｎ[Ｊ].ＦｏｏｄＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２００６ꎬ２３(７):６８９￣６９３.[４６]ＳｐｅｒａｎｚａＢꎬＢｅｖｉｌａｃｑｕａＡꎬＳｉｎｉｇａｇｌｉａＭꎬｅｔａｌ.Ｓｈｅｌｆｌｉｆｅｄｅｆｉ￣ｎｉｔｉｏｎｆｏｒＩｔａｌｉａｎａｎｃｈｏｖｉｅｓｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｗｉｔｈＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｐｌａｎｔａ￣ｒｕｍꎬａｎｄＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｎｉｍａｌｉｓｓｕｂｓｐ.ｌａｃｔｉｓ[Ｊ].Ｉｎｎｏｖａ￣ｔｉｖｅＦｏｏｄＳｃｉｅｎｃｅ＆ＥｍｅｒｇｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓꎬ２０１２ꎬ１６(３９):１７１￣１８０.[４７]唐文静ꎬ宁喜斌ꎬ王楚文ꎬ等.复合乳酸菌对冷藏海鲈鱼块的保鲜效果[Ｊ].微生物学通报ꎬ２０１６ꎬ４３(３):５５９￣５６６. [４８]Ｄｅｌｖｅｓ￣ＢｒｏｕｇｈｔｏｎＪ.Ｎｉｓｉｎａｓａｆｏｏｄｐｒｅｓｅｒｖａｔｉｖｅ[Ｊ].ＦｏｏｄＡｕｓｔｒａｌｉａꎬ２００５ꎬ５７(１２):５２５￣５２７.[４９]祝银ꎬ刘琴ꎬ严忠雍ꎬ等.Ｎｉｓｉｎ生物保鲜剂对冻藏金枪鱼的影响[Ｊ].广州化工ꎬ２０１３ꎬ(２４):４１￣４３.[５０]裘帅波ꎬ黄巧珍ꎬ裘观容ꎬ等.天然乳酸菌肽保鲜剂对青占鱼保鲜效果研究[Ｊ].食品工业ꎬ２０１３ꎬ(４):４５￣４８. [５１]官爱艳ꎬ谭贝贝ꎬ卢佳芳ꎬ等.生物保鲜剂对海鲈鱼冰藏保鲜效果的影响[Ｊ].核农学报ꎬ２０１７ꎬ３１(８):１５２８￣１５３６. [５２]ＡｂｄｏｌｌａｈｚａｄｅｈＥꎬＲｅｚａｅｉＭꎬＨｏｓｓｅｉｎｉＨ.Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｐｌａｎｔｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌｓａｎｄｅｘｔｒａｃｔｓ:ＴｈｅｒｏｌｅｏｆｔｈｙｍｅｅｓｓｅｎｔｉａｌｏｉｌꎬｎｉｓｉｎꎬａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｔｏｃｏｎｔｒｏｌＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏ￣ｇｅｎｅｓꎬｉｎｏｃｕｌａｔｅｄｉｎｍｉｎｃｅｄｆｉｓｈｍｅａｔ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｏｎｔｒｏｌꎬ２０１４ꎬ３５(１):１７７￣１８３.[５３]Ｃｏｎｃｈａ￣ＭｅｙｅｒＡꎬＳｃｈ㊆ｏｂｉｔｚＲꎬＢｒｉｔｏＣꎬｅｔａｌ.Ｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃ￣ｔｅｒｉａｉｎａｎａｌｇｉｎａｔｅｆｉｌｍｉｎｈｉｂｉｔＬｉｓｔｅｒｉａｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓꎬｇｒｏｗｔｈｏｎｓｍｏｋｅｄｓａｌｍｏｎ[Ｊ].ＦｏｏｄＣｏｎｔｒｏｌꎬ２０１１ꎬ２２(３￣４):４８５￣４８９.[５４]凡玉杰ꎬ杨文鸽ꎬ楼乔明ꎬ等.复配型壳聚糖涂膜对冷藏银鲳的保鲜效果[Ｊ].核农学报ꎬ２０１６ꎬ３０(４):７３４￣７４０. [５５]ＫｏｒｈｏｎｅｎＪ.ＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃＲｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＬａｃｔｉｃＡｃｉｄＢａｃｔｅｒｉａ[Ｊ].ＶｅｔｅｒｉｎａｒｓｋｉＧｌａｓｎｉｋꎬ２０１０ꎬ６２(５￣６):３２９￣３４０.[５６]ＴｏｄｏｒｏｖＳＤꎬＳｔｏｊａｎｏｖｓｋｉＳꎬＩｌｉｅｖＩꎬｅｔａｌ.Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙａｎｄｓａｆｅ￣ｔｙａｓｓｅｓｓｍｅｎｔｆｏｒｌａｃｔｉｃａｃｉｄｂａｃｔｅｒｉａｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌＢｕｌｇａｒｉａｎｆｅｒｍｅｎｔｅｄｍｅａｔｐｒｏｄｕｃｔ"ｌｕｋａｎｋａ"[Ｊ].ＢｒａｚｉｌｉａｎＪｏｕｒｎａｌｏｆＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙꎬ２０１７ꎬ４８(３):５７６￣５８６.[５７]王然然ꎬ李晓敏ꎬ陈柳ꎬ等.黄酒发酵过程中乳酸菌的分离及对其产生物胺能力的评价[Ｊ].食品与发酵工业ꎬ２０１７ꎬ４３(１):１２￣１７.[５８]杨小民ꎬ杨基础.几种糖对纤维素酶热稳定性影响的研究[Ｊ].清华大学学报(自然科学版)ꎬ２０００ꎬ４０(２):５１￣５４.６１１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀微㊀生㊀物㊀学㊀杂㊀志㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀３９卷。
