分子生物学技术在昆虫系统学研究中的应用
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昆虫免疫系统的结构和功能研究昆虫是地球上最成功的生物之一,其免疫系统也是其生存能力的重要保障。
本文将对昆虫免疫系统的结构和功能进行研究。
免疫系统是指机体为了抵御外部病原体入侵而发挥的一种自我保护作用。
对于昆虫,其免疫系统十分独特,与哺乳动物的免疫系统有所不同。
昆虫免疫系统的主要组成部分包括:表皮屏障、体液免疫和细胞免疫。
下面将对其分别进行介绍。
表皮屏障是昆虫免疫系统的第一道防线。
由于昆虫的外骨骼和角质层的存在,外部病原体很难进入昆虫体内。
此外,昆虫体表分泌具有杀菌作用的物质,进一步增强了表皮屏障的保护作用。
体液免疫是昆虫免疫系统的主要防御方式之一。
体液免疫主要是通过体液中存在的一些特殊蛋白质来完成的。
其中,最主要的是抗菌肽和脂多糖结合蛋白。
抗菌肽主要是通过破坏细菌细胞膜和DNA来达到杀菌的作用。
而脂多糖结合蛋白则可以结合到病原体上,从而诱导体液中的其他组分参与进来,形成一个完整的抗菌系统。
细胞免疫是昆虫免疫系统的另一种防御方式。
细胞免疫主要是通过一些特殊的细胞来完成的。
其中,最主要的细胞类型是血球和网织球。
血球主要的作用是通过吞噬和杀菌来清除病原体。
而网织球则主要是通过产生一些特殊的物质来引导其他细胞参与到免疫反应中来。
与哺乳动物免疫系统不同的是,昆虫免疫系统并没有正反馈和记忆性,因此其免疫力相对较弱。
但这并不妨碍研究人员深入研究昆虫免疫系统的结构和功能。
近年来,随着分子生物学和遗传学等新技术的发展,关于昆虫免疫系统的研究也取得了一些进展。
例如,研究人员通过对果蝇免疫系统的分析和研究,发现果蝇体内有一些特殊的基因可以增强其免疫力。
这些研究成果表明,在研究昆虫免疫系统时,可以从遗传和分子水平入手,从而寻求提高昆虫免疫力的方法。
另外,关于昆虫免疫系统的研究还有一些其他的趋势。
例如,有部分研究人员开始研究昆虫免疫系统与环境因素之间的关系。
由于昆虫对环境变化的适应性很强,因此其免疫系统在不同的环境下会表现出不同的特点。
昆虫学研究中的分子生物学方法昆虫在生态系统中扮演着重要角色,包括传粉、食物链的上下位传递以及分解和再循环等。
同时,昆虫也是天然产品的主要来源,例如蜜蜂的蜜和蚕的丝等。
因此,对昆虫的研究具有重要的理论和应用意义。
而分子生物学方法在昆虫学研究中的应用得到了越来越广泛的关注,特别是在昆虫的基因表达、代谢、生长和发育等方面的研究中。
1. 昆虫基因表达的研究方法分子生物学方法在研究昆虫基因表达中发挥着重要作用。
例如,RT-qPCR技术可以快速、准确地检测基因表达水平的变化。
通过PCR扩增和定量特定基因在RNA水平的表达,我们能够了解到基因在不同时间和不同组织中的表达情况。
此外,还可以使用Northern blot或Western blot等方法来检测蛋白质的表达情况,这些方法都是以分子生物学为基础的。
2. 昆虫代谢的研究方法分子生物学方法也被用于研究昆虫代谢方面的问题。
代谢是指生物转化和利用食物、氧气和其他外源性化学物质的生化过程。
代谢酶催化代谢反应,而代谢酶的表达受到基因调控。
因此,研究代谢反应的分子机制需要了解相关基因的表达和调控。
例如,在昆虫研究中,可以使用基因敲除技术来破坏或改变代谢途径相关的基因表达,进而观察代谢变化。
3. 昆虫生长和发育的研究方法分子生物学方法还可以用于研究昆虫生长和发育。
生长和发育是由一系列复杂的分子和细胞事件组成的,包括基因表达调控、信号转导和细胞分裂等。
基因表达调控是生长和发育的关键环节,因此我们可以通过转录组和蛋白组分析等高通量技术对相关基因和蛋白的表达情况进行全面的研究。
例如芋螺素、胰岛素样生长因子(IGFs)和幼虫唾液腺激素等对昆虫生长和发育的影响,对其分子机制的研究就采用了这些方法。
4. 昆虫制药和生物农药的研发在昆虫学中,分子生物学方法也被广泛用于昆虫制药和生物农药的研发。
例如,利用转基因技术可以将毒素或吸血昆虫的唾液腺激素等蛋白质导入植物细胞中,使其抵抗害虫。
分子生物学在蝗虫研究中的应用蝗虫是一种臭名昭著的害虫,给人类农业生产造成了严重的损失。
分子生物学是一个广泛应用于生物学研究的科学领域,主要研究生命体系的分子结构、功能和相互作用。
在蝗虫研究中,分子生物学技术的广泛应用,不仅帮助我们更好地了解蝗虫的遗传特性和生物学行为,也为人类治理蝗虫提供了新的思路和手段。
1.感官和营养觉醒标记基因的鉴定感官和营养觉醒是昆虫个体生长和发育过程中至关重要的两个环节。
通过对蝗虫感官和营养觉醒标记基因的鉴定,可以更好地了解蝗虫的食物摄取行为、成长发育过程以及对外界刺激的反应。
例如,研究人员通过克隆和表达蝗虫感官受体基因,并进行功能研究,发现在蝗虫的口中感受味道的受体基因可以作为化学杀虫剂的新靶标来研制新型杀虫剂。
2.基因组分析可以通过基因组分析,了解蝗虫在演化过程中的遗传变异和适应性。
研究人员通过第二代测序技术,对沙漠蝗和草原飞蝗的基因组进行了测序和比较,结果表明两种蝗虫的基因组差异非常大,说明它们在不同生境下演化出不同的适应策略。
3.RNA干扰技术RNA干扰技术是目前应用最广泛的基因沉默技术,可以有针对性地抑制特定基因的转录和翻译。
在蝗虫研究中,RNA干扰技术被广泛应用于寻找新型杀虫剂和基因拟态研究。
例如研究人员通过RNA干扰技术,成功地抑制了蝗虫翅膀的发育,从而阻止了它们的飞行,这一发现为控制蝗虫提供了新的思路和手段。
4.CRISPR-Cas9基因编辑CRISPR-Cas9基因编辑技术是一种新兴的基因编辑工具,可以在准确的位点切割DNA分子,并插入、删除或替换特定的基因片段。
在蝗虫研究中,CRISPR-Cas9技术被用于研究目标基因的功能,并开发针对蝗虫的基因工程病毒。
这些研究为沙漠蝗和草原飞蝗的防治提供了新的策略和指导意义。
5.基因调控网络分析分子生物学研究所揭示的基因调控网络可以进一步了解蝗虫的繁殖、发育和生长等方面的生物学特征和遗传机制。
例如,研究人员通过转录组和基因调控网络分析,发现了沙漠蝗的APOPT1基因是影响沙漠蝗繁殖的主要基因。
昆虫生态学的研究现状及前景昆虫是地球上最为丰富和多样化的生物类群之一,同时也是生态系统中最为重要的一部分。
它们所占据的生物空间、种类繁多的食物链、强大的适应性等特点,使得昆虫在维持生物多样性和生态平衡中扮演着重要的角色。
因此,昆虫生态学研究是生态学领域中的重要分支,对于深入理解自然生态系统和了解生态系统中的生物特点和生理生态方面的知识有着重要的科学价值。
一、昆虫生态学研究现状昆虫生态学的研究内容包括昆虫分布、数量和密度、生活史、形态、物种多样性、食物链、能量流、群体动态和相互作用等多方面。
随着科技不断进步和研究方法、手段日益丰富,昆虫生态学的研究也愈加深入和广泛。
(一)生物多样性研究昆虫是自然界中生物多样性的重要组成部分,尤其是各种资源昆虫的研究,涉及自然保护、生物资源利用等方面。
昆虫生态学是昆虫生物多样性研究的重要分支。
在昆虫研究中,运用现代分类学、分子生物学等技术手段,发现和描述新的昆虫物种,更能从侧面评价物种起源和多样性的演化程度。
(二)虫害、益虫研究虫害和益虫不同种类的昆虫一直是人类农业生产、林业生产、环境卫生、家居装饰等方面发挥着巨大的作用。
昆虫生态学就发展了生物防治技术,并运用其低成本、无污染、可持续、无副作用的优势,来控制和调节虫口数量。
(三)食物链和能量流研究在生态学领域中,食物链和能量流是非常重要的研究领域。
昆虫是食物链最基础的成分之一,它们在食物链和能量流中的作用和调节非常突出。
昆虫生态学的研究可以为我们深入认识食物链和生态系统中昆虫的生物多样性,从而加深我们对生态系统中多种动植物之间相互关系的认识。
二、昆虫生态学研究前景随着人们对生态环境问题的关注度不断上升,昆虫生态学的研究也愈加广泛和深入。
昆虫生态学的研究前景也变得越来越广阔。
(一)昆虫生态资源利用昆虫生态学的另一个重要领域是昆虫资源的利用。
昆虫有着丰富的营养价值和药用价值。
例如,蚕蛾的茧可以制成丝绸,蝉的幼虫又可以是人们生活中的重要食品之一;而蜜蜂采集的花蜜,是通过发酵加工成高价值的蜂蜜制品等等。
分子生物学技术在动物学研究方面的应用引言:动物学作为生物学的一个重要分支,研究动物的分类、形态、生理生态以及进化等方面的知识。
随着科技的进步,分子生物学技术在动物学研究中的应用越来越广泛。
本文将重点介绍分子生物学技术在动物学研究方面的应用。
一、DNA测序技术的应用DNA测序技术是目前分子生物学研究中最重要的技术之一。
通过DNA测序,可以准确地获得动物的基因组信息,进而研究动物的遗传特征和进化关系。
例如,通过DNA测序可以对不同物种的基因组进行比较,揭示物种间的亲缘关系和进化历史。
此外,通过DNA测序还可以研究动物的基因突变和遗传病等方面的问题,为动物的保护和疾病治疗提供重要依据。
二、PCR技术的应用PCR技术是一种重要的分子生物学技术,可以在短时间内扩增特定DNA片段。
在动物学研究中,PCR技术的应用非常广泛。
例如,通过PCR技术可以快速检测动物的遗传多样性,评估物种的保护状况和对环境变化的适应能力。
此外,PCR技术还可以用于动物的基因表达研究,揭示不同组织和不同发育阶段的基因表达模式,深入了解动物的生理功能和发育过程。
三、蛋白质组学技术的应用蛋白质组学技术是研究动物蛋白质组成和功能的重要手段。
通过蛋白质组学技术,可以全面地分析动物体内的蛋白质组成和蛋白质相互作用关系。
例如,通过质谱技术可以鉴定动物体内的蛋白质,进而研究其功能和调控机制。
此外,蛋白质组学技术还可以用于研究动物的蛋白质修饰和功能调控,揭示动物的生理过程和疾病发生机制。
四、基因编辑技术的应用基因编辑技术是近年来发展起来的一项重要技术,可以对动物的基因进行精确的编辑和修饰。
通过基因编辑技术,可以研究动物基因的功能和调控机制,揭示基因与表型之间的关系。
例如,通过基因编辑技术可以构建特定基因缺失或突变的动物模型,模拟人类遗传疾病,研究疾病的发生机制和治疗方法。
此外,基因编辑技术还可以用于改良和优化动物的农业性状,提高动物的生产性能。
总结:分子生物学技术在动物学研究中的应用是一项重要且不断发展的领域。
分子生物学技术在我国寄生虫学研究中的应用随着分子生物学技术的发展,其在我国寄生虫学研究中的应用也越来越广泛。
以往,寄生虫学研究主要依靠形态学、生态学和传统的生物学方法,但随着分子生物学技术的引入,研究方法和手段得到了极大的改进和提高。
分子生物学技术主要包括PCR扩增、基因测序、基因组学、蛋白质组学等方法。
在疟原虫、血吸虫、钩虫等病原体的研究中,PCR扩增技术可以快速检测出寄生虫的特异性基因,如18S rRNA基因、ITS 基因等。
基因测序技术可以对寄生虫的基因组进行全面的研究和分析,研究其基因表达、功能和进化等问题。
基因组学技术则可以揭示寄生虫的基因组结构和功能。
蛋白质组学则可以研究寄生虫的蛋白质组成和功能。
通过以上分子生物学技术的应用,可以更深入地了解寄生虫的生物学特性、生命周期、致病机制等方面的问题,为疾病的防治提供科学依据。
同时,这些技术也可以用于疾病的诊断和监测,为疾病的防治提供重要的技术支持。
总之,分子生物学技术在我国寄生虫学研究中的应用已经成为不可或缺的一部分,其发展和应用将会极大地促进寄生虫学研究的进步,为我国疾病的防治和人民的健康做出更大的贡献。
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分子生物学技术在生物研究中的应用近年来,随着科技的发展和生物研究的深入,分子生物学技术在生物研究中的应用越来越广泛。
这些技术不但使得生物研究变得更加方便和高效,而且在人类医学、农业生产、环境保护等领域都有着巨大的应用前景。
一、基因克隆技术基因克隆技术是指先将DNA分离出来,利用DNA polymerase 酶将其扩增,再将扩增后的DNA插入到载体中,使其在细胞中可以再生产。
基因克隆技术广泛应用于基因组结构和功能的研究,基因的表达及调控机制,致癌基因和肿瘤抑制基因的研究等。
二、PCR技术PCR技术是指通过引物的特异性作用,在适当的温度条件下进行DNA的逆转录和扩增。
该技术被广泛应用于DNA检测和分析中,如基因治疗、病毒病的诊断、遗传学研究等。
PCR技术能够快速、高效地扩增特定的DNA序列,对于基因检测和疾病诊断具有非常重要的作用。
三、蛋白质纯化技术蛋白质纯化技术是将复杂的蛋白质混合液分离,从中获得目标蛋白质的过程。
在生物研究中,蛋白质纯化技术是分子生物学的重要分支,其主要应用于蛋白质的基础研究、药物研究、工业生产等领域。
根据蛋白质性质的不同,可以选择不同的纯化方法,如界面吸附、离子交换、凝胶过滤等。
四、基因编辑技术基因编辑技术是指通过特定的核酸酶对DNA分子进行切割或修复,达到对基因的修改或调控的目的。
目前常用的基因编辑技术有CRISPR-Cas9、TALEN和ZFN等。
该技术可以用于基因敲除、基因点突变、育种等领域,对于生物研究和治疗具有广泛的应用前景。
总之,分子生物学技术在生物研究中的应用已经越来越广泛。
这些技术的出现使得生物研究变得更加高效和精确,也为人类医学、农业生产、环境保护等领域带来了更多的机遇和挑战。
相信在未来,分子生物学技术会更加成熟和完善,为全球生物研究做出更大的贡献。
分子生物学技术在检验医学中的应用随着科学技术的不断进步,分子生物学技术发展迅速,成为医学领域中不可或缺的一部分。
在检验医学中,分子生物学技术发挥了越来越重要的作用,为疾病的诊断、治疗和预防提供了新的思路和方法。
本文将介绍分子生物学技术在检验医学中的应用及其优势和局限性,并通过实际案例进行具体阐述。
分子生物学是研究生物分子在生命活动中的作用和规律的科学。
其研究对象包括DNA、RNA、蛋白质等生物分子,以及这些分子在基因表达、细胞信号转导、基因组学等方面的作用。
近年来,随着高通量测序技术的发展,分子生物学技术在医学领域中的应用越来越广泛,为检验医学带来了革命性的变化。
遗传性疾病的诊断分子生物学技术通过检测基因序列的变化,可以对遗传性疾病进行诊断。
例如,地中海贫血是一种常见的遗传性贫血疾病,传统的方法需要靠血红蛋白分析等手段进行诊断。
而采用分子生物学技术,可以直接检测到导致地中海贫血的基因突变,提高了诊断的准确性和效率。
肿瘤的早期诊断和预后判断肿瘤的发生与基因变异密切相关。
分子生物学技术可以通过检测基因变异、甲基化等因素,实现肿瘤的早期诊断和预后判断。
例如,通过检测肺癌患者血清中的循环肿瘤DNA,可以早期发现肺癌,并为治疗和预后判断提供依据。
感染性疾病的诊断分子生物学技术可以快速检测病原体核酸,对感染性疾病进行诊断。
例如,在新冠疫情期间,分子生物学技术被广泛应用于病毒核酸检测,为疫情防控提供了重要的技术支持。
遗传性疾病的诊断以地中海贫血为例,采用分子生物学技术对导致地中海贫血的基因进行检测,可以快速、准确地诊断出患者是否患有该疾病。
相较于传统的方法,分子生物学技术具有更高的特异性和灵敏度,能够避免漏诊和误诊的情况发生。
肿瘤的早期诊断和预后判断以肺癌为例,通过检测肺癌患者血清中的循环肿瘤DNA,可以早期发现肺癌,并为治疗和预后判断提供依据。
在某实际案例中,一名患者通过常规体检未能发现肺癌的迹象,但通过循环肿瘤DNA检测,发现了肺癌的存在。
分子生物学技术在昆虫系统学研究中的应用[摘要]分子牛物学技术应用于昆虫系统学研究,是50年代末新兴起来的,近年来发展相当迅速。
为了把握这个研究方向,并促进这个研究领域的发展,作者从研究方法、研究内容、研究对象等方面着手,近10年来分子生物学技术应用于昆虫系统学,并对其的研究进展进行了概括和总结。
介绍了DNA序列测定、RFLP、分子杂交技术、RAPD、SSC及DSCP等几种主要方法及其应用情况,并从分类鉴定、系统发育分析、分子进化、遗传变异及进化研究等方而总结了已有的研究成果,日前已进行过分子系统发育研究的昆虫类样进行了列表总结。
[关键词]分子生物学技术;昆虫系统学.本世纪70年代,由于限制性内切酶的发现,DNA重组技术的建立,DNA序列快速测定方法的发明,分子生物学及其技术以迅猛的速度发展。
80年代,PCR技术的产生和发展,加速了分子生物学技术在生物学各研究领域的广泛应用,分子生物学技术应用于昆虫系统学研究中,始于本世纪80年代末,近些年来发展迅速,通过研究昆虫核酸分子的结构来探求各类群之间的亲缘和进化关系,从生命的本质上子找昆虫各类群之间的内在联系。
作者从研究方法、研究内容及研究对象二方面对近10年来昆虫分子系统学的研究进展作简要的综述。
1研究方法前用于昆虫分子系统学研究的卞要方法有核酸序列分析(DNA sequence analysis)、RFLP(限制性片段长度多态性分析,Restriction fragment length polymorphism)、分子杂交技术( Molecular hybridization) ,RAPD(随机扩增DNA多态性分析,Random amplified polymorphicDNAI) ,SSCP(单链构象多态性,Single strand conformational polymorphism)和DSCP(链构象多态性,Double strand conformational polymorphism)分析等方法[1]。
1. 1 DNA序列分析DNA序列分析是通过直接比较不同类群个体同源核酸的核茸酸排列顺序,构建分子系统发育树,并推断类群间的系统演化关系、最可靠的方法。
但序列分析耗资较大,也很费时,所以不适[2]宜于大群体的遗传进化研究。
但随着生物技术的不断提高,药品、试剂盒及酶制剂越来越廉价,此方法将会得到广泛应用。
此方法与RFLP及DSCP等其它方法相结合,可快速而经济地测定大量个体,此乃今后发展的方向[2]。
日前已对许多昆虫核基因组中的核糖体DNA(r DNA)及线粒体DNA(mtDNA)进行了序列测定,并进行了相应的系统发育分析。
1. 2 RFLP分析RFLP是应用限制性内切酶切割不同类群个体的基因组DNA或某一基因,产生不同长度的限制性片段,根据酶切图,计算类群之间的遗传距离,构建系统树。
此方法的优点是快速〃经济、简便,而A结果也比较可靠,因此特别适合大群体的遗传、进化研究。
通常用于RFLP研究的是线粒体基因组DNA( mt DNA,因为昆虫的mt DNA较小,基因结构较清楚,用限制性内切酶切割后可直接进行分析。
而昆虫核基因组DNA复杂,酶切后片段很多,很难确定其同源性,击进行分子杂交后才能分析,所以用mt DNA进行RFLP分析的研究较多。
目前,也有采用RFLP与PCB 相结合的方法,先选用特定引物将某一片段进行PCB扩增和克隆,然后再进行RFLP分析。
但RFLP分析远不如核酸序列分析提供的信息量多,而且结果也不如后者可靠,所以,RFLP通常只用于种类鉴定或种内种群间的遗传进化研究,很少用于种上阶元的系统发育分析。
1. 3分子杂交技术分子杂交的基本原理是具有一定同源性的两条核酸单链,在一定的条件下可按碱基互补原则退火形成双链,杂交过程是高度特异性的。
用于杂交的双方是待测核酸序列和探针。
用带有标记的已知核茸酸片段作为探针,来检测目的基因或DNA片段的存在及变异情况。
此方法用于昆虫近缘种和复合种的鉴定效果较好。
但此方法要求对研究类群的遗传背景有一定的了解,而目探针的制备也较麻烦,因此,探针杂交技术应用并不广泛,通常只用于小型医学昆虫的种类鉴定。
1. 4 RAPDRAPD是在PCB基础上,采用单个人工合成的随机引物(一般为10 bp)对基因组DNA进行扩增,所用引物G+ C含量在50%一70%之间[3]。
此方法的优点是:a.快速、简便,整个实验能在24h以内完成,而目只击具备分子生物学实验的基本条件就可进行,也尤击昂贵的试剂及仪器设备;b.反应灵敏;c.对遗传背景不清楚的材料也能进行。
此方法的缺点是:反应过于灵敏,极易受外源DNA的污染,可贡复性低。
在昆虫中,最早由Black等将此方法应用于4种蚜虫的鉴定比较,根据电泳图r,能明确区别4个种[4]。
同时,还检测了种内不同生物型、同一生物型内不同个体,以及同一种群内不同个体之间扩增产物的多态性。
此外,还用RAPI)技术检测和鉴定了蚜虫体内的两种寄生蜂。
Kambhampt i等采用RAPI技术对蚊虫的种和种群进行了鉴定和区分,并对RAPI的实验技术、统计分析及应用等进行了探讨。
其后,RAPI在按蚊、寄生蜂、舞毒蛾、粉虱、蚜虫、蝗虫、果蝇等昆虫中均有应用。
在这些研究中,RAP I大多用于近缘种、复合种和种内生物型的识别和鉴定,以及地理种群的遗传进化研究。
RAPI在系统发育分析上的应用,还有一定的争论,例如,Vanlerberghe Mesutti采用RAP I的方法成功地对膜翅b纹翅卵蜂科的种类进行了系统发育分析,但Zande将RAPD应用于果蝇种间的系统发育分析时,却得出相反的结论,认为RAPD尤法得到可靠的遗传距离先要计算出分类单元间的遗传距离,遗传距离的算法以Jukes的单参数法和Kimura的双参数法较为常用。
在获取距离距阵后,按一定的规则,根据各距离值间的内在关系构建系统树。
距离法构建树的方法有多种,影响最大的是Saitou的邻接法Sneath的不加权对群分析法(Unweighted pair group with mathematicalaverage, UPGMA)。
距离法适合于分析各种方法获得的分子数据如序列测定,RFLP ,RAP D等。
似然法首先击要确定一个序列进化的模型,如Kimura的双参数模型等,然后淤找在该进化模型下最有可能产生所研究的DNA序列数据的系统树,由于这类方法计算特别复杂费时,因此其应用不如前两类方法普遍。
在似然法中,影响最大的是最大似然法(Maximum likelihood method)。
以上3类方法都是在一定的前提条件下进行的,因而有一定的运用范围,由于作者对许多条件所知甚微,因而很难判断在某一具体情况下哪种方法最佳。
最好是同时合用多类方法构建系统树,若多种方法所获系统树的拓扑结构一致,将大大提高结果的可靠性目前用于分子系统发育分析的主要常用软件有:MacClade,Phylip,Mega。
2研究内容2. 1种群遗传变异及进化的研究检测和描述种内各种群的遗传结构及变异状况,探讨物种的形成与分化的内在机理。
内容包括自然地理种群及社会性昆虫的社会种群研究。
通常采用的方法有RAPD ,RFLP ,SSCP和DSCP,而DNA序列测定用于种群研究较少。
此方面的研究有:Chapco等采用RAPI对蝗虫种群的研究; Kambhampt i等、Ballinger Grabtree等采用RAPI检测按蚊的亚种及种群变异;陈燕茹等采用RAPI 分析果蝇的地理种群变异;土文等、贾振宇等用mt DNA的RFLP方法分析果蝇的自然种群;Martinez等研究mt DNA在蚜虫地理种群内的变异; McLain等分析按蚊地理种群中rDNA NTS 片段的变异; Pnterka等采用RAPD PCB分析蚜虫种群的遗传变异; Atkinson等采用mt DNA的DSCP方法分析社会性昆虫种群的遗传变异[5]。
2. 2种及种下阶元的分类鉴定主要是对近缘种和复合种、种下亚种与生物型的识别和鉴定。
此研究最为可靠的方法是分子杂交技术,在医学昆虫的研究中应用较多,如用DNA探针鉴定按蚊复合种。
采用RAPD、RFLP 及SSCP ,DSCP也能进行种类鉴定,Black等采用RAPI技术成功地检测了蚜虫的种及种内不同的生物型以及蚜虫体内的寄生蜂; VanlerbergheMesutti用mt DNA的RFLP、RAPI分子标记有效地鉴定膜翅b寄生蜂种类; Boge等采用PCB SSCP对步甲种类进行了鉴定。
2. 3系统发育分析系统发育分析是系统学研究的热点,通过分子系统发育研究,对传统分类有疑问的类群或形态分类不能解决的类群的系统发育进行分析和探讨,也可对传统的分类系统进行验证。
分子系统发育研究采用的数据通常是DNA序列,RFLP数据也可用于低级阶元的系统发育分析[6]。
目前已有许多类群进行了分子系统发育分析,从种级至目级阶元都有研究。
分子系统学研究结果与传统的分类系统及形态支序分析的结果有的相一致,但有的却很矛盾,如Camp-bell等Dohlen等根据18S rDNA片段序列构建的分子系统树证明:同翅目并非为一个单系群,而是一个平行进化的类群。
Chalwatzis等、Whiting等根据18S和28S rDNA的序列分析,证明捻翅目与双翅目亲缘关系较近,而与鞘翅目关系却较远,而传统分类学一直认为捻翅目与鞘翅目关系较近,有的学者并把它作为鞘翅目中的一个总科。
这样,分子数据与形态数据结果不统一,在现有研究水平下很难说哪种方法得出的结论更可靠,目前较为折中的办法是把分子性状和形态性状综合起来分析2. 4分子进化。
分子进化的研究目的是构建基因或DNA分子的进化树,并探索生物大分子的进化机制和特征。
这类研究卞要集中在亲缘关系比较明确的类群或高级阶元类群之间进行,研究对象以rDNA 及mt DNA为主要研究对象。
3 研究结论3. 1 rDNAr DNA是编码核糖体RNA的基因,是一类中度重复的DNA序列,以串联多拷贝形存在于染色体DN A中,每个重复单位由非转录间隔区(norr transcribed spacer, NTS)、转录间隔区( internal transcribed spacer, ITS)。
3种RNA(18S ,5. 8S ,28S rRN A)基因编码区组成rDNA 3个区域的DNA进化速率各有不同,编码区总的来说,进化速率很慢,非常保守,适合于构建生命系统树的基部分支,但编码区内,又可分为高度保守区、保守区、可变区和高变区,这些不同的区域,适合于不同阶元类群的系统发育研究;转录间隔区为中度保守,适合于推断5-10年左右的进化事件;非转录间隔区则进化速度较快,适合于种间关系的研究[7]。