高效液相色谱法测定三子散中栀子苷的含量

反相高效液相色谱法测定柴远解郁片中栀子苷的含量

【摘要】 目的 建立以反相高效液相色谱法测定柴远解郁片中栀子含量的方法。方法 以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以乙腈-水(15∶85)为流动相；检测波长为238nm；流速1.0 ml/min。理论板数以栀子苷峰计算应不低于2500。结果 栀子浓度线性范围为0.1248 μg～0.6240 μg。平均回收率为99.27，RSD＝0.41%(ｎ＝5)。结论 本法简便、准确、重复性好，可用于柴远解郁片的质量控制。

【关键词】 柴远解郁片；栀子；反相高效液相色谱法

柴远解郁片是我院在研的六类新药，该制剂由柴胡、远志、栀子、巴戟天、五味子、石菖蒲、酸枣仁、茯苓、牡丹皮和半夏药材组成，具有舒肝解郁和安神定志，用于治疗抑郁症(肝郁气滞型)。栀子是柴远解郁片中主要成分之一，在新药研制过程中， 参照2010年版中国药典栀子项下含量测定方法，笔者建立了以反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定其中栀子含量的方法。作为控制本品质量的方法之一。

1 仪器与试药

日本岛津LC-10ATvp高效液相色谱仪，十八烷基硅烷健合硅胶色谱柱(Diamonsil C18(250 4.6 mm;5 μm)色谱柱(迪马公司)；SPD-10AVP检测器，N2010色谱数据工作站(浙江大学智能信息工程研究所)，栀子苷对照品由中国药品生物制品检定所提供(供含量测定用)，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为重蒸馏水。柴远解郁片由我院试制中心提供。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

以十八烷基硅烷健合硅胶为填充剂；以乙腈-水(15∶85)为流动相；检测波长为238 nm；流速1.0 ml/min；柱温：室温。理论板数以栀子苷峰计算应不低于2500。

2.2 对照品溶液的制备 精密称取栀子苷对照品适量，加甲醇制成每1 ml含31.2 μg的溶液，即得。

2.3 供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约0.2 g，同时另取本品粉末测定水分(中国药典2010年版附录Ⅸ H第二法)，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理20 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液10 ml，置25 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

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sjzxyx88@m·中医中药·高效液相色谱法测定牛黄上清丸中栀子苷的含量陈蕾1，曾晓红2（1.新疆自治区医疗机构药品采购中心，新疆 乌鲁木齐 830000；2.乌鲁木齐市第一人民医院，新疆 乌鲁木齐 830000）0　引言中成药牛黄上清丸始载于明代李挻的《医学入门》，具有清热泻火、散风止痛的功效[1]，属于国家基本药物的目录品种，主要由全粉入药已经在临床应用多年。牛黄上清丸的标准收载于《中国药典》2010年版[2]。在2010年版的《中国药典》中对于含量的测定有记载，丸剂利用液相色谱法测定的有效成分为黄芩苷，胶囊剂液相色谱法测定的有效成分为大黄素，片剂采用不同的液相色谱法分别对栀子苷、黄芩苷有效成分进行测定[3-4]。牛黄上清丸（大蜜丸）的中药组成为人工牛黄、栀子、黄连、黄柏、大黄、黄芩、连翘、赤芍等十九味调制而成[5]。目前，对于牛黄上清丸中栀子苷的成分含量测定的文献报道比较少，因此本文研究的目的在于采用高效液相色谱法测定丸剂中栀子苷有效成分的含量，从而为牛黄上清丸的质量控制提供科学的数据参考。1　仪器与试药1.1　试验仪器。美国Agilent公司生产的Agilent1100型高效液相色谱仪器（配备有G1256A型自动进样器，G1241型真空脱气机器，1100型二极管阵列检测器、1100型四元泵），美国Agilent公司生产的Agilent XDB-C18（250 mm×4.6 mm，2.5 μm）色谱柱，美国梅特勒公司生产的万分之一电子分析天平，AP002-1021型抽滤机，AS2153型数控超声波清洗仪器（天津奥特赛斯恩斯仪器有限公司生产），ADF-100型万能粉碎机（北京生物科技有限公司生产）。1.2　试验试药。甲醇、乙腈均为色谱纯（天津市北方天医化学试剂厂生产），磷酸溶液为分析纯（烟台市双文化工有限公司生产），硝酸铵为分析纯（北京生物科技有限公司生产），水为三蒸水，栀子苷对照组（中国药品生物制品检定所，批号：805-5414，含量为99.7%），牛黄上清丸（大蜜丸）（北京同仁堂股份有限公司同仁堂制药厂提供，生产批号：0016415、0016248、1005248，规格为6.0 g×10丸）[6]。2　方法与结果2.1　色谱条件的选择。色谱柱选择Agilent XDB-C18（250 mm×4.6 mm，2.5μm），流动相为乙腈：0.2%磷酸铵缓冲溶液=10:90，柱温为25℃，检测波长为240 nm，进样量为20 μL，流速为1.2 mL/min。理论塔板数按照栀子苷的理论塔板数应≥17700。2.2　溶液的配制2.2.1　对照品溶液的配制：取栀子苷对照品适量精密称定后置于10 mL容量瓶中，加入甲醇溶液稀释至刻度后摇匀，置于超声仪器中进行超声，待溶液全部溶解后，放冷至室温后，将缺损的体积再次用甲醇溶液补充至刻度，摇匀后得到栀子苷的浓度为0.20 mg/mL。精密吸取5 mL溶液置于另一容量瓶中，加入5 mL甲醇溶液定容至刻度后得到0.05 mg/mL的栀子苷对照品溶液。置于-20℃冰箱中储存，备用。2.2.2　供试品（样品）溶液的配制：取同一批次牛黄上清丸6.0g，将丸剂剪碎，精密称定后置于研钵中，以80 mL甲醇溶液分别倒入研钵中配合将丸剂研碎溶解，后转移至100 mL容量瓶中，超声仪器中超声提取35 min，后放置于空气中冷却至室温后，甲醇溶液再次定容，摇匀，静置，上清液郭0.45 μm的微孔滤膜，置于-20℃冰箱中，储存，备用。2.2.3　阴性对照品溶液的配制：按照牛黄上清丸中成药的制备工艺及制备材料，配制缺中药栀子的中成药后，按照2.2.2项下供试品溶液的配制方法制备成阴性对照品溶液，置于-20℃冰箱中备用。详见图1-3。图1　对照品色谱图（1：栀子苷）图2　供试品色谱图（1：栀子苷）图3　阴性对照溶液色谱图摘要：目的 采用高效液相色谱法（HPLC）测定牛黄上清丸中栀子药材中有效成分栀子苷的含量，为牛黄上清丸的质量控制提供数据参考。方法 色谱柱选择Agilent XDB-C18（250 mm×4.6 mm，2.5 μm），流动相为乙腈：0.2%磷酸铵缓冲溶液=10:90，柱温为25℃，检测波长为240 nm，流速为1.2 mL/min。结果 栀子苷的线性回归方程为：Y=2.748×103-0.0839×102（r=0.9997），线性范围为0.108-0.831μg；栀子苷的平均加样回收率为99.87%，99.98%、100.02%，RSD为1.11%、1.02%、0.97%。结论 以高效液相色谱法对牛黄上清丸中组成成分栀子中的栀子苷进行测定，操作方式简单，重复性好，精密度高，结果稳定性较强，可以作为牛黄上清丸质量控制的检测手段。关键词：牛黄上清丸；高效液相色谱法；栀子苷；线性回归；稳定性中图分类号：R286 文献标识码：B DOI：10.19613/ki.1671-3141.2018.49.136本文引用格式：陈蕾,曾晓红.高效液相色谱法测定牛黄上清丸中栀子苷的含量[J].世界最新医学信息文摘,2018,18(49):166-167.世界最新医学信息文摘 2018年 第18卷 第49期167

高效液相色谱法测定栀子金花丸中栀子苷含量

李海洲;亓彦平

【期刊名称】《中国药业》

【年(卷),期】2005(14)9

【摘 要】目的:测定栀子金花丸中栀子苷的含量以控制产品质量.方法:采用Hyper-sil ODS柱(250mm×4.6 mm,5μm,大连依利特公司)为色谱柱,以乙腈-水-三乙胺(10:90:0.1)为流动相,流速为1.0 mL/min,检测波长为240 nm,柱温为室温.结果:栀子苷的平均回收率为99.6%.结论:高效液相色谱法准确、重现性好,可用于栀子金花丸的质量控制.

【总页数】1页(P50-50)

【作 者】李海洲;亓彦平

【作者单位】山东省莱芜市药品检验所,山东,莱芜,271100;山东省莱芜市中医医院,山东,莱芜,271100

【正文语种】中 文

【中图分类】R286.0;R927.2

【相关文献】

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[J], 高旭东;师永清;陈士恩;郝宝成;梁剑平

3.反相高效液相色谱法测定栀子金花丸中栀子苷的含量 [J], 郭永成;王学蕾 4.RP-HPLC法测定栀子金花丸中栀子苷的含量 [J], 包淑英;傅红;张义友;王巍;刘洪利;黄振宇

5.栀子金花丸中栀子苷含量的胶束毛细管电泳法测定 [J], 王晓可;毋福海

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浙江中医杂志２０１８年４月第５３卷第４期　

高效液相色谱法同时测定清热护肝方中葛根素、栀子苷和芍药苷的含量半　

楼婷婷　余平　孙萍萍　余永华　

１　浙江省立同德医院　浙江杭州３１００１２　

２杭州新诺华医药有限公司　浙江杭州３１００１５　

关键词　清热护肝方　葛根素栀子苷　芍药苷　高效液相色谱法　

清热护肝方由葛根、栀子、芍药、柴胡、枸杞、茵陈、　

五味子、板蓝根、垂盆草、紫草组成，具有清热解毒、保肝　

护肝的功效。其中葛根、栀子、芍药是其重要成分。目前，　未见同时测定清热护肝方多个成分含量的报道。笔者采　

用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）同时测定清热护肝方葛根中　活性成分葛根素、栀子中活性成分栀子苷和芍药中活性　

成分芍药苷的含量，并进行方法学考察，以期为有效控　制该制剂的质量提供参考。　

１仪器与试药　

岛津ＬＣ一１５Ｃ高效液相色谱仪；ＫＱ５２００超声波清　洗器（昆山市超声波仪器有限公司）；十万分之一电　子天平（德国塞多利斯）。葛根素、栀子苷和芍药苷的　

对照品（中国药品生物制品检定所，批号：ｌ１０７５２—　

２００５１ｌ、ｌ１０７４９—２００７１４、１１０７３６—２０１３３７）；水为过　０．２２　１２　ｍ滤膜的纯水，乙腈为色谱纯，其余试剂均为　

分析醇。清热护肝方饮片均由浙江中医药大学中药　饮片厂提供，经浙江中医药大学药学院专家鉴定合　

格。　２方法“　和结果　２．１　色谱条件：流动相为乙腈一水（１６：８４），色谱柱为　Ｈｙｐｅｒｓｉｌ　ＢＤＳ　Ｃ１８（４．６ｍｍ×２５０ｍｍ，５　１２　ｍ），流速为　１．０ｍｌ／ｍｉｎ，检测波长为２３０ｎｍ。进样量为２０　ｕ　１。理论板　数按葛根素、栀子苷和芍药苷计算均在４０００以上，分离　

度均＞１．５。对照品、样品、阴性样品色谱见图１。　２．２　对照品溶液的制备：分别取葛根素对照品约　

１７ｍｇ、栀子苷对照品约ｌＯｍｇ和芍药苷约１４ｍｇ，置ｌＯＯｍｌ　

量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。作为对照品溶　液。　２．３供试品溶液的制备：按照处方，调配混合研　细，精密称取细粉适量约５００ｍｇ，置５０ｍｌ容量瓶中，