标准菌株管理程序

标准菌株执行标准最新规范微生物学领域中，标准菌株的执行标准是确保实验结果准确性和可重复性的关键。

以下是一套最新的规范，旨在指导科研人员和实验室工作人员在处理标准菌株时遵循的步骤和注意事项。

开头：标准菌株是微生物学研究和工业生产中不可或缺的工具，它们为实验提供了一致性和可比性。

随着科学的发展和技术的进步，对标准菌株的管理也提出了更高的要求。

本规范旨在提供一套最新的指导原则，以确保标准菌株的正确使用和维护。

正文：1. 菌株的选择与鉴定：- 标准菌株应从权威机构获取，并附有详细的鉴定报告。

- 菌株在使用前应进行再次鉴定，以确保其纯度和特性。

2. 菌株的保存：- 标准菌株应保存在适宜的条件下，如-80°C的低温冰箱或液氮中。

- 应定期检查菌株的活性和稳定性。

3. 菌株的复苏与培养：- 复苏菌株时应遵循特定的操作程序，以避免污染和变异。

- 培养条件应严格遵循菌株的推荐条件。

4. 菌株的传代与使用：- 标准菌株的传代次数应有明确限制，以防止基因漂变。

- 使用菌株时，应记录详细的实验条件和操作步骤。

5. 数据记录与报告：- 实验过程中的所有数据都应详细记录，并进行备份。

- 实验报告应包括菌株的来源、使用条件、实验结果和分析。

6. 质量控制：- 定期对标准菌株进行质量控制测试，确保其性能符合标准。

- 对于不符合标准的菌株，应立即停止使用并进行调查。

7. 安全与伦理：- 在处理标准菌株时，应遵守生物安全和伦理规范。

- 实验室工作人员应接受适当的培训，并使用适当的个人防护装备。

8. 菌株的共享与交流：- 鼓励在科研社区内共享标准菌株，以促进科学交流和合作。

- 共享时应提供菌株的详细信息和使用条件。

结尾：遵循上述规范，可以确保标准菌株在科研和生产中的有效性和可靠性。

实验室管理者和科研人员应不断更新知识和技能，以适应不断变化的科学和技术环境。

通过共同努力，我们可以提高实验的准确性，推动微生物学领域的进步。

实验室菌株的管理制度第一章总则第一条为规范实验室菌株的管理，保障实验室菌株的安全和合法使用，制定本制度。

第二条本制度适用于所有具有实验室菌株管理需求的实验室。

第三条实验室菌株管理的目的在于加强对实验室菌株的管理和使用，保障实验室工作人员和周围环境的安全，维护实验室科研工作的顺利开展。

第四条实验室菌株管理应遵循科学、公正、严谨、规范的原则。

第五条实验室菌株主要包括细菌、真菌、病毒等微生物生物材料。

第六条实验室菌株管理包括菌株来源获取、存放、传递、复制、鉴定、变异、保护、使用和销毁等环节。

第七条实验室菌株管理应遵循"生物安全第一"的原则，确保实验室菌株不会对实验室工作人员和周围环境造成安全风险。

第八条实验室菌株管理应遵循法律法规和相关管理规定，确保菌株的合法获取和使用。

第二章实验室菌株获取与登记第九条实验室菌株的获取应经过实验室负责人或指定人员批准，获取途径包括从合法采购渠道购买、通过国家授权的菌种服务中心获取、从其他实验室或科研单位转入等。

第十条实验室菌株获取应提供相关文献资料和菌株来源信息，并填写菌种来源登记簿进行记录。

第十一条获取的实验室菌株应及时进行分离培养，并制备冻种，保存在冻存物库中。

第十二条实验室菌株应按照标准规范的菌株命名进行分类和登记。

第十三条实验室菌株登记内容应包括菌株名称、来源、分类地点、分离日期、保存人、保存方式等信息。

第十四条实验室菌株的变异信息和相关操作应及时在登记簿中更新记录。

第十五条实验室菌株的姓名登记簿应保存完整、准确，并定期进行备份和归档。

第三章实验室菌株存放与管理第十六条实验室菌株应妥善保存，避免污染和变异。

第十七条实验室菌株应定期进行培养，保持其活力和纯度。

第十八条实验室菌株保存条件应符合各菌株种类的特性和要求，包括温度、湿度、有机溶剂、氧气浓度等。

第十九条实验室菌株的保存应使用专门的冻存设备和保存试剂，并进行定期检验和维护。

第二十条实验室菌株应加强保管，如用金属标签标注，记录存放地点、存放日期、保存人等信息。

菌种管理规程1、目的：规范菌种管理与使用程序，确保实验结果可靠与实验室安全。

2、范围：本规程适用于本公司检验用标准菌种的管理。

3、责任：QC微生物限度检验员、QC负责人对此规程的实施负责。

4、内容：4.1标准菌种由受过专业培训，有足够的菌种保管经验的微生物限度检查员保管。

4.2检定用标准菌种，由质量部门负责人批准后，报采购部购买。

4.3收到菌种后，应核对品名，菌号数量，检查菌种管有无破损，填写《检定菌种接收记录》。

在保存菌种容器外加贴标签，注明编号、名称、购买日期。

标准菌种的保存条件：应在2～5℃保存，一般可保存3个月，藏菌种的冰箱不得存放食物和易挥发性药品。

4.4标准菌株的使用4.4.1取用时，必须登记使用时间、数量及使用人。

4.4.2启用时，必须在专用净化台内严格按无菌操作进行菌种的传代。

4.4.3传代后的标准菌株应不少于6支，4支专用于菌种传代。

另2支为工作用菌种。

传代工作应予记录。

4.4.4保存用菌株，应一个月接种传代于新鲜的营养琼脂斜面上，检定是否属纯种，发现变异或染菌应及时报质检部负责人并记录。

4.5工作用标准菌株，应在用前将菌种接种于新鲜的营养琼脂斜面上培养后，再接种于新鲜营养肉汤培养基中，保存在2～5℃冰箱内，该液体一般使用三天。

4.6标准菌种的定期检查4.6.1 定期检查菌种外观及干燥状态。

4.7项4.7 接种菌株必须在净化工作台内进行。

在接种不同菌株时，要特别注意防止菌种之间的交叉污染。

4.7.2取菌液，吸取菌液的吸管，用后必须放在5%苯酚液中，至少浸泡24小时后方可清洗。

4.7.3弃菌种管、染菌器具，菌种培养基的双碟等，应经121℃、45分钟蒸汽灭菌后，方可清洗，严防污染。

4.7.4 接种菌株时，若不慎污染桌面、地面等，应及时用有效消毒方法处理，以防污染环境及工作人员。

4.7.5 控制传代次数，传代次数越多，突变的机率越大，因此要尽量少传代，应根据菌种保存情况规定最多传代次数，超过此限度或经鉴定检查不合格的，原则上应销毁灭活(加热失活)，有灭活记录。

菌种保存、传代、使用、销毁管理规程,操作规程传代用菌种采用甘油冷冻管保存法。

将菌种接种在适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，将菌液混合甘油并分装至冷冻管中，冷冻管标注菌种名称、代数、保存日期等信息，然后放置于-80℃冰箱中保存。

每年进行一次复苏和传代，保存时间不超过5年。

5.3.2.2液体石蜡保存法对于一些难以保存的菌种，采用液体石蜡保存法。

将菌种接种在适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，将菌液混合液体石蜡并分装至玻璃瓶中，瓶口用铝箔密封，标注菌种名称、代数、保存日期等信息，保存温度为-70℃。

每年进行一次复苏和传代，保存时间不超过5年。

5.4菌种的传代传代用菌种每年进行一次复苏和传代。

复苏后，将菌种接种至适宜的琼脂培养基上，待菌生长充分后，按照规定的传代代数制备传代用菌种，并及时更新菌种库存记录。

5.5菌种的使用使用菌种前，应先确认菌种的品质和纯度，并按照规定的传代代数制备工作用菌种。

使用后，应及时更新菌种库存记录，并进行相应的消毒处理。

5.6菌种的销毁菌种在使用过程中，如出现变异或污染等情况，应及时进行应灭活处理，并填写《菌种销毁记录表》，经主管部门审核同意后，进行销毁处理。

菌种库存中长期未使用的菌种，应定期进行清理和销毁处理。

菌复苏、复壮；Sabouraud葡萄糖琼脂培养基：用于白色念珠菌复苏、复壮；青霉素-链霉素琼脂培养基：用于铜绿假单胞菌复苏、复壮。

5.4.1.1.3复苏步骤：1.取出保存好的菌种管，用接种针在酒精灯上消毒；2.将接种针在75%酒精中消毒，再用酒精棉球擦拭消毒；3.用接种针在相应的培养基上进行接种；4.置于适宜温度下孵育，待菌落出现后进行传代或进行实验。

5.4.1.2标准菌株的确认通过形态学、生理生化特性、分子生物学等方法进行鉴定，确认菌株的纯度和种属。

5.4.1.3标准菌株的传代将菌株从原始保存方式中转移到新的保存方式中，确保菌株的保存和传承。

传代次数不宜过多，一般不超过10代。

Procedure for Maintaining and Handling Reference Microorganism标准菌株的管理与控制1. Aim 目的To maintain and handle stock cultures of reference strains for quality control and performance testing purposes. This procedure will minimize the opportunity for cross contamination, mutation and alteration of typical characteristic of the reference strains.规范用于微生物实验质量控制和操作评估的标准菌株管理与使用程序，尽量减少交叉污染确保实验结果可靠与实验室安全。

2. Scope 范围The working instruction applies to maintaining and handling of reference microorganism in the microbiological laboratory本工作指引适用于微生物实验室所有标准菌株的管理与使用。

3. Reference 参考1. LI 00.703 Performance Test of Culture Media.2. Microbank Advance Microorganism Storage System Package Insert4. Contents 内容4.1 Procedure 程序1. Resuscitate the reference microorganism strains by:标准菌株的复壮a. Ensure that the appropriate liquid medium containing 0.5 – 1.0 ml (e.g. TryptoneSoya Broth or Buffer Peptone Water) is at room temperature将复壮所用的0.5-1.0ml液体培养基 (如TS或BPW)至于室温。

标准菌种管理程序1.目的为对微生物实验需要的标准菌株进行有效控制和规范管理，防止污染、变异、丢失或损坏，以保证溯源性和稳定性，制定本程序。

2.适用范围适用于微生物实验中标准菌种（原始标准菌种、标准储备菌株和工作菌株）的申购、验收、保管、领用、使用、传代及存储等方面。

3.职责3.1采购部负责依据采购申请规定的名称、规格、数量执行原始标准菌种申购工作；3.2微生物检测人员负责菌种的验收、菌种的领用、、及传代与保存。

3.3生物安全责任人负责批准菌种的双人双锁保管管理\领用、使用及销毁，原始标准菌种的接收工作，标准菌种采用双人双锁保管管理。

3.4生物安全责任人负责组织定期的生物安全检查活动。

4.工作程序4.1标准菌种申购本公司购买的原始标准菌种来源于美国典型菌种保藏中心（ATCC），英国典型菌种保藏中心（NCTC），中国工业微生物菌种保藏管理中心（CICC），中国医学微生物菌种保藏管理中心（CMCC），中国食品发酵工业研究所（IFFI）。

综合部依据《外部服务和供应品采购程序》实施采购工作。

菌种来源机构详见附件一：微生物菌种保藏机构名称和缩写。

4.2菌种分类4.2.1本公司保存的菌种仅包括部分致病性细菌，不包括病毒、螺旋体、衣原体、立克次氏体等菌种。

本公司的标准菌株除了实验所用之外，还应包括应用于培养基（试剂）验收/质量控制、方法确认/证实、阳性对照、阴性对照、人员培训考核和结果质量的保证等所需的菌株。

4.2.2菌种的分类根据其危险性决定（包括实验室感染的可能性，感染后发病的可能性，症状轻重及愈后情况，有无致命危险及有效的防止实验室感染方法，用一般的微生物操作方法能否防止实验室感染、我国有否此种菌种及曾否引起流行、人群免疫力等情况）。

依其危险程度的大小，我国的菌种分为四类。

第一类：实验室感染的机会多，感染后发病的可能性大，症状重并能危及生命，缺乏有效的预防方法，以及传染性强，对人群危害性大的烈性传染病，包括国内未发现或虽已发现，但无有效防治方法的烈性传染病菌种。

疾病预防与控制中心实验室菌种、毒种（株）和阳性标本管理程序1 目的加强中心的菌种、毒种（株）和阳性标本的管理，确保菌（毒）种（株）及阳性标本收集、保管、领用及销毁工作符合规定，相关生物安全检测工作安全有序地进行。

2 范围适用于本中心菌种、毒种（株）和相应阳性标本的收集、保管、领用、销毁等工作。

3 职责3.1 微生物实验室负责菌（毒）种的采购计划及菌种验收。

3.2 微生物实验室配合后勤管理部门做好菌（毒）种的采购。

3.3 微生物实验室负责菌种、毒种（株）和相应阳性标本的收集、保管和销毁。

3.4 中心主任负责菌种采购及领用审批。

3.5 中心生物安全管理委员会负责经常性的监督检查。

4 分类与定义4.1 分类根据《中国医学微生物菌种保藏管理办法》与《病原微生物实验室生物安全管理条例》的规定，按病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度，将病原微生物分为一类、二类、三类、四类，其中，第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物。

具体分类参照有关规定执行。

4.2 定义《病原微生物实验室生物安全管理条例》所称病原微生物，是指能够使人或者动物致病的微生物；所称实验活动，是指实验室从事与病原微生物菌（毒）种、样本有关的研究、教学、检测、诊断等活动。

5 程序5.1 菌种、毒种（株）及阳性标本的收集下列菌、毒种（株）及阳性样本需移交中心菌、毒种库集中保存：5.1.1 常规检测、监测项目，科学研究分离获得的有保存价值的普通菌种、毒种（株）及相应的阳性标本。

5.1.2 外部购买的普通菌种、毒种（株）标准株。

5.2 菌种、毒种（株）和阳性样本的接收5.2.1 在生物安全防护水平相应的设备和条件下进行菌种、毒种（株）和阳性样本接收工作；对可疑高致病原微生物的接收应在生物安全柜内进行，并及时安排两人上送省疾控中心。

5.2.2 接收菌种、毒种（株）和阳性样本时，应有两人在场，一人登记相关信息资料，另一人戴上手套，做好个人安全防护后，检查菌种、毒种（株）和阳性样本包装容器有无破损和泄漏。

文件制修订记录1.目的规范本中心标准菌种和野生菌种的管理。

2.范围本规程适用于标准菌种和实验过程中分离纯化的野生菌种的管理。

3.职责3.1菌种管理员：负责菌种的申购、接收、保存、分发。

3.2微生物检验员：负责菌种的确认、传代、使用及销毁。

3.3科室负责人：负责指导、监督检验员和管理员对菌种的管理。

4.术语4.1标准菌种(冻干菌种)：由国内或国际菌种保藏机构保藏的，遗传学特性得到确认和保证并可追溯的菌种。

4.2标准储备菌种：又称传代用菌种，由标准菌种经一次传代得到的培养物，是指用标准菌种制备的采用特定保存方法长期固定保存的菌种，用于传代及制备工作菌种。

4.3工作菌种：工作菌种是指用标准菌种或标准储备菌种接种至普通琼脂斜面培养后，作为日常工作使用的菌种。

4.4代：菌种的代是指将其接种至一新鲜培养基上或培养基内，每萌发一次即称为一代，从）。

菌种保藏中心获得的冷冻菌种为第0代（G5.程序5.1菌种的申购菌种管理员每年根据菌种的使用情况（包括临时检验需要）提出购买计划，经批准后，向菌种保藏中心购买标准菌种（冻干菌种），采购执行《服务和供应品的采购程序》。

5.2菌种的接收菌种到达实验室后，由菌种管理员接收菌种，检查其名称和数量，以及每一支的完整性，同时将菌种的所有信息，填写《标准菌种接收记录表》，贴好标签并按照该菌适宜储存条件进行储存（储存期及储存条件见菌种说明书）。

5.3菌种的编号5.3.1标准/标准储备菌种采用字母加数字表示：英文缩写字母-来源编号-代次-传代日期-顺序号。

菌种的英文缩写字母：大肠埃希菌（E.c）、金黄色葡萄球菌（S.a）、枯草芽孢杆菌（B.s）、黑曲霉菌（A.n）、白假丝酵母（C.a）等，来源以购进方编号为准；代数用一位带有下标数字的字母表示；标准/标准储备菌种用G表示；工作菌种用W表示；如G3表示标准菌种第3代；W3表示工作用菌种第3代。

传代日期用6位数字表示：年份取最后两位数，月、日分别用两位数。

菌种管理规范一、引言菌种管理是指对实验室中的菌种进行规范的管理和使用，确保菌种的安全性、稳定性和可追溯性。

本文旨在制定菌种管理的标准化操作流程，以确保实验室菌种的质量和安全。

二、菌种的采购与登记1. 采购菌种应选择正规的供应商或者机构，确保菌种的来源可靠。

2. 菌种采购时应获取相关证书和文献，包括菌种的鉴定报告、纯度证书等。

3. 菌种应在到货后即将进行登记，登记内容包括菌种名称、菌株编号、来源、存储条件等。

三、菌种的保存与传承1. 菌种应按照菌种的特性和要求选择合适的保存方法，如冷冻保存、干燥保存等。

2. 菌种的保存容器应具备防漏、防污染的功能，标签清晰明确，包括菌株编号、菌种名称、保存日期等信息。

3. 菌种的传承应按照规定的程序进行，确保菌种的连续性和稳定性。

4. 菌种传承时应记录传承的日期、传承人员等信息，以便追溯。

四、菌种的鉴定与验证1. 新采购的菌种应进行鉴定，确保其与供应商提供的鉴定结果一致。

2. 定期对保存的菌种进行鉴定，以确保菌种的纯度和稳定性。

3. 鉴定结果应记录并保存，包括鉴定方法、鉴定人员、结果等信息。

五、菌种的使用与管理1. 使用菌种前应对菌种进行复苏和培养，确保菌种的活力和纯度。

2. 菌种的使用应按照实验室的操作规程进行，遵守相关的安全操作规定。

3. 菌种的使用记录应详细、准确，包括使用日期、使用人员、使用目的等信息。

4. 菌种使用后应及时归还或者销毁，确保菌种的安全管理。

六、菌种的废弃与销毁1. 废弃的菌种应按照规定的程序进行处理，包括灭活、消毒等。

2. 废弃菌种的处理记录应详细，包括处理日期、处理方法、处理人员等信息。

3. 菌种的销毁应按照像关法规进行，确保菌种的彻底销毁。

七、菌种管理的质量控制1. 菌种管理应建立质量控制体系，包括菌种的质量检测、菌种管理的评估等。

2. 定期进行菌种管理的内部审核，确保管理流程的有效性和符合性。

3. 外部机构或者专家可以对菌种管理进行评估，提出改进建议和意见。