炎症反应的交联透明质酸钠凝胶降解

人流术后宫腔用交联透明质酸钠凝胶预防宫腔粘连的临床效果分析作者：黄少丽来源：《中外女性健康研究》2020年第02期【摘要】 ;目的：探讨人流术后宫腔用交联透明质酸钠凝胶预防宫腔粘连的临床效果。

方法：选取本院2018年1月至2018年6月人流术后患者98例，依照治疗方案不同分组，各49例。

参照组予以常规抗感染治疗，研究组于参照组基础上予以宫腔用交联透明质酸钠凝胶治疗。

观察对比术前、术后2个月两组子宫内膜厚度、宫腔粘连、流血量、阴道流血时间、术后月经复潮时间、腹痛持续时间。

结果：术后2个月研究组子宫内膜厚度大于参照组（P【关键词】 ;宫腔用交联透明质酸钠凝胶;宫腔粘连;子宫内膜厚度;并发症发生率;;人工流产是终止早期妊娠常用的术式，当前人工流产患者逐年增加。

人流手术可导致子宫内膜损伤、感染情况发生，容易引发宫腔粘连。

宫腔粘连可引起月经异常，表现为月经量减少，甚至停经，痛经等症状，严重降低患者生育能力[1]。

如不给予及时、有效治疗，可诱发患者月经紊乱、闭经，继发不孕、再次妊娠流产等，严重影响患者家庭和睦及身心健康[2]。

目前临床通常给予人流术后患者缩宫素促进子宫收缩、抗生素预防感染治疗，但其于促进子宫内膜恢复、防止子宫粘连方面效果欠佳。

本研究选取本院人流术后患者98例，分组研究人流术后宫腔用交联透明质酸钠凝胶预防宫腔粘连的临床效果。

现报告如下。

1 资料与方法1.1 一般资料选取本院2018年1月至2018年6月人流术后患者98例，依照治疗方案不同分为研究组（n=49）和参照组（n=49）。

研究组年龄21～30歲，平均年龄（25.46±2.19）岁;妊娠时间50～62d，平均妊娠时间（55.56±2.69）d;孕次1～4次，平均孕次（2.46±0.69）次。

参照组年龄21～30岁，平均年龄（25.52±2.09）岁;，妊娠时间50～62d，平均妊娠时间（55.69±2.48）d; 孕次1～4次，平均孕次（2.52±0.59）次。

双相交联透明质酸钠1.引言1.1 概述双相交联透明质酸钠是一种重要的生物材料，具有广泛的应用前景和发展潜力。

作为一种具有多功能性和生物相容性的材料，双相交联透明质酸钠已被广泛应用于医学领域，如软组织修复、药物传递系统以及生物医学工程等。

双相交联透明质酸钠的特性使其在医学领域中具有独特的优势。

首先，双相交联透明质酸钠具有优异的机械性能，能够提供良好的支撑和保护作用，使其成为理想的组织修复材料。

其次，双相交联透明质酸钠具有高度的生物相容性和生物降解性，能够与人体组织相容并逐渐降解，在修复过程中不会产生副作用。

双相交联透明质酸钠的制备方法主要包括物理交联和化学交联两种方式。

物理交联是通过温度、pH值等条件的改变，使透明质酸钠分子之间相互交联形成网状结构。

化学交联则是通过添加交联剂使透明质酸钠分子之间发生共价键结合，形成更稳定的交联结构。

在医学领域中，双相交联透明质酸钠已被广泛应用于软组织修复方面。

其独特的结构和功能使其成为填充剂和支架材料的理想选择，能够帮助组织细胞生长和修复。

此外，双相交联透明质酸钠还可用作药物传递系统的载体，可通过调控透明质酸的交联程度和释放速度来实现精确的药物释放。

随着科学技术的不断发展，双相交联透明质酸钠的应用前景依然广阔。

未来，我们可以进一步研究双相交联透明质酸钠的制备方法和性能改进，以满足不同领域的需求。

此外，我们还可以探索双相交联透明质酸钠在组织工程和再生医学领域的应用，为人类健康做出更大的贡献。

1.2文章结构1.2 文章结构本文将按照以下结构进行叙述和分析双相交联透明质酸钠的定义、制备方法、应用前景和发展趋势。

2. 正文2.1 双相交联透明质酸钠的定义和特性在这一部分，将介绍双相交联透明质酸钠的定义和其特性。

首先，将对透明质酸钠进行简要介绍，解释其在医学领域的重要性和应用。

然后，将详细描述双相交联透明质酸钠的结构特性，包括其化学组成、分子结构和性质。

重点关注该材料的双相交联结构与传统透明质酸钠的区别，以及这种结构对其性能的影响。

透明质酸钠预防术后粘连的研究进展曹昆昆;章建全【摘要】外科术后粘连一直是临床上较为常见的并发症,可导致肠梗阻、不育症和疼痛等;超声引导下甲状腺结节热消融术后,也会由于局部组织粘连引起颈部异物感、声音嘶哑、吞咽困难等.透明质酸钠因具有良好的粘弹性、生物相容性、稳定的理化性质等优势,已被广泛应用于预防外科术后粘连.本文针对透明质酸钠的物理结构、理化性质、预防术后粘连的机制以及应用进展进行综述.【期刊名称】《中国介入影像与治疗学》【年(卷),期】2017(014)002【总页数】4页(P118-121)【关键词】透明质酸钠;术后粘连;微波消融【作者】曹昆昆;章建全【作者单位】第二军医大学附属长征医院超声诊疗科,上海 200433;第二军医大学附属长征医院超声诊疗科,上海 200433【正文语种】中文【中图分类】R445.1外科手术后由于机体组织修复而引起的组织粘连是较为常见的一类术后并发症。

局部组织粘连常导致组织功能康复受损，严重者需再次行手术治疗，给患者带来极大痛苦。

因此如何预防术后组织粘连一直以来都是临床上亟待解决的难题。

透明质酸钠(sodium hyaluronate， SH)是一种大分子氨基黏多糖，广泛存在于人体及动物组织中，具有黏弹性、无毒、无抗原性、体内可降解以及广泛的生物相容性等特点，1969年Rydell等[1]发现SH能够减轻肌腱损伤后粘连，而直到20世纪90年代SH才首次被应用于防止术后组织粘连[2]。

后续研究[3]表明，SH应用于人体具有高度安全性，并可显著降低粘连的发生率。

近年来，随着对SH研究的逐渐深入，其在预防术后粘连方面的优势逐渐彰显，SH现已被广泛地应用于多种临床实践，并取得重大进展。

本文对SH在预防术后粘连方面的临床应用进展进行综述。

术后粘连的发生通常是由于体内的黏膜或浆膜层出现范围不定的黏合或形成纤维索带，这是机体对创伤、炎症、异物等损害在愈合修复过程所产生的一种普遍反应。

一种交联透明质酸钠凝胶及其制备方法交联透明质酸钠凝胶是一种具有良好生物相容性和生物降解性的材料，被广泛应用于医药领域中的组织工程和药物递送等方面。

本文将介绍一种交联透明质酸钠凝胶的制备方法。

首先，制备交联透明质酸钠凝胶的材料包括：透明质酸钠、交联剂、缓冲液和交联溶剂。

第一步是制备缓冲液。

将所需量的磷酸盐缓冲液加入适量的去离子水中，并通过调整pH值到目标范围来制备磷酸盐缓冲液。

第二步是制备透明质酸钠溶液。

将一定量的透明质酸钠加入缓冲液中，充分溶解并得到透明质酸钠溶液。

第三步是制备交联溶剂。

在一个容器中加入适量的交联剂，然后加入足够的去离子水，充分搅拌溶解。

第四步是将透明质酸钠溶液加入交联剂溶液中。

透明质酸钠溶液和交联剂溶剂通过搅拌混合，使二者充分溶解。

第五步是进行交联反应。

将适量的交联剂加入透明质酸钠溶液中，经过一定的温度和时间，使透明质酸钠发生交联反应。

此过程可以在室温下进行，也可以在较高温度下进行。

第六步是凝胶形成。

经过交联反应后，透明质酸钠会形成凝胶状物质。

可以通过调整交联剂的浓度、交联剂和透明质酸钠的混合比例以及交联反应的时间来控制凝胶的性质和特性。

最后，获得的交联透明质酸钠凝胶可以通过离心等方法进行固形化和分离，然后进行后续的处理和应用。

总结起来，制备交联透明质酸钠凝胶的方法包括：制备缓冲液、制备透明质酸钠溶液、制备交联溶剂、将透明质酸钠溶液加入交联剂溶剂中、进行交联反应和凝胶形成。

通过调整制备过程中的各个参数，可以得到具有不同特性和性能的交联透明质酸钠凝胶。

这种凝胶材料在医学领域中具有广泛的应用潜力，如药物递送和组织工程等。

透明质酸钠凝胶透明质酸钠也叫玻璃酸钠。

1934年，Meyer等自牛眼玻璃体（hyaloid body）分离出一种含糖醛酸（uronic acid）和氨基己糖的高分子多糖，命名为“hyaluronic acid”。

该词由“hyaloid”(透明的、玻璃状的)和“uronic acid”组合而成，《生物化学名词》译为“透明质酸”，《中国药典药》和国家药品标准称为“玻璃酸”。

在生理中性环境中，hyaluronic acid是一个聚阴离子。

1985年，Balazs等建议“hyaluronan”一词作为此种多糖的总称，不管其处于何种程度的解离度。

“hyaluronan”已广泛应用，涵盖了任何状态的透明质酸及其盐(hyaluronate)，通常将其译为“透明质酸”，缩写为HA。

在目前，凝胶。

主要成分：本品主要成份为透明质酸钠，辅料含氯化钠，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾。

化学名称：(1-4)-O-β-D葡萄糖醛酸-(1-3)-2-乙酰氨基-2-脱氧-β-D葡萄糖。

分子式：（C14H20NO11Na）n不同工艺生产的透明质酸的分子量也各不相同，天然性状的透明质酸钠的分子量一般在80万～250万之间，通常认为透明质酸钠的分子量越高则粘弹性越好，疗效也就越好。

微生物发酵法制取：用Streptococcus zooepidemics(兽疫链球菌)的突变体(mutant)发酵制取。

此突变体无溶血活性，产透明质酸钠量大，产品分子量可达250万。

从动物组织提取：用蛋白酶去除蛋白质，以十六烷基氯化吡啶单离HA，以足量氯仿进一步去除蛋白质。

纯品中氨基酸含量仅为0.35%，分子量最高可达120万。

眼科手术：眼科手术辅助用医疗器械，用于白内障摘除术和人工晶体手术等。

骨科手术：骨科手术，主要用于预防肌腱粘连，缝合术后于暴露肌腱吻合处、腱周、腱间均匀涂抹本品，也可于损伤修复部鞘内或局部注射，或二者并行，视情况而定。

关节腔内注射：常用于治疗骨关节炎及类风湿性关节炎等。

西地碘含片联合透明质酸钠凝胶辅助治疗中重度慢性牙周炎的临床疗效观察【摘要】本研究旨在观察西地碘含片联合透明质酸钠凝胶辅助治疗中重度慢性牙周炎的临床疗效。

共选取X名患者，随机分为观察组和对照组。

观察组采用西地碘含片联合透明质酸钠凝胶治疗，对照组采用常规治疗。

观察指标包括牙周指数、牙缝出血指数等。

观察结果显示观察组患者牙周指数减低、牙缝出血明显减少，临床疗效显著优于对照组。

结论为西地碘含片联合透明质酸钠凝胶对中重度慢性牙周炎具有辅助治疗效果，具有一定的临床意义。

【关键词】西地碘含片、透明质酸钠凝胶、牙周炎、临床疗效、治疗、观察、结果、讨论、结论、临床意义1. 引言1.1 研究背景牙周炎是一种较为常见的口腔疾病，主要特征是龈沟形成、出血、牙周袋形成、牙齿松动等症状。

慢性牙周炎是一种常见的牙周炎类型，如果不及时治疗会导致牙齿逐渐松动，最终导致牙齿脱落。

目前治疗牙周炎的方式多种多样，包括口腔洁治、药物治疗等，然而部分患者仍然存在治疗效果不佳或者反复发作的情况。

西地碘含片具有抑菌、消炎以及促进伤口愈合的作用，而透明质酸钠凝胶则可以提高组织的自愈能力和抗炎能力。

联合使用西地碘含片和透明质酸钠凝胶辅助治疗中重度慢性牙周炎有望取得更好的疗效。

目前对于这种联合治疗方式的临床疗效尚未有明确的研究结果。

本研究旨在观察西地碘含片联合透明质酸钠凝胶辅助治疗中重度慢性牙周炎的临床疗效，为临床治疗提供更为科学的依据。

1.2 研究目的本研究的目的是评估西地碘含片联合透明质酸钠凝胶辅助治疗中重度慢性牙周炎的临床疗效。

当前治疗中重度慢性牙周炎的方法多种多样，而西地碘含片联合透明质酸钠凝胶这一新型治疗方案的临床疗效尚未被全面评估。

本研究旨在观察并评估该治疗方案在中重度慢性牙周炎患者中的实际疗效，为临床治疗提供更多的参考依据。

通过对患者进行详细的临床观察，我们希望可以全面了解这一治疗方案对中重度慢性牙周炎患者的疗效表现，并进一步探讨其可能的机制和临床价值。

医用自交联透明质酸钠凝胶用于慢性鼻窦炎鼻窦开放术临床观察杨东宝;肖静;李玉洁;徐海蓉;梁小军【摘要】目的观察医用自交联透明质酸钠凝胶对慢性鼻窦炎行鼻窦开放术术后早期术腔上皮化的作用.方法选择医院2015年1月至2016年1月收治的保守治疗3个月无效需行鼻窦开放术的慢性鼻窦炎患者50例,按入院顺序随机分为试验组和对照组,各25例.试验组患者手术结束时将医用自交联透明质酸钠凝胶涂布于术腔,对照组患者不予涂布.结果试验组患者术腔清洁持续时间和上皮化所需时间显著短于对照组(P<0.05).结论医用自交联透明质酸钠凝胶可促进鼻窦开放术后早期术腔上皮化,其机制可能为减少术腔炎性渗出,抑制囊泡、息肉、肉芽组织增生.【期刊名称】《中国药业》【年(卷),期】2019(028)004【总页数】3页(P68-70)【关键词】医用自交联透明质酸钠凝胶;慢性鼻窦炎;鼻内镜;鼻窦开放术;上皮化【作者】杨东宝;肖静;李玉洁;徐海蓉;梁小军【作者单位】重庆市丰都县人民医院耳鼻喉科,重庆 408200;重庆市丰都县人民医院耳鼻喉科,重庆 408200;重庆市丰都县人民医院耳鼻喉科,重庆 408200;重庆市丰都县人民医院耳鼻喉科,重庆 408200;陆军军医大学第二附属医院,重庆 400037【正文语种】中文【中图分类】R969.4;R987慢性鼻窦炎是鼻腔鼻窦黏膜慢性炎症性疾病，患者行鼻内镜手术后，术腔黏膜的炎性反应往往迁延不愈，表现为黏膜炎性水肿，囊泡形成，严重者有息肉样变，导致术腔引流不畅、粘连等，上皮化进程慢，不仅影响手术效果，还需进行大量术后清创，甚至导致鼻窦炎复发及二次手术。

高分子量透明质酸钠经先进生物技术精制而成，具有局部抗炎，抑制成纤维细胞分泌细胞外基质等作用[1-2]，为克服其在体内降解快和无法远期防粘连的缺点，将其制成膜[3]，或与其他自体组织联合应用[4]，以延长其在体内的降解时间。

高浓度、高分子量的自交联透明质酸钠凝胶具有优良的生物相容性，无种属特异性，降解速度较普通透明质酸钠明显减缓；可抑制粒性白细胞趋化及炎性介质分泌和扩散，具有抗炎活性；涂抹于组织表面可形成纤维网结构，覆盖炎性浆膜和正常浆膜隔离，形成暂时保护膜，起到物理阻隔作用；此外，透明质酸钠还可与间质细胞、成纤维细胞膜表面的透明质酸受体相互作用，调节细胞功能，可加速内源性修复[5]。

关于透明质酸钠问题汇总1.定义透明质酸是一种由D-葡萄糖醛酸盒N-乙酰基-D-葡萄糖胺通过β-（1-3）糖苷链连接而成的双糖重复结构单元组成的线性多糖。

每个双糖单元通过β-（1-4）糖苷链与另一个双糖单元连接起来。

2.原材料2.1是否通过工业发酵的方式？2.2原材料供应商？2.3所采用材料应符合YY/T 0606.9的要求或其他规定？3.型式检验3.1外观交联透明质酸钠凝胶垂直置于照度为1000 lx下，任意旋转，从水平方向上观察。

交联透明质酸钠凝胶应无色、透明，无任何肉眼可见的异物。

3.2有效使用量将每支单包装中交联透明质酸钠凝胶按正常使用方式尽量取出，精密称定后除以交联透明质酸钠凝胶密度（ρ=1.01g/ml）所得值应在标示装量的90%~120%之间。

3.3粒径分布交联透明质酸钠凝胶的粒径分布应在标称范围内。

3.3.1颗粒粒径分布测定3.3.1.1目的显微镜下对交联透明质酸钠凝胶颗粒的观察和测定。

3.3.1.2原理交联透明质酸钠凝胶为无色同名颗粒状。

采用甲苯胺蓝阳离子染料对其进行染色，染色后凝胶颗粒呈蓝色。

在显微镜下测定颗粒粒径角膜接触镜控制质量体系。

3.3.2问题a)颗粒为不规则形状，粒径值如何定义？b)颗粒与加工过程有关，加工过程中是否对这个指标进行质量控制？c)标准要求如何规定？3.4注射器柄推挤力注射器柄推挤力应在标称范围内，柄提供平均力数值。

（20~30N）3.5红外鉴别交联透明质酸钠凝胶应具备特征性红外图谱。

交联透明质酸钠凝胶的溶胀度应在标称范围内（交联透明质酸钠溶胀时重量变化的量度，反应该凝胶的交联程度）。

3.7渗透压交联透明质酸钠凝胶渗透摩尔浓度应为270m0smpl/L~350 m0smpl/L。

3.8pH值pH值应在6.8-7.6范围内。

3.9含量交联透明质酸钠含量应为标示值的90%~120%之间。

3.10蛋白质透明质酸钠蛋白质含量应不大于0.1%（质量分数）。

3.11重金属含量重金属含量应不大于5ug/g。

2021年2月第28卷第3期三种不同宫腔屏障对宫腔粘连分离术后再粘连的预防效果比较叶丽虹　方雅琴宫腔粘连是由于宫腔手术或炎症等因素引起的子宫内膜基底层受损，从而导致子宫各壁间形成粘连，部分或全部宫腔闭塞。

宫腔粘连的临床表现为月经量减少、闭经、周期性腹痛、不孕、习惯性流产等。

宫腔粘连分离术（TCRA）是标准术式，但中重度宫腔粘连患者术后复发率高，而有效预防措施至今仍是妇科临床治疗中的难题。

本文探讨中重度宫腔粘连患者术后分别采用宫腔放置COOK球囊、宫内节育器及交联透明质酸钠凝胶对预防再次宫腔粘连的效果，现将其报道如下：1　资料与方法1.1　对象与分组　选取2017年5月至2019年5月在我院就诊的中重度宫腔粘连且有生育要求的患者150例。

宫腔粘连的诊断和分级按美国生育学会（AFS）的评分标准。

患者均为中重度宫腔粘连初治；无宫腔镜手术及雌孕激素治疗禁忌证。

排除子宫腺肌病或子宫内膜异位症；子宫肌瘤≥3cm；严重肝肾功能异常或凝血功能异常；合并全身性严重疾病或恶性肿瘤者。

本次观察经我院医学伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

将患者随机分为球囊组、节育器组、凝胶组，各50例。

球囊组年龄（29.4±4.9）岁；孕（2.5±1.6）次，流产（2.5±0.9）次；AFS评分（8.7±2.0）分。

节育器组年龄（30.0±3.9）岁；孕（2.6±1.3）次，流产（2.4±1.2）次；AFS评分（8.5±2.1）分。

凝胶作者单位：312030　中国医科大学绍兴医院妇科通信作者：叶丽虹，Email:***************组年龄（28.6±4.0）岁；孕（3.0±1.4）次，流产（2.7±1.0）次；AFS评分（8.8±1.8）分。

三组患者年龄、孕次、流产次数、AFS评分等资料接近。

1.2　治疗方法　三组均于月经干净后3～7天行TCRA。

一种重组iii型胶原蛋白-透明质酸钠双重交联凝胶制备方法及应用1. 引言1.1 概述本文介绍了一种制备重组III型胶原蛋白-透明质酸钠双重交联凝胶的方法及其应用。

胶原蛋白和透明质酸钠是生物医学领域中常用的材料，具有广泛的应用前景。

通过将胶原蛋白和透明质酸钠进行双重交联处理，可以得到具有优秀性能和生物相容性的凝胶材料，可应用于组织工程、药物传输系统等领域。

1.2 文章结构本文共分为五个部分进行描述和讨论。

引言部分主要对文章进行概述，并介绍了文章的结构安排。

第二部分将对胶原蛋白和透明质酸钠进行详细介绍。

第三部分将详细叙述胶原蛋白-透明质酸钠双重交联凝胶的制备方法，包括原料准备、胶原蛋白交联处理以及透明质酸钠交联处理等步骤。

第四部分将对制备的凝胶样品进行性能测试与结果分析，包括物理性能测试和生物相容性评价结果分析等内容。

最后一部分为结论与展望，对本研究的主要结果进行总结，并对研究的不足之处和未来的应用前景进行展望。

1.3 目的本文的目的是介绍一种新颖的制备方法来获得胶原蛋白-透明质酸钠双重交联凝胶，并通过对其性能测试和分析，探索其在特殊应用领域中的潜在应用价值。

通过这项研究，我们希望为开发新型生物材料，改善组织工程和药物传输系统等领域的治疗效果提供有益参考和支持。

2. 胶原蛋白和透明质酸钠介绍：2.1 胶原蛋白：胶原蛋白是人体中最丰富的一种结构性蛋白质，占据总体的30%，在皮肤、骨骼、肌肉、血管和内脏等组织中起着重要的支持和连接作用。

它由三个左旋螺旋状α链构成，每个α链含有近千个氨基酸残基，并以其特殊的氨基酸序列Gly-X-Y 而闻名，其中X和Y通常为丙氨酸和羟磷酸。

胶原蛋白具有很好的生物相容性、生物可降解性和低免疫原性等优点，在医学领域得到广泛应用。

由于其天然来源具有一定局限性，因此通过基因工程技术或从动物组织中提取纯化过程中也实现了合成胶原蛋白。

2.2 透明质酸钠：透明质酸钠是一种多糖类化合物，由N-乙醇胺引起的D-葡萄糖和D-坎头糖二磷酸盐通过β-1,3-醛缩合成链呈线性结构，也被称为透明质酸、玻璃质酸或玻尿酸。

透明质酸钠的作用与功效透明质酸钠是一种常见的天然有机酸盐，被广泛应用于医学、化妆品和保健品等领域。

透明质酸钠具有许多重要的作用和功效，本文将详细介绍其在皮肤保健、关节保健和眼部保健方面的作用与功效。

1. 皮肤保健作用与功效透明质酸钠在皮肤保健方面有着重要的作用和功效。

首先，它具有保湿作用。

透明质酸钠能够吸附并保持皮肤表面的水分，增加皮肤的含水量，使皮肤保持湿润。

这不仅能够改善干燥、脱皮等肌肤问题，还可减轻细纹和皱纹，提升皮肤的光滑度和紧致度。

其次，透明质酸钠还能提供屏障保护作用。

透明质酸钠能够在皮肤表面形成一层透明的保护膜，阻止水分的蒸发，并阻挡外界的有害物质和刺激。

这不仅能够形成保湿屏障，还可有效防护外界环境对皮肤的伤害，促进皮肤自我修复和保护。

此外，透明质酸钠还具有调节肌肤酸碱平衡的作用。

皮肤酸碱平衡对于保持皮肤的健康非常重要，而透明质酸钠可以稳定和调节皮肤的酸碱平衡，保持正常的PH值，促进皮肤正常的生理功能，预防和改善各种皮肤问题。

最后，透明质酸钠还可以促进皮肤细胞的增殖和修复。

透明质酸钠可以刺激皮肤细胞的新陈代谢，加速老化细胞的脱落，促进新生细胞的产生。

这不仅能够改善皮肤的质地和色素沉着，还可加速伤口的愈合和修复，减少炎症和红肿。

综上所述，透明质酸钠在皮肤保健方面的作用与功效主要包括保湿作用、屏障保护作用、调节肌肤酸碱平衡作用和促进皮肤细胞增殖和修复作用。

这些作用和功效使透明质酸钠成为了许多化妆品和护肤品中重要的活性成分。

2. 关节保健作用与功效透明质酸钠在关节保健方面也有着重要的作用和功效。

首先，透明质酸钠具有润滑作用。

关节是骨骼之间的缝隙，透明质酸钠能够在关节表面形成一层润滑膜，减少骨骼之间的摩擦，保护关节软骨，防止滑膜因摩擦而受损，从而起到润滑关节的作用。

其次，透明质酸钠还具有缓冲作用。

关节在运动过程中承受着巨大的冲击力，透明质酸钠可以吸收和分散这些冲击力，减少关节受力，降低关节炎、滑膜炎等疾病的发生风险。

第３４卷第６期化㊀学㊀研㊀究Ｖｏｌ．３４㊀Ｎｏ．６２０２３年１１月ＣＨＥＭＩＣＡＬ㊀ＲＥＳＥＡＲＣＨＮｏｖ．２０２３注射用交联透明质酸钠凝胶的降解试验研究张素文１∗，李红梅１，郈秀菊１，刘㊀阳１，于学龙１，朱爱君２（１．山东省药学科学院，山东省医用高分子材料重点实验室，山东济南２５０１０１；２．中石油华东设计院有限公司，山东青岛２６６０７１）收稿日期：２０２２⁃０９⁃２７基金项目：山东省重点研发计划项目（２０１８ＧＳＦ１１８１３２）作者简介：张素文（１９８１－），女，高级工程师，主要从事医用高分子材料及制品的研究㊂∗通信作者，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｓｕｗｅｎ２０００ｙ＠１６３．ｃｏｍ摘㊀要：考察了不同交联程度的注射用透明质酸钠凝胶样品在３７ħ磷酸盐缓冲液中和酶加速条件下的降解情况及在家兔背部皮下植入的生物学反应，以获取安全有效的临床注射用面部填充剂㊂结果表明，溶胀度大㊁耐酶解系数小的低交联度透明质酸凝胶ＣＨＡ１的体外降解速度较快；溶胀度约为４５，抗酶解性能与对照品相近的中等交联度凝胶ＣＨＡ４，自然条件下缓冲液中１８０ｄ质量保持率９５％以上，家兔体内植入２６ｗ时凝胶填充性无显著下降，具有较好的临床应用价值㊂关键词：交联透明质酸钠凝胶；体外降解；植入；抗酶解性中图分类号：ＴＱ３１７．４文献标志码：Ａ文章编号：１００８－１０１１（２０２３）０６－０５２７－０６Ｓｔｕｄｙｏｎｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｇｅｌｆｏｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎＺＨＡＮＧＳｕｗｅｎ１∗ ＬＩＨｏｎｇｍｅｉ１ ＨＯＵＸｉｕｊｕ１ ＬＩＵＹａｎｇ１ ＹＵＸｕｅｌｏｎｇ１ ＺＨＵＡｉｊｕｎ２１．ＳｈａｎｄｏｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ ＳｈａｎｄｏｎｇＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆｍｅｄｉｃａｌｐｏｌｙｍｅｒｍａｔｅｒｉａｌｓ Ｊｉｎａｎ２５０１０１ Ｓｈａｎｄｏｎｇ Ｃｈｉｎａ２．ＣＮＰＣＥａｓｔＣｈｉｎａＤｅｓｉｇｎＩｎｓｔｉｔｕｔｅＣＯ． ＬＴＤ Ｑｉｎｇｄａｏ２６６０７１ Ｓｈａｎｄｏｎｇ ＣｈｉｎａＡｂｓｔｒａｃｔ Ｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｇｅｌｆｏｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｉｎｇｄｅｇｒｅｅｕｎｄｅｒｔｈｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｏｆｎｅｕｔｒａｌｉｚａｔｉｏｎａｎｄｅｎｚｙｍｅａｃｃｅｌｅｒａｔｉｏｎｉｎｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒａｔ３７ħａｎｄｔｈｅｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎｏｆｓｕｂｃｕｔａｎｅｏｕｓｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｂａｃｋｏｆｒａｂｂｉｔｓｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｔｏｏｂｔａｉｎｓａｆｅａｎｄｅｆｆｅｃｔｉｖｅｆａｃｉａｌｆｉｌｌｅｒｆｏｒｃｌｉｎｉｃａｌｉｎｊｅｃｔｉｏｎ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｔｈａｔｔｈｅｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｌｏｗｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｇｅｌＣＨＡ１ｗｉｔｈｈｉｇｈｓｗｅｌｌｉｎｇｄｅｇｒｅｅａｎｄｌｏｗｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｉｓｆａｓｔｅｒｉｎｖｉｔｒｏ．Ｔｈｅｍｅｄｉｕｍｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｇｅｌＣＨＡ４ｗｉｔｈａｓｗｅｌｌｉｎｇｄｅｇｒｅｅｏｆ４５ａｎｄａｎａｎｔｉ⁃ｅｎｚｙｍａｔｉｃｐｒｏｐｅｒｔｙｓｉｍｉｌａｒｔｏｔｈａｔｏｆｔｈｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｈａｓａｍａｓｓｒｅｔｅｎｔｉｏｎｒａｔｅｏｆｍｏｒｅｔｈａｎ９５％ｉｎｔｈｅｂｕｆｆｅｒｓｏｌｕｔｉｏｎｆｏｒ１８０ｄｕｎｄｅｒｎａｔｕｒａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．Ｔｈｅｆｉｌｌｉｎｇｐｒｏｐｅｒｔｙｏｆｔｈｅｇｅｌｄｏｅｓｎｏｔｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｄｅｃｒｅａｓｅｗｈｅｎｉｍｐｌａｎｔｅｄｉｎｒａｂｂｉｔｓｆｏｒ２６ｗ，ｓｏｉｔｈａｓｇｏｏｄｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｖａｌｕｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｇｅｌ；ｉｎｖｉｔｒｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ；ｉｍｐｌａｎｔａｔｉｏｎ；ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏｅｎ⁃ｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓ㊀㊀透明质酸钠（Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ，ＨＡ）是一种天然存在于生物体内的糖胺聚糖，是构成皮肤㊁玻璃体㊁关节滑液和软骨组织的重要成分［１］，因其具有良好的生物相容性㊁独特的黏弹性和可降解性近年来在生物医学领域被广泛应用［２－６］㊂由于ＨＡ在人体内可被透明质酸酶（Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｄａｓｅ，ＨＡａｓｅ）降解，因此纯透明质酸在人体中的滞留时间较短，很快就会代谢成水和二氧化碳，大大限制了其在皮肤填充领域的应用㊂采用化学交联的方式可获得高分子量的透明质酸钠，以延长ＨＡ填充剂在体内的维持时间，使其被用于面部皮肤填充㊁改善皱纹或修饰唇部形状等方面㊂制备了不同交联度的注射用透明质酸钠凝胶，并研究了其在体外长期放置及酶加速条件下的降解情况并考察了凝胶在家兔体内的植入降解反５２８㊀化㊀学㊀研㊀究２０２３年应，以期获得安全有效的临床注射用面部填充剂㊂１㊀材料与方法１．１㊀材料与仪器㊀㊀透明质酸钠㊁透明质酸酶㊁上市对照品注射用修饰透明质酸钠凝胶（标示含量２０ｇ／Ｌ）㊁１，４⁃丁二醇缩水甘油醚（ＢＤＤＥ）㊁透析袋（截留分子量１４０００）；干燥箱；高速台式离心机ＴＧＬ⁃２０Ｂ⁃Ｃ；岛津紫外分光光度计ＵＶ⁃２５０１ＰＣ；显微镜；恒温振荡器；电子分析天平㊂１．２㊀方法１．２．１㊀交联透明质酸钠凝胶的制备㊀㊀将不同比例的ＨＡ和ＢＤＤＥ在碱性条件进行交联反应，浸泡㊁洗涤㊁灭菌后，得注射用交联ＨＡ凝胶样品㊂１．２．２㊀溶胀度测定取５００目筛网折成４ｃｍˑ４ｃｍˑ２ｃｍ的正方形槽，置８０ħ干燥箱中至恒重，记作ｍ０㊂称取０．２０．５ｇ交联ＨＡ凝胶置于筛网上，把筛网置于蒸发皿中，加入适量０．９％氯化钠溶液，使其完全浸润样品，待凝胶充分溶胀后，将筛网和样品取出，用滤纸吸去筛网周围多余的溶液，称量记作ｍ１㊂然后将筛网放入干燥箱中，８０ħ下至恒重，称量记作ｍ２㊂通过公式（１）计算其溶胀度Ｑ㊂Ｑ＝（ｍ２－ｍ１）／（ｍ２－ｍ０）（１）１．２．３㊀透明质酸钠含量测定采用改良咔唑显色法［７］测定透明质酸钠的质量浓度㊂交联ＨＡ水解后生成的葡萄糖醛酸可与咔唑试剂反应呈现红紫色，生成的颜色深浅与葡萄糖醛酸含量成正比㊂葡萄糖醛酸在５３０ｎｍ波长处有最大吸收值（Ａ），经验证葡萄糖醛酸质量浓度（Ｃ）在０ ５０ｍｇ／Ｌ范围内，Ａ和Ｃ呈良好的线性关系㊂此方法先将交联ＨＡ水解，再根据回归方程计算出降解液中葡萄糖醛酸质量浓度，最后按公式（２）计算出透明质酸质量浓度值Ｍ，以ｇ／Ｌ表示㊂Ｍ＝２．０６７５Ｃ１ｍ２ｍ１ˑ１００％（２）㊀㊀式中：ｍ１为交联透明质酸钠凝胶质量，单位为μｇ；ｍ２为交联透明质酸钠凝胶和蒸馏水质量，单位为ｍｇ；ｄ１为交联透明质酸钠凝胶密度，１．０１ｇ／ｍＬ；ｄ２为交联透明质酸钠凝胶和蒸馏水混匀液密度，１．００ｇ／ｍＬ；Ｃ１为样品管中葡萄糖醛酸含量，单位为ｍｇ／Ｌ㊂１．２．４㊀体外抗酶解性试验取０．２５ｇ交联ＨＡ凝胶，加４００ＩＵ／ｍＬ的透明质酸酶溶液２ｍＬ，加ＰＢＳ至５ｍＬ，３７ħ下放置７２ｈ㊂取１ｍＬ加无水乙醇４ｍＬ，１５０００ｒ／ｍｉｎ，离心１５ｍｉｎ，取上清液１ｍＬ加ＰＢＳ至２ｍＬ，作为甲液㊂另取ＨＡ凝胶０．２５ｇ，加０．５ｍｏｌ／Ｌ的硫酸溶液５ｍＬ，９８ħ干燥箱中放置１ｈ，然后加１ｍｏｌ／Ｌ的氢氧化钠溶液５ｍＬ，加水至５０ｍＬ，作为乙液［８］㊂分别取甲液和乙液各１ｍＬ，用改良的咔唑法测定溶液中糖醛酸的质量浓度，按公式（３）计算凝胶的耐酶解系数Ｒ：Ｒ＝１－Ａ／Ｂ（３）式中：Ａ为甲液中葡萄糖醛酸的质量浓度；Ｂ为乙液中葡萄糖醛酸的质量浓度㊂１．２．５㊀体外长期降解试验称取适量交联ＨＡ凝胶待测试样置透析袋中，将透析袋两端扎口后浸入ＰＢＳ缓冲溶液中㊂３７ħ放置，按照试验期进行取样，无水乙醇脱水，１５０００ｒ／ｍｉｎ，离心１５ｍｉｎ，吸去上清液，剩余样８０ħ真空干燥至恒重，按公式（４）计算质量保持率：质量保持率＝ｍ２ｍ１ˑ１００％（４）式中：ｍ１为降解前的干重；ｍ２为降解后的干重㊂同期取降解溶液，１５０００ｒ／ｍｉｎ，离心１５ｍｉｎ，取上清液１ｍＬ，用改良咔唑显色法测定糖醛酸含量㊂１．２．６㊀体外加速降解试验取约０．１ｇ交联ＨＡ凝胶样品，各加约０．５ｍＬ酶解液（４００ＩＵ／ｍＬ），置３７ħ下，１００ｒ／ｍｉｎ，振摇，分别于１㊁２㊁３㊁４㊁５㊁６㊁７ｄ后测定凝胶中的透明质酸钠含量㊂１．２．７㊀植入降解试验选择成年健康家兔，兔脊椎两侧皮下组织植入交联ＨＡ凝胶㊂每只动物单侧注射样品２个点，每点间距约４ｃｍ，每点注射０．２ｍＬ，每个植入观察点受试家兔３只，分别在植入４㊁１２㊁２６㊁５２ｗ后观察植入部位的形状变化，安乐死处死动物，取注射部位皮肤及周围组织固定在１０％磷酸盐缓冲甲醛溶液中，取材㊁包埋㊁制片㊁染色，镜下观察植入部位注射凝胶的降解及与组织的相容情况㊂２㊀结果与讨论２．１㊀交联透明质酸钠凝胶溶胀度的测定㊀㊀制备的交联ＨＡ凝胶为交联高分子材料，无法直接测定其黏度或分子量㊂研究显示，交联ＨＡ饱和水凝胶的含水量多少与交联ＨＡ凝胶的密度（即交联ＨＡ凝胶三维网格的大小）呈正相关，即溶胀度第６期张素文等：注射用交联透明质酸钠凝胶的降解试验研究５２９㊀能够反映凝胶的交联程度，同样条件下，凝胶的交联度越大，溶胀度越小㊂因此可用溶胀度作为评价交联透明质酸钠凝胶结构的量化指标㊂根据ＢＤＤＥ和ＨＡ的质量投料比由小到大，制备了ＣＨＡ１ ＣＨＡ５五种交联度的凝胶样品，分别测试其溶胀度，每个样品平行测三次，取平均值，结果如图１所示㊂图１㊀不同交联度ＨＡ凝胶样品的溶胀度Ｆｉｇ．１㊀ＳｗｅｌｌｉｎｇｄｅｇｒｅｅｏｆＨＡｇｅｌｓａｍｐｌｅｓｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｄｅｇｒｅｅｓ图１表明，随着交联剂投料量的增加，所得凝胶样品的溶胀度逐渐下降㊂这说明交联程度越高，成胶过程中所吸收的水越少，这与有关资料［９］中对不同交联程度凝胶交联度的吸水能力的描述一致㊂另外，实验发现随着交联剂投料量的增加，交联凝胶样品的溶胀度下降趋势逐渐放缓㊂本实验条件下，ＢＤＤＥ和ＨＡ的投料比低于０．４时，增加ＢＤＤＥ投料量，产品的溶胀度会明显降低，但高于该比例以后，增加ＢＤＤＥ的量，所得凝胶产品的溶胀度降幅放缓㊂这可能与前期ＢＤＤＥ投料量严重不足，凝胶交联程度低，交联网格密度小有关㊂在ＢＤＤＥ占比较小时，增加交联剂用量会显著提高交联密度，交联度增加明显，随之对应的是ＨＡ产物溶胀度的显著下降㊂后期随着交联剂增加，ＨＡ和ＢＤＤＥ反应比逐渐达到平衡，交联度也趋于稳定，因此ＢＤＤＥ的增加对溶胀度的影响不再明显㊂２．２㊀抗酶解性研究透明质酸在体内的降解主要有两种机制：酶解作用和自由基降解作用［１０］㊂作为皮肤填充剂使用的ＨＡ，为了延长时效，维持填充效果，通常选择抗酶解性能较好的产品㊂体外耐酶解系数的大小能够作为衡量ＨＡ在体内降解快慢的参考指标㊂测定了自制的五种交联ＨＡ样品的耐酶解系数同时将上市产品作为对照品，结果如表１所示㊂从表１可以看出随着交联程度的增大，凝胶的耐酶解系数逐渐提高，其在人体内的降解时间理论上也相应增长㊂这点与文献［１１－１２］中报道的：ＨＡ产品的持久性与ＨＡ的浓度和交联度呈正相关，结论相一致㊂另外，从表１可知ＣＨＡ１样品耐酶解系数为０．５６７，仅相当于对照品耐酶解系数的５８％；ＣＨＡ３和ＣＨＡ４的抗酶解性与对照品相近，耐酶解系数均在０．９８左右㊂对照品宣称的体内预期吸收时间为６ １２个月，因此选择ＣＨＡ３和ＣＨＡ４作为时效６个月以上的面部填充产品进一步研究其性能㊂表１㊀各交联ＨＡ凝胶样品的耐酶解系数Ｔａｂｌｅ１㊀Ｅｎｚｙｍａｔｉｃｈｙｄｒｏｌｙｓｉｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓｏｆｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄＨＡｇｅｌｓａｍｐｌｅｓ凝胶样品耐酶解系数ＲＣＨＡ１０．５６７ＣＨＡ２０．８５２ＣＨＡ３０．９７９ＣＨＡ４０．９８５ＣＨＡ５０．９９１对照品０．９８３２．３㊀体外长期降解试验研究交联ＨＡ凝胶其主要成分为水，自然条件下会随时间的推移而逐渐降解表现为凝胶质量减少㊂选取耐酶解系数较低的ＣＨＡ１样品和耐酶解性与对照品相近的ＣＨＡ４样品作为长期降解实验的考察对象㊂具体为：精密称取各样品１ｇ，每个样品平行做５份，置３７ħ烘箱中放置，分别于１４㊁３０㊁６０㊁９０㊁１２０和１８０ｄ后取样，测其质量保持率，结果如图２所示㊂图２㊀１８０ｄ内交联ＨＡ凝胶的体外降解Ｆｉｇ．２㊀Ｉｎｖｉｔｒｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｏｆｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄＨＡｇｅｌｗｉｔｈｉｎ１８０ｄ从图２中可以看出，１８０ｄ的试验周期内ＣＨＡ４５３０㊀化㊀学㊀研㊀究２０２３年样品质量前两周稍有增加，后缓慢减小㊂交联度较大的凝胶样品初期质量的增加可能与其刚浸入ＰＢＳ缓冲溶液中时尚未达到溶胀平衡有关㊂随着浸入时间的延长，当溶剂的溶胀力和交联链段的收缩力相平衡时，体系达到了溶胀平衡状态，溶胀体的体积不再变化［１３］，此时凝胶质量不再增加㊂其后随着链段的分裂，凝胶逐渐降解，其质量逐渐减小㊂但对交联度较大的凝胶而言其在自然状态下的降解是比较缓慢的，经计算１８０ｄ时ＣＨＡ４的质量保持率达９５％以上，而交联度相对较低的ＣＨＡ１样品在取样期内凝胶质量呈逐渐减少趋势，且在三个月后质量损失比较明显，１８０ｄ时其质量保持率约为７５％㊂交联ＨＡ凝胶在ＰＢＳ溶液中逐渐降解为小分子量ＨＡ，利用改良咔唑显色法对各取样期的降解液进行葡萄糖醛酸含量检测，从图２中可以看出随着放置时间的延长，交联凝胶样品降解液中的糖醛酸含量均逐渐增大，说明高分子量的不溶ＨＡ分子逐步降解为低分子量水溶性ＨＡ㊂另外，对比图２中两个样品的降解曲线可以看出ＣＨＡ１降解液中糖醛酸含量增速明显快于ＣＨＡ４㊂整个取样期内ＣＨＡ４降解液中糖醛酸含量仅略有升高，而ＣＨＡ１放置１８０ｄ后降解液中的糖醛酸含量比３０ｄ时增加了一倍以上㊂这点正好与取样期内两凝胶样品的质量变化趋势相印证㊂２．４㊀体外加速降解试验中透明质酸钠含量变化㊀㊀对ＣＨＡ１和ＣＨＡ４样品进行体外加酶加速降解试验研究㊂根据设计方案，各观察期样品中的透明质酸钠含量变化情况㊂如图３所示，可以直观的看出，随着酶解时间的延长，两样品中的透明质酸含量均逐渐降低㊂ＣＨＡ１中ＨＡ含量随酶解时间延长基本呈直线下降趋势，降解速度很快，至第４天时基本完全降解㊂这点与长期降解时的降解趋势相符合㊂ＣＨＡ４在初始的第１天和后期第５天降解速率较大，中间的２ ４ｄ降速较缓㊂这是因为初期样品刚置于酶解环境中，在ＨＡａｓｅ的作用下游离的低分子量ＨＡ快速降解㊂同时高分子量ＨＡ交联网络中的糖苷键被破坏，断裂成多个较低分子量的ＨＡ短链单元，随着时间延长这些短链ＨＡ分子缓慢酶解，最后在链段分解到一定程度后突然崩解，表现为ＨＡ含量急剧降低㊂实验结果表明ＣＨＡ４酶解第５天时ＨＡ含量下降８５％以上，至第６天时样品中的透明质酸含量从初始的２４．２ｇ／Ｌ下降至１ｇ／Ｌ左右，基本降解完毕㊂由此可以推测，ＣＨＡ４凝胶在注入动物后可在一段时期内保持较为稳定的填充效果，后期快速降解吸收㊂图３㊀酶加速降解试验中凝胶的透明质酸钠含量变化Ｆｉｇ．３㊀Ｃｈａｎｇｅｏｆｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｃｏｎｔｅｎｔｉｎｇｅｌｉｎｅｎｚｙｍｅａｃｃｅｌｅｒａｔｅｄｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｔｅｓｔ２．５㊀植入降解试验不同工艺生产的交联ＨＡ凝胶，注入人体后会产生不同的宿主反应，如植入后的炎症反应㊁肉芽组织形成㊁纤维包裹的形成等［１４］，因此对产品进行临床前的生物学评价十分重要㊂本实验采用家兔背部皮下植入的方式考察产品的性能，一方面观察材料与组织的相容性，确保产品的安全；另一方面可根据不同时间的降解情况验证产品的有效性［１５－１６］㊂具体为：选择ＣＨＡ３和ＣＨＡ４样品进行植入试验，每只家兔脊椎右侧注射ＣＨＡ３，左侧注射ＣＨＡ４，按实验设计方案各观察期满后，处死动物，观察凝胶降解及组织相容性情况㊂试验中植入交联ＨＡ凝胶４㊁１２㊁２６和５２ｗ后，所有动物反应正常，植入部位皮肤无出血㊁水肿和坏死等情况㊂试验结果表明，ＣＨＡ３和ＣＨＡ４两个样品注射后动物反应及各期病理学结果情况无显著差异㊂２６ｗ前，植入部位凸起大小手触感觉无明显变小，背部剃毛后肉眼观察凸起体积无明显变化，说明凝胶支撑性无明显下降㊂植入约１０个月后，植入部位凸起体积触摸感觉有所减小，植入５２ｗ后，手感无凸起，背部剃毛后肉眼亦观察不到凸起，但镜下仍可观察到未降解的凝胶细微颗粒㊂从图４的组织病理图上可以看出随着植入时间的延长，凝胶颗粒在动物体内逐渐变小，凝胶粒径由植入最初的４００μｍ左右下降至１０ ３０μｍ，说明随着时间推移凝胶逐渐破碎降解㊂另外植入４ｗ，可见未降解完全的样品周围炎细胞浸润及被纤维结缔组织所包裹；１２ｗ时，样品内部可见炎细胞浸润及被皮下组织所包裹㊂由此可见，植入的凝胶至少能维持６个月以上的填充效果，但其前期炎症反应稍明显，这可能与凝第６期张素文等：注射用交联透明质酸钠凝胶的降解试验研究５３１㊀胶的透明质酸钠含量较高有关㊂作为一种预期填充效果６个月以上的美容整形产品，ＣＨＡ４在动物体内的长期降解情况仍需进一步研究，如降低ＨＡ含量，改变注射剂量或设计更长的植入时间，以期观察凝胶在动物体内的长期潜在风险以及降解终点时限㊂图４㊀家兔体内植入ＣＨＡ４（ａ）４ｗ㊁（ｂ）１２ｗ㊁（ｃ）２６ｗ㊁（ｄ）５２周后的组织病理图Ｆｉｇ．４㊀ＨｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｙｏｆｒａｂｂｉｔｓｉｍｐｌａｎｔｅｄｗｉｔｈＣＨＡ４ｆｏｒ（ａ）４ｗ，（ｂ）１２ｗ，（ｃ）２６ｗａｎｄ（ｄ）５２ｗ３㊀结论制备了各种不同交联度的透明质酸钠凝胶，并对各样品进行了溶胀度和耐酶解系数测定㊂选取其中交联度较低的ＣＨＡ１和交联度适中的ＣＨＡ４样品研究了其在体外缓冲液中及加速酶解条件下的降解情况㊂试验结果表明，溶胀度大交联度低的ＣＨＡ１体外降解速度较快，抗酶解性与对照品相似的ＣＨＡ４，缓冲液中１８０ｄ的质量保持率良好，动物体内植入２６ｗ后填充效果无显著下降，说明其作为长效的面部填充产品有一定的临床应用潜力，但其在动物体内长期的降解情况仍需进一步研究㊂参考文献：［１］ＫＯＧＡＮＧ，ＳＯＬＴÉＳＬ，ＳＴＥＲＮＲ，ｅｔａｌ．Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄ：ａｎａｔｕｒａｌｂｉｏｐｏｌｙｍｅｒｗｉｔｈａｂｒｏａｄｒａｎｇｅｏｆｂｉｏｍｅｄｉｃａｌａｎｄｉｎｄｕｓｔｒｉａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙＬｅｔｔｅｒｓ，２００７，２９（１）：１７⁃２５．［２］张晓鸥，吕旸，毛华，等．透明质酸支架材料：应用研究与产品转化前景［Ｊ］．中国组织工程研究，２０１８，２２（２）：２９４⁃３０２．ＺＨＡＮＧＸＯ，ＬＹＵＹ，ＭＡＯＨ，ｅｔａｌ．Ｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｓｃａｆｆｏｌｄｓ：ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｒｅｓｅａｒｃｈａｎｄｐｒｏｄｕｃｔｐｒｏｓｐｅｃｔｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｉｓｓｕｅＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１８，２２（２）：２９４⁃３０２．［３］孙玉波，杨津先．关节镜下清理术联合透明质酸钠注射治疗膝骨关节炎的效果研究［Ｊ］．中国医疗器械信息，２０１９，２５（２４）：１２４⁃１２５．ＳＵＮＹＢ，ＹＡＮＧＪＸ．Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆａｒｔｈｒｏｓｃｏｐｉｃｄｅｂｒｉｄｅｍｅｎｔｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｉｎｔｈｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｏｆｋｎｅｅｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．ＣｈｉｎａＭｅｄｉｃａｌＤｅｖｉｃｅＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ，２０１９，２５（２４）：１２４⁃１２５．［４］ＬＩＵＹ，ＷＵＹＨ，ＬＩＮＨ，ｅｔａｌ．Ｓｔｕｄｙｏｎａｎｉｎｊｅｃｔａｂｌｅｂｉｏｍｅｄｉｃａｌｐａｓｔｅｕｓｉｎｇｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅａｓａｃａｒｒｉｅｒｏｆｈｙｄｒｏｘｙａｐａｔｉｔｅｐａｒｔｉｃｌｅｓ［Ｊ］．ＣａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅＰｏｌｙｍｅｒｓ，２０１８，１９５：３７８⁃３８６．［５］ＴＲＥＶＩＤＩＣＰ，ＡＮＤＲＥＰ，ＢＥＮＡＤＩＢＡＬ，ｅｔａｌ．Ｐｒｏｓｐｅｃｔｉｖｅ，ｓｐｌｉｔ⁃ｆａｃｅ，ｒａｎｄｏｍｉｚｅｄ，ｌｏｎｇ⁃ｔｅｒｍｂｌｉｎｄｅｄｏｂｊｅｃｔｉｖｅｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅａｎｄｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙｏｆｔｗｏｎｅｗｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｆｉｌｌｅｒｓ：ＥＲＲＡＴＵＭ［Ｊ］．ＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃＳｕｒｇｅｒｙ，２０１８，４４（８）：１４４８⁃１４５７．［６］ＺＨＡＮＧＪＮ，ＣＨＥＮＢＺ，ＡＳＨＦＡＱＭ，ｅｔａｌ．ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａＢＤＤＥ⁃ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｂａｓｅｄｍｉｃｒｏｎｅｅｄｌｅｓｐａｔｃｈａｓａｄｅｒｍａｌｆｉｌｌｅｒｆｏｒａｎｔｉ⁃ａｇｅｉｎｇｔｒｅａｔｍｅｎｔ［Ｊ］．５３２㊀化㊀学㊀研㊀究２０２３年ＪｏｕｒｎａｌｏｆＩｎｄｕｓｔｒｉａｌａｎｄＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＣｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１８，６５：３６３⁃３６９．［７］ＢＩＴＴＥＲＴ，ＭＵＩＲＨＭ．Ａｍｏｄｉｆｉｅｄｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｃａｒｂａｚｏｌｅｒｅａｃｔｉｏｎ［Ｊ］．ＡｎａｌｙｔｉｃａｌＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１９６２，４（４）：３３０⁃３３３．［８］陈建英，汪敏，刘杰，等．注射用交联透明质酸钠凝胶的制备及其体外抗酶降解性的研究［Ｊ］．中国生化药物杂志，２００８，２９（４）：２６２⁃２６５．ＣＨＥＮＪＹ，ＷＡＮＧＭ，ＬＩＵＪ，ｅｔａｌ．Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｏｆｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｇｅｌｆｏｒｉｎｊｅｃｔｉｏｎａｎｄｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｉｔｓｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｏｅｎｚｙｍａｔｉｃｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃｓ，２００８，２９（４）：２６２⁃２６５．［９］蒙一纯，宋慧锋．交联透明质酸钠凝胶微整形理论与实践［Ｍ］．北京：人民卫生出版社，２０１５．ＭＥＮＧＹＣ，ＳＯＮＧＨＦ．Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅａｎｄｐｒａｃｔｉｃｅｏｆｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｇｅｌａｐｐｌｙｉｎｇｉｎｍｉｃｒｏｐｌａｓｔｉｃ［Ｍ］．Ｂｅｉｊｉｎｇ：Ｐｅｏｐｌｅ＇ｓＭｅｄｉｃａｌＰｕｂｌｉｓｈｉｎｇＨｏｕｓｅ，２０１５．［１０］张堃，简军，张政朴．透明质酸的结构㊁性能㊁改性和应用研究进展［Ｊ］．高分子通报，２０１５（９）：２１７⁃２２６．ＺＨＡＮＧＫ，ＪＩＡＮＪ，ＺＨＡＮＧＺＰ．Ｒｅｖｉｅｗｏｆｈｙａｌｕｒｏｎａｎ：ｉｔｓｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ，ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓａｎｄａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．ＰｏｌｙｍｅｒＢｕｌｌｅｔｉｎ，２０１５（９）：２１７⁃２２６．［１１］ＦＡＬＣＯＮＥＳＪ，ＢＥＲＧＲＡ．Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｄｅｒｍａｌｆｉｌｌｅｒｓ：ａｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｒｈｅｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＢｉｏｍｅｄｉｃａｌＭａｔｅｒｉａｌｓＲｅｓｅａｒｃｈＰａｒｔＡ，２００８，８７Ａ（１）：２６４⁃２７１．［１２］ＫＡＢＬＩＫＪ，ＭＯＮＨＥＩＴＧＤ，ＹＵＬＰ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐａｒａｔｉｖｅｐｈｙｓｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｄｅｒｍａｌｆｉｌｌｅｒｓ［Ｊ］．ＤｅｒｍａｔｏｌｏｇｉｃＳｕｒｇｅｒｙ，２００９，３５：３０２⁃３１２．［１３］冯海，黄鑫，苏李，等．交联透明质酸体外降解和细胞毒性研究［Ｊ］．浙江工业大学学报，２０１１，３９（６）：６３０⁃６３４．ＦＥＮＧＨ，ＨＵＡＮＧＸ，ＳＵＬ，ｅｔａｌ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｏｎｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎａｎｄｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｏｆｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｉｎｖｉｔｒｏ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＺｈｅｊｉａｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１１，３９（６）：６３０⁃６３４．［１４］聂卫，刘伟伟，刘大卫，等．不同交联透明质酸复合凝胶在体内的宿主反应及基质金属蛋白酶９表达［Ｊ］．中国组织工程研究，２０２０，２４（１０）：１５５７⁃１５６２．ＮＩＥＷ，ＬＩＵＷＷ，ＬＩＵＤＷ，ｅｔａｌ．Ｈｏｓｔｒｅｓｐｏｎｓｅｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｈｙａｌｕｒｏｎｉｃａｃｉｄｃｏｍｐｏｓｉｔｅｇｅｌｓａｎｄｍａｔｒｉｘｍｅｔａｌｌｏｐｒｏｔｅｉｎａｓｅ⁃９ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ［Ｊ］．ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＴｉｓｓｕｅＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＲｅｓｅａｒｃｈ，２０２０，２４（１０）：１５５７⁃１５６２．［１５］朱彬，奚宏伟，魏长征．交联透明质酸钠凝胶的生物安全性研究［Ｊ］．广州化工，２０１４，４２（１１）：１２２⁃１２３，１６６．ＺＨＵＢ，ＸＩＨＷ，ＷＥＩＣＺ．Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓａｆｅｔｙｒｅｓｅａｒｃｈｏｆｃｒｏｓｓ⁃ｌｉｎｋｅｄｓｏｄｉｕｍｈｙａｌｕｒｏｎａｔｅｇｅｌ［Ｊ］．ＧｕａｎｇｚｈｏｕＣｈｅｍｉｃａｌＩｎｄｕｓｔｒｙ，２０１４，４２（１１）：１２２⁃１２３，１６６．［１６］ＴＲＥＶＩＤＩＣＰ，ＡＮＤＲＥＰ，ＢＥＮＡＤＩＢＡＬ，ｅｔａｌ．Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ１８⁃ｍｏｎｔｈｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｔｈｅｔｏｌｅｒａｂｉｌｉｔｙｏｆ２ｄｅｒｍａｌｆｉｌｌｅｒｓｆｏｒｍｕｌａｔｅｄｗｉｔｈＴｒｉ⁃Ｈｙａｌｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ［Ｊ］．ＰｌａｓｔｉｃａｎｄＲｅｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｖｅＳｕｒｇｅｒｙ⁃ＧｌｏｂａｌＯｐｅｎ，２０２０，８（１２）：ｅ３２７４．［责任编辑：任艳蓉］。

关于透明质酸钠问题汇总1.定义透明质酸是一种由D-葡萄糖醛酸盒N-乙酰基-D-葡萄糖胺通过β-（1-3）糖苷链连接而成的双糖重复结构单元组成的线性多糖。

每个双糖单元通过β-（1-4）糖苷链与另一个双糖单元连接起来。

2.原材料2.1是否通过工业发酵的方式？2.2原材料供应商？2.3所采用材料应符合YY/T 0606.9的要求或其他规定？3.型式检验3.1外观交联透明质酸钠凝胶垂直置于照度为1000 lx下，任意旋转，从水平方向上观察。

交联透明质酸钠凝胶应无色、透明，无任何肉眼可见的异物。

3.2有效使用量将每支单包装中交联透明质酸钠凝胶按正常使用方式尽量取出，精密称定后除以交联透明质酸钠凝胶密度（ρ=1.01g/ml）所得值应在标示装量的90%~120%之间。

3.3粒径分布交联透明质酸钠凝胶的粒径分布应在标称范围内。

3.3.1颗粒粒径分布测定3.3.1.1目的显微镜下对交联透明质酸钠凝胶颗粒的观察和测定。

3.3.1.2原理交联透明质酸钠凝胶为无色同名颗粒状。

采用甲苯胺蓝阳离子染料对其进行染色，染色后凝胶颗粒呈蓝色。

在显微镜下测定颗粒粒径角膜接触镜控制质量体系。

3.3.2问题a)颗粒为不规则形状，粒径值如何定义？b)颗粒与加工过程有关，加工过程中是否对这个指标进行质量控制？c)标准要求如何规定？3.4注射器柄推挤力注射器柄推挤力应在标称范围内，柄提供平均力数值。

（20~30N）3.5红外鉴别交联透明质酸钠凝胶应具备特征性红外图谱。

交联透明质酸钠凝胶的溶胀度应在标称范围内（交联透明质酸钠溶胀时重量变化的量度，反应该凝胶的交联程度）。

3.7渗透压交联透明质酸钠凝胶渗透摩尔浓度应为270m0smpl/L~350 m0smpl/L。

3.8pH值pH值应在6.8-7.6范围内。

3.9含量交联透明质酸钠含量应为标示值的90%~120%之间。

3.10蛋白质透明质酸钠蛋白质含量应不大于0.1%（质量分数）。

3.11重金属含量重金属含量应不大于5ug/g。

交联透明质酸钠降解
交联透明质酸钠是一种将透明质酸分子通过交联反应形成三维网格结构的高分子化合物。

通常，交联透明质酸钠的降解可以通过生物降解和化学降解两种方式进行。

生物降解是指在生物体内通过生物酶的作用将交联透明质酸钠分解成较小的分子，进而被代谢和排出体外。

这个过程可以在体内自然地进行，不需要外部干预。

化学降解是指通过一定的化学处理将交联透明质酸钠分解成较小的分子。

其中常用的方法包括酶解、酸碱水解、热解等。

这些方法可以在实验室中控制，使交联透明质酸钠分解为所需的分子或化合物。

总体而言，交联透明质酸钠的降解是一个复杂的过程，可以通过生物降解和化学降解两种方式进行。

具体选择哪种方式以及降解的条件和速率可以根据实际需要和应用来确定。

透明质酸钠（Sodium Hyaluronate）是一种常见的天然高分子化合物，广泛应用于医药、化妆品和医疗领域。

透明质酸钠交联聚合物指的是将透明质酸钠分子进行交联反应，形成3D 网络结构的聚合物材料。

这种交联结构赋予了材料独特的性能和功能，其功效与作用主要包括以下几个方面：
1.保湿和润滑：透明质酸钠具有很强的保水能力，交联后的聚合物可以在皮肤表面形成
保湿膜，有效锁住水分，使皮肤保持湿润、柔软，并具有润滑作用。

2.填充和紧致：透明质酸钠交联聚合物可以填充皮肤的细纹、皱纹和凹陷部位，起到皮
肤平滑和紧致的作用。

在医疗领域，交联透明质酸钠也被用于填充整形手术。

3.保护和修复：透明质酸钠交联聚合物可以形成一层保护层，保护皮肤免受外界刺激。

它还有助于皮肤的修复过程，缓解炎症和创伤。

4.改善肤质：交联透明质酸钠可以改善皮肤质地，提升皮肤的弹性和紧致度，减少毛孔
的显著性，使皮肤看起来更加光滑和年轻。

5.药物传递：透明质酸钠交联聚合物可以作为药物载体，用于将药物输送到皮肤深层，
实现局部治疗效果。

6.医疗应用：透明质酸钠交联聚合物被广泛应用于医学领域，例如关节润滑剂、眼科手
术、皮肤修复和填充等领域。

透明质酸钠交联聚合物具有多种美容和医学应用，能够改善皮肤状况、保湿、填充、修复和保护皮肤，以及为药物输送提供平台，满足不同领域的需求。

但在使用时仍需要遵循相关产品说明和专业人士的建议。

不同交联透明质酸复合凝胶在体内的宿主反应及基质金属蛋白酶9表达聂卫; 李睿智; 刘伟伟; 刘大卫; 崔晓雪; 刘山海; 李旭; 肖光礼; 王世炜; 牛换云【期刊名称】《《中国组织工程研究》》【年(卷),期】2020(024)010【总页数】6页(P1557-1562)【关键词】交联; 透明质酸; 凝胶; 羟丙基甲基纤维素; 植入; 皮下; 宿主反应; 金属基质蛋白酶9【作者】聂卫; 李睿智; 刘伟伟; 刘大卫; 崔晓雪; 刘山海; 李旭; 肖光礼; 王世炜; 牛换云【作者单位】天津市医药科学研究所天津市 300020; 爱美客技术发展股份有限公司北京市 100022【正文语种】中文【中图分类】R459.9; R-332; R318.080 引言 Introduction透明质酸又名玻尿酸，是由N-乙酰葡糖胺和葡萄糖醛酸双糖单位构成的线性多糖，分子质量大，具有一定黏弹性特质[1]。

透明质酸可经过一定处理制成医疗器械产品，用于组织工程、面部注射以除皱或丰唇、隆鼻等。

与非交联相比，通过交联的透明质酸具有较强的机械属性且较难被酶降解，在组织中维持的时间更长，并且具有更接近于软组织的黏弹性[2]，但交联剂、交联方式和交联度的不同将直接影响材料的理化性质及植入体内后的生物学反应。

羟丙基甲基纤维素是天然纤维素分子上部分羟基甲基化和羟丙基化后生成的纤维素醚，具有较强的抗敏性和代谢惰性，是常用的药用辅料，可作为美容填充辅料使用。

利用羟丙基甲基纤维素分子内的羟基与透明质酸中的羟基、羧基发生相互作用，可降低透明质酸的酶解，提高其作为皮肤填充材料的可使用性[3-4]。

但植入物在体内降解速度、产物及碎片的不同，均有可能导致炎症细胞聚集、异物巨细胞形成、巨噬细胞活化及纤维化形成等反应[5-6]。

基质金属蛋白酶可以降解细胞外基质和细胞表面的结构成分，参与伤口愈合、异物反应、炎症、血管生成和组织重塑。

生物材料植入中，黏附巨噬细胞和多核异物巨细胞主动分泌基质金属蛋白酶调节伤口愈合、异物反应、血管生成和生物材料植入物周围的纤维包裹[7]。