大孔吸附树脂的预处理方法
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大孔吸附树脂方法
大孔吸附树脂方法是一种将大分子物质从溶液中吸附和分离的方法。
它利用大孔吸附树脂的特性,通过吸附作用将目标分子从溶液中富集,然后通过洗脱将目标分子从吸附树脂上解吸出来。
大孔吸附树脂通常具有高表面积和大孔隙体积,可以容纳较大的目标分子。
其工作原理是基于吸附剂和目标分子之间的相互作用力,如静电吸附、范德华力、离子交换等。
吸附树脂可以选择性地吸附目标物质,而不吸附其他成分,从而实现目标分子的分离纯化。
大孔吸附树脂方法的步骤一般包括:
1. 树脂预处理:将吸附树脂浸泡或冲洗以去除杂质和残余物质。
2. 样品预处理:对待测样品进行预处理,如去除颗粒、蛋白质沉淀等。
3. 吸附:将样品与吸附树脂接触,使目标分子与吸附树脂发生吸附作用,并将其富集在树脂上。
4. 洗脱:通过改变洗脱液的条件,如改变温度、pH、离子浓度等,使目标分子从吸附树脂上解吸出来。
5. 纯化收集:将洗脱液中的目标分子收集下来,以获得纯净的目标物。
大孔吸附树脂方法在生物制药、食品、环境等领域中具有广泛的应用。
它可以用于分离和纯化蛋白质、抗体、病毒颗粒、多肽、核酸等大分子物质。
D101型大孔吸附树脂预处理方法D101型大孔吸附树脂预处理方法:乙醇浸泡24h→用乙醇洗至流出液与水1:5不浑浊→用水洗至无醇味→5%HCl通过树脂柱,浸泡2-4h→水洗至中性→2%NaOH 通过硅胶柱树脂柱,浸泡2-4h→水洗至中性,备用。
在给树脂柱中加入1/3的水,然后将准确量好体积的D101树脂用水转移到树脂柱中,再用70%的乙醇2倍树脂体积处理,流速为1倍树脂体积,过完乙醇后用水洗至无醇味即可进行使用。
D101大孔吸附树脂是完全非极性的,树脂本身用纯水洗后,流出纯水PH6.5-8大孔树脂吸附的是分子态的物质,乙醇洗脱就是和大孔树脂进行对分子态的物质竞争吸附,使物质转为溶解于乙醇,从而被乙醇洗脱液带走比表面比较大。
物理吸附。
作用力为范德华力。
预处理:高温干燥。
100度。
再生:150度吹扫大孔吸附树脂总有气泡怎么办?我的步骤是这样的:先在柱子中装入1/4的乙醇,然后将预先润湿的脱脂棉用玻璃棒推入柱子下端狭窄的部分,打开活塞控制1滴/1秒,将大孔吸附树脂沿着壁,边搅拌边加入柱子中。
一开始一个气泡都没有,用乙醇继续处理时,就开始有气泡,脱脂棉上下都有,到后来连柱子中都有气泡,我都要晕死了,请大家帮帮忙,看看问题到底出在哪?聚酰胺预处理方法称聚酰胺,直接倒进柱子里,摇匀,不要有空气泡,用90%乙醇冲洗柱后,拿到干燥箱里70-80℃烘干,放到室温。
然后把样品倒进去,用25ml水慢慢冲,样品用玻璃棒引流到入,千万别把聚酰胺颗粒冲起来。
收集滤液即得。
用过的聚酰胺一般用5%NaOH水溶液洗脱,洗至NaOH水溶液颜色极淡为止。
有时因某些鞣质与聚酰胺又不可逆吸附,用NaOH水溶液很难洗脱,可用5%NaOH在柱中浸泡,每天将柱中的NaOH水溶液放出一次,并加入新的5%NaOH水溶液,这样浸泡一周后,鞣质可基本洗脱完。
然后用蒸馏水洗脱至pH8-9,再用2倍量的10%醋酸水溶液洗脱,最后蒸馏水洗脱至pH中性,重复使用。
大孔树脂处理方法步骤:1、新树脂用95%乙醇冲至无浑浊(树脂流出液与水混合后,不浑浊)2、蒸馏水冲至无醇味(大概5倍柱体积)3、5-10 %HCL2-3倍柱体积浸泡4、蒸馏水冲至流出液pH=75、5-10 %NaOH2-3倍柱体积浸泡6、蒸馏水冲至流出液pH=7 备用而长时间不用保存,待活化后,再用95%乙醇浸泡,即可。
预处理:水淘洗后上柱----95%乙醇洗脱----洗脱直至一倍醇加四倍水不产生浑浊------水洗脱(醇水之间梯度过渡,否则产生大量气泡)-------洗脱到无醇味------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性-------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------2%-5%盐酸洗脱------浸泡3-4小时-------水洗至中性------2%-5%氢氧化钠溶液洗脱------浸泡3-4小时------水洗至中性-------过渡到95%乙醇洗脱------过渡到水------水洗至无醇味。
大孔吸附树脂使用注意事项①运输及贮藏过程中应保持5~40℃环境中,避免过热过冷。
注意不使树脂变干,以免孔结构发生变化。
②树脂装填在吸附柱中使用,装填前应对设备管道进行清洗,以防有害物质对树脂产生污染。
③料液通过树脂床前应除杂、澄清、滤过,以免污染树脂。
④树脂停运时间过长,停运前要充分解析,洗净,并以大于10%食盐溶液浸泡,以避免细菌在树脂中繁殖。
大孔吸附树脂异常现象及处理方法①树脂被微生物污染后,可重新进行预处理或用小于0.5%次氯酸钠溶液浸泡,并用水洗净。
②失水变干时,可用乙醇浸泡并水洗。
③树脂遭铁污染时,可用4~10%HCl溶液浸泡处理④树脂受到有机物污染时,可用1%NaOH、10%NaCl混合盐碱溶液浸泡处理。
大孔吸附树脂操作方法
大孔吸附树脂是一种常用的固体吸附剂,广泛应用于分离、纯化和净化过程中。
下面是大孔吸附树脂的操作方法:
1. 树脂的选择:根据需要分离或净化的目标物质和样品特性,选择合适的大孔吸附树脂。
常见的大孔吸附树脂有聚苯乙烯型、丙烯酸型等。
2. 树脂的预处理:将新鲜的大孔吸附树脂用适当的溶剂进行预处理,以去除树脂中的杂质和未反应的功能基团。
3. 树脂的干燥:使用干燥剂或真空滤波器将树脂干燥,以去除其内部的溶剂或水分,使树脂处于干燥状态。
4. 树脂的装填:将干燥的大孔吸附树脂装填到合适的设备中,如固定床柱或工业吸附柱。
5. 树脂的平衡:用适当的缓冲液对树脂进行平衡,使树脂与环境中的离子相平衡,消除电荷效应。
6. 样品的加载:将需要分离或净化的样品加载到装有大孔吸附树脂的设备中,使目标物质与树脂发生吸附作用。
7. 洗脱目标物质:根据需要,选择合适的洗脱液对大孔吸附树脂中吸附的目标物质进行洗脱。
可以使用溶剂、缓冲溶液或浓度梯度洗脱等方法。
8. 收集目标物质:将洗脱出的目标物质收集,以供后续分析或使用。
9. 再生树脂:如果需要重复使用大孔吸附树脂,可以对其进行再生。
常见的再生方法包括洗脱剂的调整、溶剂进行洗脱、酸碱洗脱等。
10. 树脂的储存:将再生后的大孔吸附树脂储存于干燥、阴凉的地方,以防止其表面被杂质污染。
以上是大孔吸附树脂的一般操作方法,具体操作步骤还需根据不同的实验要求和设备特性进行调整。
大孔树脂吸附工艺流程大孔树脂吸附工艺流程介绍本文将详细说明大孔树脂吸附工艺的流程。
大孔树脂是一种具有高吸附性能的材料,广泛应用于分离、纯化和吸附等领域。
通过以下流程,可以实现高效的吸附过程。
准备工作1.选择适合的大孔树脂材料:在吸附过程前,需要根据需要选择合适的大孔树脂材料。
树脂的孔径和功能团选择要根据待处理物质的大小和化学特性进行匹配。
2.储存和处理树脂:树脂应在干燥、避光、密封的条件下储存,并且避免与湿气、化学物质接触。
处理树脂时,要小心避免使用过高或过低的温度或pH值。
工艺流程以下是大孔树脂吸附工艺的详细流程:1.样品预处理:–收集待处理的样品,并进行初步的预处理,例如过滤、离心或浓缩。
–必要时,可以使用其他方法,如溶解、酸碱调整等,以达到更好的吸附效果。
2.树脂平衡与溶剂处理:–将所需量的大孔树脂加入吸附柱中,并使用适当的溶剂(如脱离剂或缓冲溶液)进行平衡,以保证树脂内部孔隙的充填和活性团的重新活化。
–根据具体需求,可以采取不同的平衡时间和溶剂体积,以便充分实现平衡。
3.样品上样与洗脱:–将预处理后的样品通过吸附柱缓慢地上样,使待吸附物质与树脂表面发生适当的接触。
–根据需要,可以进行洗脱步骤,以去除非目标物质。
4.吸附物质收集与分离:–吸附柱中吸附的目标物质可以通过洗脱剂进行收集和分离。
–可以使用不同的洗脱剂,根据需要调整洗脱剂的组成、浓度和pH值等。
–可以使用适当的技术方法,如渗析、逆渗析、吸附柱层析等,进行吸附物质的高效分离和纯化。
总结大孔树脂吸附工艺流程包括样品预处理、树脂平衡与溶剂处理、样品上样与洗脱、吸附物质收集与分离等步骤。
通过合理的树脂选择和工艺优化,可以实现高效、快速的目标物质吸附和纯化。
在实际应用中,还需要根据具体情况进行参数调整和操作优化,以获得最佳的吸附效果。
5.吸附树脂再生与回收:–吸附树脂在一定周期后会失去吸附能力,需要进行再生与回收。
–可以使用适当的再生剂,如盐酸、乙醇等,进行树脂的再生。
大孔树脂使用方法一、大孔吸附树脂的预处理:大孔树脂在试验中使用时间较长,必须保证不受霉菌污染。
新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理过,但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂、引发剂、分散剂等用前必须除掉。
预处理的流程简述如下:(1)以0.5BV的乙醇浸泡树脂24h (1BV为1个树脂床体积)(2)用2BV 的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱,并浸泡4-5 h(3)再用水以同样流速洗净(4)用乙醇洗至流出液加水不呈白色混浊为止。
(5)用2BV的5%HCL 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层。
并浸泡树脂2-4h 。
而后用水以同样流速洗至出水pH 中性(6)用2BV 的2%NaOH 溶液以4-6 BV/h的流速通过树脂层并浸泡树脂2-4h 而后用水以同样流速洗至出水pH 中性。
也可采用下列程序:在洁净的分离柱内,放入已去除外来杂质,体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积0.4-0.5倍的乙醇(或甲醇)浸泡24 h ,然后用树脂体积的2-3倍的乙醇(或甲醇)与水交替反复洗脱交替洗脱2-3次,至最终以水洗脱后,保持分离使用前的状态。
醇洗脱液加水不显混浊。
也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。
二、大孔树脂的使用大孔树脂是大孔径的高分子分离材料,中草药有效成分在大孔树脂上的吸附是大孔树脂与有效成分形成以范德华力和氢键为主的一分子间作用力的结果。
大孔树脂依据其聚合物的单体组成不同,可以分成非极性和极性两大类。
非极性吸附树脂适合从极性溶液中(如水溶液)中吸附非极性物质。
中等极性树脂可从极性溶液中吸附非极性物质,还能从非极性溶液中吸附极性物质。
大孔树脂的孔径和比表面积是影响大孔树脂对物质的吸附的主要因素。
大孔树脂比表面积越大,单位质量大孔树脂吸附的作用面积越大,单位质量大孔树脂吸附有效成分就越大。
而大孔树脂的比表面积还包括内孔网的面积。
树脂孔径过小有效成分分子不能进入树脂内部,只能在树脂外表面吸附,相应的比表面积就比较小。
大孔树脂吸附工艺流程引言:大孔树脂吸附工艺是一种广泛应用于工业生产中的分离和净化技术。
本文将介绍大孔树脂吸附工艺的流程及其应用。
一、大孔树脂简介大孔树脂是一种具有较大孔径的高分子材料,其孔径通常在50-1000纳米之间。
由于其孔径较大,大孔树脂具有较高的比表面积和孔隙体积,能够有效地吸附和分离目标分子。
二、大孔树脂吸附工艺流程大孔树脂吸附工艺通常包括以下几个步骤:1. 树脂选择:根据所需吸附物的特性和工艺要求,选择合适的大孔树脂。
不同类型的大孔树脂具有不同的吸附能力和选择性,因此需要根据实际情况进行选择。
2. 树脂预处理:将选定的大孔树脂进行预处理,以去除可能存在的杂质和活性基团,提高吸附性能和稳定性。
3. 样品处理:将待吸附的样品进行处理,通常包括预处理、浓缩等步骤。
预处理可以去除杂质、调整样品pH值等,以提高吸附效果。
4. 吸附操作:将处理后的样品与预处理好的大孔树脂充分接触,使目标分子被树脂表面的活性基团吸附。
吸附操作的条件包括温度、压力、pH值等,需要根据实际情况进行优化。
5. 洗脱操作:吸附后的树脂需要进行洗脱,将吸附的目标分子从树脂上解吸出来。
洗脱操作可以使用溶剂、改变温度或pH值等方式进行。
6. 再生操作:洗脱后的树脂可以进行再生,以便重复使用。
再生操作通常包括洗脱剂回收、树脂再生等步骤。
7. 产品收集:洗脱后的目标物质可以进行收集和纯化。
根据具体需求,可以选择不同的收集方式。
三、大孔树脂吸附工艺的应用大孔树脂吸附工艺广泛应用于各个领域,例如生物药物制备、环境保护、食品加工等。
在生物药物制备中,大孔树脂可以用于蛋白质纯化、寡核苷酸合成等过程中的目标分子分离和纯化。
其高选择性和吸附能力能够有效地提高产品纯度和产量。
在环境保护领域,大孔树脂可以用于废水处理和废气净化等过程中的有害物质去除。
其高效的吸附能力和再生性能可以有效地净化废水和废气,降低环境污染。
在食品加工中,大孔树脂可以用于食品添加剂的分离和纯化,提高食品品质和安全性。
1)树脂预处理方法:如果树脂出厂时已经过深度处理,一般可直接使用,但树脂在储存、运输过程中有可能可能造成污染,为慎重起见,最好再行预处理。
预处理方法:树脂装柱时先水洗去细小树脂及破碎树脂。
然后在柱内加入高于树脂层10CM的乙醇浸泡4小时,放出浸液,至洗涤液在试管中加水稀释不浑浊并且洗脱液用紫外光谱扫描不得检出吸收峰为止。
再用水洗涤至乙醇含量小于1%,即可使用。
树脂前处理合格评价标准:(A)用三倍量乙醇洗脱树脂柱,洗脱液加等量水不应显浑浊。
(B)洗脱液用紫外光谱扫描不得检出吸收峰。
(2)树脂装柱后要采用逆流灌注法排气,将树脂中气体排出,否则在使用中由于气阻影响吸附。
同时在使用中保持液位,以免空气进入。
(3)建议操作条件步骤流速流量备注填充装柱湿法装柱,树脂装填高度3米。
逆流洗柱水洗除去小粒子有破碎树脂。
前处理1-5BV/h 3BV 用乙醇等进行予处理。
水洗脱1-5BV/h 3BV 必要时根据吸附剂的PH值使用缓冲溶液吸附1-4BV/h 根据吸附量应在吸附容量以下。
PH=5-8,温度<50度。
上柱药液加入NaCl有利于提高吸附容量水洗2-3BV/h 0.5-1BV 将粘附在树脂上的杂质洗出。
解吸0.5-3BV/h 2-3BV 乙醇、丙酮等的(含水)溶液溶液。
温度升高有利于解吸再生0.5-3BV/h 3-4BV 多次应用乙醇、丙酮、碱+乙醇等溶剂水洗2-3BV/h 3-4BV 碱再生后加入酸中和备注:具体操作应根据工艺条件调整,BV:柱床体积(4)树脂的强化再生方法:树脂使用几个周期后,吸附能力下降,可用适量5%的NaCl溶液处理一次。
当树脂受污染严重吸附能力降低较大时需强化再生。
其方法是在容器内加入高于树脂层10cm的2%-3%盐酸溶液浸泡2-4小时,然后用3倍于树脂体积的盐酸溶液通柱,并用净水洗至接近中性;继用5%的氢氧化钠溶液浸洗2-4小时,并同上法用3倍于树脂体积的同浓度的氢氧化钠溶液通柱,最后再用净水清洗至PH值为中性,再用2-3倍树脂体积的乙醇洗柱,然后用纯水洗去乙醇,即可投入使用。
大孔吸附树脂的预处理
大孔吸附树脂是一种常用于生物制药和食品工业中的材料,用于分离
和纯化目标分子。
在使用大孔吸附树脂之前,需要进行预处理,以确
保其良好的性能和稳定性。
预处理的第一步是将大孔吸附树脂放入缓冲液中进行洗涤。
这个步骤
旨在去除树脂表面的杂质和未反应的试剂。
缓冲液通常是一种pH值
为7.0-8.5的缓冲溶液,例如Tris-HCl或Phosphate Buffered Saline(PBS)。
在洗涤过程中,可以使用搅拌器或振荡器来帮助混合。
接下来,需要对大孔吸附树脂进行消毒。
消毒可以通过浸泡在70%乙醇中或使用紫外线灯等方法来实现。
消毒有助于去除可能存在的微生物,并确保树脂不会被污染。
最后,在进行实验之前,需要对大孔吸附树脂进行平衡操作。
这个步
骤旨在将树脂与实验所需的缓冲液达到平衡状态。
平衡操作通常需要
将树脂放入缓冲液中,并在恒温下搅拌一段时间。
平衡时间的长短取
决于树脂的类型和实验要求。
总之,大孔吸附树脂的预处理包括洗涤、消毒和平衡三个步骤。
这些
步骤可以确保树脂表面没有杂质和微生物,并且与实验所需的缓冲液达到平衡状态,从而保证实验的准确性和稳定性。
大孔吸附树脂标准操作方法
大孔吸附树脂是一种常用的吸附材料,用于处理液体或气体中的污染物。
以下是大孔吸附树脂的标准操作方法:
1. 准备工作:将需要处理的溶液或气体收集在容器中。
准备好大孔吸附树脂,并确保其完整性和干燥。
2. 预处理:如果大孔吸附树脂需要预处理,按照厂家提供的指导进行处理。
可能的预处理方法包括活化处理、湿化处理等。
3. 装填树脂:将大孔吸附树脂填充到处理设备中。
可以使用筛网或过滤器等装置来防止树脂流失。
4. 接触时间:根据需要,将溶液或气体与大孔吸附树脂接触一段时间。
接触时间的长短取决于污染物的浓度和树脂的性能。
5. 分离:根据处理设备的设计,将树脂和溶液或气体分离开来。
这可以通过过滤、离心等方法实现。
6. 再生:大孔吸附树脂在吸附一定量的污染物后需要进行再生。
具体的再生方法取决于树脂的类型和制造商的建议。
可能的再生方法包括洗涤、浸泡、蒸汽处理等。
7. 质量监控:对于每个处理周期,应对大孔吸附树脂的质量进行监控。
可以通过采样和分析样品来确定树脂的饱和度或吸附效果。
请注意,以上方法提供了一般的操作指导,具体的操作细节可能因实际情况而有所不同。
在进行大孔吸附树脂的操作前,建议仔细阅读树脂制造商提供的具体操作手册和安全说明。
同时,操作时应遵循相关的安全操作规程,包括佩戴个人防护装备、避免吸入树脂颗粒等。
大孔吸附树脂的预处理以大孔吸附树脂的预处理为标题,本文将对大孔吸附树脂的预处理进行详细介绍。
大孔吸附树脂是一种用于分离和纯化化合物的材料,具有较高的吸附能力和选择性。
然而,在使用大孔吸附树脂之前,需要进行预处理以提高其吸附性能和稳定性。
大孔吸附树脂的预处理包括清洗和活化两个步骤。
清洗的目的是去除树脂表面的杂质和污染物,以减少对吸附性能的影响。
活化则是为了增加树脂的吸附活性和稳定性。
清洗大孔吸附树脂的方法可以选择物理清洗和化学清洗相结合。
物理清洗主要是通过反复使用溶剂洗涤树脂,去除表面的有机物和固体颗粒。
常用的溶剂有乙醇、醚类溶剂等。
另外,也可以使用超声波清洗来加速清洗过程,使树脂表面更加干净。
化学清洗则是使用一些化学试剂来去除更顽固的污染物。
常见的化学清洗方法包括酸洗和碱洗。
酸洗主要是使用稀硫酸或盐酸来去除树脂表面的无机盐和金属离子。
碱洗则是使用氢氧化钠或氢氧化钾来去除树脂表面的有机污染物。
清洗完毕后,接下来是树脂的活化处理。
活化的目的是为了增加树脂的吸附活性和稳定性,以提高其分离和纯化效果。
常用的活化方法包括热活化和化学活化。
热活化是将树脂在高温条件下进行加热处理,以去除树脂表面的吸附剂和其他有机物。
热活化的温度和时间可以根据树脂的材料和具体要求进行调整。
一般来说,较高的温度和较长的时间可以获得更好的活化效果。
化学活化则是使用化学试剂来改变树脂表面的化学性质,增加其吸附活性。
常用的化学活化试剂包括浓硫酸、浓硝酸等。
活化试剂的选择应根据树脂的材料和要求进行选择,以避免对树脂的损害。
在进行大孔吸附树脂的预处理时,需要注意以下几个问题。
首先,要选择合适的清洗和活化方法,根据树脂的材料和具体要求进行选择。
其次,要控制好清洗和活化的条件,避免过度处理导致树脂的损害。
此外,清洗和活化后的树脂应及时保存在干燥和密封的容器中,以防止再次受到污染。
大孔吸附树脂的预处理是提高其吸附性能和稳定性的重要步骤。
通过合适的清洗和活化方法,可以去除树脂表面的污染物和杂质,增加树脂的吸附活性和稳定性,从而提高其分离和纯化效果。
1、大孔树脂处理方法步骤:将大孔树脂用无水乙醇浸泡24h后湿法装柱;用乙醇2BV/h通过树脂层,冲至流出液加水不呈白色浑浊为止,并用去离子水以同样流速冲洗至无醇味(大概5倍柱体积);然后用2BV/h 0.5% HCl(2-3倍柱体积)以2.5ml/min流速通过树脂层,并浸泡2—4h后用水以同样流速洗至流出液pH值呈中性;最后用2BV 2%NaOH 溶液以2.5ml/min流速通过树脂层,并浸泡2—4h后,用水以同样流速洗至流出液pH 呈中性。
而长时间不用保存,待活化后,再用95%乙醇浸泡,即可。
2、装柱树脂分别浸没在蒸馏水中,避免气泡产生对总黄酮分离纯化的影响。
树脂加到预定的柱体积后,再用蒸馏水反复过柱,使柱内的树脂充分压紧。
装好的树脂柱静置过夜,使柱内的树脂继续压紧直至充分稳定下来后才能使用。
上样时将柱上部蒸馏水放至与树脂面基本齐平后,沿管壁从柱上部缓慢加入待分离纯化的样品溶液。
应注意不要冲松表层树脂而使之浮起。
自柱下放出少许液体,至样品液面与树脂表面基本齐平。
3、大孔树脂对麻黄总黄酮吸附的研究(静态吸附实验)精密称取已处理好的5种大孔树脂D101、AB-8、D-4020、HP-20、SP-70适量(相当于树脂5.0g),置于250ml锥形瓶中,精确加入已知浓度的发酵液溶液100ml,用振荡器振荡24h,充分吸附后,滤过,分别取各树脂的滤液1ml进行吸光度的分析,测定滤液剩余黄酮的含量,按吸附率:E%E% =C0 —C e / C0 ×100% C0 —吸附前溶液的浓度mg/ml C e —吸附后溶液浓度吸附量Q=(C0 —C e)×V/W Q—吸附量mg/g W 干树脂重 V溶液体积计算各树脂在室温下的吸附量,吸附率。
按上述试验方法,取充分吸附后的树脂过滤抽干,分别精密加入95%的乙醇各30ml,室温下浸泡振摇24h,滤过,测定滤液中黄酮浓度,根据下式:解吸率%=C2V2/(C0-C1)×V1×100%计算解吸率。
大孔树脂使用方法一、大孔吸附树脂的预处理:大孔树脂在试验中使用时间较长,必须保证不受霉菌污染。
新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理过,但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂、引发剂、分散剂等用前必须除掉。
预处理的流程简述如下:(1 )以 0.5BV 的乙醇浸泡树脂24h (1BV 为 1 个树脂床体积)(2 )用 2BV 的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱,并浸泡 4-5h(3 )再用水以同样流速洗净(4 )用乙醇洗至流出液加水不呈白色混浊为止。
(5 )用 2BV 的 5%HCL 溶液以 4-6 BV/h 的流速通过树脂层。
并浸泡树脂2-4h 。
而后用水以同样流速洗至出水pH 中性(6 )用 2BV 的 2%NaOH 溶液以 4-6BV/h 的流速通过树脂层并浸泡树脂 2-4h而后用水以同样流速洗至出水pH 中性。
也可采用下列程序:在洁净的分离柱内,放入已去除外来杂质,体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积 0.4-0.5 倍的乙醇(或甲醇)浸泡24 h ,然后用树脂体积的 2-3 倍的乙醇(或甲醇)与水交替反复洗脱交替洗脱2-3 次,至最终以水洗脱后,保持分离使用前的状态。
醇洗脱液加水不显混浊。
也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。
二、大孔树脂的使用大孔树脂是大孔径的高分子分离材料,中草药有效成分在大孔树脂上的吸附是大孔树脂与有效成分形成以范德华力和氢键为主的一分子间作用力的结果。
大孔树脂依据其聚合物的单体组成不同,可以分成非极性和极性两大类。
非极性吸附树脂适合从极性溶液中(如水溶液)中吸附非极性物质。
中等极性树脂可从极性溶液中吸附非极性物质,还能从非极性溶液中吸附极性物质。
大孔树脂的孔径和比表面积是影响大孔树脂对物质的吸附的主要因素。
大孔树脂比表面积越大,单位质量大孔树脂吸附的作用面积越大,单位质量大孔树脂吸附有效成分就越大。
而大孔树脂的比表面积还包括内孔网的面积。
树脂孔径过小有效成分分子不能进入树脂内部,只能在树脂外表面吸附,相应的比表面积就比较小。
大孔树脂预处理
具体操作过程为:(1)乙醇浸泡:将大孔树脂置于大烧杯中,倒入乙醇,使乙醇完全浸没树脂,并不断搅拌,以除去气泡,使之充分混合,静置24小时。
(2)水洗:将泡好的树脂装入色谱柱中,用2BV体积的乙醇以2BV/小时的流苏冲洗树脂,洗至流出物中无白色混浊物为止,后用蒸馏水以同样流速冲洗至无醇味为止。
(3)酸洗:用2BV体积的5%的盐酸浸泡,同时冲洗树脂,流速为一小时5BV,然后以同样流速,用蒸馏水洗至中性。
(4)减洗:用2BV体积的2%氢氧化钠溶液冲洗树脂,与酸洗的条件一致。
最后按同样的流速,用蒸馏水冲洗至中性。
预处理后的树脂要用蒸馏水浸泡保存。
如果树脂连续使用,则在再次使用之前,可以不必再进行预处理。
若经过预处理的树脂长期放置不用,在使用时,应重新进行预处理,具体操作为:用浓食盐水浸泡树脂,逐渐稀释,切记不要把树脂放在水中,以免由于树脂急剧膨胀而破碎,导致不能使用,造成浪费。
具体过程为:(1)乙醇浸泡:先于吸附柱内加入相当于装填树脂体积0.4~0.5倍的乙醇,
然后将新树脂投入柱中,使其液面高于树脂层约0.3m处,并浸泡24小时。
(2)水洗:用2BV(BV:指树脂床体积)乙醇以2BV/H的流速通过树脂层,洗至流出液不在出现白色混浊液为止。
并以水以同样的流速通过乙醇。
(3)酸洗:用2BV的5%盐酸浸泡2~4h并淋洗树脂,液体流速为4~6BV/H,而后用水以同样的流速洗至出水pH中性。
树脂处理合格后方可使用,树脂连续使用不必再进行预处理,停用时间过长,应考虑重新进行预处理,停用前要充分进行解吸,洗净,并以大于10%食盐溶液浸泡,以避免细菌在树脂中繁殖。
大孔树脂使用方法
发布者:郭玉亮发布时间:2011-1-4 12:05:24
一大孔吸附树脂的预处理:
大孔树脂在试验中使用时间较长,必须保证不受霉菌污染。
新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理过,但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂、引发剂、分散剂等用前必须除掉。
预处理的流程简述如下:
(1)以0.5BV的乙醇浸泡树脂24h (1BV为1个树脂床体积)
(2)用2BV 的乙醇以2BV/h流速通过树脂柱,并浸泡4-5 h
(3)再用水以同样流速洗净
(4)用乙醇洗至流出液加水不呈白色混浊为止。
(5)用2BV的5%HCL 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层。
并浸泡树脂2-4h 。
而后用水以同样流速洗至出水pH 中性
(6)用2BV 的2%NaOH 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层并浸泡树脂2-4h 而后用水以同样流速洗至出水pH 中性。
也可采用下列程序:在洁净的分离柱内,放入已去除外来杂质,体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积0.4-0.5倍的乙醇(或甲醇)浸泡24 h ,然后用树脂体积的2-3倍的乙醇(或甲醇)与水交替反复洗脱交替洗脱2-3次,至最终以水洗脱后,保持分离使用前的状态。
醇洗脱液加水不显混浊。
也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。
大孔树脂预处理与再生方法一、树脂的预处理1、树脂装入交换柱后,用蒸留水反洗树脂层,展开率为50-70%,直至出水清晰、无气味、无细碎树脂为止,再用50%-100%乙醇10-15倍体积慢速淋洗。
2、用约2倍体积的4-5%HCl溶液,以2m/h流速通过树脂层。
全部通入后,浸泡4-8小时,排去酸液,用洁净水冲洗至出水呈中性。
冲洗流速为10-20m/h。
3、用约2倍树脂体积的2-5%NaOH溶液,按上面进HCl的方法通入和浸泡。
排去碱液,用洁净水冲洗至出水呈中性。
流速同上。
酸碱溶液若能重复进行2-3次,则效果更佳。
经预处理后的树脂,在第一次投入运行时应适当增加再生剂用量,以保证树脂获得充分的再生。
二、树脂再生方法1、酸性树脂用2.5倍树脂体积的HCl溶液(浓度4%)以2倍树脂体积60-80 min通完,然后用纯水的相同流速(慢速淋洗)30 min之后,加大流速(6BV/h)快速淋洗至出水PH至6-7为止。
2、碱性树脂方法同上,再生剂为4%NaOH溶液,尘洗终点为出水PH7-8。
3、中性树脂配制碱性盐水(含8%NaCl,2%NaOH),以用2.5倍树脂体积60-80 min通完,然后浸泡2-4小时,以纯水淋洗至出水PH呈中性。
大孔吸附树脂的预处理新购树脂可能含有分散剂、致孔剂、惰性溶剂等化学残留,所以使用前应按以下步骤进行预处理。
1、装柱前清洗吸附柱与管道,并排净设备内的水,以防有害物质对树脂的污染。
2、于吸附柱内加入相当装填树脂0.5倍的水,然后将新大孔树脂投入柱中,把过量的水从柱底放出,并保持水面高于树脂层表面约20厘米,直到所有的树脂全部转移到柱中。
3、从树脂低部缓缓加水,逐渐增加水的流速使树脂床接近完全膨胀,保持这种反冲流速直到所有气泡排尽,所有颗粒充分扩展,小颗粒树脂冲出。
4、用2倍树脂床体积(2BV)的乙醇,以2BV/H的流速通过树脂层,并保持液面高度,浸泡过夜。
大孔吸附树脂的预处理新购树脂可能含有分散剂、致孔剂、惰性溶剂等化学残留,所以使用前应按以下步骤进行预处理。
1、大孔树脂处理方法步骤:将大孔树脂用无水乙醇浸泡24h后湿法装柱;用乙醇2BV/h通过树脂层,冲至流出液加水不呈白色浑浊为止,并用去离子水以同样流速冲洗至无醇味(大概5倍柱体积);然后用2BV/h 0.5% HCl(2-3倍柱体积)以2.5ml/min流速通过树脂层,并浸泡2—4h后用水以同样流速洗至流出液pH值呈中性;最后用2BV 2%NaOH溶液以2.5ml/min流速通过树脂层,并浸泡2—4h后,用水以同样流速洗至流出液pH 呈中性。
而长时间不用保存,待活化后,再用95%乙醇浸泡,即可。
2、装柱树脂分别浸没在蒸馏水中,避免气泡产生对总黄酮分离纯化的影响。
树脂加到预定的柱体积后,再用蒸馏水反复过柱,使柱内的树脂充分压紧。
装好的树脂柱静置过夜,使柱内的树脂继续压紧直至充分稳定下来后才能使用。
上样时将柱上部蒸馏水放至与树脂面基本齐平后,沿管壁从柱上部缓慢加入待分离纯化的样品溶液。
应注意不要冲松表层树脂而使之浮起。
自柱下放出少许液体,至样品液面与树脂表面基本齐平。
3、大孔树脂对麻黄总黄酮吸附的研究(静态吸附实验)精密称取已处理好的5种大孔树脂D101、AB-8、D-4020、HP-20、SP-70适量(相当于树脂5.0g),置于250ml锥形瓶中,精确加入已知浓度的发酵液溶液100ml,用振荡器振荡24h,充分吸附后,滤过,分别取各树脂的滤液1ml进行吸光度的分析,测定滤液剩余黄酮的含量,按吸附率:E%E% =C0 —Ce / C0 ×100% C0 —吸附前溶液的浓度mg/ml Ce —吸附后溶液浓度吸附量Q=( C0 —Ce)×V/W Q—吸附量mg/g W 干树脂重 V溶液体积计算各树脂在室温下的吸附量,吸附率。
按上述试验方法,取充分吸附后的树脂过滤抽干,分别精密加入95%的乙醇各30ml,室温下浸泡振摇24h,滤过,测定滤液中黄酮浓度,根据下式:解吸率%=C2V2/(C0-C1)×V1×100%计算解吸率。
大孔树脂使用方法
一大孔吸附树脂的预处理:
大孔树脂在试验中使用时间较长。
必须保证不受霉菌污染。
新购树脂一般用氯化钠及硫酸钠处理。
但树脂内部存在未聚合的单体残存的致孔剂引发剂分散剂等用前必须除掉。
方法:预处理的流程简述如下:以0.5BV的乙醇浸泡树脂24h (1BV为1个树脂床体积)用2BV 的乙醇以2BV/h 流速通过树脂柱,并浸泡4-5 h 用乙醇2 BV/h 的流速洗涤树脂至流出液的加水不呈白色混浊为止。
再用水以同样流速洗净。
用2BV的5%HCL 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层。
并浸泡树脂2-4h 。
而后用水以同样流速洗至出水pH 中性用2BV 的2%NaOH 溶液以4-6 BV/h 的流速通过树脂层并浸泡树脂2-4h 而后用水以同样流速洗至出水pH 中性。
在洁净的分离柱内,放入已去除外来杂质,体积恒定的大孔吸附树脂加入相当于树脂体积0.4-0.5倍的乙醇(或甲醇)浸泡24 h ,然后用树脂体积的2-3倍的乙醇(或甲醇)与水交替反复洗脱交替洗脱2-3次,至最终以水洗脱后,保持分离使用前的状态。
醇洗脱液加水不显混浊。
也可用电导率、荧光和紫外吸收等作为前处理的标准。
二大孔树脂的使用
中草药有效成分在大孔树脂上的吸附是大孔树脂与有效成分形成以范德华力和氢键为主的一分子间作用力的结果。
大孔树脂依据其聚合物的单体组成不同,可以分成非极性和极性两大类。
非极性吸附树脂适合从极性溶液中(如水溶液)中吸附非极性物质。
中等极性树脂可从极性溶液中吸附非极性物质,还能从非极性溶液中吸附极性物质。
大孔树脂的孔径和比表面积是影响大孔树脂对物质的吸附的主要因素。
大孔树脂比表面积越大,单位质量大孔树脂吸附的作用面积越大,单位质量大孔树脂吸附有效成分就越大。
而大孔树脂的比表面积还包括内孔网的面积。
树脂孔径过小,有效成分分子不能进入树脂内部,只能在树脂外表面吸附,相应的比表面积就比较小。
因此选择的时候应该根据目标物的分子量选择合适孔径的树脂才能使吸附的有效面积增大
具体地应该通过实验确定。
1树脂类型的确定吸附率和吸附量的测定:
吸附率
E% =C0 —C e / C0 ×100%
C0 —吸附前溶液的浓度mg/ml C e —吸附后溶液浓度
E% —吸附率
吸附量
Q=(C0 —C e)×V/W
Q—吸附量mg/g W 干树脂重 V溶液体积
考察某种树脂是否适合于该新药。
首先考察该树脂的比吸附值,即树脂对所纯化分离的有效成分要有较大的吸附量。
然后,需考察树脂对所分离的有效成分有良好的分离性能目标成分能比较集中的被洗脱出来。
采用的方法如下
A静态吸附以葛根素中黄酮提取为例将10g 处理好的树脂加入葛根素水溶液30ML 总黄酮浓度为9.4mg /mL 每5min 振摇1次,2h 小时后分别取各树脂的吸附溶液1ML 进行吸光度的分析,计算各种树脂对葛根素总黄酮的吸附率和吸附量。
B静态解析:
将静态吸附的树脂过滤抽干,加30 ml 70%乙醇解析每5分钟振一次2h 后分别取各解析液测定黄酮的浓度。
以计算各种树脂对黄酮的解析率。
C动态吸附准确称取10ml 或20ml 树脂在干净的2 ×20cm色谱柱内,加入葛根素的水溶液总黄酮的浓度为9.4mg/ml 于柱顶,以2BV/h 的流速进行动态吸附,收集流出液。
按床体积收集进行分析,测出目标物的浓度如皂甙或黄酮等,然后以洗脱液体积为横坐标,流出液中的目标物含量为纵坐标绘制动态吸附曲线,计算饱和动态吸附量。
并计算达到吸附饱和时,所吸附的目标物的量。
可以比较出何种树脂的吸附量大。
2药液浓度的考查:
黄酮、皂苷、生物碱等在大孔树脂上是物理吸附。
从物理吸附等温方程可以发现。
有效成分初始浓度增加。
平衡吸附量增加,吸附率降低。
平衡吸附实际增加。
进柱液浓度增加平衡吸附时间增加平吸附实际延长吸附率降低。
取葛根素的水溶液分别加水稀释。
.5,10,15,20 倍后上样以2BV/h 的流速进行吸附后先以5BV水洗脱再用70%乙醇洗脱,收集洗脱液至100ML 于250nm 计算吸光度计算总黄酮的含量。
即多篇文献研究结果表示当总黄酮浓度0.5g/mL 黄酮的药液浓度上样即可。
药液稀释可以提高解析率。
洗脱剂浓度中草药有效成分从大孔树脂上洗脱,是利用有效成分在洗脱液有效成热能在洗脱液中的溶解作用大于有效成分在
黄酮、皂苷、生物碱以及其他苷类物质在乙醇类溶液中溶解度较大。
常使用乙醇作为洗脱液。
乙醇溶液从两方面影响有效成分在大孔吸附树脂上的吸附。
将中草药有效成分pH值对大孔吸附树脂提取有效成分效果的影响
酸性有效成分应该在酸性条件下吸附,碱性有效成分应该在碱性条件下吸附。
反之在解析洗脱阶段,酸性有效成分使用户碱性洗脱液洗脱效果好碱性有效成分使用酸性洗脱液效果好。
温度对大孔树脂提取有效成分效果的影响
由于黄酮、皂甙、生物碱等有效成分在大孔树脂是通过分子间作用力,属于物理吸附。
温度升高,一方面有效吸附作用降低。
另一方面,有效成分在溶液中的溶解度增大。
综合结果温度升高可使有效成分在大孔树脂上的吸附速度和吸附量降低。
实验证明,葛根素的吸附量吸附量减少反之在解析阶段,应该升高温度。
在吸附目标物后可选用对目标物溶解度较高的溶剂如乙醇作为解析剂,采用不同浓度的乙醇作为解析剂。
分析洗脱液中目标物浓度。
求得最佳的浓度。
流速对吸附的影响:将浓度为7.96 mg/ml 皂甙溶液通过玻璃柱内考察不同流速对吸附量的影响流速过大会使树脂的工作吸附量下降。
提早泄漏。
且树脂压力增大能量损失。
皂甙吸附以3BV /h 为宜。
黄酮吸附以
三树脂的再生及保存方法
大孔树脂的再生与保存树脂经反复使用后层析柱颜色变深柱效降低。
需再生处理后才能继续使用。
经甲醇丙酮或以稀酸和稀碱及水反复处理后即可恢复树脂的吸附能力。
注意由于丙酮和氢氧化钠和丙酮有反应。
这两者不能同时用或程序选用。
保存方法再生后的大孔树脂可用一定浓度的醇浸泡以备下次使用。