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2.基因缺失疫苗的优点:
a) b)
c)
d)
人为的有目的进行相关基因片断的缺失,缺失的片断 较大,一方面区域明确,另一方面返祖的可能性较少; 缺失基因不是免疫原性基因,而是将毒 力基因(gTK) 进行缺失,无毒力或毒力较弱; gE基因的缺失可大大减弱病毒在体内的复制和扩散 能力;不能进入中枢神经系统,很难在中枢神经系统中 形成潜伏; 可以把缺失基因表达蛋白作为标志蛋白,通过标志蛋 白抗体的检测将疫苗毒与野毒感染区分开来;
1.常规疫苗的缺点:
A.灭活疫苗: ①安全,但免疫效力不佳; ②接种剂量大,油佐剂的问题,导致偶尔出现过敏 反应,注射部位皮肤坏死; ③抗体持续时间较短,需进行二次或三次免疫接 种;
常规疫苗的缺点:
B.常规弱毒疫苗:
①主要通过在非适应性的细胞上反复盲传,进行致弱和自然的基因 缺失,缺失部位不确切; ②安全性较差; ③可持续刺激机体产生抗体,免疫原性好,但在动物体内有可能与 野毒进行基因交换导致毒力返强; ④接种能预防临床症状的出现,但不能阻止病毒在被 感染动物质 体内复制排出和形成潜伏感染; ⑤潜伏感染的病猪在应激件下能被激活,形成复发性感染,并向外 排毒 ;
病原概述; 典型毒株结构示意图 病毒糖蛋白;
1.病原概述:
伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus PRV;)属 于疱疹病毒科a 疱疹病毒亚科的猪疱疹病毒I型; 能引起多种动物的发热﹑奇痒及脑脊髓炎为主 要症状的疱疹病毒; 猪是伪狂犬病病毒的贮存宿主和传染源,人对 PRV无易感性; PRV对脂溶剂高度敏感,最适pH值为6-8,过酸和 过碱的环境将使其很快灭活; 环境中的PRV的存活依赖于PH值高低和温度的 变化;
二﹑伪狂犬病的流行病学:
宿主非常广泛,猪是本病毒的原发性感染宿主,又 是重要的传染源,可以垂直传播; 本病可以经呼吸道粘膜﹑皮肤创口以及配种等 传播,并可经胎盘垂直传播; 一年四季均可发生,尤其是冬春二季为甚; 空气传播是病毒扩散的最主要途径; 无论是野毒感染猪还是弱毒疫苗免疫猪都会导 致潜伏感染;
病原：
PRV透射电镜照片 50000×
2.PRVFa株结构简图:
TK
gH
gⅡ gE
gD gⅠ
gx
3.病毒糖蛋白:
雄峰科技●郑州公司
目前已经发现PRV有11种病毒糖蛋白， gE﹑gI﹑gC﹑gX和TK对PRV的复制是非必 的,gD﹑gB﹑gH﹑gL是必需的; gE和gI两者以共价键结合形成复合体,gE影响病 毒从感染的细胞释放及病毒从细胞到细胞之间 的传播; gC与病毒吸附有关,还诱导机体产生不依赖补体 的中和抗体等细胞免疫应答;
三﹑症状:
PRV可引起不同年龄的猪感染,主要表现为四 大症状: 妊娠母猪:流产﹑死胎﹑木乃伊胎,以死胎 为主; 新生仔猪: 断奶前后的仔猪: 成年猪及母猪:
1.妊娠母猪:
1.
2.
3.
妊娠母猪发生流产﹑产死胎﹑木乃伊胎,其中以 产死胎为主,而细小病毒引起的母猪繁殖障碍则 以产木乃伊胎为主; 无论是头胎母猪还是经产母猪都发病,而且没有 严格的季节性; PRV感染与PRRSV感染所产死胎在外观上有 一定的差别,PRRSV感染所产死胎外观病变相 对比较轻些,一般死胎看起来比较新鲜,而PRV 感染所产死胎外观经常发生腐烂﹑自溶,看起来 比较严重,妊娠早﹑中﹑晚均可发生;
伪狂犬病的综合防制措施:
1) 2)
3) 4) 5)
6)
在全国范围内确定只能使用基因缺失疫苗并配合gEELISA检测方法,这是控制本病的关键之所在; 定期检查猪群,发现病猪应采集病料及时送检,封锁发病场, 包括人员和车辆; 控制猫和狗等野生动物进场,定期对猪场进行灭鼠; 不从患过伪狂犬病的猪场引种; 发生伤狂犬病的猪场,特别是种猪场发生过流产﹑产死胎 的母猪应建立严格的种猪淘汰制度; 对于受伪狂犬病威胁的邻近地区,采用紧急接种,高密度接 种,并尽可能使用同一种标志基因 的基因缺失疫苗;
猪伪狂犬病：
国内的情况 病原 流行病学 症状 诊断方法 预防控制措施
国内的情况：
我国PR的发病率呈上升态势；
带毒现象普遍，严重：
猪群中PRV带毒现象十分普遍，母猪常呈 隐性感染和带毒； 引起繁殖障碍的一大疫病； 免疫密度仍需提高：免疫抗体水平仍需提高；
一﹑病原:
1. 2. 3.
3.断奶前后的仔猪:
PR引起断奶前后的仔猪发病死亡,发病率在 20%-40%,死亡率在10%-20%左右; 主要表现为神经症状,偶尔伴发有拉稀,间或有 呕吐的情况发生; 同时还表现出呼吸系统症状;
仔猪断奶前后出现奇痒症 状，以头顶墙等神经症状；
仔猪断奶前后出现奇痒症状， 仔猪断奶前后出现奇痒症 以头顶墙等神经症状； 状，以头顶墙等神经症状；
PR的净化：
清群：（种猪ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ）
感染带毒阳性率高的猪全部淘汰 所有饲养设备及环境完全消毒
子代隔离（offspring segregation） 早期断奶（SEW） 监测与淘汰（test-removal） 管理与免疫接种（management vaccination）
对种猪群进行监测 疫苗免疫接种
断奶前后仔猪出现腹泻，死亡前 呈现游泳状、鸣叫、声音嘶哑；
4.成年猪及母猪:
成年猪表现为生长受阻,饲料报酬降低; 母猪的一过性不育症,发情正常但可能出现屡 配不孕,返情率甚至达到90%; 公猪表现出睾丸肿胀,萎缩,丧失种用能力;
病理变化 ：
患病仔猪出现全身性症状；实质性器官 出血；淋巴结出血等；最典型的是打开 脑盖后可见脑膜出血，脑充血；
患猪脑充血；
四﹑诊断方法:
1. 2. 3. 4. 5.
病毒分离:胎儿﹑胎衣分离病原进行鉴定; 病毒鉴定:动物试验---接种家兔; 病毒抗原检测: 特异性抗体检测: PCR检测PRV的DNA:用这种方法可以鉴 别出是疫苗毒还是野毒感染;
五.预防和控制策略:
•
应用基因缺失疫苗的必要性; 1.常规疫苗的缺点; 2.基因缺失疫苗的优点; 伪狂犬病的综合防制措施;
控制和净化：
自繁自养，引种监测与检疫；
加强卫生消毒与灭鼠工作； 坚持疫苗免疫接种，提高免疫接种密度： 感染和带毒种猪群的净化
仔猪一般在8-10周龄进行免疫；
母猪产前4-8周接种，在有效监测母源抗体的前提下，
猪PR净化的条件：
PR基因缺失疫苗： 监别诊断技术：
自然弱毒疫苗（缺失部分gE） 基因工程缺失疫苗（双缺失：TK.gE) gE –ELISA：可区分疫苗抗体和野毒抗体 PCR：
感染母猪流产之死胎；
2.新生仔猪:
新生仔猪的大量死亡,主要表现在刚生下的仔猪第一 天还是好好的从第二天起开始发病,3-5天内是死亡高 峰,甚至整窝死亡; 发病仔猪表现出明显的神经症状,昏睡﹑鸣叫﹑呕吐 ﹑拉稀,一旦发病,1-2天内死亡; 剖检主要是肾脏布满针尖样的出血点,脑膜表面充血 ﹑出血;
