发酵工程综述
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发酵工程总结王玉真第一章绪论一.发酵工程:是应用微生物学等相关的自然科学以及工程学原理,利用微生物等生物细胞进行酶促转化,将原料转化成产品或提供社会性服务的一门科学。
由于它以培养微生物为主,所以又称为微生物工程。
※从广义上讲,有三部分组成:上游工程,发酵工程,下游工程二.发酵的定义1.传统发酵发酵(fermentation)最初是来自于拉丁语“发泡”(ferver)这个词,是指酵母作用于果汁或发芽的谷物时产生二氧化碳的现象。
2.生化和生理学意义的发酵:指微生物在无氧条件下,分解各种有机物质产生能量的一种方式;或者更严格地说,发酵是以有机物作为电子受体的氧化还原产能反应。
如葡萄糖在无氧条件下被微生物利用产生酒精并放出CO2。
3..工业上的发酵:泛指利用生物细胞制造某些产品或净化环境的过程。
三.※发酵工业产业化应抓好哪三个环节?发酵工程产业化:就是将有关应用微生物的科学研究成果转化为发酵产品,并投向市场的过程。
三个环节:投产试验、规模化生产和市场营销。
①投产试验:涉及到”上、中、下三游”工作,即研究成果的验证、小试、中试和扩大试验。
②规模化生产:值得注意的是产品质量问题,其检测必须符合相应产品标准。
③市场营销:市场开拓对技术本身影响不大,但参与市场竞争却是产业化成败的决定因素。
四.※当前发酵工业面临三大问题:1.菌种问题(纯种;遗传稳定性;安全;周期短、转化率高产率高;抗污染能力强:噬菌体、蛭弧菌);2.合适的反应器(生产规模化;原料利用量大,并且具有一定选择性;节能;结构多样化、操作制动化;节省劳力);3.基质的选择(价廉;原料利用量大,并且具有一定选择性;易被利用;副产物少;满足工艺要求)第二章菌种的来源一.自然界分离微生物的一般操作步骤?1、※菌种分离的一般过程:标本采集→预处理→富集培养→菌种分离(初筛、复筛)→性能鉴定→菌种保藏目的:高效地获取一株高产目的产物的微生物2、微生物材料的标本采集:遵循原则:材料来源越广泛,越有可能获得新的菌种一般通过以下途径获得菌种:①向菌种保藏机构索取有关菌株;②由自然界采集样品,如土壤、水、动植物体等;③从一些发酵制品中分离目的菌株,如从酱油中分离蛋白酶产生菌,从酒醪中分离淀粉酶或糖化酶的产生菌。
发酵工程知识点总结归纳一、发酵工程概述1. 发酵工程的定义发酵工程是一门研究微生物、酶等生物催化剂在工业生产中广泛应用的工程学科。
2. 发酵工程的历史发酵工程的历史可以追溯到几千年前,最早的酿酒技术可以追溯到古代民族。
随着人类对微生物的认识和技术的发展,发酵工程逐渐成为一门系统的学科。
3. 发酵工程的应用领域发酵工程广泛应用于食品、饮料、医药、生物制药、环保等领域,对人类的生活和健康有着重要影响。
二、发酵过程及机理1. 发酵过程发酵过程是利用微生物或酶对有机物进行生物催化反应,产生有机产物或能量的过程。
发酵过程通常包括菌种培养、发酵产物的分离提纯等步骤。
2. 发酵机理发酵的基本机理包括微生物的生长和代谢过程,包括物质的代谢途径、酶的作用、生理生化特性等。
三、发酵工程中的微生物1. 发酵微生物的分类发酵微生物包括细菌、真菌、酵母等。
不同的微生物在发酵过程中起到不同的作用。
2. 发酵微生物的培养发酵微生物的培养包括培养基的配制、发酵罐的设计等环节,培养条件对微生物的生长和代谢具有重要影响。
3. 发酵微生物的选育发酵工程中常用的微生物包括大肠杆菌、酵母菌等,针对不同的产品需要选择适合的微生物用于发酵生产。
四、发酵工程中的酶1. 酶的分类酶是生物催化剂,可以促进化学反应的进行。
按照其作用方式可以分为氧化酶、还原酶、水解酶等。
2. 酶的应用酶在发酵工程中有着广泛的应用,可以用于生产食品、医药、生物燃料等产品。
3. 酶的工程化酶的工程化包括酶的产生、提纯、改良等步骤,使其更好地适用于实际生产。
五、发酵工程中的设备1. 发酵罐发酵罐是用于放置和滋生微生物的设备,包括灭菌、通气、控温等功能。
2. 排气系统排气系统可以有效地排除产生的二氧化碳和其他代谢产物,以保证发酵过程的正常进行。
3. 分离设备分离设备包括离心机、膜分离等,用于分离提纯发酵产物。
六、发酵工程中的工艺控制1. 发酵条件的控制发酵过程中需要控制pH、温度、氧气供应等参数,以保证微生物的生长和产物的产生。
发酵工程总结一名词解释1.发酵:传统概念,是指微生物在无氧条件下分解代谢有机物质释放能量的过程。
现代概念,利用微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体或其代谢产物的过程。
2.发酵工程:采用现代化工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。
3.微生物的生物转化:是利用生物细胞对一些化合物某一特定部位的作用,是它转化成结构相类似但是更具有经济价值的化合物。
4.生产微生物细胞物质:是以获得具有多种用途的微生物菌体细胞为目的产品的发酵工业。
5.筛选:采用与生产相近的培养基和培养条件,通过三角瓶的容量进行小型发酵实验,以求得适合于工业生产用菌种。
方法有a平皿快速检测法(变色圈法、透明圈法、生长圈法、抑菌圈法、梯度平板法)b摇瓶培养法。
6.诱变育种:就是利用物理或化学诱变剂处理均匀分散的微生物细胞群,提高基因突变频率,再通过适当的筛选方法获得所需要的高产优质菌种的育种方法。
7.基因突变:指的是DNA碱基发生变化即点突变。
8.自然选育:在生产过程中,不经过人工诱变处理,利用菌种的自发突变选育出优良菌种的过程。
9.回复突变:高产菌株在传代的过程中,由于自然突变导致高产性状的丢失,生产性能下降的情况。
10.菌种退化:是指在较长时期传代保藏后,菌种的一个或多个生理性状和形态特征逐渐减退或消失的现象。
11.狭义的菌种复壮:指在菌种已发生衰退的情况下,通过纯种分离和测定生产性能等方法,从衰退群体中找出少数尚未衰退的个体,从而达到恢复浓菌原有典型性状的目的。
广义的复壮是一项积极的措施,指在菌种的典型特征或生产性状尚未衰退前,就经常有意识地采取纯种分离和生产性状的测定工作,以期从中选择到自发的正变个体12.种子扩大培养:是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后,再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级放大培养而获得一定数量和质量的纯种过程。
一,名词解释1发酵工程:是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。
发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。
2实罐灭菌:是指将配制好的培养基放入发酵罐或其他装置中,通入蒸汽将培养基和所用设备加热至灭菌温度后维持一定时间,再冷却到接种温度,也叫间歇灭菌、分批灭菌。
3连续培养:又叫开放培养,是相对分批培养或密闭培养而言的。
连续培养是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法.分批培养:是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后,接入少量微生物菌种进行培养,使微生物生长繁殖,在特定条件下完成一个生长周期的微生物培养方法。
4培养基:是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。
有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。
5自然选育:也称自然分离,是指对微生物细胞群体不经过人工处理而直接进行筛选的育种方法,又称为单菌落分离。
6营养缺陷型:指微生物等不能在无机盐类和碳源组成的合成培养基中增殖,必须补充一种或一种以上的营养物质才能生长。
7渗漏缺陷型:是遗传障碍不完全的营养缺陷型,突变使某一种酶的活性下降而不是完全丧失,所以这种缺陷性能够少量地合成某一代谢产物,能在基本培养基上少量地生长。
8消毒灭菌:灭菌是指杀灭一切活的微生物。
而消毒则是指杀灭病原微生物和其他有害微生物,但并不要求清除或杀灭所有微生物(如芽胞等)。
9发酵动力学:是研究各种环境因素与微生物代谢活动之间的相互作用随时间变化的规律的科学。
10生物热:产生菌在生长繁殖过程中产生的热能11搅拌热:搅拌器转动引起的液体之间及液体与设备之间的摩擦产生的热量12前体:在微生物的生物合成过程中,有些化合物能直接被微生物利用构成产物分子结构的一部分,而化合物本身的结构没有大的变化,这些物质称为前体。
制药厂微生物发酵控制方法文献综述发酵工程是牛化工程和现代生物技术及其产业化的基础。
在发酵工程领域,为了提高发酵水平和生产率,更多的研究工作集中在菌种的筛选和改造上。
尽管现代生物技术在基因工程和代谢T程领域内有了长足的进展,通过诱发变异、基因重组和培养能够得到高产菌株,然而,通过优化控制使发酵过程产品生产最优(即生产能力最大、成本消耗最低、产品质量最高)仍是发酵工程领域中存在的主要问题之一,因此对微生物发酵过程优化控制的研究日益受到莺视。
微生物发酵过程优化控制的主要问题是建立过程模型和制定优化控制策略和算法。
近年来,微生物发酵过程优化控制技术研究已经取得了一些进展,发酵过程建模方面的主要研究成果包括:机理分析建模、黑箱建模和混合建模。
发酵过程优化控制策略方面的主要研究成果包括:基于线性化近似的经典优化控制,基于直接寻优算法的仿真优化控制,基于非线性系统理论的优化控制以及基于人工智能技术的优化控制。
1微生物发酵过程建模1.1基于过程机理分析的建模发酵过程机理分析建模是基于质能平衡、Monod方程、Contois 方程等建立过程机理模型,以及从基因分子、细胞代谢和反应器等多尺度建立过程机理模型,在依据机理确定模型形式的情况下,用回归的方法确定模型参数。
上海交通大学的周海英等对甲醇营养型毕氏酵母的代谢途径进行分析,建立了其生长代谢的结构模型。
为解决该模型不能很好描述蛋白生成的问题,引入一阶闭环调节器对其进行动态改进,实验结果表明,改进后的模型可以完整地描述细胞生长和蛋白生成。
张嗣良等从基因分子遗传、细胞代谢调节和反应器工程特性等尺度对发酵过程优化与放大进行了深入的研究,在不同尺度上认识过程的本质,得到发酵过程的一些约束条件。
以过程广义化学计算方程为基础,结合数据处理及辨识技术,建立了L-赖氨酸流加发酵过程的动态模型,实现了过程仿真。
机理建模需要深入了解发酵过程机理,虽然模型中各参数的物理意义明确,但由于发酵过程的复杂性、生物传感器的缺乏以及各参数之间的严重关联,机理建模难度较大。
发酵工程与环境保护的综述[摘要]: 20世纪中叶以来,环境问题已经成为整个地球的一大危机,人类赖以生存和发展的环境受到了严峻挑战,资源的迅猛开发与滥采滥用,使其日益枯竭,生态环境遭到了严重破坏,造成了各种污染事故频频发生。
本文阐述了发酵的概念、特点,分析了发酵工程的基本原理和过程,探讨了发酵工程在环境保护中的应用,展望了其在环境保护中的应用前景,为环保工作者提供思考。
[关键词]:发酵工程发酵环境保护微生物自然界存在着丰富的微生物种群,在生物圈物质循环中着重充当分解者的角色。
微生物通过发酵作用,可以对物质进行降解与转化,一方面合成自身细胞成分,另一方面,产生新的有用的产品。
因此,利用微生物发酵工程的原理与技术,净化和处理环境污染物,可以实现废物资源化,提高整体工艺的效益,降低运行成本,同时达到减轻环境污染,保护环境的目的。
本文阐述了发酵的概念和特点,分析了发酵工程的基本原理和过程,探讨了发酵工程在环境保护中的应用,展望了其在环境保护中的应用前景,为环保工作者提供思考。
一、发酵的概念发酵是微生物分解有机物,产生乳酸或乙醇和二氧化碳的过程,发酵必须依靠微生物酶的参与,并为微生物提供细胞生命活动所需的能量和各种细胞结构物质。
广义上的发酵是指利用微生物生产有用代谢产物的一种生产方式;狭义上的发酵是微生物呼吸作用的一种类型,是指微生物在厌氧条件下,以体内的某些有机物作为最终氢(电子)受体的产能过程;工业上的发酵是泛指一切依靠微生物的生命活动而实现的工业生产过程。
二、发酵的特点发酵条件温和、发酵原料广泛、发酵专一性强第四、发酵的高效性、发酵的创新性、三、发酵工程的原理发酵的基本原理是单一菌种在培养基中的纯培养,因此优良菌种的选育和发酵过程中对杂菌污染的防治至关重要。
优良菌种的选育是发酵取得良好效益的关键,因此必须采取合理的菌种选育方法,获得性能优良稳定的菌种。
此外,发酵过程杂菌防治是生产成败的关键,除了必须对设备进行严格消毒处理和空气过滤外,反应必须在无菌条件下进行。
发酵工程工作总结
发酵工程是一门涉及微生物、生物化学、工程学等多学科知识的综合性学科,
其应用范围涉及食品、医药、化工等多个领域。
在过去的一段时间里,我有幸参与了发酵工程的工作,并在实践中积累了一些经验和感悟,现在我将对这段经历进行总结和分享。
首先,发酵工程的工作需要对微生物的生长规律和代谢途径有深入的了解。
在
实际操作中,我们需要根据不同微生物的特性,选择合适的培养基、培养条件和发酵工艺参数,以保证微生物能够获得最佳的生长环境,从而产生出高效的发酵产物。
在这个过程中,对微生物的生理特性和代谢途径的理解是至关重要的。
其次,发酵工程的工作需要对发酵工艺有深入的了解和熟练的操作技能。
在实
际操作中,我们需要掌握各种发酵设备的使用方法,了解不同发酵工艺的优缺点,并且能够根据实际情况进行灵活调整和优化。
同时,我们还需要对发酵过程中可能出现的问题有预见性,并且能够迅速有效地解决这些问题,以保证整个发酵过程的顺利进行。
最后,发酵工程的工作需要具备团队合作和沟通能力。
在实际工作中,我们需
要与不同领域的专业人员进行密切的合作,共同解决实际问题。
而且,我们还需要与同事之间进行有效的沟通和协调,以保证整个团队的工作能够有序进行。
总的来说,发酵工程是一项综合性强、应用广泛的工作,需要我们具备多方面
的知识和能力。
在未来的工作中,我将继续努力学习,不断提升自己的专业素养,以更好地为发酵工程的发展做出贡献。
发酵工程工作总结在过去的一段时间里,我有幸参与了一项发酵工程项目的工作。
这段时间让我对发酵工程有了更深入的了解,并且也让我体会到了发酵工程工作的重要性和挑战性。
在这篇文章中,我将对我所参与的发酵工程工作进行总结,分享我在这个项目中所学到的经验和收获。
首先,我要强调的是发酵工程在现代生产中的重要性。
发酵工程是利用微生物、酶或细胞等生物体对物质进行转化的工程技术。
在食品、医药、化工等领域,发酵工程都有着广泛的应用。
在我们所参与的项目中,我们主要是针对食品领域开展发酵工程工作,通过对微生物的培养和利用,生产出高品质的食品产品。
这种工作不仅需要我们对微生物的生长和代谢规律有深入的了解,还需要我们具备严密的实验操作和数据分析能力。
其次,我要说的是发酵工程工作的挑战性。
在发酵工程中,微生物的生长和代谢受到许多因素的影响,如温度、pH值、营养物质等。
因此,我们需要在实验中对这些因素进行精确的控制,以确保微生物能够正常生长并产生所需的产物。
在实际的工作中,我们也遇到了许多困难和挑战,比如微生物培养过程中的污染问题、产物分离纯化的难度等。
但正是这些挑战让我们不断学习和进步,也让我们更加深刻地理解了发酵工程工作的复杂性和精密性。
最后,我要总结的是我在这个项目中所学到的经验和收获。
通过这段时间的工作,我不仅对发酵工程有了更深入的了解,还学会了如何进行实验设计、数据分析和结果解读。
同时,我也意识到了团队合作在发酵工程工作中的重要性,只有团结协作,才能克服种种困难,完成艰巨的任务。
此外,我还学会了如何在实践中不断改进和完善工作方法,以提高工作效率和结果的可靠性。
总的来说,参与发酵工程工作是一次宝贵的经历。
通过这段时间的工作,我不仅对发酵工程有了更深入的了解,还学会了许多实用的技能和方法。
我相信这些经验和收获将对我的未来学习和工作产生积极的影响,也让我更加热爱和珍惜发酵工程这个领域。
希望在未来的工作中,我能够继续努力,不断提升自己,为发酵工程的发展贡献自己的力量。
发酵工程综述
娄宏跃
(12级生物工程专业(1)班)
摘要:抗体酶是具有催化活性的免疫球蛋白,又被称为催化抗体。
[1]由于它兼具抗体的高度选择性和酶的高效催化性,因而催化抗体制备技术的开发预示着可以人为生产适应各种用途的,特别是自然界不存在的高效催化剂,对生物学、化学和医学等多种学科有重要的理论意义和实用价值。
本文主要对抗体酶的生产工艺及其应用进行综述。
关键词:抗体酶;发酵;微生物;酶工程
前言:
自从1986年Schultz和Lerner首次证实由过渡态类似物为半抗原,通过杂交瘤技术产生的抗体具有类似酶的催化活性以来,抗体酶一直是科学界的“宠儿”。
[2]短短十几年,抗体酶已显示出在许多领域的潜在应用价值,包括许多困难和能量不利的有机合成反应,前药设计,临床治疗,材料科学等多个方面。
抗体酶和天然酶在功能上有许多相似之处,如催化效率高,具有专一性、区域和立体选择性,可进行化学修饰和具有辅助因子等,并且在饱和动力学与竞争性抑制方面也极其相似。
一、抗体酶的发现
1946年,Pauling用过渡态理论阐明了酶催化的实质,即酶之所以具有催化活力是因为它能特异性结合并稳定化学反应的过渡态(底物激态),从而降低反应能级。
他指出,酶通过某种方式与高能、短寿命的过渡态结合而起催化作用。
这个过渡态构型中某些键在形成,另一些键在断裂,存在时间极短,半衰期约为10 ~10 s,实际中极难捕获。
[3]同时,Pauling又指出酶和抗体的根本不同在于前者选择性的结合一个化学反应的过渡态,而抗体则是结合一个基态分子。
既然过渡态分子难以捕获,而过渡态类似物是能够模拟一个酶催化反应过渡态的结构的稳定物质,于是人们就设想,只要寻找到与反应中决定性步骤的相应酶紧密结合的酶竞争性抑制剂,就等于发现了过渡态类似物;还有一种思路,就是这种类似物也能根据化学反应机制推测设计出来。
然后,以过渡态类似物为半抗原,利用哺乳动物的免疫系统,诱导与其互补构象的抗体产生,这种抗体即具有催化活性——这就是1969年
Jencks提出的,他发展了Pauling的理论;接着,Kohler和Milstein于1975年发明了具有历史意义的单克隆技术,使抗体酶的生产成为可能。
[4]
Lerner和P.C.Schultz分别领导各自的研究小组独立地证明了:针对羧酸酯水解的过渡态类似物产生的抗体,能催化相应的羧酸酯和碳酸酯的水解反应。
1986年美国《Science》杂志同时发表了他们的发现,并将这类具有催化能力的免疫球蛋白称为抗体酶或催化抗体。
抗体有极高的亲和力,解离常数在10 ~10 mol/L,这与酶相似,但无催化活力。
酶的催化机制在于它能结合底物产生过渡态,降低能垒,改变化学反应的速度。
抗体酶同时具备了抗体和酶的特征,应用前景十分广阔。
[5]
二、抗体酶的应用
(一)在有机化学领域的应用[5]
目前,已成功筛选出可催化6种类型酶促反应和几十种化学反应的抗体酶,可催化许多困难和能量不利的反应.催化类型包括底物异构化反应、酯水解、酰胺水解、酰基转移、Claisen重排反应、光诱导反应、氧化还原、金属螯合、环化反应等,抗体酶还可以作为手性助剂控制光加成反应产物的立体化学,用于手性化合物的拆分,还可用于探索化学反应机制.
(二)在医学领域的应用[7]
利用抗体酶催化药物在体内的还原,有利于机体对药物的吸收,并降低药品的毒副作用;将抗体酶技术和蛋白质融合技术结合在一起,设计出既有催化功能又有组织特异性的嵌合抗体,用于切割恶性肿瘤;[7]将抗体酶直接作为药物,以治疗酶缺陷症患者。
(三)在戒毒领域的应用[8]
抗体酶可以拮抗可卡因等麻醉剂的成瘾性,使可卡因失去刺激功能,以帮助瘾君子戒除毒瘾.抗体酶还可以水解清除血液中的毒素,如分解可卡因、有机磷毒剂等.
三、抗体酶的产生途径和方法
(一)直接引入天然或合成的催化基团[9]
直接引入天然或合成的催化基团有两种方法,分别是化学诱变法和蛋白质工程技术,化学诱变法是将合成或天然具有催化活性的基团通过化学修饰法引人到抗体分子中。
蛋白质工程技术则是通过蛋白质工程技术使抗体结合部位的氨基酸残基产生定向改变,既
可直接产生酶活性,也可对初步具有酶活性的抗体进行进一步改造,构建高活性抗体。
(二)基因工程技术
由免疫学可知,对独特的分子抗原,动物可有5~1万个不同的B细胞产生抗体,而通过细胞融合产生的单克隆抗体一般只有上百个。
因此,重组抗体分子在细菌E.coli中的表达,可提供抗体库。
基因工程抗体库得到的抗体数量比免疫技术得到的抗体要高几个数量级,但该方法中筛选抗体的技术还需进一步完善。
四、菌种选育及培养基的制备[10]
(一)常见菌种
所有的微生物在一定条件下都能合成多种多样的酶。
但并不是所有的都能够用于酶的生产。
一般来说,酶的生产的细胞必须具备的条件是:产量高、容易培养和管理、产酶稳定性好、利于酶的分离纯化、安全可靠、无毒性。
1.大肠杆菌
大肠杆菌可以用于生产多种酶,其生产的酶属于胞内酶,需要经过细胞破碎才能分离得到。
2.枯草芽孢杆菌
枯草芽孢杆菌是应用最广泛的产酶微生物,生产的蛋白酶为胞外酶,而碱性磷酸酶存在于细胞间质之中。
3.霉菌
霉菌有曲霉、青霉、木霉、根霉、毛霉、链霉等,其中,可用于生产蛋白酶的有根霉、毛霉、红曲霉、链霉,它们通过诱导或改造后,给予一定条件下可用于生产抗体酶。
(二)培养基
1.碳源
大多数产酶微生物采用淀粉或其水解产物,如糊精、淀粉水解糖、麦芽糖、葡萄糖等为碳源。
2.氮源
氮源可分为两大类,有机氮和无机氮两大类,有机氮是各类蛋白质及其水解产物,如酪蛋白、豆饼粉、花生冰粉、蛋白胨、酵母膏、牛肉膏、蛋白水解液、氨基酸等,无
机蛋白是各种含氮的无机化合物,如氨水、硫酸铵、磷酸铵、硝酸铵、硝酸钾、硝酸钠等铵盐和硝酸盐。
3. 无机盐
无机盐可分为两大类,分别为大量元素和微量元素,大量元素有:磷、硫、钾、钙、钠、镁、氯等。
微量元素有:铜、锰、锌、钼、钴等。
五、生产工艺流程
六、发酵工艺控制研究[11]
(一)PH 值的调节控制
(二)温度的调节控制
(三)溶解氧的调节控制
(四)泡沫的控制和消除
七、产品的分离与提纯
(一)细胞的破碎
当生产的抗体酶为胞内酶时,则要用细胞破碎的方法,有机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法、酶促破碎法。
(二)酶的提取
用适当溶剂处理含酶原料,使酶充分溶解到溶剂中。
为了提高酶的稳定性,以免引起酶的变性失活可适当加入某些保护剂,如酶作用的底物、辅酶、某些抗氧化剂等。
(三)沉淀分离
沉淀分离是通过改变某些条件或添加某种物质,使酶在溶液中溶解度低,从溶液中沉淀析出,而与其他溶质分离的技术过程。
该方法有多种,如盐析沉淀法、等电点沉淀法、有机溶质沉淀法、复合沉淀法、选择性变性沉淀法等。
(四)离心分离
借助离心机旋转所产生的离心力,使大小、密度不同的物质分离出来。
根据分离物质的特性,应选择适当的离心机、离心方法和离心条件。
总结
目前,抗体酶研制和应用的许多历程还不清楚,从而无法设计过渡态稳定类似物。
而在反应历程中,抗体酶的方法又将在其中发挥重要作用,可以通过构制预期的抗体酶来验证反应历程,使理论上的历程更接近实际。
参考文献
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[10]郭勇等.酶的生产与应用 [J] 北京化学工业出版社 2003年
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