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PCR仪校验规程
PCR仪校验规程
1.目的：
确保本仪器的功能和运行正常，检测数据正确，特制定本规程。
2.技术指标
加热范围：可调式热盖，控制温度范围从30℃~110℃。
温度精度：0.1℃
热均一性：15秒内温度均一性0.3℃。
升温、降温速度：最快升温速度4℃/秒，最快冷却速度3.0℃/秒。
电压：100～240V
频率：50～60Hz/相
功率：250W
存储量：程序最多可有1000个，每个最多99步，总步骤可达1500步。
3.自校步骤
3.1打开电源开关，电源指示灯亮，仪器自校。
3.2进入控制面板，利用各种操作键编制程序。
3.3放入加好样品的Eppendorf管，关好热盖，启动程序。
3.4待程序运行结束后，取出Eppendorf管，将产物进行电泳，并与标准Marker 进行比较，观察其是否与预期设计的片段大小相符。
4.结果判定
将自校结果与上述各项技术指标进行比对，如二者相符，则仪器检定合格，可以正常使用；否则应及时与厂家联系维修。
5.校验周期
一年。
6.参考文件
JJF 1071国家计量校准规范编写规则
JJF 1001 通用计量术语及定义
GBT/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定7.记录表格
《测试设备校验记录表》。
link appraisement陕西中检计量测试技术有限公司图1 内部结构示意图CHINA SCIENCE AND TECHNOLOGY INFORMATION May.2021·中国科技信息2021年第10期10万～30万◎室或样品池中孔温度进行测量、在装有反映缓冲液的PCR管中安置温度传感器用于对反应缓冲液温度进行测量，是PCR仪现有的两种主要校准方法。
前者能将加热室或样品池中各点温度、均匀度直接获取，然而却无法将PCR管内反应体系温度反映；后者能获取可将PCR反应中各阶段温度更精确、真实反映的温度参数，然而PCR管质量却会对其构成巨大影响。
综合来看，采用后者展开测量，相对而言更加合理、科学。
PCR仪温度校准项目稳定的温度循环，是PCR得以成功实现的基础条件之一。
温度准确性、升降速度及温场均匀性和最大超调温度等温度控制的动、稳态特性，会对PCR扩增结果的准确性构成严重影响，温度准确性作为PCR仪关键性能指标之一的温度准确性，如果处于较低水平会引起非特异性扩增的情况，更有甚者会导致扩增结果出错，构成假阴性和假阳性。
现有PCR仪性能主要指标中，有关准确度方面的指标多以±0.5℃为主，个别PCR仪性能较好，能实现±0.3℃的温度准确度。
所以，有必要测试 PCR仪控温准确度。
在计算校准实验平均温度时，可采用公式：n ttnii∑==1，式中ti代表各个测量点实际温度值；i代表检测中使用的温度探头序号；n代表检测中使用的温度探头数量。
温场均匀性因PCR仪加热器难以均匀加热的缘故，PCR仪模块上各孔间会有适量温差存在，进而影响试验结果。
PCR仪边中间区域温度通常高于边缘点，因此PCR仪性能指标之一的均匀性也很重要，普遍规定在±0.5℃，个别性能较好的 PCR仪能实现±0.3℃的温度均匀度。
校准试验中，挑选16个孔板中的特殊反应位置用于温度测量，能将孔板温度均匀性获取。
人民医院基因扩增实验室ABI7500实时荧光定量PCR仪操作、维护及校准操作规程1 ABI7500实时荧光定量PCR仪概述7500型荧光定量PCR仪是特异性靶基因检测与定量的一体化平台。
7500型将PCR热循环，荧光检测和各种应用分析软件结合在一起，可实时定量观察PCR每一循环各反应管中PCR扩增产物的情况。
PCR实验结束后即刻得到定量结果，无需凝胶电泳分析，无需纯化PCR产物，无需进行任何实验操作。
7500型实时荧光定量PCR仪具有节省时间，灵敏度高，准确性好和避免产物污染等优点。
2 主要技术参数样品孔数：96孔样品基座，温度范围：4.0-99.9℃温度显示：经计算机计算的实际样品温度，精确到0.1℃加热冷却速度：平均温度变化速度1℃/秒温度准确性：正负0.25℃，35－100℃范围升降温重现性：任意温度达到时间误差小于5秒3 操作说明3.1 实验程序运行：3.1.1 首先打开电脑，进入操作系统后，打开7500仪器电源；3.1.2 双击桌面上的7500快捷方式，进入以下界面：3.1.3 点击，进入以下操作界面，按照默认设置，直接点击“完成”（Finish）：3.1.4 在96孔板中选择所放置样本对应的区域，如下图：3.1.5 点击按钮，在弹出的对话框中选择FAM-TAMRA荧光-淬灭基团，点击“Add To Plate Document”：3.1.6 点击按钮，如图所示，在弹出的对话框中勾选FAM荧光，内参荧光选择，点击“Close”：3.1.7 在选项下，逐个双击所选样本，设置样本类型和标准点定量值：3.1.8 点击选项，按照试剂盒说明书设置相应的扩增程序：3.1.9 点击按钮，为使用结果文件设定保存路径和名称。
3.1.10 点击“Start”开始运行扩增程序。
3.2 实验结果分析：3.2.1 点击按钮，打开使用结果文件；3.2.2 点击选项，进入结果分析操作界面。
点击下面的选项，双击纵坐标，选择Linear项，调整为线性坐标，点击“OK”确定：3.2.3 选取所有样本，手动设定阈值为最大荧光值的5%左右为宜。
xxxxxx 所作业指导书仪器设备操作规程YTIM -2018 PCR(基因扩增)仪监测系统2018-11-15批准 2018-11-15实施PCR(基因扩增)仪监测系统操作规范一、简介该系统是由笔记本电脑、数据接收处理器、多通道温度探头、数据连接线、系统软件组成。
用于测试定性PCR仪加热模块的温度准确性。
二、主要技术指标1）热敏电阻湿度传感器：U=0.1℃,k=22）热敏电阻最快响应速率：3.0℃/s,三、使用条件温度（15±35）℃，相对湿度30%～85%四、操作程序1）操作准备1 确认系统主要标准在有效期内2 确认系统各部件已经按照说明书正确连接2）开机1 打开主机电源管2 打开笔记本电脑、将多通道温度探头放入被校PCR仪的加热模块3）被校信息录入1 进入设备管理对话框点击菜单栏<Device>→<Add>进入仪器添加对话框2 输入仪器的厂家、型号、编号等信息3 选择仪器的校准周期。
4 再次确认仪器的各项信息后点击<Finish>完成被校仪器信息录入。
4）检测1 点击开始模块进行软件自检，自己完毕，连接正常后，进行下一步。
2 选择已录入的被校仪器。
3 选择检测用的程序。
4 待被校PCR启动程序之后，立即点击测试系统开始模块的<Finish>按钮，进行数据采集。
5检定完毕后，自动退出测试程序，自动进行数据保存。
5）结果处理1 双击所选记录或者单击菜单栏<view>→<results>弹出简单结果分析对话框，单击<preview>预览报告，单击<print>打印报告。
2单击菜单栏<view>→<suface>弹出监测数据实时回放及模拟模块热成像图。
五、稳定性检查温度传感器和系统主机每12个月校准一次。
本操作规程由xx室编写审核：批准：。
pcr仪校准标准
一、目的
本标准规定了PCR仪的校准方法、校准项目和校准周期，以确保PCR仪的准确性和可靠性。
二、适用范围
本标准适用于各类PCR仪的校准，包括实时荧光定量PCR仪、普通PCR仪等。
三、校准方法
1.实时荧光定量PCR仪校准方法
（1）选定标准品：选择已知拷贝数的标准品，用于校准PCR仪的荧光定量检测系统。
（2）设置仪器参数：按照仪器说明书设定PCR仪的参数，包括退火温度、延伸时间、循环数等。
（3）运行PCR反应：将标准品DNA加入到PCR反应液中，按照设定的参数进行PCR反应。
（4）数据分析：记录PCR仪生成的荧光信号数据，使用标准曲线法计算标准品的拷贝数。
将计算结果与已知拷贝数进行比较，评估仪器的准确性。
2.普通PCR仪校准方法
（1）温度校准：使用温度计测量PCR仪的加热块温度，观察是否与设定温度一致。
可以参考仪器说明书中的温度校准表进行校准。
（2）灵敏度校准：使用已知浓度的模板DNA进行PCR反应，观
察是否能够正确检测到目标基因。
可以参考仪器说明书中的灵敏度校准表进行校准。
四、校准项目
1.实时荧光定量PCR仪校准项目：荧光信号稳定性、荧光信号准确性、拷贝数计算准确性等。
2.普通PCR仪校准项目：加热块温度准确性、灵敏度检测准确性等。
五、校准周期
1.实时荧光定量PCR仪校准周期：建议每季度进行一次校准。
2.普通PCR仪校准周期：建议每年进行一次校准。
基因扩增仪PCR仪测温系统校准规范.docJJF ×××× ─ 201×基因扩增仪（PCR仪）测温系统校准规范1范围本规范适用于 48 孔或 96 孔孔板结构的测量范围为（ 0～ 120 ）℃的多通道基因扩增仪（PCR 仪）测温系统或者单通道基因扩增仪（PCR 仪）测温仪的的校准，其他孔板结构和温度范围的基因扩增仪（ PCR 仪）测温系统的温度校准可以参考本规范。
2引用文件本规范引用下列文件：JJF 1071-2000 《国家计量校准规范编写规则》JJF 1007-2007 《温度计量名词术语及定义》JJF 1527-2015 《聚合酶链反应分析仪校准规范》YY/T 1173-2010 《聚合酶链反应分析仪》ITS-90 1990 年国际温标凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本规范；凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本规范。
3术语3.1 基因扩增仪（ PCR 仪），即聚合酶链反应分析仪polymerase chain reaction analyzer基于 PCR（聚合酶链反应）技术原理，模拟 DNA 或RNA 的复制过程，在模板、引物、校验和没等存在的条件下，特异扩增已知序列，对其进行检测分析的仪器设备。
[YY/T 1173-2010 3.2]3.2 基因扩增仪（PCR 仪）测温系统temperature measuring system for Polymerasechain reaction analyzer用于基因扩增仪（ PCR 仪）的专用温度校准装置。
3.3 温度校准专用等温块与配件isothermal block and accessory for temperaturecalibration与标准恒温槽配套使用并提供基因扩增仪测（PCR 仪）温系统温度校准的洁净温场的辅助装置。
3.4 温度校准专用等温块测试孔testing hole for temperature calibration模拟基因扩增仪控温块内的结构，提供基因扩增仪（PCR 仪）测温系统探头布放插孔的专用等温块。
1、温度校准
温度控制是PCR仪的核心功能之一，必须确保加热和冷却均匀、准确。
通常使用温度计或红外线测温仪来检查PCR仪内部不同位置的温度是否稳定，并与设置温度进行比较，以确保其精度和准确性。
2、时间校准
时间控制是PCR过程中的另一个重要因素。
在PCR过程中，各个步骤的时间应该严格控制，以确保反应的准确性。
通过使用标准计时器或电子计时器，在不同时间段内测试PCR仪的时间精度和准确性。
3、光强度校准
PCR仪的光强度检测系统需要被校准以确保准确读取荧光信号。
为此，校准PCR仪前需要检查光源和检测器是否正常工作。
然后，使用标准荧光素材，如SYBR Green等，对PCR仪进行校准，以确保光强度检测系统的精度和准确性。
4、热平衡校准
热平衡是指PCR仪内部所有区域的温度达到稳定状态。
为了保证PCR反应的可靠性和准确性，必须确保PCR仪的各个区域在温度上达到平衡。
通常使用热敏电阻或热电偶来检查PCR仪不同位置的温度是否均匀，并进行调整以确保热平衡。
5、压力校准
PCR反应管需要在PCR仪中得到牢固的支撑，以保持其位置不变，并避免在高速旋转时移位。
因此，压力校准也是PCR仪校准过程中非常重要的一步。
通过检查PCR反应管架的压力和精度，确保PCR反应管可以正确地放置并安全运行。
PCR仪校验规程
1.目的：
确保本仪器的功能和运行正常，检测数据正确，特制定本规程。
2.技术指标
加热范围：可调式热盖，控制温度范围从30℃~110℃。
温度精度：0.1℃
热均一性：15秒内温度均一性0.3℃。
升温、降温速度：最快升温速度4℃/秒，最快冷却速度3.0℃/秒。
电压：100～240V
频率：50～60Hz/相
功率：250W
存储量：程序最多可有1000个，每个最多99步，总步骤可达1500步。
3.自校步骤
3.1打开电源开关，电源指示灯亮，仪器自校。
3.2进入控制面板，利用各种操作键编制程序。
3.3放入加好样品的Eppendorf管，关好热盖，启动程序。
3.4待程序运行结束后，取出Eppendorf管，将产物进行电泳，并与标准Marker 进行比较，观察其是否与预期设计的片段大小相符。
4.结果判定
将自校结果与上述各项技术指标进行比对，如二者相符，则仪器检定合格，可以正常使用；否则应及时与厂家联系维修。
5.校验周期
一年。
6.参考文件
JJF 1071国家计量校准规范编写规则
JJF 1001 通用计量术语及定义
GBT/T 8170 数值修约规则与极限数值的表示和判定7.记录表格
《测试设备校验记录表》。
PCR 仪温度示值误差校准结果的不确定度评定
1 被测对象
用于模块加热的聚合酶链反应（PCR ）分析仪，温度示值误差的校准结果，用PCR 仪监测系统进行校准。
2 测量模型
采集仪测量误差的数学模型为 c s d T T T -=∆ 式中：
d T ∆——温控装置工作区域内温度示值误差，℃；
S T ——被校准PCR 仪温控装置工作区域的设定温度值，℃；
c T ——所有测温传感器测量值的平均值，℃。
3 灵敏系数
S T 的灵敏系数： 1/1=∂∆∂=S d T T c
c T 的灵敏系数： c
d T T c ∂∆∂=/2=-1
4 不确定度来源
设定温度S T 为输入值，不产生不确定度，所以不确定度的来源只有测温传感器的测量值c T 。
（1） 测量重复性引入的不确定度 （2） 标准温度传感器引入的不确定度 5 不确定度分量的计算
（1）测量重复性引入的不确定度)(1i T u
（2）标准温度传感器引入的不确定度
标准温度传感器校准不确定度由标准温度传感器校准证书得到。
05.02
10.0)(2===
k u T u c
s ℃ 6 标准不确定度一览表
7 合成不确定度
合成不确定度用公式)()()(2
22
1s i T u T u u +=∆计算得到，结果见表3 8 扩展不确定度
c u k U ⨯=，取2=k ，则测量结果扩展不确定度见表3。
pcr温度校准标准1. 简介PCR（聚合酶链式反应）是一种广泛应用于生物医学研究和临床诊断的技术，它通过扩增DNA片段来检测和定量目标DNA序列。
PCR反应的准确性和可重复性是保证实验结果可靠性的关键因素之一。
因此，PCR温度校准标准的制定和实施对于确保PCR实验数据的准确性至关重要。
2. PCR温度校准标准的背景2.1 PCR反应中温度参数的重要性在PCR反应中，不同温度阶段（变性、退火、延伸）对于扩增目标序列起着至关重要的作用。
不同目标序列需要不同的退火温度，而延伸阶段则需要适当控制延伸时间。
因此，正确控制PCR反应中各个阶段的温度参数对于扩增特定目标序列非常关键。
2.2 PCR仪器中温度控制系统现代PCR仪器通常配备了高精确度、高稳定性和快速响应速度的热电偶或光学传感器来监测和调节反应体系中各个阶段所需的精确温度。
然而，由于PCR反应过程中温度的变化，仪器中的温度控制系统可能存在一定的误差。
因此，制定PCR温度校准标准以确保反应体系中真实的温度是非常必要的。
3. PCR温度校准标准的制定3.1 标准样品选择PCR反应体系中常用的标准样品是由特定序列构建而成的DNA片段。
这些片段具有已知序列和长度，并且已经在许多实验室和研究领域进行了广泛应用。
选择合适的标准样品对于确保PCR反应体系中真实温度测量结果非常重要。
3.2 标准样品测量在制定PCR温度校准标准时，必须对所选标准样品进行精确测量。
这可以通过使用高精密仪器和合适的测量方法来实现。
例如，可以使用高分辨率热电偶或光学传感器来监测和记录PCR反应体系中不同阶段所需的精确温度。
3.3 数据分析与处理通过对多次重复实验数据进行统计分析和处理，可以得到更加可靠和可重复性结果。
这些数据可以用于建立PCR温度校准曲线和计算温度误差范围。
根据这些数据，可以制定PCR温度校准标准，以确保实验数据的准确性和可重复性。
4. PCR温度校准标准的实施4.1 标定PCR仪器一旦制定了PCR温度校准标准，就可以使用标定样品来验证和调整PCR 仪器的温度控制系统。
《基因扩增仪（PCR仪）测温系统校准规范》编制说明《基因扩增仪（PCR仪）测温系统校准规范》起草小组2017年02月目录一、任务来源二、制定目的和意义三、基因扩增仪（PCR仪）测温系统生产和使用情况四、规范起草的技术依据五、制定规范的主要内容六、总结《基因扩增仪（PCR仪）测温系统校准规范》编制说明一、任务来源根据国家质量监督检验检疫总局国质检量函[2014]79号文件《2016年国家计量技术法规文件制定/修订计划》，2016年5月，全国温度计量技术委员会向上海市计量测试技术研究院等单位下达制定《基因扩增仪（PCR仪）测温系统校准规范》任务，完成期限2017年5月。
二、制定目的和意义基因扩增仪也称聚合酶链式反应仪（以下简称PCR仪），是一种使DNA聚合酶在指定的温度场条件下发生基因复制的仪器。
随着生物技术不断发展，PCR 仪的校准需求也随之呈现几何级数增长。
图1 基因扩增仪（PCR仪）测温系统基因扩增仪测温系统（如图1）是一种外观新型，结构特殊的高精度温度计量器具，主要用作基因扩增仪温度性能校准的标准器，它作为JJF1527-2015《聚合酶链式反应分析仪校准规范》规定的温度计量标准器，国内外技术机构已经广泛使用其开展基因扩增仪的温度校准，目前国内基因扩增仪（PCR仪）测温系统主要用户集中在各大计量技术机构，PCR仪生产厂商，各类生物实验室，医学检验所。
作为PCR仪的测温标准器，这些用户对基因扩增仪测温系统的温度量值溯源需求是显而易见的，而基因扩增仪（PCR仪）测温系统本身的量值溯源问题却始终未解决，国内外尚无针对该类测温系统的校准方法。
基因扩增仪测温系统校准方法的研究与制订配合了JJF1527-2015《聚合酶链式反应仪校准规范》和YY/T1173-2010 《聚合酶链反应分析仪》等技术法规的颁布实施，更好的规范了国内基因扩增仪的使用，保障基因扩增仪温度参数评价的正确性。
可以满足国内PCR仪的生产商和用户的质量保障需求；填补了国内此测温领域的技术空白；作为生物安全、医疗安全等领域计量溯源技术研究的重要一环也是《计量发展规划（2013-2020年）》的计量科技基础研究重点项目。
三、基因扩增仪（PCR仪）测温系统生产和使用情况3.1基因扩增仪（PCR仪）（以下简称PCR仪）概述Polymerase Chain Reaction (PCR)，中文译为聚合酶链式反应，是一种DNA 的快速扩增技术，其扩增效率之高就象核裂变的“链式反应”那样。
PCR技术通过两个短的称为引物的DNA小片段和一种耐热的酶的作用，可以在3个小时内把特定的DNA量提高1000万倍。
聚合酶链式反应分析仪是完成聚合酶链式反应的必备仪器，是微量核酸测量必需的主要设备之一，已经广泛普及到生物学相关的各个实验室，成为了生命科学研究、临床检验、法医检验、血液制品检验、食品微生物检验、动植物物种研究与检验等实验室的必备仪器设备之一。
特别是随着定量PCR仪开发和发展，聚合酶链式反应分析仪在临床检验、检验检疫、法医鉴定、进出口商品检验等领域得到了广泛应用，在生命科学领域、食品科学领域、药物研发和生物技术产品开发领域、以及高等院校的检测分析实验室和研究机构中发挥着重要作用。
目前市场上PCR仪的种类总体来说可以分为两大类：定性基因扩增仪（图1-1）和实时荧光定量PCR仪（图1-2）。
定性基因扩增仪又衍生出带梯度PCR 功能的梯度PCR仪、和带原位扩增功能的原位PCR仪等等。
无论PCR仪的外形结构和功能产生如何变化，其使用宗旨还是通过热循环的温度变化控制实现DNA的变性和复制[6]。
目前，针对基因扩增仪（PCR仪）的校准规范JJF1527-2015《聚合酶链式反应分析仪校准规范》已于2015年正式颁布实施。
图1-1 基因扩增仪图1-2 实时荧光定量PCR仪3.2基因扩增仪（PCR仪）测温系统概述基因扩增仪（PCR仪）测温系统，是一种用于基因扩增仪（PCR仪）实时温度校准的传感系统。
通常由多通道测温传感器（测温模块），数据采集模块，数据线，显示器（计算机）组成。
图1基因扩增仪（PCR仪）测温系统示意图图2基因扩增仪（PCR仪）测温系统实物图JJF1527-2015聚合酶链式反应仪校准规范中7.2.1温度校准标准装置规定的基因扩增仪测温系统的技术要求如下：测温范围（0~120）℃，测温准确度优于±0.10℃。
目前，基因扩增仪测温系统分为有线系统和无线系统两种。
根据PCR仪的不同结构，PCR仪测温系统中的温度传感器数量可能是1，8，9，15，16，96等。
有线系统测温准确度通常能达到±（0.10~0.15）℃；无线系统测温准确度通常能达到±0.20℃。
3.3基因扩增仪（PCR仪）测温系统的主要特性3.3.1基因扩增仪（PCR仪）测温系统特点和应用1）通常由若干个（通常为16个）精密温度探头（长度为1.5cm左右）、数据采集分析模块,测试校准软件组成。
2）测温准确度高，热响应速度快；3）传感器结构特殊。
作为基因扩增仪的标准器，针对不同构造的基因扩增仪，测温系统温度传感器数量和结构也相应变化。
3.3.2基因扩增仪（PCR仪）测温系统产品主要性能指标基因扩增仪（PCR仪）测温系统主要计量性能包括：测温范围、温度最大允许误差、温度分辨力。
3.3.2.1基因扩增仪（PCR仪）测温系统的测温范围通常覆盖（30~100）℃，按照JJF1527-2015的技术要求为（0~120）℃。
3.3.2.2基因扩增仪（PCR仪）测温系统的温度最大允许误差指基因扩增仪（PCR 仪）测温系统的多路温度传感器在规定的测温范围内所能达到的允许误差极限。
3.3.2.3基因扩增仪（PCR仪）测温系统的温度分辨力：按照JJF1527的测温仪技术要求规定基因扩增仪（PCR仪）测温系统的测温不确定度0.10，所以系统的温度分辨力应不小于0.01℃。
基因扩增仪（PCR仪）测温系统产品主要性能指标见表1所示表1-2 基因扩增仪（PCR仪）的温度校准装置主要性能指标四、规范制定的主要技术依据及原则本规范依据JJF1071-2010《国家计量校准规范编写规则》编写，包括范围、引用文件、术语、概述、计量特性、校准条件、校准项目和校准方法、校准结果的表达等内容。
同时参考了JJF 1007-2007《温度计量名词术语及定义》、JJF1001-2011《通用计量术语及定义》和JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》4.1架构架构上按照引言、范围、引用文献、术语和计量单位、概述、计量特性、通用技术要求、校准条件、校准项目和校准方法、校准结果10个部分制定《基因扩增仪测温系统校准规范》。
4.2术语与计量单位的选择术语和计量单位、计量特性、通用技术要求与校准项目和校准方法、原则上与[1] SN/T 2102.1—2008/ISO 22174:2005 食源性病原体PCR检测技术规范第1部分：通用要求及定义。
[2] JJF1527-2015聚合酶链反应分析仪校准规范[3] YY/T1173-2010 聚合酶链反应分析仪。
[4] JJF1030-1998恒温槽技术性能测试规范。
保持一致。
3、计量特性确定原则通过在统计分析在一定数量、具有代表性的不同型号、不同厂家生产的基因扩增仪测温系统的实验数据，根据基因扩增仪测温系统在实际应用中的主要功能和性能指标，考虑其具体应用的要求，形成本规范确定的计量特性。
4、温度校准设备选择的原则计量特性确定的实验研究过程中使用了一等标准铂电阻温度标准装置及配套基因扩增仪专用等温块。
基因扩增仪测温系统作为基因扩增仪的温度量值的标准器，溯源至一等标准铂电阻温度计标准装置。
五、制定规范的主要内容1范围本规范适用于测量范围为（0～120）℃的基因扩增仪测温系统的校准，其他温度范围的分布式光纤温度计的校准可以参考本规范。
目前大部分基因扩增仪（PCR仪）测温系统可以覆盖此范围，校准机构可以根据顾客要求，参考本规范进行校准。
2 引用文件本规范引用下列文件：GB/T 2421 1-2008《电工电子产品环境试验概述和指南》JJF 1527-2015《聚合酶链式反应分析仪校准规范》YY/T1173-2010《聚合酶链反应分析仪》JJG 160-2007《标准铂电阻温度计检定规程》本规范引用了《电工电子产品环境实验概述和指南》中对电子产品环境温度和湿度的要求，采用了标准环境条件。
在标准器温度计的计算，引用了JJG 160-2007《标准铂电阻温度计检定规程》中温度测量和计算的要求。
目前尚未检索到相关国家标准，国际建议，也没有比较完整和全面的行业标准、规范。
3 术语本规范参考有关文献制定6项名词术语，未采用光纤行业中普遍使用的精度、分辨率等术语定义。
温度计量领域所使用的分辨力术语有较大区别。
空间分辨力和定位误差属于长度计量领域。
4 概述简要说明分布式光纤温度计的工作原理，并附有一张工作原理图。
5 计量特性针对温度计量器具应具备的主要技术指标，以及基因扩增仪（PCR仪）测温系统的主要特性，考虑到计量技术机构现有技术条件，本规范确定了温度准确度、测温范围、温度分辨力3项指标。
6 校准条件校准环境指标采用《电工电子产品环境试验概述和指南》GB／T 2421 1-2008中规定的标准环境条件，“环境温度：15℃～35℃；环境湿度：25～75 %RH”校准设备基本采用现有计量实验室设备，温度源可以使用开口空间足够大的恒温槽并配套基因扩增仪专用等温块来模拟基因扩增仪的正常温度工况，并保持基因扩增仪测温系统传感器洁净无污染。
7 校准项目和校准方法本规范确定的校准项目包括温度示值误差、测温范围、温度分辨力等3项指标。
7.1 温度示值误差温度测量误差按照JJF1527-2015对基因扩增仪温度校准要求选取温度点，一般选择30℃、50℃、60℃、70℃、90℃、95℃，通过每个温度点的4次测量示值误差，取平均值，作为在该温度点处的示值误差。
7.2温度测量范围通过上述温度示值误差的测量，可以确定满足最大允许误差要求的温度范围，即温度测量范围。
7.3温度分辨力将恒温槽与等温块一起设定在90℃，基因扩增仪测温系统放入恒温槽中的基因扩增仪校准专用等温块，恒温30min以上，测量基因扩增仪测温系统显示稳定在90℃状态下的示值t1，记录下此时标准铂电阻温度计示值T1℃。
根据被校准基因扩增仪测温系统标称显示的温度分辨力D1，缓慢调整恒温槽的设定温度，直至被校基因扩增仪测温系统显示值稳定在（t1+D1）℃，恒温30min以上，记录下此时标准铂电阻温度计示值T2℃。
温度分辨力（率）σ应按σ=T2-T1计算六、《基因扩增仪测温系统（PCR仪）校准规范》制定过程2014年11月由上海市计量测试技术研究院向全国温度计量技术委员会申报，归口全国温度计量技术委员会，上海市计量测试技术研究院承担，中国计量科学技术研究院、辽宁省计量技术研究院，江苏省计量测试技术研究院，广东省计量技术研究院，上海宏石医疗科技有限公司参加起草，2016年5月项目正式启动。
