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胚胎工程及生物技术的安全性和伦理问题1．受精作用和初期胚胎发育过程(1)受精条件：精子一定经过①获能过程，关于啮齿类动物的精子，一般采纳培育法。
卵母细胞一定发育至 MⅡ中期才能参加受精过程。
(2)受精过程：第一发生顶体反响开释顶体酶，而后发生透明带反响和卵细胞膜反响阻挡多精入卵。
(3)初期胚胎发育过程：③④过程的分裂方式是有丝分裂。
细胞开始发生疏化的期间是囊胚期，该期间分化形成内细胞团和滋润层。
(4)初期胚胎培育：发育培育液中的“两素”“两酸”分别指维生素、激素，氨基酸、核苷酸。
2．胚胎移植、胚胎切割和胚胎干细胞的内在联系3．基因工程的三大安全问题(1)食品安全方面：可能合成毒蛋白、出现新的①过敏原、改变食品的营养成分等。
(2)生物安全方面：有可能造成“②入侵的外来物种”，危害生物的③生计。
(3)环境安全方面：有可能打破④自然物种的原有界线，改变生态系统的能量流动和物质循环；造成二次污染或产生危害动植物和人类的病原微生物。
4．试管婴儿和设计试管婴儿的异同点(1)设计试管婴儿比试管婴儿多的操作是遗传学诊疗，此中解决不孕夫妻生育问题的是试管婴儿技术，治疗白血病的是设计试管婴儿技术。
(2)二者都是体外受精，并进行体外初期胚胎培育，都要经过胚胎移植。
胚胎工程技术及应用1．荷斯坦奶牛是世界上产奶量最高的奶牛品种之一。
某良种企业引进纯种荷斯坦奶牛，并用以下门路繁育出荷斯坦良种奶牛集体。
请回答以下问题。
(1) 请把上边空格的内容增补完好：①________激素；②________办理；③ ________。
(2) 该企业为了在短时间内获取更多的良种奶牛，经常在进行③过程以前采纳________技术进行操作。
若进行操作的是囊胚阶段的胚胎，要注意的是________________ 。
(3) 若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后辈基因型同样吗？________( 填“一定不同样”“可能不同样”或“必定同样”) 。
高考生物复习导学案第2讲胚胎工程、生物技术的安全性和伦理问题、生态工程(聚焦新课标：6.1转基因产品的安全性引发社会的广泛关注；6.2中国禁止生殖性克隆人；6.3世界范围内应全面禁止生物武器；6.4人类活动对生态系统的动态平衡有着深远的影响，依据生态学原理保护环境是人类生存和可持续发展的必要条件)1[纵引横连建网络]提醒：特设长句作答题，训练文字表达能力2[边角扫描全面清]1．胚胎工程的相关判断(1)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其同期发情()(2)绝大多数精卵细胞的识别具有物种特异性()(3)卵裂球细胞的体积随分裂次数的增加而不断增大()(4)受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植()(5)培养早期胚胎的培养液中含维生素、激素等多种能源物质()(6)早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清()(7)在胚胎移植时，对供体和受体母牛都要进行相同激素处理()(8)胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割()(9)利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎()(10)胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点()2．生物技术的安全性和伦理问题的判断(1)转基因生物扩散到种植区之外不可能造成“基因污染”()(2)转基因生物不改变生物原有的分类地位、减少了农药使用、保护了农田土壤环境()(3)设计试管婴儿不需要对胚胎进行基因检测()(4)国际上大多数国家都在转基因食品标签上警示性注明可能的危害()(5)种植转基因作物应与传统农业种植区隔离()(6)转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中()(7)种植转基因植物有可能因基因扩散而影响野生植物的基因多样性()(8)转基因植物的目的基因可能转入根际微生物()3．生态工程的判断(1)单一人工林比天然混合林稳定性低，易爆发虫害——协调与平衡原理()(2)草原确定合理载畜量，不能过度放牧——协调与平衡原理()(3)引种考虑适应环境——物种多样性原理()(4)林业生态工程建设，既考虑种树又考虑生活问题——整体性原理()(5)实施生态工程的目的是为人们提供丰富的生产和生活物质()(6)要实现人与自然的和谐发展，通过生物技术手段，转化淀粉生产可再生能源是最合理的()(7)要实现人与自然的和谐发展，发展生态农业，实现物质和能量的多级利用是最合理的()3[考点突破固考基]1．早期胚胎发育各时期的特点2．胚胎工程的操作流程(1)胚胎移植过程中两次使用激素，第一次常用________对受、供体进行同期发情处理；第二次用________对供体做超数排卵处理。
第39讲胚胎工程与生物技术的安全性与伦理问题[新高考复习目标]1．生命观念：认同胚胎工程建立与开展的意义。
2．科学思维：简述哺乳动物的精子和卵子的发生、受精作用、胚胎发育过程，构建试管动物和胚胎移植的根本操作流程模型。
3．社会责任：试管动物、克隆性治疗和转基因产品的安全性、生物技术中的伦理问题和生物武器对人类的威胁。
授课提示：对应学生用书第283页考点一体内受精和早期胚胎发育1．精子和卵子的发生(1)精子的发生①场所：哺乳动物精子发生的场所是睾丸。
②时期：从初情期开始，直到生殖机能衰退。
③过程(2)卵子的发生①场所：雌性动物的卵巢内。
②时期：在动物胚胎性别分化以后。
③过程2．受精(1)概念：精子和卵子结合形成合子(受精卵)的过程。
(2)场所：雌性动物的输卵管内。
(3)过程3．早期胚胎发育1．教材选修3 P63“讨论2〞：排卵是指卵子从卵泡中排出，还是指卵泡从卵巢中排出？提示：是指卵子从卵泡中排出。
2．教材选修3 P64“侧栏思考题〞：进展体外受精时，将卵母细胞取出后，是否应当将它置于与输卵管中相似的环境，让它进一步成熟？提示：是的。
从卵巢上取出的卵母细胞还没有成熟，尚未完成减数第一次分裂。
应在体外人工模拟输卵管环境进展培养，才能使其成熟，即达到受精前的成熟阶段。
1．精子和卵子的发生都是从初情期开始的。
(×)2．卵子形成过程中，减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续的。
(×)3．判断卵子是否受精的标志是在卵细胞膜和透明带的间隙观察到两个极体。
(√)4．卵裂期细胞的体积随分裂次数增加而不断增大。
(×)5．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加。
(×)6．在胚胎发育过程中，细胞的分化出现在桑椹胚期。
(×)“三大反响〞“两道屏障〞2．明辨体内受精应注意的几个问题(1)精子获能是指精子获得受精“能力〞，而不是获得能量；排卵是指卵子从卵泡中排出，而不是卵泡从卵巢中排出。
第三讲胚胎工程及生物技术的安全性和伦理问题[基础知识·系统化]知识点一体内受精和早期胚胎发育1．精子和卵子的发生2．受精3．早期胚胎发育知识点二体外受精和早期胚胎培养1．体外受精2．胚胎的早期培养1．胚胎移植2．胚胎分割3．胚胎干细胞知识点四生物技术的安全性和伦理问题[基本技能·问题化]1．请据体外受精过程的流程图回答下列问题(1)体外受精的过程主要包括卵母细胞的采集和培养、精子的采集和获能及受精等几个步骤。
(2)采集精子的方法主要有假阴道法、手握法和电刺激法。
获能的方法有培养法和化学诱导法。
(3)体外采集小鼠的卵子常用超数排卵处理法。
2．完善胚胎移植的过程示意图，并填空(1)对供体牛要进行超数排卵处理；对供、受体牛要进行同期发情处理。
(2)排卵是指卵子从卵泡中排出，冲卵是指把供体母牛子宫内的早期胚胎冲洗出来。
(3)动物的早期胚胎一般发育到桑椹胚或囊胚阶段才能进行移植。
(4)若要获得多个遗传物质完全相同的新个体，可对检查合格的胚胎用胚胎分割技术处理，该过程属于无性繁殖或克隆。
3．分析试管婴儿与克隆人的培育过程，回答下列问题Ⅰ.试管婴儿的培育过程：Ⅱ.克隆人的培育过程：(1)试管婴儿技术与克隆技术在技术环节上的主要差异是前者需经过体外受精，后者需用到细胞核移植技术。
(2)试管婴儿技术属于有性生殖，克隆技术属于无性生殖。
(3)在Ⅰ的图示中，①②③是试管婴儿的培育过程，①②④⑤是设计试管婴儿培育的过程。
后者比前者多了胚胎移植前的遗传学诊断过程。
考点一受精与早期胚胎发育1．(2013·天津高考)哺乳动物卵原细胞减数分裂形成成熟卵子的过程，只有在促性腺激素和精子的诱导下才能完成。
下面为某哺乳动物卵子及早期胚胎的形成过程示意图(N表示染色体组)。
据图分析，下列叙述错误的是( )A．次级卵母细胞形成的过程需要激素调节B．细胞Ⅲ只有在精子的作用下才能形成成熟卵子C．Ⅱ、Ⅲ 和Ⅳ细胞分裂后期染色体数目相同D．培育转基因动物应选择细胞Ⅳ作为受体细胞解析：选C 分析题图可知，在促性腺激素的作用下完成减数第一次分裂并产生次级卵母细胞；只有在精子的作用下，次级卵母细胞才能完成减数第二次分裂；Ⅱ为卵原细胞，染色体数目为2N，Ⅲ为次级卵母细胞，在减数第二次分裂后期，着丝点分裂后染色体数为2N，Ⅳ为受精卵，在有丝分裂后期，着丝点分裂，染色体数目加倍为4N，三者在分裂后期染色体数目不同；动物基因工程中常用受精卵作为受体细胞。
考点3 胚胎工程及生物技术的安全性和伦理问题1．把握胚胎工程的操作流程提醒 (1)排卵是指卵子从卵泡中排出。
(2)体外受精注意点：①对象：获能精子和成熟卵子；②条件：获能溶液或专用受精溶液。
(3)区别2种标志：①受精标志：在卵细胞膜和透明带间隙中看到两个极体；②受精完成的标志：雌、雄原核融合成合子。
(4)早期胚胎培养液成分：①2“盐”：无机盐和有机盐；②2“酸”：氨基酸和核苷酸；③2“素”：维生素和激素；④2“液体”：水和血清。
(5)胚胎移植的生理学基础：①供、受体的生理变化相同；②早期胚胎与母体无组织上的联系；③受体对外来胚胎基本上无免疫排斥反应；④供体胚胎的遗传特性不影响孕育过程。
2．理清治疗性克隆和生殖性克隆的区别和联系类型项目 治疗性克隆生殖性克隆目的从胚胎中取出干细胞用于医学研究和治疗用于生育，获得人的复制品区别水平细胞水平个体水平联系都属于无性生殖；产生新个体或新组织，遗传信息相同3.把握试管婴儿和设计试管婴儿的异同点(1)设计试管婴儿比试管婴儿多出的是过程④。
(2)试管婴儿主要是解决不孕夫妇的生育问题；设计试管婴儿用于白血病、贫血症等疾病的治疗。
(3)两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。
4．转基因生物的安全性问题(1)食物安全方面：可能合成毒蛋白、出现新的过敏原、改变食物的营养成分等。
(2)生物安全方面：有可能造成“基因污染”，危害生物的多样性。
(3)环境安全方面：有可能打破物种界限，改变生态系统的能量流动和物质循环；造成二次污染或产生危害动植物和人类的病原微生物。
5．生物技术引发的伦理问题(1)克隆人技术①违反人类伦理道德。
②冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念。
③人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人。
(2)设计试管婴儿①把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重。
②抛弃或杀死配型不合适的多余胚胎，无异于“谋杀”。
(3)基因检测①对个人隐私权提出挑战。
第35讲胚胎工程与生物技术的安全性和伦理问题课程内容核心素养——提考能1.简述动物胚胎发育的基本过程2。
简述胚胎工程的基本技术3。
关注转基因生物产品的安全性4.举例说明生物武器对人类的威胁5.讨论生物技术中的伦理问题科学思维建立试管动物和胚胎移植的基本操作流程模型科学探究探究转基因食品的安全性，讨论是否支持设计试管婴儿社会责任尝试解决生产生活中的生物学问题：试管动物、克隆治疗、转基因生物的安全性等考点一体内受精和早期胚胎发育1。
精子和卵子的发生2。
受精作用3。
早期胚胎发育1。
受精过程中的“三大反应"与防止多精入卵受精的“两道屏障”（1）顶体反应:精子的质膜和顶体外膜发生一系列改变并释放顶体酶的过程即为顶体反应.顶体反应的主要作用是形成精子穿越放射冠的通道，是精子和卵子结合必不可少的条件。
（2）透明带反应：精子触及卵细胞膜的瞬间，会产生阻止后来的精子进入透明带的生理反应，称做透明带反应，它是防止多精入卵受精的第一道屏障。
（3）卵细胞膜反应：精子入卵后,卵细胞膜会立即发生一种生理反应，拒绝其他精子再进入卵内，称为卵细胞膜反应，这是防止多精入卵受精的第二道屏障.2.卵裂期胚胎发育过程中物质和体积变化的规律（1)有机物：胚胎没有和母体建立联系,没有从母体获取有机物，而一直呼吸消耗，有机物总量减少.(2）细胞体积:胚胎总体积不变或略有缩小,但细胞数目增多，所以每个细胞体积减小.（3）细胞中DNA含量：伴随细胞分裂,细胞数目增多，总DNA含量增多，但每个细胞中核DNA含量保持相对稳定。
3.胚胎工程中的一些场所及时期(1）精子发生场所-—睾丸曲细精管;卵子的发生场所—-卵巢;受精场所--输卵管;发育场所——输卵管和子宫。
(2）精子发生时间及特点——初情期后,两次分裂连续进行;卵子发生时间及特点——胚胎期性别分化以后和初情期以后，两次分裂不连续进行。
(3）胚胎发育过程中开始分化的阶段是囊胚期，可以进行胚胎移植或分割的阶段为桑椹胚和囊胚阶段。
考点3 胚胎工程及生物技术的安全性和伦理问题1．把握胚胎工程的操作流程提醒 (1)排卵是指卵子从卵泡中排出。
(2)体外受精注意点：①对象：获能精子和成熟卵子；②条件：获能溶液或专用受精溶液。
(3)区别2种标志：①受精标志：在卵细胞膜和透明带间隙中看到两个极体；②受精完成的标志：雌、雄原核融合成合子。
(4)早期胚胎培养液成分：①2“盐”：无机盐和有机盐；②2“酸”：氨基酸和核苷酸；③2“素”：维生素和激素；④2“液体”：水和血清。
(5)胚胎移植的生理学基础：①供、受体的生理变化相同；②早期胚胎与母体无组织上的联系；③受体对外来胚胎基本上无免疫排斥反应；④供体胚胎的遗传特性不影响孕育过程。
2．理清治疗性克隆和生殖性克隆的区别和联系3.把握试管婴儿和设计试管婴儿的异同点(1)设计试管婴儿比试管婴儿多出的是过程④。
(2)试管婴儿主要是解决不孕夫妇的生育问题；设计试管婴儿用于白血病、贫血症等疾病的治疗。
(3)两者都是体外受精，并进行体外早期胚胎培养，都要经过胚胎移植，都是有性生殖。
4．转基因生物的安全性问题(1)食物安全方面：可能合成毒蛋白、出现新的过敏原、改变食物的营养成分等。
(2)生物安全方面：有可能造成“基因污染”，危害生物的多样性。
(3)环境安全方面：有可能打破物种界限，改变生态系统的能量流动和物质循环；造成二次污染或产生危害动植物和人类的病原微生物。
5．生物技术引发的伦理问题(1)克隆人技术①违反人类伦理道德。
②冲击现有的婚姻、家庭和两性关系等传统伦理道德观念。
③人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人。
(2)设计试管婴儿①把试管婴儿当作人体零配件工厂，是对生命的不尊重。
②抛弃或杀死配型不合适的多余胚胎，无异于“谋杀”。
(3)基因检测①对个人隐私权提出挑战。
②制造基因歧视。
6．正确看待生物技术(1)正视转基因技术可能带来的安全性问题，要趋利避害，不能因噎废食。
(2)我国政府不反对治疗性克隆，不接受任何生殖性克隆人实验。
1．(2018·江门高考模拟)荷斯坦奶牛是世界上产奶量最高的奶牛品种之一。
某良种公司引进纯种荷斯坦奶牛，并用以下途径繁育出荷斯坦良种奶牛群体。
请回答以下问题。
(1)请把上面空格的内容补充完整：①__________激素；②____________处理；③____________。
(2)该公司为了在短时间内得到更多的良种奶牛，常常在进行③过程之前采用________技术进行操作。
若进行操作的是囊胚阶段的胚胎，要注意的是______________________________。
(3)若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型相同吗？________ ( 填“一定不相同”或“可能不相同”或“一定相同”)。
为什么？_______________________________ ________________________________________________________________________。
(4)为了确保得到雌性奶牛，往往需要对移植前的胚胎进行性别鉴定，请举出一种对早期胚胎进行性别鉴定的方法 (只需写出名称或简要原理)：________________________________。
答案(1)促性腺同期发情胚胎移植(2)胚胎分割将内细胞团均等分割(3)可能不相同因为这些胚胎可能由不同的受精卵发育而来(4)DNA分子杂交技术解析 (1)对良种荷斯坦奶牛进行超数排卵处理时需使用[①]促性腺激素。
对受体母牛要进行[②]同期发情处理，以使其生殖器官的生理变化与供体相同。
质量检查、培养得到合格的早期胚胎后，可以进行[③]胚胎移植。
(2)欲得到更多的良种奶牛，常常在进行[③]胚胎移植之前采用胚胎分割技术进行操作。
对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分割。
(3)若一次给受体母牛移入多个胚胎，产生的多个后代基因型可能不相同，因为这些胚胎可能由不同的受精卵发育而来。
(4)对移植前的胚胎进行性别鉴定时，可取滋养层细胞，利用DNA分子杂交技术，做DNA分析。
方法技巧(1)胚胎移植或胚胎分割的2个时期：桑椹胚和囊胚。
(2)2种“冲卵”的不同：①胚胎移植：冲出的是早期胚胎；②体外受精：冲出的是卵子。
(3)2次使用的激素不同：①孕激素：对供、受体进行同期发情处理；②促性腺激素：对供体进行超数排卵处理。
(4)胚胎分割的2个关注点：①快速繁殖动物的最佳方法；②后代具有相同的遗传物质。
2．(2018·天津河东区二模)2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”，三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。
据图回答下列问题：(1)图中①是________过程，②是__________卵母细胞，③是________受精。
(2)三亲婴儿的染色体来自于________________________________________________________________________________________________________________________。
(3)这种生殖方式属于__________(填“有性”或“无性”)生殖。
(4)捐献者在取卵前通常需要注射促性腺激素，以达到________________的目的。
(5)三亲婴儿的培育技术________(填“能”或“不能”)避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，而__________(填“能”或“不能”)避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
答案(1)核移植减数第二次分裂中期(或次级) 体外(2)母亲卵母细胞和精子(3)有性(4)超数排卵(或促进多个卵泡发育) (5)能不能解析(1)根据题图分析可知，①是核移植过程，②是处于减数第二次分裂中期的卵母细胞，③是体外受精。
(2)捐献者只是为婴儿提供了细胞质，所以三亲婴儿的染色体来自于母亲的卵母细胞和父亲的精子。
(3)根据题图可知，三亲婴儿是体外受精产生的，属于有性生殖。
(4)对捐献者注射促性腺激素，是为了使其超数排卵，以获得更多的卵母细胞。
(5)根据题图可知，卵母细胞的细胞质来自于捐献者，可避免母亲的线粒体遗传基因传递给后代。
但是细胞核来自母亲的卵母细胞，因此不能避免母亲的红绿色盲基因传递给后代。
方法技巧核移植≠试管婴儿：前者是无性繁殖，后者是有性繁殖；前者主要解决濒危动物挽救，后者主要解决不孕不育；前者可选择性别，后者取决于精子类型；二者子代遗传物质都来自两个亲本；二者都需利用胚胎移植技术。
3．克隆羊“多利”的问世，很快在全世界引发了一场大讨论，其中关于“治疗性克隆”的问题也成为人们关注的焦点。
如图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图回答以下问题：(1)过程A表示________________，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是应用患者的体细胞作为核供体，由[①]____________细胞提供细胞质，进行人工重组。
(2)经过程B得到的结构中，[ ]________是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞。
在体外培养条件下，胚胎干细胞具有增殖能力并可保持__________状态。
(3)“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞核具有________。
相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，究其原因是____________________的结果。
(4)对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，如有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复。
你认为这种做法符合伦理道德吗？为什么？________________________________________________________________________________________________________________________________________________。
(5)如果进行生殖性克隆，则不需要进行定向诱导，但必须进行____________，使得胚胎能正常发育成完整个体，该操作一般在________________时期进行。
答案(1)体细胞核移植(次级)卵母(2)④内细胞团未分化(3)全能性基因选择性表达(4)符合。
因为脐带血是身外之物，属于废物利用，符合伦理道德(合理即可) (5)胚胎移植桑椹胚或囊胚解析(1)从图中可以看出，A是体细胞核移植的过程。
(2)胚胎干细胞在体外培养的时候，能保持未分化的状态。
(3)在现有的条件下，动物细胞的全能性不能得到表达，但是动物细胞核的全能性可以表达出来；在此过程中，基因进行了选择性表达。
(4)我们不支持生殖性克隆，但不反对治疗性克隆，治疗性克隆符合伦理道德，特别是用脐带血进行治疗(并非使用胚胎)符合伦理道德。
(5)一般在桑椹胚或囊胚期，通过胚胎移植技术将桑椹胚或囊胚转移到其他母体内继续胚胎的发育，直至形成完整的胚胎。
4．(2018·兰州高三一诊)2018年1月25日，由中科院神经科学研究所团队克隆的猕猴“中中”和“华华”，登上了全球顶尖学术期刊《细胞》的封面，该成果标志着中国率先开启了以体细胞克隆猴作为实验动物模型的新时代。
回答下列问题：(1)正常情况下，哺乳动物的受精过程主要包括：__________________________，进入卵黄膜，原核形成和融合。
(2)哺乳动物的体外受精主要包括_______________、__________________等几个主要步骤。
(3)在体外受精前，要对精子进行获能处理。
通常采用的体外获能方法有培养法和________。
(4)在使用合成培养基培养早期胚胎时，通常还需加入________等天然物质，并需要适时____________，以清除代谢产物，防止代谢产物积累对早期胚胎造成危害。
(5)胚胎在受体内存活的最可能的生理基础是__________________________________________________________________________________________________________。
答案(1)精子穿越放射冠和透明带(2)卵母细胞的采集精子的获取和受精(3)化学诱导法(4)血清更换培养液(5)受体子宫基本上不对外来胚胎发生免疫排斥反应解析(1)受精是指精子与卵子结合形成合子的过程。
它包括受精前的准备阶段和受精阶段。
在自然条件下，受精是在雌性的输卵管完成的。
哺乳动物的受精过程主要包括：精子穿越放射冠和透明带，进入卵黄膜，原核形成和融合。
(2)哺乳动物的体外受精主要包括卵母细胞的采集、精子的获取和受精等几个主要步骤。
