HSF细胞说明书

油茶籽油不皂化物的提取与抗氧化性研究周振宇;杨成;蔡春辉【摘要】以油茶籽油为原料,通过皂化-己烷萃取法提取其不皂化物.通过气相色谱-质谱联用技术(GC-MS)对油茶籽油不皂化物的组成进行了分析,并通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)法、三价铁离子还原力(FRAP)法以及细胞抗氧化(CAA)法对其抗氧化性能进行了测定,并与α-生育酚进行了比较.结果表明,通过皂化-己烷萃取法得到的油茶籽油不皂化物主要含有烃类、三萜醇以及植物甾醇;油茶籽油不皂化物的DPPH自由基清除率可达到95％,EC50为1.9 g/L;油茶籽油不皂化物具有一定的Fe3+还原能力,在质量浓度为5 g/L时,FRAP值可达170;油茶籽油不皂化物能够进入细胞并对2,2'-偶氮(2-甲基丙基脒)二盐酸盐(ABAP)诱导的细胞内活性氧水平升高具有抑制作用,质量浓度为100 mg/L时CAA值可达36.6.【期刊名称】《日用化学工业》【年(卷),期】2018(048)006【总页数】6页(P330-335)【关键词】化妆品原料;油茶籽油;不皂化物;抗氧化【作者】周振宇;杨成;蔡春辉【作者单位】江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡 214122;江南大学化学与材料工程学院,江苏无锡 214122;福建春辉生物工程有限公司,福建宁德 352100【正文语种】中文【中图分类】TQ658随着人们生活水平的不断提高，消费者不再满足于通过化妆修饰自身的容貌，更希望化妆品具有抗衰老、美白、祛斑等多种功效，可以从根本上改善肌肤及毛发等多方面的问题。

抗衰老产品是功效型化妆品中极其重要的一个品类，根据皮肤衰老的机理，清除细胞内多余的自由基显得尤为重要，因此寻找合适的化妆品用抗氧化活性物逐渐成为了研究热点[1]。

天然植物提取物是化妆品中常用的抗氧化活性物之一，相比于合成的抗氧化物质，它具有来源广泛、性能优异、绿色健康等多种优势，在食品、药品和化妆品领域都有很高的应用价值[2,3]。

产品描述人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基操作手册产品规格：400mL产品货号：PD-016人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基专门为人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化而开 发，针对人骨髓间充质干细胞的特性优化分化试剂的配方，可增加人骨髓间充质干细胞的成脂 分化效果。

本产品含血清成分，仅用于科研用途，不可用于诊断、治疗、临床及其他用途。

培养基组成成分●人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基 ADP1：成分名称添加体积175 mL 20 mL 2 mL 2 mL 400μL 200μL 200μL 人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化诱导基础培养基 ADP1FBS谷氨酰胺 Glutamine青链霉素 Pennicillin-Streptomycin胰岛素 InsulinIBMX罗格列酮 Rosiglitazone地塞米松A Dexamethasone 200μL●人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基 ADP2（维持培养基）成分名称添加体积人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化基础培养基 ADP2175 mL FBS20 mL 谷氨酰胺 Glutamine2 mL 青链霉素 Pennicillin-Streptomycin2 mL 胰岛素 Insulin 400μL油红-O 染色液 10 m L操作流程一、人骨髓间充质干细胞成脂诱导分化培养基的准备注：各成分请根据试剂管上标签标示温度保存。

地塞米松A和地塞米松B浓度不同，不能混用。

染色液1.本产品为试剂盒型，使用前需将试剂盒内各成分试剂混匀。

（请勿将 ADP1 与 ADP2混淆）2.使用前，请将血清置于4℃解冻，直至血清完全溶解；待血清完全溶解后，将所有添加物置于室温溶解。

待试剂完全溶解后，轻轻摇晃使试剂混合均匀（低于 500μL 体积的试剂无需此操作）。

注：为了保证微量试剂的使用效果，请将低于 200μL 的试剂管进行短暂离心，使试剂能全部收集至管底。

3.按上述两个成分表，将表一 ADP1 中的 FBS、青链霉素、谷氨酰胺、胰岛素、IBMX、罗格列酮、地塞米松A等试剂按体积大小先后加入到诱导基础培养基中；混合均匀后做好标识，培养基即可使用。

HSF(SV40) (人包皮成纤维细胞)培养注意事项
细胞名称：HSF(SV40)(人包皮成纤维细胞)
细胞别称：HSF-SV40
细胞货号：SNL-500
生长特性：贴壁
培养条件：成纤维细胞培养体系
培养环境：空气，95%；二氧化碳(CO2)，5%；37℃
细胞简介：HSF(SV40)细胞是取自8岁男童包皮真皮组织的成纤维细胞通过SV40转化而获得的永生化细胞，合适条件下至少可以稳定传代20代以上。

HSF(SV40)细胞培养注意事项
1. 细胞贴壁较弱
该细胞贴壁比较弱，因此在遇到运输低温及震荡、室温静置太长时间、添加的培养基或其他试剂过冷等情况时会出现明显的细胞回缩变粗变短的现象，及时放回培养箱静置培养后可恢复正常。

2. 对消化非常敏感
该细胞在消化时极易受损，需要非常精细的控制消化操作、消化时间及吹打力度。

若控制不好，会导致细胞形态异常、生长速度减慢甚至无法继续传代培养，很容易出现传代一两次就无法继续生长传代的情况。

（详细传代步骤见下文）
3.对培养基要求高
该细胞需使用成纤维细胞专用培养体系培养，否则可能出现细胞死亡或无法生长情况。

4. 注意控制细胞密度
细胞密度过高时及时传代，避免培养基变黄太快或细胞高密度培养导致细胞脱落或者状态变差。

早期代数的细胞生长较快，注意及时换液及传代；细胞传代容易成团聚集，注意控制消
化时间不能太短，接种时尽量吹散为单颗细胞。

5. 原代永生细胞
该细胞由原代包皮成纤维细胞通过SV40转化而获得，传代次数有限，建议尽早完成实验。

逆转录病毒介导系统感染原代培养人皮肤成纤维细胞张清华艾民1蒋知新沙杭高毅2卢海2（中国人民解放军三零五医院，北京100017）〔摘要〕目的利用包装生产逆转录病毒感染原代培养人皮肤成纤维细胞，为细胞重编程提供技术保证。

方法利用组织块贴壁法体外原代培养人皮肤成纤维细胞。

包装生产携带绿色荧光蛋白GFP 基因的逆转录病毒上清液。

收集逆转录病毒上清液感染原代培养人皮肤成纤维细胞，利用荧光显微镜观察逆转录病毒感染成纤维细胞。

结果体外成功原代培养出人皮肤成纤维细胞。

293T 细胞包装生产携带GFP 基因的逆转录病毒上清液。

包装生产后逆转录病毒成功地感染原代培养人皮肤成纤维细胞。

结论逆转录病毒介导系统是人皮肤成纤维细胞重编程的有效基因转移载体。

〔关键词〕逆转录病毒；人皮肤成纤维细胞；细胞重编程；诱导多潜能干细胞〔中图分类号〕R34〔文献标识码〕A〔文章编号〕1005-9202（2012）11-2297-02；doi ：10.3969/j.issn.1005-9202.2012.11.039基金项目：全军医药卫生科研基金项目（No.08Z017）；科学技术部867计划项目（No.2006AA02A141）1南方医科大学研究生院2南方医科大学再生医学研究所通讯作者：蒋知新（1963-），男，副主任医师，硕士，硕士生导师，主要从事心血管病研究。

第一作者：张清华（1950-），男，主任医师，教授，博士生导师，主要从事冠心病干细胞治疗研究。

胚胎干细胞（ESCs ）是具有无限增殖，自我更新和多向分化潜能的一种未分化细胞，在体外可被诱导分化为神经细胞〔1〕、平滑肌细胞、心肌细胞〔2〕、造血细胞〔3〕而用于多种疾病的治疗，具有广阔的研究和临床应用前景。

目前，ESCs 研究也存在着一些问题，如免疫排斥反应和伦理学问题的争论。

诱导多潜能干细胞技术是将多能性基因转染到已分化的体细胞，将其重编程为类似于ESCs 的多潜能干细胞，并被命名为“诱导多潜能干细胞”（iPSCs ），简称“iPS 细胞”〔4〕。