PCR技术培训测试题

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PCR技术培训测试题

1.PCR技术扩增DNA,需要的条件是()

①目的基因②引物③四种脱氧核苷酸④DNA聚合酶等⑤mRNA⑥核糖体

A.①②③④(正确答案)

B.②③④⑤

C.①③④⑤

D.①②③⑥

2.一个DNA分子中如果G所占摩尔比为17.2%,那么A所占的摩尔比为()

A.82.8%

B.32.8%(正确答案)

C.17.2%

D.65.6%

3.多重PCR需要的引物对为()

A.一对引物

B.半对引物

C.两对引物

D.多对引物(正确答案)

4.PCR是在引物、模板和4种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应,其特异性决定因素为()

A.模板

B.引物(正确答案)

C.dNTP

D.镁离子

5.在PCR反应中,下列哪项可以引起非靶序列的扩增()

A.Taq酶加量过多

B.引物加量过多 C.A和B都可(正确答案)

D.缓冲液中镁离子含量过高

6.PCR技术每一个循环包含下面哪些环节(B)

①.酶切

②.变性

③.退火

④.延伸

⑤.连接

A①②③

B②③④(正确答案)

C①②④

D③④⑤

7.PCR基因扩增仪的温度控制主要是指()

①温度的准确性控制

②温度的均一性控制

③退火温度控制

④升降温速度控制

⑤延伸温度控制

A①②④(正确答案)

B①②③

C②③⑤

D③④⑤

8.如果一个PCR反应体系中加入模板200个,经过30个循环后扩增产物的数量将达到()

A200×30×2

B.200×30

C.200×2^30(正确答案)

D.200×30^2 9.有关荧光定量PCR的方法,错误的是()

A.在扩增的指数期定量

B.采用内标和外标的方法均可

C.可采用Taqman探针

D.在扩增的终点测定定量(正确答案)

10.荧光定量PCR检测过程中,基线漂移的可能原因有()

A.蒸发

B.相邻荧光通道干扰

C.探针水解

D.以上都是(正确答案)

11.Taqman探针采用的是()

A.荧光标记的探针(正确答案)

B.生物素标记的探针

C.同位素标记的探针

D.SYBRGreen荧光染料

12.以下是经过PCR扩增后得到的Ct值,哪个样品的DNA原始拷贝数最多()

A.样品1,Ct=20(正确答案)

B.样品2,Ct=22

C.样品3,Ct=24

D.样本4,Ct=28

13.TaqDNA聚合酶酶促反应最适温度为()

A.37℃

B.50-55℃

C.70-75℃(正确答案)

D.80-85℃

14.下列关于Ct值的描述正确的是()

①.Ct值的定义是PCR扩增过程中,荧光信号开始由本底进入指数增长阶段的拐点所对应的循环数; ②.用不同浓度的DNA做PCR,DNA浓度越高,Ct值越小

③.DNA浓度每增加1倍,Ct值减小一个循环;

④.Ct值与模板DNA的起始拷贝数成反比;

⑤.平台期DNA拷贝数与Ct值呈线性关系;

A①②③④(正确答案)

B①②③⑤

C①③④⑤

D②③④⑤

15.下面属于SYBRGreenI方法特点的是()

①适用性广,灵敏,方便且成本低的一种定量PCR方法;

②用于病原体检测,疾病耐药性基因研究,药物疗效考核及遗传疾病的诊断;

③特异性高,重复性好,只适合特定目标;

④引物要求高,易出现非特异性条带;

⑤适合科研中对各种目的基因定量分析,基因表达量的研究,转基因重组动植物的研究。

⑥需要做熔解曲线来确认扩增产物特异性

A①④⑤⑥(正确答案)

B①②③④

C②③⑤⑥

D③④⑤⑥

16.荧光定量PCR能够实时监测PCR反应的全过程,对每一个循环进行定量或定性分析;而普通PCR只能对反应终产物进行半定量或定性分析

对(正确答案)

17.荧光定量PCR的结果分析可以直接通过电脑读出,而普通PCR的结果必须通过电泳进行条带分析

对(正确答案)

错 18.无论SYBRgreen荧光定量还是Taqman探针定量,随着扩增反应的进行,荧光信号都是随着PCR产物的增加而增强的

对(正确答案)

19.定量PCR可以对样本中的某个分子进行拷贝数定量

对(正确答案)

20.SYBRGreenI是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料

对(正确答案)