香菇中香菇多糖的测定

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86 食品安全导刊 2018年1月Technology科技分析与检测

1 前言香菇属于一种食用类的真菌,味甘性平,不仅能够食用,还可药用。香菇中的营养成分主要是多糖类物质以及不饱和脂肪酸物质,在经过热水提取之后,得到的香菇多糖能够调节身体中具有免疫功能的T细胞的活性,可以显著降低甲基胆蒽导致肿瘤病变的几率。香菇能够有效遏制癌细胞,其中还包含双链核糖核酸,其可以诱导形成干扰素,拥有极强的抗病性能。现阶段,我国不少的企业已经把香菇作为一种原材料,应用到药品生产过程之中。但是,现阶段我国有关香菇药用的标准较为陈旧,而且内容也相对简单,只是涉及一些形状以及理化方面的鉴别,但是,对于香菇多糖物质所拥有的特性以及含量等却没有相关标准。所以,测量香菇之中香菇多糖物质的意义重大。在此,通过紫外分光光度方法测量香菇 之中的多糖。2 香菇多糖含量测定试验2.1 试验原理香菇多糖物质在乙醇之中会发生沉淀现象,能够和水溶性的单糖以及低聚糖分离,并且和浓硫酸发生反应会被分解成为单糖,同时在极短的时间之内发生脱水反应,并形成糠醛物质或者是羟甲基糠醛物质,再和蒽酮发生缩合反应,便会形成相应的衍生物,所得物质自身颜色和香菇多糖含量存在直接联系,如此便能够通过比色方法测量多糖物质。2.2 试验方法2.2.1 对照样品试样制备精确称取无水葡萄糖试剂10 mg, 将其放置在100 mL的容量瓶之中,然后加入水并进行定容处理,便可以得到浓度为0.1 mg/mL的对照样品试样。2.2.2 样品溶液制备称量鲜香菇5 g左右,并且准确计量称取的数值,将香菇进行粉碎处理,得到直径约为2 mm的香菇颗粒,并将香菇颗粒放置到索氏提取容器里面,向其中添加90 mL水,通过电加热进行回流提取操作,直到提取溶液变为无色溶液,再将提取液转移到容量为100 mL的容量瓶之中,进行定容并摇晃均匀。精确称取溶液10 mL,并向其中添加150 mL的乙醇溶液,并摇晃均匀,然后将其静置于温度为4 ℃的环境之中,经过12 h之后液取出,并进行离心处理,将离心液的上部清液倾倒,得到沉淀物质加水进行溶解,将溶解后物质转移到50 mL的容量瓶之中,进行定容处理,并将溶液摇匀,便得到样品溶液。2.2.3 标准曲线制备准确称取所制备的对照品溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mL,并将称量好的溶液放置到容量为10 mL具塞试管之中,加水至2 mL,再向其中添加6 mL硫酸蒽酮溶液,并将其摇匀,密塞之后将其放置到沸水浴之中,经过15 min之后将其取出,并且把溶液放置到冰浴之中进行冷却处理,将所得试剂当成是空白试剂,采取紫外可见光分光光度测量方法进行测量,并在625 nm处测试相应的吸收度。2.2.4 测试法准确量取试品溶液2 mL,将其放置在10 mL的具塞试管之中,依照标准曲线制备项下的方法,从添加6 mL硫酸蒽酮溶液起,根据标准进行吸收度测试,并且在标准曲线之上读取试品溶液之中的葡萄糖重量值。通过测试得出,对照品葡萄糖和样品之中香菇多糖在400~700 nm波长范围内测定吸收度,结果在625 nm位置处都存在最大吸收值。2.2.5 标准曲线的绘制通过以上方法,将葡萄糖的浓度值当作横坐标,将吸收度值当作纵坐标,绘制标注曲线。最后得到函数y=0.004 305 727x+0.020 847,其中r取值为0.998 803 4。这也说明了在测量的浓度范围之中,表现出了较为优良的线性关系。2.2.6 重复性试验准确称量一份样品溶液,依照标准曲线制备中的方法进行测试,制备出六份试液进行吸光度的测量,通过测量得到吸光度均值是0.313 4,其中RSD为0.46%,这也体现出了此种测试方法拥有相对好的重复性。2.2.7 样品的稳定性试验精确量取两份试样,并对这两份试样在0、2、4以及24 h时进行测量,试样制备方法依旧采取标准曲线制备中的方法进行,之后完成吸光度的测量工作。在测量之后得出,在放置 2 h以后样品的测量结果出现了相对大的波动。这体现出了样品制备完成以后不能够放置太久,应当即刻完成测 量工作。3 结语现阶段,提取香菇之中多糖的方法非常多,比如可以采取复合酶提取方法、高压提取方法等等。在此所采用的方法是水提醇沉法,这种方法也是实验室提取香菇多糖中应用较为普遍的方法。此种提取方法较为简便,操作也较为简单,拥有较强的推广性。并且,在试验的过程中,还针对超声法、回流法以及索氏提取法加以对比,所得结果显示索氏提取方法的效率最高。进行醇沉操作过程中,参考《中国药典》里面灵芝之中多糖测量方法,采用质量分数为95%的乙醇作醇沉试剂。在采用紫外可见光光度方法进行测量时,选用显色试剂的过程中,可以采用蒽酮硫酸溶液,也可以采用苯酚硫酸溶液,经过试验发现了两者之间并不存在较为明显的差异,由于蒽酮硫酸溶液的污染相对较小,因此,此次试验采用的显色剂为蒽酮硫酸溶液。此次试验是在方法学指导下开展的,制定的试验方法较为简便,而且操作过程也易于完成,具有相对优良的稳定性,回收率也相对较高,具有较大的推广与应用价值。香菇中香菇多糖的测定

□ 张春霞 泰安市食品药品检验检测中心摘 要:此次试验利用紫外可见光光度分析的测量方法,测量香菇多糖含量,并且验证了实验的重复性以及稳定性,得出此种试验方法较为简便,而且操作过程也易于完成,具有较大的推广与应用价值。关键词:香菇;香菇多糖;测定

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