转基因鸡生产的基本原理和方法
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转基因的技术原理
转基因的技术原理《转基因技术原理：从基础到应用全解析》1. 引言嘿，你有没有想过，在现代农业里，有一种技术能让农作物像被施了魔法一样，拥有了一些特殊的能力呢？比如说，棉花不怕虫子咬了，大豆的产量更高了。
这就是转基因技术在背后发挥着作用。
今天啊，咱们就来好好扒一扒转基因技术背后的原理，让你从基本概念到实际应用，完完全全地搞明白它。
这中间呢，咱们会讲讲它的理论基础、工作过程，在生活和高级工业中的应用，还有那些容易被人误解的地方，再补充一些相关的知识。
2. 核心原理2.1基本概念与理论背景说白了，转基因技术就是把一种生物的基因（也就是带有遗传信息的DNA片段）提取出来，然后把它放到另一种生物的细胞里去，让这个基因在新的生物体内发挥作用。
这个概念的来源可以追溯到很久以前人们对遗传规律的探索。
最开始孟德尔通过豌豆实验发现了遗传因子（也就是现在我们说的基因）的存在，这就像是打开了一扇大门。
随着科学不断发展，人们对基因的认识越来越深入，就开始琢磨能不能把基因在不同生物之间进行转移呢？于是，转基因技术就逐渐发展起来了。
2.2运行机制与过程分析这个过程就像是一场神奇的基因接力赛。
首先呢，科学家要找到他们想要转移的基因。
比如说，科学家发现一种细菌里有个基因能产生一种毒素，这个毒素能杀死害虫，那这个基因就是目标基因。
然后呢，要把这个基因从细菌的DNA里面切割出来，这就好比是从一串项链上取下一颗特殊的珠子。
这个切割的工作就需要一种特殊的“剪刀”，叫限制性内切酶。
接下来，要把这个取出来的基因放到另一种生物的细胞里。
这个过程就像是把一颗珠子缝到另一件衣服上。
但是这个细胞它有自己的防御机制，不会轻易接受外来的基因，所以还需要一些特殊的手段，比如说用一种叫载体的东西，这个载体就像是一辆小卡车，把目标基因运到细胞里面去。
最后，这个外来的基因进入细胞后，要和细胞自己的基因一起工作。
细胞会把这个新的基因当作自己的一部分，按照基因里面的信息来合成相应的蛋白质，这样就实现了转基因的目的。
转基因应用的原理
转基因应用的原理1. 什么是转基因技术转基因技术是指将外源基因（来自其他物种）导入到目标生物体的基因组中，使其表达外源基因所带来的特定功能或性状的技术。
转基因技术广泛应用于农业、医学和工业等领域，为实现高产、高效、高质量的产出提供了新的途径。
2. 转基因应用的原理转基因应用的原理主要包括以下几个方面：2.1 外源基因的获取外源基因可以从其他物种中获取，通过PCR扩增或者合成基因获得。
外源基因可以是来自相同生物界的不同物种，也可以是来自不同生物界的物种。
2.2 基因导入将外源基因导入目标生物体的基因组中是实现转基因的关键步骤。
常用的基因导入方法主要包括农杆菌介导的转化、基因枪法和直接注射法。
2.3 基因整合和表达一旦外源基因成功导入目标生物体的基因组中，它可以在目标生物体中进行整合。
整合可以是随机的，也可以是特定位点的。
2.4 外源基因的表达和功能实现导入目标生物体基因组中的外源基因需要能够在目标生物体中被成功表达。
通过转录和翻译，外源基因所携带的DNA信息可以被转录成RNA，然后翻译成蛋白质。
3. 转基因应用的列点方式•农业领域：–提高作物的耐虫性和抗病性，减少农药的使用；–提高作物产量和品质，改善产品的特性；–增加作物对环境中营养物质的利用效率。
•医学领域：–制造人类蛋白质药物，用于治疗疾病；–开发转基因动物模型，用于研究人类疾病的发生机制；–培育转基因植物，用于生产药用植物和疫苗。
•工业领域：–生产纤维素酶和淀粉酶，用于纺织和食品工业；–制造可降解塑料，减少对环境的污染；–生产生物燃料，降低对传统能源的依赖。
转基因技术的应用不仅可以提高农作物的生产力和品质，还能够解决医学领域中的一些难题，同时在工业领域中也有广泛的应用前景。
4. 转基因技术的争议与伦理转基因技术在应用过程中面临着许多争议与伦理问题。
其中包括：•对于食品安全的关注：人们担心消费转基因食品对健康带来不确定的风险；•环境影响的疑虑：转基因作物的大面积种植可能会对环境生态系统造成潜在影响；•种类多样性的减少：转基因作物的广泛种植可能会导致原有的种类多样性减少。
动物遗传育种学知识点总结
动物遗传育种学知识点总结一、遗传育种学概述遗传育种学是研究遗传规律和方法应用于育种改良的学科，它是农业科学的重要分支，对于提高作物和动物的产量、品质和抗逆性具有重要意义。
遗传育种学的主要任务是利用遗传原理和方法，通过不同遗传资源的选择、杂交、选择再生和遗传育种、种子繁殖等措施，改良和选育出具有优良性状的新品种，从而提高生物体的经济效益，并进一步推动生物资源的可持续利用。
二、遗传规律1. 孟德尔遗传定律：孟德尔是遗传学的奠基人，他通过对豌豆的杂交实验，总结出了自由组合定律、分离组合定律、独立组合定律，这三个定律构成了孟德尔的遗传规律。
2. 隐性和显性基因：在生物体的基因组中，有些基因会显现出来，而有些则处于隐性状态。
这种显性和隐性的表现形式是在基因型和表现型上的。
通过这些基因的遗传组合，可以得到不同的表现型。
3. 杂合和纯合：在杂交和自交过程中，基因型的组合会产生不同的效果。
杂合就是指由不同的两个纯合子交配，而纯合则是指由同一纯合子自交的过程。
4. 杂交优势和劣势：在杂交后代中，因为来自不同亲本的基因组合，有些会表现出比亲本更好的性状，称为杂交优势，而有些则会表现出比亲本差的性状，称为杂交劣势。
5. 连锁和不连锁基因：在染色体上，有些基因会相互连锁，而有些则是相对独立的。
通过对连锁基因的遗传，可以推测出染色体的连锁关系。
三、遗传改良1. 选择育种：通过对种群中个体的选择，将具有优良性状的个体进行繁殖，推进种群中优良性状的积累和传递，达到改良种群性状的目的。
2. 杂交育种：将两个不同亲本的优良性状进行杂交，通过亲本间基因的重组，产生具有杂种优势的后代。
在动物遗传育种学中，常用的杂交育种包括杂交猪、杂交鸡、杂交犬等。
3. 突变育种：通过人为诱发或发现天然突变，改变物种的性状，从而获得具有新的优良性状的品种。
在动物遗传育种中，突变育种被广泛用于提高生育率、改良产奶量、改良外貌等方面。
4. 组织培养育种：利用组织培养技术，从植物体内分离出细胞，再通过诱导多能细胞分化形成无性系再生植株，以产生具有优良性状的新植株。
转基因技术及转基因食品的安全性
转基因技术及转基因食品的安全性吕军;刘兴胥;吴健程;甘敏鑫【摘要】现代生物技术的快速发展,特别是转基因技术,对解决人口过多问题、资源短缺、环境恶化等问题有着重大作用,对科技发展、社会进步和经济增长产生极其重要、深远的影响.本文介绍了转基因技术的方法、应用,以及由此而引发的安全性问题及其带来的不良影响,以期能够比较好的了解现代生物技术.【期刊名称】《生物技术世界》【年(卷),期】2016(000)002【总页数】3页(P60-62)【关键词】转基因技术;转基因食品;安全性;应用【作者】吕军;刘兴胥;吴健程;甘敏鑫【作者单位】南宁市新科健生物技术有限责任公司,广西南宁530003【正文语种】中文【中图分类】Q788近二十年来，转基因食品的生产发展可谓十分迅猛，各国都纷纷投人巨大的人力、物力、财力进行研究，就连联合国前秘书长安南也曾在联合国大会上赞扬转基因食品是“继绿色革命后的一次蓝色革命”［1］。
目前，许多国家对转基因食品都有不同程度的研究。
总的说，发达国家的转基因食品研究水平较高，生物安全意识较高，而发展中国家的转基因食品研究水平较弱，生物安全意识相对淡薄［2］。
现代生物技术，指的是以基因工程为核心的转基因技术，即通过基因工程将人工分离和修饰过的基因或DNA导入到生物体细胞基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体的性状稳定地整合、表达并可遗传的修饰，这一技术称为转基因技术［3］。
转基因技术一般包括5个步骤：一是取得符合人们要求的DNA片段，这种DNA片段被称为“目的基因”；二是将目的基因与质粒或病毒DNA连接成重组DNA；三是把重组DNA引入某种细胞；四是把目的基因能表达的受体细胞挑选出来；五是表达成蛋白，采用合适的条件得到高表达的产品［4］。
2.1 农杆菌介导转化法利用根癌农杆菌和发根农杆菌为中间介体，让农杆菌感染受伤的植物细胞，然后将它所携带的质粒DNA片段整合到植物细胞基因组中实现外源DNA到寄主植物细胞的转化。
转基因技术原理
转基因技术原理
转基因技术是一种将外源基因导入到目标生物体中的技术，以改变目标生物体的遗传特性。
其原理主要包括以下几个步骤：
1. 选择目标基因：根据需要改变的性状，选择与之相关的基因作为目标基因。
2. 克隆目标基因：通过PCR（聚合酶链式反应）等方法，从
源生物体中提取目标基因的DNA序列，并进行克隆。
3. 构建转基因载体：将克隆得到的目标基因插入到合适的载体（如质粒）上，构建转基因载体。
4. 转化目标生物体：将转基因载体导入到目标生物体的细胞中。
可以通过基因枪、冷冻融合、细菌介导转化等方式进行。
5. 转基因生物体的筛选与培养：将转化后的细胞进行筛选，剔除未成功转化的细胞，并培养转基因生物体。
6. 目标基因表达与分析：通过PCR、酶切、Southern blot等方法，检测转基因生物体是否成功表达目标基因，并对表达的性状进行分析。
转基因技术的原理基于基因的核酸序列具有一致性，无论是来源于哺乳动物、植物或微生物，都是由碱基对组成的。
因此，通过改变目标生物体DNA序列，即改变了生物体内所编码蛋
白质的氨基酸序列，从而改变了生物体的性状。
转基因技术在农业、医学、生物工程等领域具有广泛应用前景。
第9章 转基因技术
19
重组目的基因的结构示意图
限制性核酸内切酶
20
21
DNA连接酶
22
转入受体进行表达
23
二、中游部分
1、外源基因的导入 2、外源DNA整合、转录及表达的检测
24
1、外源基因的导入
1）受精卵原核显微注射法 2）逆转录病毒感染法 3）胚胎干细胞法 4）精子载体法 5）细胞核移植法 6）脂质体介导法 8）基因打靶 9）原始生殖细胞技术
效率高
感染率高、细胞损伤小，胚胎存活率高。
宿主范围广泛，外源DNA在整合位点附近较少发生缺失 和重排
呈单位点、单拷贝整合，并且不受胚胎发育阶段的限制。
43
缺点：
逆转录病毒载体容量有限，只能转移≤10kb的DNA，转 入的基因一般没有其邻近的调控序列。
载体病毒基因有潜在的致病性，携带外源基因的病毒 载体在导入受体细胞过程中有可能激活受体细胞DNA序 列上的原癌基因或其它有害基因，威胁受体动物的健 康安全。
基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。
48
第二节
原理 同源重组(homologous recombination)
发生在同源序列间的重组，通过链的断裂 和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链 或双链片段的交换。 细胞水平实现基因的定位修饰
49
50
51
优点：
可对阳性细胞选择，实现外源DNA的定点整合，避免 了随即整合的缺点。
，是一项旨在培育肉多低脂且环境友好型家禽的研究组成部
分。无毛鸡能够减少养殖户用在防止鸡遭受高温侵袭的通风
设施上的投入
9
约翰斯-霍普金斯大学的科学家注视着两只小老鼠，左边的 是一只普通老鼠，右边的是一只转基因老鼠，肌肉发达程 度是普通老鼠的2到3倍。在对一种新发现的基因进行研究 时，科学家培育了转基因鼠。这只转基因鼠有助于科学家 寻找伴随癌症或者艾滋病出现的肌肉萎缩症的治疗手段。
重组目的基因的结构示意图
限制性核酸内切酶
20
21
DNA连接酶
22
转入受体进行表达
23
二、中游部分
1、外源基因的导入 2、外源DNA整合、转录及表达的检测
24
1、外源基因的导入
1）受精卵原核显微注射法 2）逆转录病毒感染法 3）胚胎干细胞法 4）精子载体法 5）细胞核移植法 6）脂质体介导法 8）基因打靶 9）原始生殖细胞技术
效率高
感染率高、细胞损伤小，胚胎存活率高。
宿主范围广泛，外源DNA在整合位点附近较少发生缺失 和重排
呈单位点、单拷贝整合，并且不受胚胎发育阶段的限制。
43
缺点：
逆转录病毒载体容量有限，只能转移≤10kb的DNA，转 入的基因一般没有其邻近的调控序列。
载体病毒基因有潜在的致病性，携带外源基因的病毒 载体在导入受体细胞过程中有可能激活受体细胞DNA序 列上的原癌基因或其它有害基因，威胁受体动物的健 康安全。
基因，从而在生物活体内研究此基因的功能。
48
第二节
原理 同源重组(homologous recombination)
发生在同源序列间的重组，通过链的断裂 和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链 或双链片段的交换。 细胞水平实现基因的定位修饰
49
50
51
优点：
可对阳性细胞选择，实现外源DNA的定点整合，避免 了随即整合的缺点。
，是一项旨在培育肉多低脂且环境友好型家禽的研究组成部
分。无毛鸡能够减少养殖户用在防止鸡遭受高温侵袭的通风
设施上的投入
9
约翰斯-霍普金斯大学的科学家注视着两只小老鼠，左边的 是一只普通老鼠，右边的是一只转基因老鼠，肌肉发达程 度是普通老鼠的2到3倍。在对一种新发现的基因进行研究 时，科学家培育了转基因鼠。这只转基因鼠有助于科学家 寻找伴随癌症或者艾滋病出现的肌肉萎缩症的治疗手段。
修改转基因动物
正负筛选示意图
正选择
如果发生正确的同源重组而整合，那么
HSV-tk就不会整合到基因组，只有转入基 因及neor基因整合进去。 用G418来筛选转染细胞，没有整合neor基 因的细胞将全部死亡， 整合了外源基因的细胞可以存活下来，这 就是正选择。
负选择
质粒载体pUC19：
大小2686bp， 带有pRB322的复制 起始点， 一个氨苄青霉素抗性 基因 一个大肠杆菌乳糖操 纵子β-半乳糖苷酶基 因（lacZ’）的调节基 因片段， 一个调节lacZ’基因表 达的阻遏蛋白的基因 lacⅠ， 多个单克隆位点。
λ噬菌体载体
由质粒和噬菌体的粘性末端构建而成，具有质粒载 体和噬菌体二者的优点。 λ噬菌体载体的容量受到一定的限制，最大插入片段不能 超过23kb。 1978年Colli s和Hohn发展了新载体——粘粒（即柯斯质 粒），其基因组由以下几部分构成： 质粒复制起始位点， 1个或多个限制性内切酶位点， 抗药性标记和带有粘性末端的DNA片段。 粘粒载体大小为4～6kb，而插入片段为29～45kb，可克 隆携带40kb大小的DNA片段，在大肠杆菌中复制保存， 适用于作基因簇和大基因克隆。
DNA微注射法
超常排卵： 供体雌鼠 注射 怀孕母马的血清 48h再注射人的绒 毛膜促性腺激素 使其母马超量排卵 处理的雌鼠一次可 以产生大约35个卵细胞（而正常的雌鼠只能产生5～10个卵细胞） 注射： 雌鼠交配后杀死 小心从输卵管中取出受精卵 将外源基 因注射进受精卵中。 DNA微注射要在精前核时期注射才能有效。 移植：将25～40个受精卵用显微外科手术移植到假孕雌鼠的子宫内 制造雌鼠假孕 让它与切除了输精管的不育雄鼠交配（缺乏精 子所以雌鼠卵细胞无法受精） 培养：将受精卵移入代孕母鼠子宫中，大约3周以后，接受过注射的 受精卵发育生长成为幼鼠，由代孕母鼠产下。 检测：提取DNA进行Southern杂交或PCR检测，或通过与另一只鼠 杂交来确定转入基因是否在其生殖系中。 筛选：对子代进行杂交产生纯合转基因鼠。
转基因技术——动植物转基因方法
转基因 技术
【DAWN_ZX】
转基因技术的步骤
转基因 技术
STEP4：目的基因的检测和表达
1.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目 的基因。 方法：采用DNA分子杂交技术。 2.检测目的基因是否转录出了mRNA。 方法：采用用标记的目的基因作探针与 mRNA 杂交。 3.最后检测目的基因是否翻译成蛋白质。 方法：从转基因生物中提取蛋白质，用相应的 抗体进行抗原－抗体杂交。 4. 进行个体生物学水平的鉴定。
转基因 技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法
胚胎干细胞介导法 逆转录病毒载体法 精子介导的基因转移 核移植转基因法 体细胞核移植法 线粒体介导法
转基因 技术
【DAWN_ZX】
动物转基因方法
原核显微注射法（最常用） •方法：将外源基因注射到受精卵细胞的原核内，
外源基因与胚胎基因组融合后体外培养， 移植到 受体母畜子宫内发育，这样分娩的动物体内的每一 个细胞都含有新的DNA片段。 •缺点：效率低、位置效应(外源基因插入位点随 机性)造成表达结果有不确定性、动物利用率低。 反刍动物繁殖周期长，有较强的时间限制、需要大 量的供体和受体动物。
转基因 技术
【DAWN_ZX】
植物转基因方法 基因枪介导转换法
•方法：利用火药爆炸或高压气体加速将包裹
了带目的基因的DNA溶液的高速微弹直接送入 完整的植物组织和细胞中，然后通过细胞和组 织培养技术，再生出植株，选出其中转基因阳 性植株即为转基因植株。 •优点:不受受体植物范围的限制，而且其载 体质粒的构建也相对简单，是目前转基因研究 中应用较为广泛的一种方法。
转基因技术的步骤 STEP2：基因表达载体的构建
目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且 可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥 作用。 组成：目的基因＋启动子＋终止子＋标记基因 标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含 有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出 来。常用抗生素基因。
转基因动物的生产 PPT课件
16
转基因动物所面临的问题
1.技术性问题
（一）转基因动物的效率
目前转基因动物研究领域尚存在制备效率低的问题，转基因小鼠有效率只有4%。 注 射 外 源 基 因 后 的 存 活 率 为 86% ， 移 植 到 母 体 子 宫 后 存 活 率 25% ， 母 鼠 怀 孕 率 为 80%，基因在染色体上的整合率24%。
据不完全统计，制备一只转基因小鼠，需40个注射过的受精卵，而绵羊、山羊、 猪、牛分别为110，90，110个和1,600个，而转基因个体的后代中只有50%表达基 因，不能表达或表达混乱，不能遗传给后代等问题。随着这一技术的成熟，许多问 题有望得到逐步解决。
（二）转基因的整合造成宿主细胞基因的突变 （三）转基因的表达问题
杂交、筛选
嵌合小鼠
纯合转基因小鼠
6
2．逆转录病毒载体技术
原理：据逆转录病毒cDNA能整合到宿主染色体内这一特 性，克隆、构建重组逆转录病毒载体，通过转染，实现 生殖细胞的基因转移。
缺点： 逆转录病毒具有潜在致癌性； 载体构建复杂，容纳外源基因的大小有限（<10Kb)； 嵌合体比例大； 病毒载体序列可能干扰目的基因的表达。
2
转基因技术的概念
转基因技术就是用实验室的 方法将所需的目的基因导入 动物的受精卵，使外源基因 与动物本身的基因整合在一 起，在动物发育过程中表达， 并能稳定遗传给后代的技术。 这种在基因组中稳定地整合 有人工的外源基因的动物称 为转基因动物。
含有荧光水母基因的小猪
3
转基因动物技术
转基因动物技术的核心，是把遗 传的功能单位──基因转移到动 物体内，使它成为动物体内的一 部分。被转移的基因可以来自同 种或异种动物，也可以来自植物 或微生物。这样一来，就打破了 物种之间的界线。
转基因动物所面临的问题
1.技术性问题
（一）转基因动物的效率
目前转基因动物研究领域尚存在制备效率低的问题，转基因小鼠有效率只有4%。 注 射 外 源 基 因 后 的 存 活 率 为 86% ， 移 植 到 母 体 子 宫 后 存 活 率 25% ， 母 鼠 怀 孕 率 为 80%，基因在染色体上的整合率24%。
据不完全统计，制备一只转基因小鼠，需40个注射过的受精卵，而绵羊、山羊、 猪、牛分别为110，90，110个和1,600个，而转基因个体的后代中只有50%表达基 因，不能表达或表达混乱，不能遗传给后代等问题。随着这一技术的成熟，许多问 题有望得到逐步解决。
（二）转基因的整合造成宿主细胞基因的突变 （三）转基因的表达问题
杂交、筛选
嵌合小鼠
纯合转基因小鼠
6
2．逆转录病毒载体技术
原理：据逆转录病毒cDNA能整合到宿主染色体内这一特 性，克隆、构建重组逆转录病毒载体，通过转染，实现 生殖细胞的基因转移。
缺点： 逆转录病毒具有潜在致癌性； 载体构建复杂，容纳外源基因的大小有限（<10Kb)； 嵌合体比例大； 病毒载体序列可能干扰目的基因的表达。
2
转基因技术的概念
转基因技术就是用实验室的 方法将所需的目的基因导入 动物的受精卵，使外源基因 与动物本身的基因整合在一 起，在动物发育过程中表达， 并能稳定遗传给后代的技术。 这种在基因组中稳定地整合 有人工的外源基因的动物称 为转基因动物。
含有荧光水母基因的小猪
3
转基因动物技术
转基因动物技术的核心，是把遗 传的功能单位──基因转移到动 物体内，使它成为动物体内的一 部分。被转移的基因可以来自同 种或异种动物，也可以来自植物 或微生物。这样一来，就打破了 物种之间的界线。
转基因的方法和原理（可编辑）
转基因的方法和原理转基因的方法和原理 1目的基因制备和载体系统 2几种有效的转基因方法 3定点突变和受体系统简介转基因研究技术的中心环节即为DNA重组技术，其最终目的是将DNA片段转入为一个生物体，从而使该生物体具有表现某种性状。
转基因通过获取基因、重组基因和表达基因等过程来实现。
转基因打破了物种的界限，使不同种的生物的遗传物质在分子水平上重新组合在一起，并且完全可以按照人的意志或目的，实现对生物体的改造。
基本步骤 1.分离获得目的基因； 2.在体外进行DNA重组，将外源DNA 连接到能自我复制又带有选择标记的载体上； 3.将重组DNA转移入受体细胞；4.筛选出含有目的DNA的受体细胞克隆；目的基因制备和载体系统目的基因来源：基因组DNA分离、化学合成、PCR扩增、cDNA文库及DNA文库中制得。
载体：质粒、λ噬菌体、柯氏质粒、YAC载体等工具酶：限制性内切酶、连接酶、DNA聚合酶等 PCR反应 PCR技术就是在体外通过酶促反应或自发地扩增一段目的基因的技术。
PCR要求反应体系具有以下条件： 1、要有与被分离的目的基因两条链各一端序列相互补的DNA引物约20个碱基左右； 2、具有热稳定性的酶如Taq DNA聚合酶； 3、4种dNTP； 4、作为模板的目的DNA序列。
PCR反应可扩增出100～5000bp的目的基因。
PCR反应过程 1、变性，即将模板DNA置于95℃的高温下，使双链DNA的双链解开变成单链DNA；2、退火，将反应体系的温度降低至55℃左右，使得一对引物分别与变性后的两条模板链相配对；3、延伸，将反应体系温度调整到Taq DNA聚合酶作用的最适温度72℃，然后以目的基因为模板，合成新的DNA链。
反复进行约30个循环左右，即可扩增得到目的DNA序列。
利用cDNA法由于真核生物的mRNA具有poly A这一结构特点，可以用结合长度大约为15bp的短链多聚DT的纤维素填充的柱子，根据碱基配对原则，将其吸附，从真核细胞的总RNA中提取出来，再用能打断A-T氢键的缓冲液洗脱。