免疫学实验报告
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CDC实验一.实验原理细胞表面抗原与相应的抗体(IgG1~3或IgM)特异性结合形成的免疫复合物,可通过经典途径激活补体形成攻膜复合体而导致细胞膜穿孔。
因此,水溶性染料如台盼蓝可进入受损细胞,染成蓝色,为阳性反应;不带抗原的细胞,未损伤,不染色,为阴性反应。
二. 实验步骤1.胸腺细胞悬液制备颈椎脱臼法处死小鼠↓暴露胸腔,分离出胸腺↓镊子夹住胸腺反复轻轻研磨↓单个细胞PBS洗2次,1000rpm,10min↓加入5%小牛血清PBS制备细胞悬液调节细胞浓度至3-4×107/ml三.结果判断①细胞膜穿孔的细胞呈蓝色,细胞膜完整的活细胞不着色。
②细胞毒性作用的判断标准如下:阴性反应( -) 死细胞占0-10%可疑阳性反应( ±) 死细胞占11-20%弱阳性反应( + ) 死细胞占21-50%阳性反应( ++ ) 死细胞占51-80%强阳性反应(+++ ) 死细胞占81-100%四.结果记录1.表格记录2.照片展示五.讨论①.第①组成阳性的原因:实验中加入抗原、抗体、补体、LC 。
抗原抗体能形成抗原抗体免疫复合物,通过经典途径激活补体,形成攻膜复合物,从而导致细胞膜穿孔,细胞受损,台盼蓝进入细胞,染成蓝色,呈阳性反应。
说明CDC 实验必须要有抗原、抗体、补体共同参与。
②.第②组成阴性的原因:实验中加入抗体、LC。
因为无抗原和补体,不能形成抗原抗体免疫复合物,也无补体,因此不能形成攻膜复合物,不能使细胞膜穿孔,细胞无损伤,台盼蓝无法进入细胞,不能被染成蓝色,呈阴性反应。
说明CDC实验必须要有补体的参与。
③.第③组呈阴性的原因:试验中加入LC和补体,因为无抗原抗体,所以没有抗原抗体免疫复合物的形成,补体不能被激活,不能形成攻膜复合物,细胞无受损,台盼蓝不能进入而不被染色,呈阴性反应。
说明CDC实验必须要有抗原、抗体的参与。
④.第④组呈阴性的原因:实验中只加入LC,既无抗原抗体免疫复合物的形成,也无补体,细胞无受损,台盼蓝不能进入而不被染色,呈阴性反应。
大学生免疫实验报告范文实验目的本次实验的目的是了解和研究大学生免疫系统的功能和特点。
通过分析大学生的免疫能力,有助于提高我们的健康意识和掌握自身免疫系统的保护机制。
实验材料和方法实验材料- 大学生志愿者- 免疫分析仪器- 免疫实验试剂盒实验方法1. 采集志愿者的血液样本。
2. 提取血液中的白细胞进行免疫分析。
3. 使用免疫分析仪器对样本中的免疫细胞数量和活性进行检测。
4. 根据实验结果分析大学生免疫系统的状态和免疫能力。
实验结果经过对志愿者血液样本的免疫分析,我们得到了以下结果:1. 白细胞数量:与正常数值相比,大学生的白细胞数量整体偏低,但仍处于正常范围内。
2. 免疫细胞活性:大学生的免疫细胞活性相对较高,表明其免疫系统对外界侵袭具有较好的响应能力。
3. 免疫抗体水平:志愿者的免疫抗体水平相对偏低,可能是由于日常生活中的不良生活习惯或营养不均衡所致。
实验分析与讨论通过对大学生免疫系统的实验分析,我们可以得出以下结论:1. 大学生免疫系统相对脆弱:大学生处于高强度的学习和生活压力之下,缺乏充足的休息和锻炼,容易导致免疫系统的不稳定,降低身体的抵抗力。
2. 免疫系统活性受到积极影响:尽管大学生面临许多应激因素,但他们的免疫细胞活性较高,可能与年轻人的新陈代谢活跃有关。
3. 不良生活习惯可能影响免疫系统:不规律的作息时间、饮食不平衡以及缺乏运动等不良生活习惯可能导致大学生免疫抗体水平相对较低,容易受到感染和疾病侵袭。
实验结论通过本次实验的研究和分析,得出以下结论:1. 大学生免疫系统整体较为脆弱,需要更加注重健康管理和保护自身的免疫系统。
2. 充足的休息、良好的饮食和适量的运动对大学生的免疫系统具有积极的影响。
3. 需要加强大学生对免疫系统的认识和健康教育,培养良好的生活习惯和健康意识。
参考文献- [免疫学基础教程](- [大学生免疫系统调查研究](。
实验一免疫学实验一、免疫细胞检测:1、淋巴细胞转化试验2、E花环形成试验3、大吞噬试验4、小吞噬试验二、凝集试验(玻片法)凝集+ 不凝集-细菌鉴定结果:三、酶联免疫吸附试验(ELISA)示教原理:结果:实验二细菌形态观察及革兰染色一、观察细菌的基本形态:1、球菌2、杆菌3、螺形菌葡萄球菌大肠杆菌霍乱弧菌(革兰染色)(革兰染色)(革兰染色)二、观察细菌的特殊结构:1、芽胞2、荚膜3、鞭毛破伤风杆菌肺炎链球菌伤寒杆菌(革兰染色)(荚膜染色)(镀银染色)三、革兰染色1、步骤:2、结果:葡萄球菌呈色,为革兰性菌;大肠杆菌呈色,为革兰性菌。
3、简述革兰染色的技术关键及医学意义。
实验三细菌人工培养及其代谢产物的观察一、常用培养基的制备:1、怎样配制100ml普通肉汤培基?2、含有%琼脂的培基为固体培基,制成平板用于;制成斜面用于。
3、含有%琼脂的培基为半固体培基,主要用于。
二、细菌在培养基中的生长情况1、平板划线分离培养结果(记录菌落形态)2、在液体培基中的生长情况:葡萄球菌:枯草杆菌:链球菌:3、在半固体培基中穿刺接种培养结果伤寒杆菌呈生长,运动;痢疾杆菌呈 生长, 运动。
三、细菌代谢产物的观察 1、糖发酵试验:产酸产气产酸不产气+ 不分解-2、蛋白质分解试验:阳性+阴性-3、细菌的色素:4、简述细菌代谢产物检查的意义。
实验四消毒灭菌与细菌分布试验一、记录并分析细菌分布检查的结果:根据上述检查结果,简述其在医学、药学工作中的实际意义。
二、高压蒸汽灭菌常用压力、温度及时间为:高压蒸汽灭菌器的使用要注意的是:三、紫外线杀菌试验1、培养后菌苔生长情况(绘图):2、简述紫外线杀菌的特点及适用范围。
实验五药物的抗菌试验一、琼脂扩散法1、纸片法2、打孔法二、液体培养基连续稀释法(试管法)药物:浓度:菌种:结果:报告MIC:实验六病原性细菌一、观察下列细菌形态并绘图链球菌淋杆菌结核杆菌(革兰染色)(革兰染色)(抗酸染色)二、化脓性球菌1、葡萄球菌:阳性+阴性-2、链球菌:3、抗链球菌溶血素“O”试验(简称抗“O”或ASO试验):抗体效价为:简述其原理及临床意义:三、肠道杆菌:1、观察大肠杆菌、伤寒杆菌、痢疾杆菌在SS平板和双糖铁培养基中的菌落特点、生化反应、动力等。
医学免疫学实验报告免疫学实验报告引言:免疫学是研究人体免疫系统的科学,通过实验研究可以更好地了解免疫系统的功能和应对机制。
本次实验旨在探究免疫系统对外来抗原的应答过程,并评估免疫细胞的活性和效能。
实验材料与方法:1. 实验动物:使用小鼠作为实验对象,因其免疫系统与人类相似度较高。
2. 抗原制备:选择一种常见的抗原,如牛血清白蛋白(BSA),通过纯化和浓缩得到高纯度的抗原溶液。
3. 免疫程序:将小鼠随机分为实验组和对照组,实验组注射抗原溶液,对照组注射生理盐水。
观察并记录两组小鼠的免疫应答情况。
4. 免疫指标测定:采集小鼠血液样本,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)等技术测定血清中特定免疫球蛋白(如IgG、IgM)的水平。
实验结果与讨论:1. 免疫应答:实验组小鼠在注射抗原后,免疫系统迅速启动,产生针对抗原的特异性免疫应答。
对照组小鼠未注射抗原,免疫系统无明显应答。
2. 抗原特异性免疫球蛋白:ELISA结果显示,实验组小鼠血清中特定抗原特异性免疫球蛋白(如IgG)的水平显著升高,而对照组无明显变化。
这表明实验组小鼠的免疫系统成功识别并产生了针对抗原的免疫应答。
3. 免疫细胞活性:通过流式细胞术等技术,观察并比较实验组和对照组小鼠免疫细胞的活性。
实验结果显示,实验组小鼠的免疫细胞活性较高,表明其免疫系统对抗原的识别和攻击能力增强。
4. 免疫记忆效应:在实验组小鼠中,注射抗原后,免疫系统形成了对抗原的记忆效应。
再次注射相同抗原时,免疫应答更为迅速和强烈。
而对照组小鼠未形成明显的免疫记忆效应。
结论:本次实验结果表明,免疫系统对外来抗原具有高度的特异性和记忆性。
免疫细胞的活性和效能在免疫应答中起到关键作用。
这些实验数据为进一步研究免疫系统的功能和应对机制提供了重要依据。
展望:在未来的研究中,可以进一步探究免疫系统对不同类型抗原的应答差异,以及免疫细胞的分化和调控机制。
此外,可以结合其他技术手段,如基因工程和单细胞测序,深入研究免疫系统的细节和复杂性。
免疫学实验报告免疫学实验报告实验目的:通过实验探究免疫应答的原理和免疫系统的功能。
实验原理:免疫系统是人体防御外界病原体入侵的重要系统,包括体液免疫和细胞免疫两个部分。
本实验主要研究体液免疫,即通过体液中的抗体与抗原结合来进行抗原识别和消灭异常细胞的免疫反应。
实验材料:实验所需材料有抗原A、抗体A、抗原A标记物、酶标记二抗、底物、酶标设备等。
实验步骤:1. 将实验用的酶标板孔板进行预处理,将抗体A溶液加入到孔板中,并在室温下孵育一段时间,使其与孔板表面结合。
2. 加入已知浓度的抗原A溶液到孔板中,使抗原与已固定的抗体结合,孵育一段时间。
3. 弃去孔板中的液体,将含有抗原A标记物的溶液加入到孔板中,使其与已结合的抗原结合,孵育一段时间。
4. 弃去孔板中的液体,用酶标设备检测标记物与孔板的结合情况。
5. 加入底物使酶标记物能够产生颜色反应。
6. 使用酶标设备测量底物的颜色反应强度,从而获得抗原与抗体结合的程度。
实验结果:根据实验结果,我们可以得到抗原与抗体结合的程度以及抗原的浓度。
实验结论:通过实验我们可以得到样本中抗原的浓度信息。
实验结果显示,抗原与抗体之间的结合程度与抗原浓度呈正相关关系,即抗原浓度越高,抗原与抗体的结合程度越强。
这表明体液免疫能够通过抗体与抗原的结合来识别并清除异常细胞。
实验总结:本次实验通过酶标技术原理探究了免疫应答的基本原理和体液免疫的功能。
通过该实验可以更好地理解免疫系统的机制,为进一步研究和应用免疫学提供基础。
同时,实验中采用的酶标技术也展示了其在免疫学研究中的重要应用价值。
免疫学作为生命科学的一个重要分支,对于人体健康和疾病防治具有重要意义,今后还需要进一步深入研究。
免疫学实验报告姓名:买迪来木.坎代尔学号:201020131222 班级:2010131实验一:多克隆抗体的制备和抗体效价的检测一:实验原理有了质量好的抗原,还必须选择适当的免疫途径,才能产生质量好的抗体。
质量好的抗体的标准:特异性强和效价高多克隆抗体的概念:在含有多种抗原决定簇的抗原刺激下,体内多个 B 细胞克隆被激活并产生针对多种不同表位的单克隆抗体,其混和物为多克隆抗体。
机体内所产生多克隆免疫血清实质上是由多种抗体组成的混合物,又称多克隆抗体。
多克隆抗体产生的基本原理:初次反应的抗体持续时间较短,亲和力也较低,多无实际应用价值。
机体初次接触抗原后,激发体液免疫应答反应。
在 Mø 和 Th 的作用下,B 细胞被激活,增生分化为浆细胞和记忆 B 细胞(Bm)。
浆细胞产生特异性抗体。
由于初次反应时,只有少量对该抗原特异的免疫活性细胞被诱导而增生分化为浆细胞。
随着抗原的消耗,抑制 T 细胞(Tc)的激活和循环抗体的反馈抑制作用,浆细胞减少,抗体滴度很快下降。
二次反应产生的抗体主要是高亲和力的 IgG。
机体再次受同一抗原刺激后,对该抗原特异性的 Bm 迅速增殖分化为浆细胞,产生特异性抗体。
Th 的记忆细胞也加快反应的进行,在抗原作用 1~2 天后,抗体滴度迅速上升。
抗体合成率为初次反应的几倍到几十倍。
1.用于免疫的动物用于免疫的动物可以是哺乳类和禽类,可以是羊、马、兔、鸡等,实验室常用兔、山羊和豚鼠。
动物种类的选择标准:1.根据抗原的生物学特性和所需获得的抗血清数。
2.用于免疫的动物需适龄、健壮、无感染性疾病,最好为雄性。
3.十分注意动物的饲养,消除动物个体差异及在免疫过程中死亡的影响。
4.如果用兔子,最好用纯种新西兰兔,一组三只,体重2-3kg为宜。
2.免疫途径:途径有很多种:静脉注射、腹腔内注射、肌肉内注射、皮内注射、皮下注射、淋巴结内注射等。
一般选择多点皮内或背部注射,每点注射0.1ml左右。
医学免疫学实验报告
免疫考试终于结束了,终于可以和补体抗体抗原细胞因子适应性免疫应答固有免疫应答say goodbye了,真的是好开心,在持续一天的开心快乐之后,莫名觉得好空虚,可能长大了,发现快乐没有来得那么容易,像是被掏空了自己,但是还是要坚持,毕竟真的不是小孩子了,要对自己做的事情负责,感觉我又开始废话连篇了,还是直接进入主题吧
我们这学期做了三个免疫实验,实验内容、实验原理相对简单,其中两个实验是关于免疫学检验技术的,
1、补体介导的细胞毒试验:
2、沉淀反应与凝集反应(凝集与双扩)
3、酶联免疫吸附测定(ELISA)
在写实验报告时的一些建议:
1、写实验步骤时,尽量使用流程图的方式来展示,这样可以使自己的实验步骤简洁、明了;
2、在实验过程中,尽管实验比较简单,但是还是要注意记录好实验的数据(实验时间、实验药剂用量)、实验现象,并在实验报告中记录出来;
3、在写实验结果、结论的时候,对实验过程、实验结果要有所思考,可以采用问答的方式展现自己的思考(这是最重要的,含金量最重)。
免疫学实验报告标题:免疫学实验报告导言:免疫学作为生物医学研究领域中的重要分支,研究人体免疫系统发挥的作用以及免疫疾病的发生与治疗。
本实验旨在通过探索免疫细胞的生物学特性、免疫反应的机制以及免疫系统的调控方式,加深对免疫学知识的理解。
第一部分:实验目的和方法1.1 实验目的本实验旨在通过实验手段验证免疫系统对外界刺激的响应机制,以及不同因素对免疫功能的影响。
1.2 实验方法本实验采用体外细胞培养及免疫染色等常规实验方法,基于免疫细胞培养和激发实验介质的构建,通过检测染色试剂标记的免疫标志物,并分析实验数据,得出相应结论。
第二部分:免疫细胞的生物学特性2.1 免疫细胞的分类免疫细胞是免疫系统中的重要组成部分,包括巨噬细胞、树突状细胞、T细胞和B细胞等。
它们分别在体内扮演着清除病原体、识别抗原和产生抗体等重要角色。
2.2 免疫细胞的功能和机制巨噬细胞通过吞噬和消化病原体参与非特异性免疫反应,树突状细胞则负责捕获外来抗原,并将其展示给T细胞。
T细胞通过识别这些抗原并发出信号来激活巨噬细胞和B细胞,后者则产生特异性抗体来清除病原体。
第三部分:免疫反应的机制3.1 免疫系统的识别机制免疫系统通过识别外来抗原来启动免疫反应。
这一过程涉及T细胞或B细胞表面的免疫球蛋白与抗原的特异性结合。
3.2 免疫反应的启动与调控当抗原与免疫细胞表面的特异性受体结合,信号将被传递到细胞内,从而启动免疫反应。
T细胞通过产生胞外信号分子来刺激其他免疫细胞,促使它们发挥抗原清除功能。
第四部分:免疫系统的调控方式4.1 免疫系统的正调控正调控是指通过一系列信号分子的协调作用来增强免疫功能。
这一过程主要由调节性T细胞扮演重要角色,通过表达抑制性分子来抑制过度免疫反应。
4.2 免疫系统的负调控负调控主要由免疫抑制因子扮演角色,如抑制性细胞因子和抑制性受体。
它们减弱免疫反应,避免自身免疫疾病的发生。
结论:通过本实验,在对免疫细胞的生物学特性进行研究的基础上,阐明了免疫反应的机制和调控方式。
免疫学实验报告免疫学实验报告免疫学是研究机体免疫系统的科学,通过实验研究,我们可以更好地了解免疫系统的功能和作用。
本次实验旨在探究免疫系统对外部病原体的应对机制以及免疫细胞的活性。
实验一:外源性抗原刺激下的免疫反应首先,我们选择了小鼠作为实验对象。
将小鼠分为两组,一组注射了抗原A,另一组注射了生理盐水作为对照组。
注射后,我们观察到注射抗原A的小鼠出现了明显的免疫反应,如红肿、瘙痒等症状,而对照组的小鼠则没有出现这些症状。
为了进一步研究免疫反应的机制,我们对两组小鼠进行了淋巴细胞计数。
结果显示,注射抗原A的小鼠的淋巴细胞数量明显增加,而对照组的小鼠则没有明显变化。
这表明,外源性抗原的刺激可以引发免疫系统的活化,进而增加淋巴细胞的数量。
实验二:免疫细胞的活性研究为了进一步了解免疫系统的活性,我们进行了一系列的实验。
首先,我们选择了巨噬细胞作为研究对象。
通过给巨噬细胞添加外源性抗原,我们观察到巨噬细胞的吞噬能力明显增强。
这表明,免疫系统可以通过巨噬细胞来清除体内的病原体。
接着,我们研究了T细胞的活性。
通过给T细胞添加外源性抗原,我们发现T 细胞的增殖能力明显增强。
这说明,T细胞在免疫反应中起到了重要的作用,能够识别并攻击体内的病原体。
实验三:免疫系统的记忆性为了研究免疫系统的记忆性,我们进行了一项长期实验。
首先,我们注射了抗原A给小鼠,观察到小鼠出现了免疫反应。
然后,经过一段时间的休息,我们再次注射了抗原A给同一批小鼠。
令人惊讶的是,这次注射后,小鼠的免疫反应明显减弱,甚至没有出现明显症状。
这表明,免疫系统具有记忆性,能够对之前接触过的抗原做出更快、更有效的应对。
结论通过本次实验,我们深入了解了免疫系统的功能和作用。
免疫系统对外部病原体的应对机制是多样的,包括免疫反应、巨噬细胞的吞噬能力以及T细胞的攻击能力。
同时,免疫系统还具有记忆性,能够对之前接触过的抗原做出更快、更有效的应对。
这些研究结果对于深入理解免疫系统的功能和作用具有重要意义。
医学免疫学实验报告引言免疫学是研究机体对各种病原体的防御和免疫反应的科学。
在医学领域中,免疫学的研究对于了解和探索疾病的发生机制以及开发新的治疗方法具有重要意义。
本实验旨在探索免疫系统的功能,并通过一系列实验步骤来加深对医学免疫学的理解。
实验材料和方法实验材料•小鼠•细菌•离心管•注射器•细胞培养基实验步骤1.实验准备:收集所需实验材料,确保实验环境的无菌性。
2.小鼠接种:将小鼠分为两组,一组为实验组,一组为对照组。
对实验组小鼠进行细菌接种,而对照组小鼠则不接种。
3.细菌培养:将细菌培养在适当的培养基中,以获取足够的细菌量。
4.细菌注射:使用注射器将培养好的细菌注入实验组小鼠的体内,同时对照组小鼠注射等量的生理盐水。
5.观察实验组小鼠:观察实验组小鼠在接种细菌后的反应和症状。
6.采集样本:在一定时间内,从实验组和对照组小鼠中采集血液样本和其他相关样本。
7.样本处理:将采集到的样本进行离心,分离出血清和细胞。
8.免疫检测:使用免疫学方法,如酶联免疫吸附试验(ELISA)等,对采集到的样本进行免疫检测。
9.数据分析:统计和分析实验数据,比较实验组与对照组的免疫反应差异。
结果与讨论通过上述实验步骤,我们进行了医学免疫学的实验研究。
初步结果显示,实验组小鼠在接种细菌后表现出明显的免疫反应,包括体温升高、免疫细胞增加等。
而对照组小鼠则没有出现这些免疫反应。
进一步的免疫检测结果显示,实验组小鼠血清中特定抗体水平升高,说明它们对细菌产生了免疫应答。
而对照组小鼠血清中的抗体水平相对较低。
通过本实验,我们验证了医学免疫学中关于免疫应答的理论,并了解了免疫系统在抵御细菌感染中的作用。
这对于研究疾病的发生机制以及开发新的治疗方法具有重要意义。
结论本实验通过对小鼠进行细菌接种,研究了免疫系统对细菌的免疫应答。
实验结果表明,细菌接种后实验组小鼠显示出免疫反应,而对照组小鼠则没有。
免疫检测结果进一步证实了实验组小鼠对细菌免疫的产生。
实验报告一
姓名:王亚斌班级:生物技术12(1)学号:2012332860026
实验一:_淋巴细胞的分离
一、实验目的
1.熟悉人外周血淋巴细胞的组成
2.熟悉人外周血淋巴细胞分离的方法
3.熟悉密度梯度离心法分离淋巴细胞的原理和方法
二、方法步骤、观察内容
1、采静脉血2ml加入抗凝管,轻轻摇动试管,混匀,5min后加入Hank's 液2ml,手动轻轻摇匀。
2、将抗凝血全部沿管壁缓慢加至另一含2ml淋巴细胞分离液管的液面上,注意保持两种液体界面清晰。
3、将试管平衡后置水平式离心机,1000rpm离心20min。
4、用毛细吸管仔细吸取血浆与分层液界面处淋巴细胞层至一刻度离心管内。
5、加入5倍体积的Hank's液,手动旋转试管使液体混匀,1000rpm离心10min,弃上清,沉淀即主要为淋巴细胞(或单位个核细胞)。
加入含10%灭活小牛血清Hank’s液1 ml,混匀后进行计数。
(备注:如做淋巴细胞转化或其它培养,所用试剂、器材应是无菌的。
)
6.细胞存活率检测:取10ul淋巴细胞悬液加入0.4%台昐蓝染色液10ul,混匀。
取10ul加入血细胞计数板,精制片刻,置显微镜高倍镜下观察。
三、观察结果
利用显微镜观察如上图所示。
单个核细胞总数=(四个大方格中单个核细胞总数/4)x稀释倍数x细胞悬液毫升数x10的四次方
利用细胞计数方法得知总细胞数为639.
根据细胞存活率=活细胞数/(活细胞+死细胞)x100%=(639-26)/639=96%
活细胞不折色,折光性强。
死细胞由于染料可渗入细胞内,故死亡细胞染成蓝色,死细胞体积较大,无光泽。
四、分析讨论
1. 人外周血中的淋巴细胞组成?
2. 根据细胞的表面标志分离淋巴细胞的原理是什么?
1.答:血液循环中的淋巴细胞。
主要由T细胞(占70%~80%)和B细胞(占20%~30%)组成
2.答:外周血中单个核细胞和单核细胞,其体积、形态和密度与其他细胞不同.淋巴细胞分离液是一种密度介于1.075∽1.090之间而近似于等渗的溶液,用它做密度梯度离心,使一定密度
的细胞按相应密度梯度分布,从而将各种血细胞加以分离.
实验报告二
姓名:王亚斌班级:生物技术12(1)班学号:2012332860026
实验二:_E-玫瑰花环形成实验_
一、实验目的
1.掌握人T淋巴细胞形成E-花环的实验原理和操作方法。
2.熟悉T淋巴细胞的功能检测方法。
二、方法步骤、观察内容
1、取肝素抗凝血1~2ml,用分层液分出淋巴细胞并洗涤,用Hanks液调整细胞浓度为2—2.5×106ml。
2、取小试管加入l ml淋巴细胞悬液及1%羊红细胞0.l ml,混匀置37℃水浴箱5分钟。
3、800~1000 r/min低速离心5分钟,放4℃冰箱2小时。
4、轻轻旋转试管使团块混匀,加2滴0.8%戊二醛液,摇匀,室温静置10分钟,使E花环固定。
5、取悬液一滴放于载玻片上,将稀释的瑞氏染液加入玻片上染色3分钟。
6、弃去染液,待干后油镜观察,计数200个淋巴细胞中形成花环的细胞效,算出百分率。
三、观察结果
1、淋巴细胞染成深蓝色,羊红细胞染成淡红色。
2、每个淋巴细胞上粘附三个以上羊红细胞者即为玫瑰花环形成细胞。
细胞总数为50个花环数为18
花环形成率为18/50=36%
四、分析讨论
1. 形成T淋巴细胞形成玫瑰花环百分率变化的因素有哪些?
2. 临床上T淋巴细胞数目的变化与哪些疾病的诊断及治疗疗效观察有关系?
1.答:T淋巴细胞数量的变化于机体的细胞免疫功能状态有一定关系。
人周围血液中T淋
巴细胞表面有羊红细胞受体,与绵羊红细胞相遇时,在其周围形成花环样细胞团,凡能结合三个以上绵羊红细胞者称为E玫瑰花环形成细胞。
2.答:T淋巴细胞来源于骨髓的多能干细胞,它是由骨髓中的一部分多能干细胞或前T细
胞迁移到胸腺内,在胸腺激素的诱导下分化成熟,成为具有免疫活性的T细胞。
T细胞分为CD4 T细胞和CD8 T细胞两个主要的亚群,T淋巴细胞及亚群的检测结果可以解释一些疾病发病机理、对患者的免疫功能和预后做出判断以及指导治疗,如感染性疾病、肿瘤性疾病、自身免疫性疾病、器官移植患者、其他免疫缺陷或异常的患者。