免疫学检测技术知识点
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第一章概论1. 免疫学(Immunology)是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病、治病为目的的一门现代医学学科。
免疫学技术对推动免疫学的发展及基础与临床免疫学的结合起了重要作用。
学习免疫学的基本概念,了解临床免疫学的理论基础,掌握免疫技术的检测原理是学习和研究临床免疫学与免疫技术的重要保障。
第一节免疫学简介1. 免疫(immunity)是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
免疫系统与机体的其他系统相互配合,相互制约,共同维持机体在生命过程中的生理平衡。
一、免疫学概念与免疫应答1. 宿主体内的免疫系统能识别并清除从外环境中侵入的病原生物及其产生的毒素、内环境中因基因突变产生的肿瘤细胞、自身衰老残损的组织细胞或自身变性抗原,实现免疫防御、免疫自稳、免疫监视。
免疫防御——指机体排斥外源性异物的能力。
免疫自稳——指机体识别和清除自身衰变残损的组织细胞的能力,以维持正常内环境稳定。
免疫监视——指机体杀伤和清除异常突变细胞的能力,以监视和抑制恶性肿瘤在体内生长。
2. 免疫应答反应(immune response):是指机体免疫系统接受抗原刺激发生一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
免疫应答的过程主要分为:识别阶段(recognition phase)——抗原识别处理传递信息活化阶段(activation phase)——免疫细胞活化增殖产生效应细胞、分子效应阶段(response phase)——执行效应功能3. 免疫应答效应大多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清除效应。
免疫应答反应过强时,可致机体组织或器官发生病理损伤,出现临床疾病。
二、免疫组织与器官1. 免疫系统(immune system)由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
淋巴组织及免疫细胞分布于机体全身,执行免疫防卫功能,维持机体内环境正常的生理功能及动态平衡。
【免疫学检验】知识点整理(第二部分)声明一:本系列知识点由中华检验医学网整理。
如非重点,请您轻骂;真有考到,纯属巧合。
声明二:我们不是学霸,只是资料的搬运工。
8 化学发光免疫技术:1 化学发光剂【酶促反应发光剂:辣根过氧化物酶HRP发光剂(常用底物为鲁米诺及其衍生物和对-羟基苯乙酸);碱性磷酸酶ALP发光剂(AMPPD:有2~30min的分解半衰期,发出波长为470nm的持续光,在15min达到高峰;4-MUP:在360nm激发光的作用下,发出448nm荧光)【直接化学发光剂:改变溶液pH就能发光。
口丫口定酯AE在含过氧化氢的稀碱溶液中能发光。
【电化学发光剂:通过点击表面进行电化学反应而发出光的物质。
化学发光剂三联吡啶[Ru(bpy)3]3+和电子共同三丙胺TPA在阳性点击表面课同时失去一个电子而发生氧化反应。
二级的三联吡啶聊被氧化成三家,成为强氧化剂,TPA失去电子后被氧化成阳离子自由基,课自发失去一个侄子,形成自由基,是一种很强的还原剂,课将一个高能量电子递给三家的三联吡啶聊,使其形成激发态二价。
发射场620nm的广州,恢复基态。
【电化学发光剂特点:分子小,空间位阻小。
衍生物与免疫球蛋白结合不印象起可溶性与免疫性。
水溶性好,稳定性高。
9 补体检测及应用:0 基本概念【补体:存在于人或动物血清中的一组具有酶样活性的不耐热和功能上连续反应的蛋白质,是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件。
【溶血素:抗绵羊红细胞抗体。
实验前56摄氏度30分钟灭活补体,预先用免疫溶血实验滴定溶血素效价(将不同稀释度的溶血素和等量的补体与SRBC混合于试管中,37摄氏度30分钟水浴。
完全溶血的试管中液体红色透明,离心后无细胞沉降;完全不溶血的试管中液体浑浊,离心后红细胞完全沉降,上清液无色透明。
一产生完全溶血的溶血素的最高稀释度作为其效价,确定为1单位。
补体结合使用一般采用2U溶血素)【经典激活途径:机体体液免疫反应的主要效应机制。
临床免疫学检验知识点1.免疫系统的基本知识:了解免疫系统的组成、功能和调节机制是理解临床免疫学检验的基础。
免疫系统由免疫器官(如脾脏、淋巴结、骨髓等)和免疫细胞(如淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等)组成,其功能包括抵御病原体的入侵、清除异常细胞和产生抗体等。
2.免疫细胞的检测方法:常用的免疫细胞检测方法包括流式细胞术、免疫组化和染色技术等。
流式细胞术可用于检测和计数不同类型的免疫细胞,免疫组化和染色技术可用于检测细胞表面标记物和细胞内分子的表达水平。
3.免疫球蛋白的检测方法:免疫球蛋白是免疫系统中的重要成分,其浓度和种类的改变可以指示一些疾病的存在和进展。
测定免疫球蛋白的方法包括免疫电泳、免疫扩散和化学发光等技术。
4.免疫反应的检测方法:免疫反应的检测方法可以用于评估机体对病原体的免疫应答以及检测自身免疫疾病的存在。
常用的免疫反应检测方法包括抗体检测、细胞毒性测定和溶菌试验等。
5.自身抗体的检测方法:自身抗体是机体免疫系统对自身组织产生的免疫反应产物,其异常产生与自身免疫疾病的发生和进展密切相关。
常用的自身抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光和免疫印迹等。
6.免疫功能的评估方法:免疫功能的评估可以指导临床医生判断机体的免疫状况和预测疾病的发展趋势。
常用的免疫功能评估方法包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子水平检测和细胞增殖测定等。
7.临床应用:临床免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如,检测艾滋病病毒抗体可用于艾滋病的早期诊断和监测;自身抗体的检测可用于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎的诊断;细胞因子水平的检测可以评估炎症反应和肿瘤的进展等。
综上所述,临床免疫学检验涵盖了多个方面的知识点,包括免疫系统的基本知识、免疫细胞和免疫球蛋白的检测方法、免疫反应和自身抗体的检测方法、免疫功能的评估方法以及临床应用等。
这些知识点对于临床医生正确使用和解读免疫学检验结果具有重要的指导意义。
免疫检验知识点总结一、免疫检验的基本原理① 抗体与抗原的相互作用免疫检验的基本原理是利用抗体与抗原的特异性相互作用。
抗体是一种由机体产生的特异性蛋白质,可以识别并结合与之对应的抗原,形成抗原-抗体复合物。
这种特异性相互作用是免疫检验能够有效识别某些疾病的基础。
② 免疫检验的灵敏度和特异性免疫检验的灵敏度是指测试方法能够准确检测到低浓度抗原或抗体的能力,而特异性是指方法能够区分目标抗原或抗体与其他非特异性成分的能力。
通常情况下,免疫检验需要具有较高的灵敏度和特异性,才能准确诊断疾病。
二、常见的免疫检验方法1. ELISA(酶联免疫吸附实验)ELISA是一种广泛应用于医学诊断的免疫检验方法。
它利用酶标记的抗体或抗原与待检测的抗原或抗体结合,通过酶底物的显色反应来检测特定物质的存在和浓度。
ELISA方法可以用于检测各种疾病的标志物,包括感染病原体、肿瘤标志物、药物残留等。
2. 免疫荧光分析免疫荧光分析是利用荧光标记的抗体识别和检测待检测的抗原或抗体。
通过荧光显微镜或荧光光度计来观察或定量分析荧光信号,以确定特定物质的存在和浓度。
免疫荧光分析广泛用于细胞学、免疫学、微生物学等领域的研究和诊断。
3. 免疫固定电泳免疫固定电泳是通过将抗体和待检测的抗原在电泳条件下结合,然后通过免疫印迹方法检测特定蛋白质或其他生物分子的存在和浓度。
免疫固定电泳在临床诊断和科研领域有广泛的应用。
4. 放射免疫测定放射免疫测定是利用放射性同位素标记的抗体或抗原与待检测的抗原或抗体结合,通过放射性测量仪器来检测特定物质的存在和浓度。
放射免疫测定通常具有较高的灵敏度和特异性,可用于检测一些低浓度的生物分子。
5. 流式细胞术流式细胞术是利用激光技术和荧光标记的抗体来检测和分析细胞表面或内部标志物的存在和表达水平。
流式细胞术可以快速高效地分析大量细胞样本,广泛用于免疫学、细胞生物学、肿瘤学等领域的研究和诊断。
三、免疫检验在疾病诊断中的应用1. 传染病的诊断免疫检验方法可以用于感染病原体的检测,例如HIV、乙肝病毒、丙肝病毒等。
免疫学检测法汇总免疫学检测法是现代医学中常用的一种检测方法,通过检测人体免疫系统产生的抗原-抗体反应来确定疾病的存在与否,以及疾病的类型和程度。
免疫学检测法广泛应用于临床诊断、流行病学调查、药物监测和研究等领域。
以下将对常用的免疫学检测法进行汇总。
1.酶联免疫吸附试验(ELISA):ELISA是一种常用的免疫学检测方法,利用酶标技术来检测抗原或抗体的存在。
ELISA分为直接ELISA、间接ELISA、竞争ELISA和间接荧光ELISA等多种类型,适用于检测各种疾病,如感染性疾病、自身免疫性疾病和肿瘤等。
2.免疫磁珠技术:免疫磁珠技术是通过抗体与磁性颗粒结合,然后利用磁力分离的原理实现对抗原或抗体的检测。
该技术具有高灵敏度和高特异性的特点,常用于病原微生物的检测、蛋白质的分离等。
此外,免疫磁珠也可用于药物检测、生物分子的富集等。
3. 蛋白质印迹(Western blot):蛋白质印迹是一种用于检测蛋白质的存在和表达水平的方法。
首先将蛋白质分离并转移到膜上,然后利用抗体与目标蛋白质结合,最后通过荧光标记或酶标记的二抗进行信号的检测。
该方法常用于疾病的诊断和研究,如肿瘤标记物的检测和鉴定。
4.免疫组织化学(IHC):免疫组织化学是一种通过对组织切片中特定抗原的免疫反应进行染色来检测该抗原的存在和分布的方法。
该技术应用广泛,在病理学诊断中常用于确定肿瘤的类型和分级、鉴别不同组织类型等。
5.流式细胞术:流式细胞术是一种通过检测细胞表面或内部抗原的免疫反应来对细胞进行分类和分析的方法。
流式细胞术结合免疫标记物和激光技术可以实现对单个细胞的快速高通量检测,常用于免疫细胞亚群的检测、免疫细胞活性的评估等。
6.荧光免疫检测:荧光免疫检测利用荧光标记的抗体或荧光探针与靶分子结合来检测目标物的存在和表达水平。
该技术具有高灵敏度、高分辨率和多重检测的优势,常用于疾病的诊断和治疗监测。
除了上述常用的免疫学检测法外,还有ELISPOT(酶联免疫斑点法)、免疫电镜(Immuno-EM)等特殊的检测方法,用于对特殊细胞亚群或抗原的检测。
免疫学检验知识点总结Immunology testing is a crucial aspect of modern medicine, encompassing a diverse range of techniques used to detect and monitor immune responses. It plays a pivotal role in diagnosing diseases, assessing the effectiveness of treatments, and understanding the immune system's intricate functions.免疫学检验是现代医学的关键领域,包括一系列用于检测和监测免疫反应的技术。
它在诊断疾病、评估治疗效果以及理解免疫系统的复杂功能方面发挥着核心作用。
One fundamental aspect of immunology testing is the identification of antigens and antibodies. Antigens are substances that trigger an immune response, while antibodies are proteins produced by the immune system to neutralize these antigens. Techniques such as immunoassay and ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) are commonly used to detect and measure the presence of antigens and antibodies in biological samples.免疫学检验的一个基本方面是抗原和抗体的识别。
免疫学检验知识点免疫学检验是一种通过检测体内免疫系统的功能状态来评估健康状况的方法。
免疫系统是人体的一种重要的防御机制,可以识别和清除病原体,保护身体免受感染。
免疫学检验可以帮助医生诊断和治疗各种免疫相关的疾病,例如自身免疫性疾病、过敏反应、免疫缺陷等。
本文将介绍一些常见的免疫学检验知识点。
一、抗体检测抗体是一种由免疫系统产生的蛋白质分子,可以识别和结合特定的抗原。
通过检测抗体的存在和量来评估免疫系统对疾病的应答情况。
常见的抗体检测包括ELISA(酶联免疫吸附试验)、Western blotting(蛋白质印迹)等。
这些检测方法可以用于检测感染性疾病的抗体,例如HIV、肝炎病毒等,并可用于确认诊断和评估治疗的效果。
二、免疫球蛋白检测免疫球蛋白是一种由免疫细胞分泌的抗体,可以帮助中和细菌毒素、清除细菌和病毒等。
免疫球蛋白检测可以评估免疫系统的功能状态。
常见的免疫球蛋白检测包括免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)等。
这些检测可以用于评估免疫系统对感染的应答情况、诊断免疫缺陷病、监测免疫治疗的效果等。
三、细胞免疫学检测细胞免疫学检测是一种评估免疫系统功能的重要方法。
常见的细胞免疫学检测包括淋巴细胞亚群分析、细胞毒性检测、细胞增殖试验等。
这些检测可以评估免疫细胞的数量、功能和应答情况,用于诊断免疫相关疾病、评估治疗效果等。
四、炎症指标检测炎症是免疫系统对感染和损伤的一种典型反应。
炎症指标检测可以评估免疫系统对炎症的应答情况。
常见的炎症指标包括C-反应蛋白(CRP)、白细胞计数、红细胞沉降率(ESR)等。
这些指标可以用于评估感染和炎症性疾病的程度、监测治疗效果等。
五、过敏原检测过敏反应是一种免疫系统过度应答一些外界物质的情况,例如花粉、食物、宠物等。
过敏原检测可以帮助确定引发过敏反应的具体物质,以便采取相应的预防和治疗措施。
常见的过敏原检测包括皮肤划痕试验、血清IgE测定等。
免疫学检验知识点总结免疫学检验是临床检验中非常重要的一个领域,通过检查人体的免疫系统功能,可以帮助医生诊断疾病、监测疾病进展以及评估治疗效果。
免疫学检验涉及到许多知识点,包括免疫学基础知识、免疫学检验方法、常见的免疫学检验指标等。
本文将对免疫学检验的相关知识点进行总结。
一、免疫学基础知识1. 免疫系统的组成免疫系统由两大部分组成:体液免疫和细胞免疫。
体液免疫主要通过抗体来进行免疫应答,而细胞免疫则通过吞噬细胞和T细胞来进行免疫应答。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能包括防御感染、清除异常细胞、调节炎症反应等。
免疫系统通过对抗原的识别和消除来维护机体内稳态,保护机体免受外界病原体的侵害。
3. 免疫系统的异常免疫系统的异常会引发一系列疾病,包括自身免疫病、免疫缺陷病、过敏性疾病等。
免疫系统的异常分析对于疾病的诊断和治疗至关重要。
二、免疫学检验方法1. 免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的免疫学检验方法,包括直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。
直接免疫荧光法可以用于检测抗原,间接免疫荧光法可以用于检测抗体。
该方法操作简便、灵敏度高,被广泛应用于临床诊断。
2. 酶联免疫吸附测定法(ELISA)ELISA是一种敏感度高、特异性强的免疫学检验方法,可以用于检测抗体或抗原。
它的操作简便,可以同时进行多个样本的检测,被广泛应用于病毒感染、免疫性疾病等的诊断。
3. 免疫印迹法(Western Blot)西方印迹法是一种用于检测蛋白质的技术,可以用于分析抗原或抗体的特异性。
该方法适用于检测免疫印迹图谱,可用于疾病的诊断和治疗。
4. 流式细胞术流式细胞术是一种用于分析或分选细胞的技术,可以用于检测免疫细胞的表面标记物、分析细胞免疫学特性等。
该方法操作简便、高通量化,被广泛应用于免疫学研究和临床诊断。
5. 免疫电泳法免疫电泳法是一种用于分离和检测蛋白质的技术,可以用于检测血清中的免疫球蛋白和其他蛋白质。
该方法适用于检测免疫球蛋白谱图、诊断多发性骨髓瘤等。
检验免疫知识点总结免疫学是研究生物体如何全面抵抗外来微生物及其毒素、组织和细胞损伤、异常细胞生长和无源异物,并调节维持体内稳态和相互适应的一门学科。
从分子、细胞和器官水平上探讨动物对抗病原体和抗体、激素、神经系统发挥作用的机制。
下面我们来总结一下免疫学的知识点。
1. 免疫系统的功能免疫系统是机体内部一项极为复杂的保卫系统,其功能包括三个方面:(1) 抵抗病原体:免疫系统是机体最重要的防御系统,能对多种病原体进行抵抗,包括细菌、病毒、真菌、寄生虫等。
(2) 抗癌:免疫系统能够识别和消灭体内的异常细胞,对抗癌症具有重要作用。
(3) 维持稳态:免疫系统还参与维持机体内部环境的平衡,调节机体内部的代谢和稳态。
2. 免疫系统的组成免疫系统由两大部分组成:先天免疫系统和获得免疫系统。
(1) 先天免疫系统:是机体天生具备的免疫保护机制,包括皮肤、黏膜、血清种种无特异性体液等。
先天免疫系统具有快速、广谱的抵抗作用,是人体抵御感染的第一道防线。
(2) 获得免疫系统:是机体在接触抗原后,通过体液免疫和细胞免疫产生相对特异性和记忆性的免疫应答,并能够产生抗体和免疫记忆。
获得免疫系统对新入侵的抗原有更为精确、灵活的识别和清除能力。
3. 免疫系统的细胞及其功能免疫系统中主要包括多种细胞类型,包括淋巴细胞、巨噬细胞、树突状细胞等。
(1) 淋巴细胞:包括T细胞、B细胞和NK细胞。
T细胞能够通过识别抗原并参与细胞毒性作用,调节免疫应答。
B细胞则是产生抗体的细胞,能够对抗原进行专一性识别,并分泌抗体发挥清除作用。
NK细胞则主要参与对病毒感染及肿瘤细胞的清除。
(2) 巨噬细胞:巨噬细胞是淋巴系统中最重要的抗原递呈细胞,其主要功能是对抗原进行摄取、加工和递呈,并发挥抗原呈递和清理作用。
(3) 树突状细胞:树突状细胞是一类具有高度抗原呈递功能的抗原递呈细胞,其主要功能是感知并识别抗原,激活T细胞和B细胞,并参与T细胞的活化。
4. 免疫应答的类型及过程免疫应答是机体对抗原刺激产生的制约性的反应。
免疫学检测技术知识点
一、抗体的检测及应用抗体进行的检测
(一)概念
利用抗原和抗体特异性结合的特性,对抗原或抗体进行定性、定量检测。
(二)血凝抑制试验
可定量检测流感病毒中和抗体。
流感病毒包膜上血凝集素可凝集红细胞,血凝集素中和抗体可抑制这种凝集。
(三)凝集反应和血型鉴定
颗粒性抗原 + 相应抗体→ 凝集
1.直接凝集反应:
玻片法:抗体→ 抗原?(如:人类ABO血型鉴定;菌种鉴定)
定性实验
试管法:抗原→ 抗体?(如:肥达反应(诊断伤寒、副伤寒)
半定量实验
2.间接凝集反应:
将可溶性抗原/抗体吸附于载体(红细胞或乳胶颗粒)+ 相应抗体/抗原→间接凝集
如:将人IgG吸附在乳胶颗粒上的类风湿因子检测。
反向间接凝集:已知抗体吸附在载体上的凝集。
如Rh血型不符时检测患者抗红细胞Rh抗原IgG。
(四)免疫荧光
用荧光素标记的抗体/抗原分子检测相对应的抗原/抗体分子的技术。
用于CD分子鉴定、细胞蛋白定位等。
常用荧光素:异硫氰酸荧光素(FITC)、藻红蛋白(PE)
(五)放射免疫
放射性核素标记进行的抗原抗体反应,用于激素等微量物质的检测。
(六)酶免疫
1.酶联免疫吸附实验(ELISA)
将抗原或抗体与固相载体(常为聚苯乙烯板)结合,然后加入待测抗体或抗原,最后以酶标抗体和底物进行检测的技术。
用于抗原或血清抗体的定量检测。
2.免疫组化:用标记特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和酶-底物的显色反应,对细胞中的抗原进行定位、定性检测的方法。
(七)免疫电镜
免疫化学技术与电镜技术结合,在超微结构水平观察抗原、抗体结合定位的方法。
(八)免疫沉淀
用特异性抗体自细胞裂解液中分离特异性蛋白抗原的方法。
(九)免疫印迹:Western blotting
用抗体检测蛋白质的分子量和抗原特异性的方法。
免疫印迹
二、免疫细胞的分离
(一)Ficoll-hypaque离心法:
即葡聚糖-泛影葡胺密度梯度离心法。
常用于分离制备单个核细胞(PBMC)。
(二)磁珠分离法:利用免疫磁珠对淋巴细胞及其亚群进行分离纯化。
如抗CD4磁珠
(三)流式细胞术(FCM):用荧光激活细胞分类仪通过荧光素标记单克隆抗体结合细胞表面CD分子而对细胞进行分类和定量的检测方法。
流式细胞术可用于鉴定、分离不同细胞。
三、免疫细胞的特异性、数量和功能检测
(一)流式细胞术:
(二)T细胞增殖试验:观察在有丝分裂原(PHA、ConA)或特异性抗原刺激下T细胞的增殖反应,测定细胞免疫功能。
1.3H-TdR掺入法:液体闪烁仪检测
2.MTT比色法:操作简便,无放射性污染。
(三)细胞毒试验:检测CTL、NK细胞杀伤靶细胞活性的细胞学技术。
如Cr51释放法。
(四)细胞凋亡检测:
1.琼脂糖凝胶电脉法:呈现梯状DNA区带图谱
2.FACS法:出现亚二倍体峰
3.TUNEL法:可以荧光定位显示凋亡细胞
(五)芯片技术:DNA芯片和蛋白质芯片
(六)细胞因子的生物活性检测
1.细胞增殖法:IL-2依赖的细胞株检测IL-2活性
2.细胞病变抑制法:增殖的病毒可引起细胞病变。
干扰素可抑制这种病变。
例题
【1~2小题共用备选答案】
A.Western blot
B.ELISA
C.免疫组化
D.流式细胞术
E.免疫沉淀
血清中抗原定量()。
[答疑编号700544190101]
【答案】B
细胞分选()。
[答疑编号700544190102]
【答案】D。