瞬态测量的作用荧光原理FLS-920原理-曾燕19页PPT
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Edinburgh InstrumentFLS920User Manual目录一、开机步骤 (2)二、实验操作 (4)1、实验前准备 (4)2、稳态实验 (6)A、发射光谱实验 (6)B、激发光谱实验 (9)C、同步谱 (10)D、Map (11)E、偏振光谱 (12)3、低温实验 (17)A、液氮冷却系统(Oxford) (17)B、ARS冷却系统 (19)4、样品衰减操作 (22)A、纳秒、皮秒级衰减 (22)纳秒灯为光源 (22)激光器为光源 (27)B、微妙、毫秒级衰减 (29)三、数据处理 (32)1、数据一般处理 (32)2、稳态光谱 (33)3、瞬态光谱 (33)四、附录 (36)1、氢灯清洗方法 (36)一、开机步骤1、打开总电源(开之前保证所有仪器开关关闭)2、开启PH13、开启PMT制冷电源CO14、开启光谱仪控制电源CD920(控制盒)或样品室下方的控制板电源此为控制盒此为控制板5、根据需要的光源开启氙灯或是其它灯源电源此为氙灯电源此为氢灯电源6、开启电脑,同时将谱仪样品室上方盖子移开。
待进入操作系统后进入F900软件。
二、实验操作 1、实验前准备在做实验前有几点需要注意:A 、 对于红敏PMT (R928),其制冷必须达到一定温度,一般为室温-40℃左右。
待C O 1显示在-17℃左右的时候,在软件的S i g n a l R a t e 窗口里观察E m 1的C P S 读数显示。
若其读数维持在50C P S 以下,则表明读数正常,P M T 制冷达到工作状态,可以用该探测器进行实验。
Fig.2.1 B 、 对于近红PMT (5509),其必须准备以液氮杜瓦罐(约15升左右),将制冷部件的管子插入罐中,开启制冷电源Fig.2.2制冷电源杜瓦罐通气管道电源开启后,其显示屏上有两行显示,一行为设定的80k,一行为PMT的温度显示。
PMT温度显示会很快显示为80k(约一分钟内)。
稳态/瞬态荧光光谱仪(FLS 920)操作说明书一、仪器测试原理时间相关单光子计数原理是FS920测量荧光寿命的工作基础。
时间相关单光子计数法(time-correlated single photon counting)简称“单光子计数(SPC)法",其基本原理是,脉冲光源激发样品后,样品发出荧光光子信号,每次脉冲后只记录某特定波长单个光子出现的时间t,经过多次计数,测得荧光光子出现的几率分布P(t),此P(t)曲线就相当于激发停止后荧光强度随时间衰减的I(t)曲线。
这好比一束光(许多光子)通过一个小孔形成的衍射图与单个光子一个一个地通过小孔长时间的累计可得完全相同的衍射图的原理是一样的。
二、测量之前需要特别注意的事项1.在切换光源、修改设置或放样品之前必须把狭缝(Δλ)关到最小(0.01nm),否则会损坏光电倍增管!如果打开样品室盖子之后,Em1的Signal Rate增加,请停止实验并立即与工作人员联系!2.测量样品的瞬态性质之前,请用先对样品的稳态性质进行表征,了解样品的激发光谱与发射光谱及最佳激发波长和发射波长;3.用PMT检测时,必须等稳压电源CO1的温度示数在-15ºC以下才可以开始采集数据;4.狭缝范围0。
01~18nm,调节时注意不要超过其上限;(L1: 1mm相当于1.8nm, 200—900nm);(L2: 1mm相当于5。
4nm, 900—1900nm)5.每次设置完参数后都要点击Apply或者回车键确定;6.文件保存路径为:C:\data\导师\自己文件夹7.用专用u盘拷贝数据并到另一台电脑发送数据8.如实填写仪器使用记录,爱护仪器。
三、稳态荧光光谱的测定1.紫外可见区稳态荧光光谱的测定步骤1)打开Xe900电源,待其稳定,稳定后电压约16—17V,电流25A;2)打开CO1电源和FLS920主机电源;3)打开计算机,双击桌面上F900图标,进入工作站4)点击窗口左上角的按钮,进入Signal Rate设置窗口,先将Excitation Wavelength和Em1Wavelength处的Δλ均设置为0。
荧光检测器的原理和应用1. 荧光检测器的基本原理荧光检测器是一种用于检测物质发射荧光的仪器。
它基于荧光现象,通过激发物质产生荧光,然后测量荧光的强度和特性来实现对样品的分析和检测。
荧光检测器主要由以下几个组件组成:•光源:提供激发样品发射荧光所需的光源。
•激发光源:产生适当波长的光以激发样品中的荧光物质。
•激发滤光片:用于选择性地传递激发光。
•样品池:放置待测样品溶液的容器。
•探测器:用于测量样品发射的荧光信号。
•探测滤光片:用于选择性地传递发射光。
•数据处理系统:用于记录和分析荧光信号的强度和特性。
荧光检测器的工作原理基于分子在激发光作用下从基态跃迁到激发态,再从激发态返回基态时发射荧光。
由于不同化合物的电子结构和能级不同,它们所发射的荧光波长也不同。
荧光检测器利用这一特性进行样品分析和检测。
2. 荧光检测器的应用荧光检测器广泛应用于生物医药、环境监测、材料科学等领域。
下面列举了荧光检测器的几个常见应用:2.1 生物医药领域•荧光标记:通过标记生物分子即可追踪其在生物体内的活动、定位以及相互作用。
荧光检测器可以被用于检测荧光标记的生物分子,如荧光染料、荧光标记的抗体等。
•荧光定量PCR:荧光检测器可以用于快速、准确地检测和定量反应体系中的荧光信号,以评估反应程度和测定目标序列的数量。
•荧光免疫检测:荧光检测器结合抗体荧光标记物,可以实现对特定生物分子的高灵敏度和高选择性检测,如荧光免疫组化检测。
2.2 环境监测领域•水质检测:荧光检测器可以用于检测水体中的污染物质,如重金属离子、有机污染物等。
•大气监测:荧光检测器可以用于检测大气中的污染物质,如挥发性有机物、氨气等。
•土壤分析:荧光检测器可以用于检测土壤中的有机物质含量和理化性质,为农业生产和环境评估提供依据。
2.3 材料科学领域•荧光探针:荧光检测器可以用于测定材料表面的物理和化学性质,如膜的厚度、材料的热解行为等。
•荧光传感器:荧光检测器可以用于测定材料中特定物质的存在和浓度,如溶液中的pH、金属离子等。