下载文档原格式
专题十六基因工程和细胞工程1．(2018 ·深圳调研) 叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，该技术能有效改进植物的质量。
请回答：(1)转基因技术的核心步骤是 __基因表达载体的建立 __，达成该步骤所需要的酶有 __限制酶和 DNA连结酶 __。
(2)将植物体细胞办理获取原生质体，再经过__农杆菌转变法 __或 __基因枪 __法，将目的基因导入原生质体，使原生质体重生出细胞壁以后，经过__植物组织培育__技术培育可获取相应的转基因幼苗。
(3)来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰便可在叶绿体中高效表达，就此剖析，原由是 __叶绿体 DNA与原核生物 DNA构造近似 ( 因为叶绿体大部分基因的构造、转录与翻译系统均与原核生物近似 )__ 。
(4)对大部分高等植物而言，与传统的细胞核转基因对比，叶绿体转基因更稳固，其遗传方式 __不依照 __( 答“依照”或“不依照” ) 分别定律，不会随 __花粉 __( “花粉”或“卵细胞” ) 传给后辈，进而保持了 __母本 __( “父本”或“母本” ) 的遗传特征。
[ 分析](1) 基因工程的核心步骤是基因表达载体的建立，所需要的酶有限制酶和DNA 连结酶； (2)植物细胞导入受体细胞的方法有农杆菌转变法、基因枪法和花粉管通道法。
原生质体再DNA构造近似。
(4) 分别生细胞壁以后，经过植物组织培育获取幼苗；(3) 叶绿体DNA与原核生物定律合用于有性生殖过程中细胞核遗传，故叶绿体转基因不依照分别定律，为母系遗传。
A 2．(2018 ·天津市和平区生物一模) 已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的蛋白为主要抗原。
疫苗的生产和抗体的制备流程如图 1 所示。
请回答以下问题：(1)过程①代表的是 __逆转录 __，过程③建立 A 基因重组载体时，启动子和停止子是从头建立的，它们应当能被受体细胞的 __RNA聚合酶 __所辨别，以便于其催化转录过程。
专题十六基因工程和细胞工程1．(2018·深圳调研)叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，该技术能有效改良植物的品质。
请回答：(1)转基因技术的核心步骤是__基因表达载体的构建__，完成该步骤所需要的酶有__限制酶和DNA连接酶__。
(2)将植物体细胞处理得到原生质体，再通过__农杆菌转化法__或__基因枪__法，将目的基因导入原生质体，使原生质体再生出细胞壁之后，通过__植物组织培养__技术培养可得到相应的转基因幼苗。
(3)来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，就此分析，原因是__叶绿体DNA与原核生物DNA结构类似(由于叶绿体大多数基因的结构、转录与翻译系统均与原核生物类似)__。
(4)对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式__不遵循__(答“遵循”或“不遵循”)分离定律，不会随__花粉__(“花粉”或“卵细胞”)传给后代，从而保持了__母本__(“父本”或“母本”)的遗传特性。
[解析] (1)基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，所需要的酶有限制酶和DNA连接酶；(2)植物细胞导入受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
原生质体再生细胞壁之后，通过植物组织培养获取幼苗；(3)叶绿体DNA与原核生物DNA结构类似。
(4)分离定律适用于有性生殖过程中细胞核遗传，故叶绿体转基因不遵循分离定律，为母系遗传。
2．(2018·天津市和平区生物一模)已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A 蛋白为主要抗原。
疫苗的生产和抗体的制备流程如图1所示。
请回答下列问题：(1)过程①代表的是__逆转录__，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的__RNA聚合酶__所识别，以便于其催化转录过程。
(2)如图2为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA 中A和U总数是__400__个。
专题十六基因工程和细胞工程1．(2017年天津市和平区生物一模)已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原。
疫苗的生产和抗体的制备流程如图1所示。
请回答下列问题：(1)过程①代表的是___逆转录__，过程③构建A基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它们应该能被受体细胞的___RNA聚合酶__所识别，以便于其催化转录过程。
(2)如图2为A基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，空白区域中G和C的总数共有400个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的mRNA中A和U总数是___400__个。
(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的___浆细胞__数目。
(4)在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次是将___杂交瘤细胞__筛选出来，第二次是将___能分泌所需抗体的杂交瘤细胞__筛选出来。
(5)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的___A蛋白__来制备疫苗。
对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的___抗A蛋白的单克隆抗体__与分离出的病毒进行特异性检测。
[解析] (1)由以上分析可知①是逆转录。
启动子是RNA聚合酶识别和结合的位点，能启动转录过程。
(2)已知图中Ⅱ区的碱基数是2000个，其中阴影区域碱基数是800个，则空白区域中碱基总数为1200个，又已知空白区域中G和C的总数为400个，则A＋T总数为800个，每条链中A＋T总数为400个，根据碱基互补配对原则，由该区转录形成的成熟mRNA 中A和U总数也是400个。
(3)在给小鼠皮下注射A蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的浆细胞数目。
(4)在将X进行扩大培养前，至少需要经过2次筛选，第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次是采用抗体阳性检测法筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
专题16 基因工程和细胞工程[重温考纲要求] 1.基因工程的诞生(Ⅰ)。
2.基因工程的原理及技术(含PCR)(Ⅱ)。
3.基因工程的应用(Ⅱ)。
4.蛋白质工程(Ⅰ)。
5.植物的组织培养(Ⅱ)。
6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅰ)。
7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。
1.基因工程的相关判断(1)携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测( ×)(2)转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测( ×)(3)一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸序列( √)(4)用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸( ×)(5)每个重组质粒至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点( √)(6)自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上，属于基因工程( ×)(7)转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加( ×)(8)重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子中脱氧核糖和磷酸交替连接( ×)(9)应用DNA探针技术，可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达( × )(10)动物的生长激素基因转入植物后不能表达( × )2.细胞工程的相关判断(1)产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测( √ )(2)21三体综合征的诊断必须通过分子检测( × )(3)培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养( √ )(4)去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理( √ )(5)乳腺细胞比乳腺癌细胞更容易进行离体培养( × )(6)培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞( × )(7)动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性( × )(8)体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体( × )(9)单克隆抗体技术可用于治疗老年痴呆症( √ )(10)细胞核移植主要在同种动物、同种组织的细胞之间进行( × )一、基因工程中会导致相应rTet 或r Amp 插入到DNA 某一质粒载体如图所示，外源40)全国乙，1.(2016·。
专题十六基因工程和细胞工程H 核心判断exinpanduan(1)质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA 之外，并且具有自我复制能力的很小的环状DNA 分子。
(√)(2)DNA 分子经限制酶切割后产生的DNA 片段末端一定是黏性末端。
(×)(3)基因表达载体组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及标记基因等。
(√)(4)启动子是一段有特殊结构的DNA 片段，位于基因的首端，是RNA 聚合酶识别和结合的部位。
(√)(5)基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程则可对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质。
(√)(6)微型繁殖技术既能保持优良品种的遗传特性，还可以高效快速地实现种苗的大量繁殖。
(√)(7)动物细胞培养中需用胃蛋白酶或胶原蛋白酶将组织细胞分散成单个细胞。
(×)(8)原代培养的细胞遗传物质没有改变，而传代培养的细胞有的已经发生突变，获得了不死性。
(√)(9)动物体细胞核移植技术获得的克隆动物在遗传性状上与供核母体完全一致。
(×)(10)动物细胞融合技术和植物体细胞杂交技术类似，也可获得杂种动物。
(×)考向一 基因工程Z 真题回放hentihuifang1．(2018·全国卷Ⅰ)回答下列问题：(1)博耶(H.Boyer)和科恩(S.Cohen)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达。
该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了__体外重组的质粒可以进入受体细胞；真核生物基因可在原核细胞中表达__(答出两点即可)。
(2)体外重组的质粒可通过Ca2＋参与的__转化__方法导入大肠杆菌细胞；而体外重组的噬菌体DNA通常需与__外壳蛋白(或答噬菌体蛋白)__组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞。
在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是__细菌__。
高考专题第18讲基因工程与细胞工程非选择题1.(2018陕西榆林四模,38)(9分)人白细胞介素是一种重要的免疫活性调节因子。
科研人员将人白细胞介素基因导入衣藻细胞的叶绿体基因组中并高效表达,该技术被称为叶绿体基因工程。
请回答下列问题:(1)质粒是基因工程中最常用的运载体,质粒作为运载体需具备的条件是(需答出两点)。
基因工程的操作工具中,除了运载体外,还需要。
(2)在构建基因表达载体时,应将目的基因插入之间,表达载体上标记基因的作用是。
(3)植物叶肉细胞中能使目的基因表达的细胞器除了叶绿体外还有。
从基因工程与环境安全的角度分析,叶绿体基因工程的优点是。
2.(2018辽宁鞍山一中四模,38)(8分)干扰素基因缺失的个体免疫力严重下降。
科学家利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。
请回答下列问题:(1)利用PCR技术扩增干扰素基因时,需在的作用下进行。
PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。
退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但的引物需要设定更高的退火温度。
如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有(填序号:①升高退火温度②降低退火温度③重新设计引物)。
(2)有人得到如图所示的含有目的基因的表达载体,但其不能在宿主细胞中表达目的基因产物,分析目的基因不能表达的原因是。
(3)对改造后的ES细胞进行培养的过程中,为了防止污染,可在培养基中添加一定量的。
(4)干扰素的作用机理是:干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体,激活细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白,其中有些蛋白可通过激活使病毒的RNA水解。
3.(2018江西上饶二模,38)(9分)口蹄疫是由口蹄疫病毒引起的一种动物传染病,目前常用接种弱毒疫苗的方法预防。
疫苗的主要成分是该病毒的一种结构蛋白VP1。
科学家尝试利用转基因番茄来生产口蹄疫疫苗。
请回答下列问题:(1)如图是VP1基因、农杆菌Ti质粒结构示意图,若用以构建具有VP1基因的基因表达载体,还需要在质粒中插入。
基因工程与细胞工程时间：45分钟满分：100分一、选择题(每题6分，共60分)1．(2014·重庆卷)下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。
以下相关叙述，正确的是( )A．②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与B．③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上C．④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状D．⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异解析本题考查基因工程培育抗虫植物的相关知识。
通过对课本知识掌握，②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶，故A错；③侵染植物细胞后，不是重组质粒而是目的基因整合到④(植物细胞)的染色体上，故B错；④植物细胞的染色体上若含有抗虫基因，但不一定能表达该基因，故⑤不一定表现出抗虫性状，故C错；⑤只要表现出抗虫性状就表明植株已发生了可遗传变异，故D正确。
答案 D2．(2014·天津卷)为达到相应目的，必须通过分子检测的是( )A．携带链霉素抗性基因受体菌的筛选B．产生抗人白细胞介素－8抗体的杂交瘤细胞的筛选C．转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定D．21三体综合征的诊断解析根据受体菌是否对链霉素产生抗性进行携带链霉素抗性基因受体菌的筛选，不需要分子检测，A错误；用特定选择培养基筛选出的杂交瘤细胞，还需要进行克隆化培养和抗体检测，才能获得足够多的能分泌抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞，B正确；转基因抗虫棉是否具有抗虫特性，需要做抗虫的接种实验，C错误；21三体综合征可通过用显微镜直接观察体细胞中的21号染色体数目的方法进行检测，D错误。
答案 B3．(2013·重庆卷)如图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。
下列有关叙述，正确的是( )A．①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞B．②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成C．③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性D．④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群解析本题主要考查单克隆抗体制备的相关知识。
专题十六基因工程和细胞工程．(·深圳调研)叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中，该技术能有效改良植物的品质。
请回答：转基因技术的核心步骤是基因表达载体的构建()限制酶和连接，完成该步骤所需要的酶有酶。
将植物体细胞处理得到原生质体，再通过()农杆菌转化法基因枪或法，将目的基因导入原生植物组织培养质体，使原生质体再生出细胞壁之后，通过技术培养可得到相应的转基因幼苗。
()来自原核生物中有重要价值的外源基因，无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达，就此分析，原因是叶绿体与原核生物结构类似由(于叶绿体大多数基因的结构、转录与翻译系统均与原)核生物类似。
()对大多数高等植物而言，与传统的细胞核转基因相比，叶绿体转基因更稳定，其遗传方式“或不遵循”“不遵循答”)遵循(卵细胞”)传给后代，从分离定律，不会随或“花粉花粉(“”(“母本而保持了父本””)的遗传特性。
母本“或[解析] ()基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，所需要的酶有限制酶和连接酶；()植物细胞导入受体细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法。
原生质体再生细胞壁之后，通过植物组织培养获取幼苗；()叶绿体与原核生物结构类似。
()分离定律适用于有性生殖过程中细胞核遗传，故叶绿体转基因不遵循分离定律，为母系遗传。
．(·天津市和平区生物一模)已知某传染性疾病的病原体为病毒，该病毒表面的蛋白为主要抗原。
疫苗的生产和抗体的制备流程如图所示。
请回答下列问题：①过程代表的是()③逆转录构建基因重组载体时，启动子和终止子是重新构建的，它，过程聚合酶们应该能被受体细胞的所识别，以便于其催化转录过程。
()如图为基因的结构示意图，已知Ⅱ区的碱基数是个，其中阴影区域碱基数是个，空白区域中和的总数共有个，则由该区域能指导蛋白质合成的片段转录产生的中和总数是个。
()在给小鼠皮下注射蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的浆细胞数目。
()在将进行扩大培养前，至少需要经过次筛选，第一次是将杂交瘤细胞筛选出来，第二次是将能分泌所需抗体的杂交瘤细胞筛选出来。
()对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的蛋白来制备疫苗。
对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒与已知病毒进行核酸序列比较，或用图中的抗蛋白的单克隆抗体与分离出的病毒进行特异性检测。
[解析] ()由以上分析可知①是逆转录。
启动子是聚合酶识别和结合的位点，能启动转录过程。
()已知图中Ⅱ区的碱基数是个，其中阴影区域碱基数是个，则空白区域中碱基总数为个，又已知空白区域中和的总数为个，则＋总数为个，每条链中＋总数为个，根据碱基互补配对原则，由该区转录形成的成熟中和总数也是个。
()在给小鼠皮下注射蛋白时，要重复注射几次的目的是通过二次免疫，增加小鼠体内的浆细胞数目。
()在将进行扩大培养前，至少需要经过次筛选，第一次是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次是采用抗体阳性检测法筛选出能够产生特异性抗体的杂交瘤细胞。
()对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的蛋白所制备的疫苗。
对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行核酸序列比较；或采用抗原—抗体杂交法，即用图中的抗蛋白的单克隆抗体进行特异性结合检测。
．如图为三种质粒和一个含目的基因的片段，其中为氨苄青霉素抗性基因，为四环素抗性基因，为蓝色显色基因，Ⅰ( )、Ⅰ( )等为限制酶和其切割位点及其与复制原点之间的距离。
已知＝个碱基对，请回答下列问题：()片段为目的基因中的某一片段，则聚合酶和连接酶的作用形成的键依次是填图中数②(字)。
()图中作为目的基因运载体最理想的质粒是(填“”“”或“”)，请据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是质粒不含有标记基因；质粒在用和目的基因相同的限制酶切割时，复制原点会被破坏，使该质粒无法进行复制。
()用Ⅰ全酶切目的基因和质粒形成的重组质粒，并进行电泳观察，可出现长度分别为．和的两个片段的两个片段，或者长度分别为(和的识别位点之Ⅰ重组质粒上目的基因的插入位点与间的碱基对忽略不计)。
()将分别用限制酶Ⅰ切开的质粒溶液与目的基因溶液混合，加入连接酶后，进行大肠杆菌受体细胞导入操作，则受体细胞的类型包含(多选)。
．白色．蓝色．白色．、蓝色()动物基因工程通常以受精卵作为受体细胞的根本原因是。
．受精卵能使目的基因高效表达．受精卵可发育成动物个体．受精卵更易接受的插入．受精卵体积较大，便于导入操作[解析] ()聚合酶和连接酶的作用形成的键均为磷酸二酯键，因此都应为②。
()由题图可知，切割目的基因应用Ⅰ，但该限制酶会将质粒的复制原点破坏，使该质粒无法进行复制，而质粒不含有标记基因，因此两者都不能作为运载体。
()根据题意，质粒长度为，目的基因长度为，所以重组质粒长度为，如果出现长度为．的一个片段，则另外一个片段的长度为。
若目的基因与运载体反向连接，可形成长度分别为和的两个片段。
()将分别用限制酶Ⅰ切开的质粒溶液与目的基因溶液混合，加入连接酶后，可得到质粒自身环化形成的普通质粒、重组质粒和目的基因自身连接的环三种类型。
如果导入的是普通质粒，受体细胞的类型为(、蓝色)，如果导入的是重组质粒，受体细胞的类型为(、白色)，如果导入的是环，受体细胞的类型为(、白色)。
()动物基因工程通常选用受精卵作为受体细胞的根本原因是受精卵可发育成动物个体。
．人乳头状瘤病毒()与宫颈癌的发生密切相关，抗的单克隆抗体可以准确检测出，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答下列问题：()。
单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有动物细胞培养、动物细胞融合()若要分析杂交瘤细胞中染色体，可通过解离、漂洗、染色和制片等过程制成装片，然后在显微镜下观察。
杂交瘤细胞中染色体数目与普通淋巴细胞相比具有的特点是染色体数目加倍，在①②③培养基上存活的细胞可能包括(。
)填下列序号①无抗体分泌的细胞②抗抗体的分泌细胞③其他无关抗体的分泌细胞()对于抗体检测呈细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释性的杂交瘤阳法，即稀释细胞到～个，每孔加入细胞稀释液，使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。
()由上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体，理由是小鼠形成的抗体对人体来说是抗原，存在着排异反应。
()科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因()，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。
除本题描述的制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路。
通过基因工程向浆细胞中导入；利用核移植技术将浆细胞的细胞核移植到去核的无限增殖细(胞中答对其一即可)。
[解析] ()利用显微镜观察有丝分裂过程中的染色体，需先制作临时装片；杂交瘤细胞中含有浆细胞和骨髓瘤细胞的染色体，所以比普通淋巴细胞的染色体数目多一倍；在培养基上生存的细胞均为杂交细胞，这些杂交细胞中有分泌抗体的细胞，有分泌其他抗体的细胞，也有不能分泌抗体的细胞。
()抗体检验呈阳性，说明该杂交瘤细胞可产生所需抗体；为保证每个小孔不多于一个细胞，根据浓度可推断加入细胞稀释液的量：设加入细胞稀释液的最大量是，则个×＝个，＝。
()小鼠形成的抗体与人体抗体不同，故在人体内可引起免疫反应，所以上述过程生产出的单克隆抗体不能直接用于人体。
()根据所给信息可知，还可通过转基因技术或核移植技术获得既能大量增殖，又能产生特定抗体的杂交细胞。
．(·陕西西安长安一中第一次检测)下图是植物体细胞杂交过程示意图，请据图回答：()植物体细胞杂交的第①步是去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。
目前此步骤最常用的方法是酶解法，也就是在温和的条件下用等分解植物的细胞壁。
纤维素酶、果胶酶②()过程的发生，必须进行人工诱导。
人工诱导原生质体融合常用的化学方法是用聚乙二醇试剂作为诱导剂诱导融合。
动物细胞融合还常用到作为诱导剂。
灭活的病毒与过程()③密切相关的具有单层膜结构的细胞器为高尔基体。
脱分化⑤④()过程称为，紫杉醇，过程称为——。
若利用此技术生产治疗癌症的药物再分化培养将进行到(填字母编号)即可。
()植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以克服远缘杂交不亲和的障碍。
[解析] ()植物体细胞杂交的第①步是用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体。
()人工诱导原生质体融合常用的化学方法是用聚乙二醇试剂作为诱导剂诱导融合。
动物细胞融合还常用到灭活的病毒作为诱导剂。
()过程⑧是杂种细胞生出细胞壁，高尔基体与植物细胞壁形成有关。
()④⑤过程分别为脱分化和再分化，治疗癌症的药物——紫杉醇是从紫杉细胞中提取的，只需将植物组织培养进行到愈伤组织阶段即可。
()植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以克服远缘杂交不亲和障碍，大大扩展可用于杂交的亲本组合范围。
．(·全国卷Ⅱ)某种荧光蛋白()在紫外光或蓝光激发下会发出绿色荧光，这一特性可用于检测细胞中目的基因的表达。
某科研团队将某种病毒的外壳蛋白()基因连接在基因的′末端，获得了－融合基因(简称为甲)，并将其插入质粒，构建了真核表达载体，其部分结构和酶切位点的示意图如下，图中～四种限制酶产生的黏性末端各不相同。
回答下列问题：()据图推断，该团队在将甲插入质粒时，使用了两种限制酶，这两种酶是。
使用这两种酶和进行酶切是为了保证甲的完整甲与载体正确连接。
，也是为了保证()将转入体外培养的牛皮肤细胞后，若在该细胞中观察到了绿色荧光，则说明基因在牛的皮转录和肤细胞中完成了翻译过程。
为了获得含有甲的牛，该团队需要做的工作包括：将能够产生绿色荧光细胞的()细胞核移入牛的去核卵母细胞、胚胎移植等。
中、体外培养()为了检测甲是否存在于克隆牛的不同组织细胞中，某同学用方法进行鉴定，在鉴定时应分填“”“总核别以该牛不同组织细胞中的(“作为模板。
””)核或[解析] ()由题意可知，基因和基因合成了－融合基因(简称为甲)，题图中显示了四个酶切位点，当将－融合基因插入质粒时，可用和限制酶进行酶切，用这两种酶进行酶切不会破坏甲的完整性，同时能保证甲按照正确的方向与载体连接。
()若在牛皮肤细胞中观察到了绿色荧光，则说明－融合基因得到表达，即目的基因在受体细胞中通过转录和翻译合成了荧光蛋白。
()为了获得含有甲的牛，可将含有目的基因的细胞的细胞核移入牛的去核卵母细胞中，然后进行体外培养、胚胎移植等。
()利用技术扩增目的基因，可以检测目的基因是否存在。
扩增的模板是。
．(·天津卷)甲型流感病毒为病毒，易引起流感大规模流行。
