肿瘤学研究常用实验技术及方法

抗菌抗病毒常用实验研究方法

细菌、病毒性疾病是目前国内外流行的主要传染病,尤其是近两年来,由冠状病毒引起的SARS及由流感病毒引起的禽流感给动物及人类带来的严重危害,是人所共知的"由于各种疫苗的不断出现,虽然一些细菌、病毒病已得到了有效的控制,但是其治疗尚无有效的解决方法因此研制高效、低毒的新型中药抗菌、抗病毒制剂已成为巫待解决的问题。

1、常用的抗菌方法

1、1稀释法

1、1、1试管稀释法

培养基内抗生素的含量按几何级数稀释并接种适量的细菌，经孵育后，观察能引起抑菌作用最低抗生素浓度，称最低抑菌浓度(MIC)为该菌对药物的敏感度。稀释法所获得的结果比较准确，常被用作校正其他方法的标准。如以下黄贝贝等的青钱柳抗菌作用的实验研究和黄利权等的火绒草的抗菌活性研究的实验方法:

1、应用试管稀释法,测定青钱柳提取物对试验菌的抑菌效果,检验不同浓度下青钱柳提取物对细菌、霉菌的抗菌作用。结果:青钱柳提取物在体外对金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌等革兰氏阳性菌具有较强的抗菌作用;而对大肠埃希氏菌、铜绿假单孢菌等革兰氏阴性菌的抗菌作用不明显;对黄曲霉、烟曲霉等霉菌的抗菌作用不明显[1]。

2、采用试管稀释法,分别测定了火绒草水煎液、水提醇沉液、醇提物、醇提石油醚部分、醇提乙酸乙酯部分、醇提正丁醇部分、醇提水溶部分等7种提取物对大肠杆菌C83882、大肠杆菌C83903、大肠杆菌C83914、沙门氏菌C79-20、金黄色葡萄球菌Newbould S-305、金黄色葡萄球菌临床分离株等6株病原菌的最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。试验结果表明,火绒草醇提物及其石油醚部分和乙酸乙酯部分对两种金黄色葡萄球菌具有较强的抑制作用,其MIC为0114 mg/ml生药浓度,MBC为0127 mg/ml生药浓度,而其它部分对金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱。火绒草醇提正丁醇部分和水溶部分对3株大肠杆菌和1株沙门氏菌具有较强的抑制作用,其MIC为2170 mg/ml生药浓度,MBC为2170 mg/ml生药浓度,显示了较强的抗菌活性[2]。

裸鼠肿瘤接种技术实验操作方法

裸鼠肿瘤接种一般有细胞接种和瘤块接种两种方式，接种取材有手术活检标本、癌性胸腹水标本和体外培养的细胞系三种。

l楼主看来是做体外培养的细胞的裸鼠接种，一般用带6号针头的注射器取适量细胞悬液注射于裸鼠的皮下，部位看试验要求而定，一般在腋下或背部皮下，每个接种部位注射0.1-0.2ml。就是将培养的细胞收集起来调整到适宜浓度重悬于不含血清的培养液或PBS中，放于冰盒中携至动物房，直接注射即可。

是牵涉到细胞株的成瘤性问题，可以通过增大细胞悬液浓度的办法来解决。一般细胞浓度可在1*10的6次方到5*10的7次方之间，浓度再大就可能打不进去了。具体浓度需要查相关文献。如果成瘤率太低，可以通过把瘤块在裸鼠身上传2—3代的方法提高成瘤率，即将已成瘤鼠的瘤块取出接种于新鼠身上，成瘤后再取出接种新鼠，如此传几代，肿瘤性质稳定后，再将肿瘤取出，剪碎、研磨、匀浆成为细胞悬液后再接种。

一、可移植性肿瘤的建立方法

1．腹水瘤的建立 将动物实体瘤细胞注入受体动物腹腔内，或将实体疤移植于受体动物的腹壁内，肿瘤生长后引起腹水，腹水内含高大量瘤细胞可移植传代．即为腹水瘤。

建议腹水瘤初期、腹水往往是血性，多次传代后逐渐变为乳白色的瘤性腹水。腹水如培养基一样供给瘤细胞生长所需的营养。若将腹水瘤细胞注入皮下，又可形成实体瘤。由于瘤细胞游离在腹水内，因此总呈圆形，体积可有大、中、小之分c：r．在一些细胞边缘偶见大小不等的泡状突起，称之为“鼓泡”。一般在接种后第5天时核分裂相达高峰。

偶见三吸或四极分裂。

二、肿癌移植方法

1．常规保种传代方法

(1)腹水瘤移植方法：瘤源一般用接种后第5～6天的腹水，抽出的腹水以乳白色为佳。接种应从下腹部件入受体动物腹腔，一般接种o．1一o．2m1。可在腹水内加适量的抗凝药物。

(2)实体型肿瘤接种法：

1)小块接种法：将瘤取出后，切开，选出生长良好而无变性坏死、呈谈红色、鱼肉状的瘤组织，切成小块(约5*5*5mm)；在受体动物腹部外例剪开—个小口，用无钩眼科镊子夹取小块，送入切口内皮下。本法多用于建瘤株的初期及少量的接种。接种部位以腋窝和鼠蹊部为佳，特别是腋窝部皮肤松弛能使瘤结长得较大，宿主寿命也可延长。

研究物理问题常用的方法

在学习物理过程中，我们不仅学习到了具体的物理知识，还接触到了许多物理研究方法，其中控制变量法、模型法、类比法、等效替代法和转换法等是研究物理问题时常见的方法。比如在研究电流与电压的关系时，需要控制电阻不变，这是用了控制变量法；在研究杠杆的平衡条件时，需要将实际的硬棒抽象为没有质量的杠杆模型，这是用了模型法；学习电流的概念时将电流与水流类比，这是用了类比法；耳熟能详的“曹冲称象”， 使大量石块对船的作用效果与大象对船的作用效果相同，从而通过称量石块的质量得出了大象的质量，这是用了等效替代法。

转换法在很多地方也有运用。将不可见、不易见的现象转换成可见、易见的现象，或者将难以测量或测准的物理量转换为能够测量或测准的物理量，都是用了转换法。比如通过微小压强计U形管两侧液面的高度差反映液体内部的压强的大小；通过电流的热效应和磁效应判断电流的存在；根据磁体吸引大头针数量的多少判断磁体磁性的强弱；在电热丝加热煤油的实验中用煤油温度的变化反映电流通过电热丝产生热量的多少等等，都用到了转换法。

此外，很多测量仪器也利用了转换法。比如用实验室常见的液体温度计测温度时，我们是根据温度计中液柱的长短来识别温度高低的，这就是将温度的测量转化为长度的测量。同理，利用电流表测电流时，我们是在量程确定的情况下根据电流表指针偏转的角度来识别电流大小的，这就是将电流的测量转化为角度的测量。

31．请根据上述材料，回答下列问题：

（1）根据电路中的小灯泡正在发光，可判断出此时电路中有电流，这一判断采用的研究方法是 ；在研究液体内部压强大小与深度的关系时，需要在同一种液体中改变微小压强计探头的深度，保证这样的实验条件采用的研究方法是 。（选填选项前的字母，每空只有一个选项正确）

A．控制变量法 B．等效替代法 C．转换法 D．模型法

（2）如图26所示的测量仪器中，将所测量的物理量转化为长度测量的是 。（选填选项前的字母，正确选项多于一个）

一　

初中物理实验常用的硼：究方法　才立英　（乐亭县新戴河初中，河北乐亭０６３６００）　物理学是一门实验科学，实验教学是物理教学的基础。物　理实验教学不仅要引导学生学习物理学的初步知识，更重要　的是指导学生学会适宜的学习方法。为学生终身学习打下良　好的基础。全日制义务教育《物理课程标准（实验稿）》（以下简　称《标准》）中明确指出：“通过科学探究，使学生经历基本的科　学探究过程，学习科学探究方法，发展初步的科学探究能力，　形成尊重事实，探索真理的科学态度。”因此在教学中教师要　重视科学探究的教学，使学生各方面的能力得到提高，为学生　的终身发展提供帮助。我通过教学实践发现探究的方法大致　有：控制变量法、对比法、类比法、抽象法和理想化法、图像法　等。下面是我在教学中的点滴体会，供同行参考。　一、控制变量法　控制变量法是运用一定手段（实验仪器、设备等）主动干　预或控制自然事物、自然现象发展的过程，在特定的观察条件　下探索客观规律的一种研究方法。即把多因素的问题变成多　个单因素的问题．分别加以研究．然后综合解决的一种常用的　研究方法。　控制变量法常用于探究物理规律的实验教学。我在“研究　导体的电阻与哪些因素有关”的实验教学中采用这种方法。首　先确定研究对象是电阻，之后选取长短粗细相同但材料不同　的金属丝．比较它们电阻的大小。然后确定材料和横截面积相　同，改变导体的长度，研究电阻与导体长度的关系。接着保持　材料和长度相同．改变导体的横截面积的大小：探究电阻与导　体的横截面积的关系．最后将这些单一关系综合、归纳．找出　它们之间的规律，得出决定电阻大小的因素是导体的材料、长　度和横截面积。经过认真的分析，学生掌握了这一探究方法的　精髓。在欧姆定律的实验教学中，我用这一方法组织学生讨论　了怎样研究Ｉ、Ｕ、Ｒ之间的关系。　二、对比法（比较法）　“比较”即找出事物之间相似的地方。通过事物间相同特　征或相异特征的比较可以很快认识新事物的研究方法，是比　较常用的研究方法。　在比热容的教学中，我引导学生通过比较实验装置．来判　断哪些相同、哪些不同：在两个烧杯中分别倒入质量相等的水　和煤油，用同样的电热器加热，测出它们的温度升高相同值时　所需通电时间不同，也就是吸收热量不同；同样的加热时间，　它们升高的温度不同，这反映了不同物质吸收相同的热量但　温度变化不同的物质的特性——比热容。使非常抽象的概念　具体化，学生顺利理解了比热容的物理意义。在“研究物体浮　沉条件”时，我用同一支锡制牙膏壳，先做成盒状放入水中，牙　膏壳漂浮于水面，然后把牙膏壳挤成一团放入水中．结果牙膏　壳沉底，通过对比得出物体浮沉的条件。对比学习不但使学生　对易混淆的知识学习掌握起来十分容易．而且印象更加深刻．　应用起来更加得心应手。　三、类比法　类比是指在新事实与已知事物间具有相似的方面作比　较。它能启发和开拓我们的思维。能给我们提供解决问题的线　索，是提出科学假设和探索新理论的重要途径．它对物理学的　发展有着不可磨灭的功劳．对学生物理的学习也发挥着巨大　的作用。　在教材中用橡皮绕绳运动与月亮绕地球运动作类比弓１人　引力；研究电压的作用时，将电压类比为水压来认识电压，使　电路中形成了电流；通电螺线管的磁场分布很抽象，规律的总　结也不容易理解，课本中用蚂蚁沿着电流爬行说“Ｎ极就在我　的左边”。猴子用右手把螺线管夹在腋下，说“如果电流沿着我　右臂所指的方向，Ｎ极就在我的前方”来类比……这样把晦涩　难懂的理论具体化。学生被生动的图像和有趣的类比所吸引，　学习物理的兴趣被调动起来，效果是明显的。　四、变抽象为具体和理想化法　变抽象为具体指分析概括一类事物共同的本质特征，把　学生不容易理解的知识与熟悉的事物或知识联系起来，帮助　他们理解知识的含义。例如大气压是看不见摸不着的，但我们　可以通过研究大气压产生的现象来认识它。学生在初中物理　学习电流时，对导体中有电流时产生的一些现象（如小灯泡发　光，发热）来确定是否有电流通过；在研究大气压的值时，用水　银柱高所产生的压强来研究大气压；由小磁针Ｎ、Ｓ极指向偏　转，可以知道磁场的存在、强弱和方向；通过扩散现象，可以知　道分子在不停地做无规则运动：在研究磁场时引入磁感线；用　光线描述光的传播，等等，都用到了这种方法。　科学的理想化绝不是无根据的幻想，而是对于客观世界　的一种超现实的认识。客观存在的复杂事物具有多方面的特　性．处于多种条件下．但是在一定的条件下只有一种或少数几　种起主要作用。并不是所有性质和条件都起同样重要的作用。　我们为了能更加清楚地认识事物的某一性质才使用理想化这　一分析问题的方式。为了突出事物的本质，教师必然要忽略一　些次要性质，因此在实验探究时，应该对一些理想化条件加以　限制。例如在杠杆一节的教学中，为什么使用的杠杆是一根粗　细均匀的直杆．用线把它的中心位置悬挂起来的目的又是什　么？通过讨论，学生会明确实验用的杠杆可以看作理想的轻质　杠杆。杠杆只受到动力和阻力作用。这样研究杠杆的平衡条件　问题就简单化。很容易得出杠杆的平衡条件。　抓住主要矛盾。忽略次要矛盾，理想实验是在真实的科学　实验的基础上，根据逻辑法则，对过程作进一步的分析、推理。　伽利略通过对于一系列实验的分析．并进一步推理得出：如果　表面绝对光滑、物体受到的阻力为零，速度不会减慢。将以恒　定不变的速度永远运动下去。这一推理为牛顿的第一定律奠　定了理论基础。教师运用这种理想化的方法，可培养和发展学　生的想象能力和逻辑推理能力。　在认识理想化法的特点的同时，教师也应该让学生认识：　在一定理想化条件下得出的规律，只在（或者非常接近）这些　条件下适用。　以上是一些常见的研究方法，在初中物理实验教学中还　有其它的研究方法，如观察法、猜想（假说）法、对称法、公式法　等。有意识地训练和培养学生的研究方法。目的是启发学生的　想象力，激发学生创造性思维，使学生养成用科学的研究方法　发现问题和解决问题的习惯。提高学生的科学素养。　让学生由衷地敬佩教师，而不是“怕教师”，从而建立平等、和　谐的良好师生关系。这样有助于让学生克服一些学习心理障　碍，让学生有话敢向教师说，愿意向教师说。在教学中，教师要　善于鼓励和激发学生学习的内存动力。调动学生的主动参与　的积极性。　在教育工作中，教师应该研究新形势下的教育观念，改变　传统的教育方式、方法，提高教育质量和效果，为培养二十一　世纪新型人才而努力，以适应社会发展的需要。