循环肿瘤细胞最新进展2015
- 格式：ppt
- 大小：2.64 MB
- 文档页数：17
文档推荐
-
循环肿瘤细胞研究进展任文君页数:3
-
关于循环肿瘤细胞(CTC)的一些认识页数:5
-
循环肿瘤细胞(CTC)检测页数:2
-
循环肿瘤细胞检测的现状及发展页数:28
-
循环肿瘤细胞检测原理及其应用页数:33
-
循环肿瘤细胞CTCs的临床应用只是分享页数:34
下载文档原格式
合集下载
循环肿瘤细胞临床检测技术研究进展
的 迁 移，许 多 杂 交 表 型 共 存 为 多 细 胞 簇 并 集 体 迁 移，更 多 能 动的侵袭性间充质样细胞聚集在多细胞簇的侵入前沿以“铺 平”道 路，而 上 皮 样 细 胞 保 留 其 上 皮 细 胞 特 性，紧 跟 其 后 并 抓住在外渗后转移到远处的机会 。 [25] 值得注意的是，EMT / MET 模型和集体迁移模型可能不是独立的，甚至是截然相反 的。在某些情况下，肿瘤细胞可以在两种机制之间切换或者 这两种机制可以协同作用转移。
2 上皮 - 间质转化（EMT）
2.1 概念 EMT 是一个涉及许多分子和细胞变化的多步骤过程，
包 括 下 调 上 皮 蛋 白，如 E- 钙 粘 蛋 白，claudins 和 细 胞 角 蛋 白，上 调 间 充 质 蛋 白，如 N- 钙 粘 蛋 白，纤 连 蛋 白 和 波 形 蛋 白，它 们 增 加 细 胞 的 运 动 性 和 侵 袭 性 。 [11-14] EMT 过 程 中 的 这些分子的变化受到转录因子的调控，即 EMT 诱导转录因 子（EMT-TF），包 括 Snail 1，Snail 2（Slug），ZEB1，Twist， TCF4 和 FOXC2。除 EMT-TFs 外，肿瘤微环境中的一些细胞 外分子（TGF-β，FGF，EGF，HGF，Wnt，Notch，Hedgehog 等） 及相关通路（MAPK，PI3K，NF-κB，Wnt / catenin，Notch 等） 被认为可诱导 EMT 。 [15-19] EMT 对肿瘤细胞侵袭性和 CTC 生 成的贡献一直存在，但其在转移性级联中的作用仍然存在争 议，已经提出了涉及 EMT 的两种转移模型，EMT / MET 模型 和集体迁移模型。 2.2 EMT 转移模型 2.2.1 EMT / MET 模型
2015肿瘤科大事件TOP10
• FDA根据OPTiM III期试验（包含436例患者） 的有效性结果，批准了该药的使用。该研究 纳入了436例患者，相比于直接使用GM-CSF 组的患者，T-Vec组有更多患者获得了持久 应答（16.3% vs 2.1%; P <0.001）。
谢谢大家！
ห้องสมุดไป่ตู้
T-DM1：曲妥珠单抗与细胞毒药物DM1结合
8 Nivolumab免疫疗法的几个适应症获得FDA批准
• 美国食品和药品管理局（FDA）批准Nivolumab用于治疗以铂为基础的 化疗期间或之后出现进展的转移性非小细胞肺癌（NSCLC）。 • 伴有EGFR或ALK肿瘤基因组畸变的患者，在使用Nivolumab之前，用其 他已经批准的治疗方法时很可能出现疾病进展。 • 对于肾细胞癌，Nivolumab获批准用于治 疗经过抗血管生成治疗的晚期患者。 • 对于黑色素瘤，FDA批准Nivolumab联合 Ipilimumab用于治疗BRAF V600野生型、 无法切除的或转移性的黑色素瘤。
3 癌症基因图谱（TCGA）分类把黑色素瘤分为四种亚型
• 癌症基因图谱（TCGA）给出的新数据建议，根据最常见的有意义的突 变基因，把皮肤黑色素瘤分为4个类型：BRAF、RAS、NF1和 TripleWT。 • 来自331例成年的原发性和/或转移性黑色素瘤患者的数据显示，最大 的基因组亚型分型是由BRAF热点突变的存在定义的，52%的病例存在 这种突变。 • 接下来最常见的基因组亚型分型是存在RAS热点突变（28%）和存在 NF1突变（14%）的。 • 最后，研究人员把Triple-WT型定义为没有BRAF、RAS或 NF1热点突变 的。
经历过乳房切除术的患者进行腋窝评估的概率从 2006年的56.6%上升至2012年的67.4%。
循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展
循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究进展
循环肿瘤细胞是从原发肿瘤中脱落的癌细胞，进入血液循环并迁移到远离原发灶的其他器官。
通过检测CTCs的存在和数量，可以提供乳腺癌的早期诊断、预测预后、指导治疗和监测疗效的重要信息。
目前，乳腺癌患者中CTCs检测的主要方法包括免疫细胞化学染色、流式细胞术、聚合酶链反应和原位杂交等。
这些方法具有各自的优缺点，但可以在不同的检测阶段识别和分离CTCs，并对其进行进一步的分析和研究。
近年来，许多研究表明，在乳腺癌患者中检测到的CTCs与肿瘤的临床特征和预后密切相关。
CTCs的存在和数量与患者的淋巴结转移、肿瘤大小、分子亚型和基因突变等因素相关。
一些研究发现，在治疗前和治疗后检测CTCs的变化可以作为预测患者治疗效果和预后的生物标志物。
除了CTCs的数量，一些研究还对CTCs进行了进一步的分析，包括CTCs的表型、单个细胞基因分析和表观遗传学分析等。
这些研究不仅可以帮助我们了解CTCs的生物学特性，还有助于发现新的治疗靶点和预测患者的治疗反应。
虽然循环肿瘤细胞检测在乳腺癌患者中的应用研究取得了一些进展，但仍然面临着一些挑战。
由于CTCs的数量很少且易被检出，检测的灵敏度还有待提高。
标准化的CTCs检测方法和操作流程尚未建立，不同研究结果之间的比较和验证存在一定的困难。
长期的随访和大样本的临床研究仍然需要进行，以验证CTCs作为预测患者预后和指导治疗的可行性和准确性。
循环肿瘤细胞作为乳腺癌患者的生物标志物，具有重要的临床应用价值。
随着技术的不断发展和研究的深入，循环肿瘤细胞检测有望成为乳腺癌早期诊断和治疗个体化的重要手段。
循环肿瘤细胞在肺癌诊疗中的临床研究进展
循环肿瘤细胞在肺癌诊疗中的临床研究进展肺癌是全球范围内最常见的癌症之一，它的发病率和死亡率一直居高不下，给人类健康带来了极大的威胁。
尽管肺癌的治疗方法逐渐多样化，但是肺癌的治愈率仍然相对较低，其中循环肿瘤细胞（CTC）的存在对肺癌的诊疗起着重要的作用。
随着生物医学技术的不断发展，关于循环肿瘤细胞在肺癌诊疗中的临床研究也取得了一系列的进展。
作为肺癌的一种重要生物标志物，循环肿瘤细胞是从原发肿瘤组织中释放出来的癌细胞，它们可以通过血管系统进入到全身循环中，从而可能在机体的其他部位形成转移灶。
循环肿瘤细胞的检测在肺癌的诊断和治疗中具有重要的意义。
近年来，一些临床研究表明，循环肿瘤细胞的检测可以提高肺癌的早期诊断率。
传统的肺癌诊断主要依靠影像学检查和组织病理学检查，但是这些检查方法对于早期肺癌的敏感性和特异性并不高，很难及时准确地进行诊断。
而循环肿瘤细胞的检测可以通过简单的血液检测就能获取癌细胞的信息，从而帮助医生对肺癌进行早期诊断，提高了肺癌的治疗成功率。
循环肿瘤细胞的检测也可以帮助医生对肺癌进行预后评估。
研究表明，循环肿瘤细胞的数量和活性与肺癌的预后密切相关，循环肿瘤细胞的检测可以帮助医生对肺癌患者的预后进行更加准确的评估，从而制定更加合理的治疗方案。
通过对患者的循环肿瘤细胞进行监测，可以及时了解肺癌的病情发展情况，为患者的个体化治疗提供有力的依据。
除了在肺癌的诊断和预后评估中的作用外，循环肿瘤细胞的检测在肺癌治疗过程中也具有重要的意义。
目前，循环肿瘤细胞的检测已经被应用于监测肺癌患者对治疗的疗效。
通过连续检测患者的循环肿瘤细胞，可以及时评估治疗的效果，帮助医生调整治疗方案，从而提高患者对治疗的响应率和存活率。
尽管循环肿瘤细胞在肺癌的诊疗中具有重要的意义，但是目前循环肿瘤细胞的检测方法还存在一些局限性。
一方面，循环肿瘤细胞的数量往往非常稀少，传统的检测方法很难对少量的循环肿瘤细胞进行高灵敏度的检测，因此需要开发更加精准的检测技术。
循环肿瘤细胞研究进展
循环肿瘤细胞研究进展循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells，CTCs）是指肿瘤细胞在血液中的存在形式，是肿瘤细胞迁移和转移的重要媒介。
随着一系列识别和分离方法的发展，CTCs被广泛应用于肿瘤诊断、预后评估、疾病监测和治疗效果评估等领域，成为肿瘤研究的热点之一。
本文将介绍循环肿瘤细胞研究的最新进展。
CTCs的分离和检测是CTCs研究的基础。
近年来，随着分子生物学、生物芯片技术的发展，研究人员提出了许多新型的CTCs分离和检测方法，如基于肿瘤细胞表面标记的免疫磁珠分离、微纳米技术的微滤装置、电化学生物传感器等。
这些方法能够高效、特异地分离和检测CTCs，极大地提高了CTCs的检测灵敏度和准确性。
CTCs的生物学特性研究是CTCs研究的重点之一。
CTCs具有高度异质性，不仅表现出肿瘤细胞的生物学特性，还表现出其自身的特殊生物学行为。
研究发现，CTCs与致瘤性、药物敏感性、肿瘤转移等密切相关。
例如，CTCs能够主动进入血液循环，并在其余器官种植形成转移瘤；CTCs具有更高的DNA 损伤修复能力，能够抵抗化疗药物导致的DNA损伤；CTCs还能够通过与免疫系统的相互作用来逃避宿主免疫系统的攻击、促进肿瘤迁移等。
这些发现为CTCs的临床应用提供了强有力的支持。
CTCs的临床价值研究是CTCs研究的一个重要方向。
研究发现，CTCs在肿瘤的诊断、治疗和预后评估等方面具有广泛的临床应用。
例如，在肿瘤早期诊断方面，CTCs成为一种新的检测手段，不仅能提高癌症早期检测的准确度，而且能明显增加肿瘤后随访的预测价值。
在肿瘤治疗方面，CTCs不仅能够作为肿瘤预后评估的一种生物标记，还可以帮助肿瘤医生制定更精确的治疗方案。
在疾病监测方面，CTCs几乎可以实时监测治疗效果和疾病进展情况，因此被视为一种有效的治疗效果监测手段。
总之，CTCs的研究取得了长足的进展，不仅深化了对CTCs 生物学特性的认识，而且广泛应用于肿瘤诊断、治疗和预后评估等领域，为更好地促进肿瘤的治疗和控制提供了新思路和新方法。
循环肿瘤细胞检测技术的研究进展
循环肿瘤细胞检测技术的研究进展肿瘤是一种十分复杂的疾病，它的病理变化可以在多个组织层次上发生。
近年来，随着分子生物学的不断发展，循环肿瘤细胞检测技术作为一种新型肿瘤诊断手段正在逐渐受到人们的重视。
本文将从基本概念、检测方法以及研究进展三个方面探讨循环肿瘤细胞检测技术。
基本概念循环肿瘤细胞（Circulating Tumor Cells, CTCs）是指癌症患者体内的肿瘤细胞，在肿瘤组织外的血液中存在的，具有肿瘤来源、生物学活性和增殖转移能力的单个活细胞或细胞团。
与传统的检测方法不同，循环肿瘤细胞检测技术可以通过简单的血液检测来检测肿瘤的存在，不仅能够实现早期诊断，还可以监测肿瘤活动、评估治疗效果以及预测肿瘤的临床结果。
检测方法循环肿瘤细胞检测技术的方法多样，包括直接可视化、免疫磁珠捕获、流式细胞分选、单细胞扩增和下一代测序等。
其中，直接可视化技术主要是通过应用显微镜等设备对血液中的肿瘤细胞进行检测；免疫磁珠捕获技术是通过将血液中的肿瘤细胞与磁珠结合，然后将其分离出来，形成肿瘤细胞的纯化；流式细胞分选技术是通过免疫分选技术对血液中的肿瘤细胞进行筛选和鉴定；单细胞扩增技术是通过对肿瘤细胞的筛选和扩增，使其在试管中形成足够数量的肿瘤细胞，并为下一代测序提供样品；下一代测序技术是通过高通量测序技术对肿瘤细胞进行检测，并获得其基因物质的序列信息。
这些技术的出现极大地拓展了循环肿瘤细胞检测技术的应用范围，并在临床诊断、治疗和研究中发挥着重要作用。
研究进展随着循环肿瘤细胞检测技术的发展，越来越多的研究表明，CTCs已成为多种癌症类型的生物标记物。
细胞表面分子的表达、细胞学形态特征以及肿瘤相关基因的表达均被证明与CTC相关。
通过对CTCs的捕获和分析，可以更好地了解肿瘤的临床进展，并为更好地治疗和干预肿瘤提供基础数据。
此外，循环肿瘤细胞检测技术也有助于肿瘤早期诊断，提供治疗方案的选择，监测治疗效果以及预测肿瘤的预后。
循环肿瘤细胞临床应用的新进展
循环肿瘤细胞临床应用的新进展
朱玲;向敏;刘馨;陈艳;王熙才
【期刊名称】《现代肿瘤医学》
【年(卷),期】2014(022)011
【摘要】循环肿瘤细胞(Circulating tumor cells,CTCs)是指释放到血液中的罕见肿瘤细胞,被认为是肿瘤血液转移的关键步骤之一.循环肿瘤细胞的检测对于肿瘤的诊断、治疗和预后判定都具有非常重要的意义,是目前肿瘤研究的热点之一.本文将从预测生物标志物、治疗反应、预后、血浆肿瘤DNA四个方面介绍循环肿瘤细胞临床应用的最新研究进展.
【总页数】3页(P2746-2748)
【作者】朱玲;向敏;刘馨;陈艳;王熙才
【作者单位】昆明医科大学第三附属医院肿瘤研究所云南省肿瘤研究所,云南昆明650118;昆明医科大学第三附属医院肿瘤研究所云南省肿瘤研究所,云南昆明650118;昆明医科大学第三附属医院肿瘤研究所云南省肿瘤研究所,云南昆明650118;昆明医科大学第三附属医院肿瘤研究所云南省肿瘤研究所,云南昆明650118;昆明医科大学第三附属医院肿瘤研究所云南省肿瘤研究所,云南昆明650118
【正文语种】中文
【中图分类】R730.43
【相关文献】
1.循环肿瘤细胞研究新进展 [J], 田向阳;魏子白
2.液体活检循环肿瘤细胞和循环肿瘤DNA在肝癌中的临床应用进展 [J], 张劲国;许国雄
3.循环肿瘤细胞检测的研究新进展 [J], 黄同海;王正;李富荣
4.循环肿瘤细胞的检测与临床应用 [J], 王萍
5.血循环肿瘤细胞及循环游离DNA在乳腺癌临床应用的研究进展 [J], 娜仁;贾永峰
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
外周血循环肿瘤细胞检测的研究进展
般 而 言 ，Ｔ Ｃ Ｃ检 测 的方 法 大 致 可 以分 为 细 胞 计 数 和 基
【 关键词 】 循环肿瘤细胞 ； 肿瘤标 志物 ； 肿瘤 转移 ； 检测技术
中 图 分 类 号 ：７ ３ Ｒ ３ 文 献 标 识 鹤 ： Ａ 文 章 编 号 ：０ ９— ４ ０ ２ １ ）０— ９４— ４ １０ ０ ６ （０ ０ １ ０ ４ ０
Ａ ｄ ａｎ ｅ ｉ ｈ ｔ ｃ ｉ ｆｃ ｒ ｕｌ ｔｎｇ ｔ ｍ ｏ ｅｌ ｎ ｐｅ ｉ ｖ ｃ ｎ ｔ ｅ ｄｅ ｅ ｔｏｎ ｏ ｉｃ ａ ｉ ｕ ｒ ｃ ｌ ｉ ｒｐｈｅ ａ ｏ ｄ ｓ ｒ ｌｂｌ ｏ
恶 性 肿 瘤 严 重 威 胁 人 类 健 康 ， 致 死 的 主 要 原 因是 部 分 其
类 型 和分 子 表 型 的 肿 瘤 分 别 表 达 不 同 的 标 志 物 ； 外 ， Ｔ 此 ＣＣ 在 外 周 血 中数 量 稀 少 ， 般 在 １。一１ 白细 胞 中 仅 含 有 １ 一 ０ ０个 个 。 目前 广 大 肿 瘤 研 究 人 员 特 别 关 注 的 是 如 何 找 到 Ｃ Ｃ的 Ｔ 特 异 性 标 志物 并 提 高检 测 手 段 的敏 感 性 和 特 异 性 。
一
肿瘤 细胞获得侵袭 能力并 造成 远处转 移 。肿瘤转 移是一
个 涉及 多 步 骤 多 因素 的 复 杂过 程 ， 有 转 移 潜 能 的 肿 瘤 细胞 具 脱 离原 发病 灶 ， 极 少 的数 量 转 移 到 血 液 、 髓 、 巴结 或远 以 骨 淋 处 器 官 中 ， 用 常 规 的 检 测 手 段 难 以发 现 ， 为 肿 瘤 的 微 转 使 称 移 （ ｃｏ ｅ ｓ ｓ ） 肿 瘤 细 胞 的 脱 落 、 袭 并 进 入 血 液 循 Ｍｉ ｍ ｔ ｔ ｉ 。 ｒ ａａｓ 侵 环 是 实 现 肿 瘤 转 移 的 最 初 阶 段 ， 为 最 终 形 成 肿 瘤 转 移 病 灶 并 提供了可能 ， 因此 在 外 周 血 中 检 测 循 环 肿 瘤 细 胞 （ ｉ ｕ ｔ ｇ ｃ ｃｌ ｉ ｒ ａｎ
循环肿瘤细胞在临床运用中的研究进展
构不完整 的微小血管 。这 类血管 上皮细胞 之间 的连接
极 为松散 ，甚至会 出现细胞 问的缺 口。因此 ，在 原发 病灶生长挤压 的外力 辅助下 ，肿 瘤细胞 就可 以通 过这 些 不完整 的微血 管 ， “ 被动 ” 侵入外 周循 环并发 生远 处转移 ＇ ｍ ｊ 。这种方式也 为 Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 的簇 集提供 了可能 。 簇集 现象 可以有效 降低 单细胞 因表面黏 附能力丧 失而
的状 况。Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 的这种生物学特性则有利于药物疗 效的 评估 。一项 ３期 临床 随机试验证 实 ，在阿 比特龙 治疗 的前列腺癌患者中 ，Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 的数量和总体生存率呈负相 关＿ ｌ ’ ］ 。因此 ，Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 能否被 有效 清 除也 被认 为是 评价
药物敏感性 的一个指标¨ 。与此相反 ，在治疗过程 中 Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 数量并 未减少甚至 出现异质性改变 ，则将预示肿
变 ，提示需 要 在 常 规运 用 上 述 药 物 的基 础 上 ，增 加
Ｈ Ｓ Ｐ ９ ０抑制剂来 重新 获得针对肿瘤 的药物活性 。 实时反 映肿瘤 状况—— 有利于治疗 监测 和预后 评 估 因为 Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 一直以 “ 主动 ” 或 “ 被动 ” 的方式进 入外周循环 ，这种动态 的过程可 以实时反 映肿瘤病 灶
现肿瘤 的 特征 ，也 可 以实 时反 映肿 瘤 的发 生 发 展 状
标 ，有效的分离富集和分子鉴定是关键 。
以抗・ Ｅ ｐ Ｃ Ａ Ｍ 和抗－ Ｃ Ｋ 抗体为基 础的 Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 分 离
富集技 术 以抗原抗 体特 异性结 合为基 础 的 Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 分 离富集 是 目前 运 用最 广 泛 的 技术 ［ ２ － ４ ］ 。其 原理 在 于 ： 通过对 Ｃ Ｔ Ｃ ｓ 上 的一些 特殊标 记物设 计 出来 的具 有针 对性 的抗 体 ，以 特 异 性 结 合 的 方 式 来 识 别 并 捕 获
循环肿瘤细胞生物学特性的研究进展
循环肿瘤细胞生物学特性的研究进展摘要】循环肿瘤细胞（CTCs）是指弥散进入血液循环的肿瘤细胞，被认为是肿瘤血液转移的关键步骤之一。
本文将近几年对CTCs生物学特性的研究进展做一综述，为早期监测肿瘤复发、判断患者预后情况、评估抗肿瘤药物的敏感性并选择个体化治疗方案等提供有力依据。
【关键词】循环肿瘤细胞；生物学特性；EMT；CTM ；干细胞【中图分类号】R73-3 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）31-0009-02Advancements in Biological Characteristis of Circulating Tumour CellsTian Wei, Yong Yang, Kaiqiang Ding, Qilong Ding(China Pharmaceutical University, Nanjing, 211198, China)据估计，全世界癌症患者的死亡约90%归咎于肿瘤转移，而非原位肿瘤的恶性损害[1, 2]。
肿瘤转移是一个非常复杂的侵袭-转移级联过程[1, 3]，肿瘤细胞弥散进入血液形成的循环肿瘤细胞（Circulating Tumour Cells，CTCs)是造成复发转移的必要前提[4]。
自1896 年Ashworth首次在患者体内检测并提出CTCs 的概念[5]，CTCs研究即受到关注，结果显示CTCs的存在可能是肿瘤发生的极早期事件[4]。
近年来随着CTCs分离检测技术的发展，越来越多的研究着力于阐明CTCs导致肿瘤转移的分子机制等。
因此，对CTCs生物学特性的研究，为肿瘤转移的机制研究以及治疗提供了新的思路和方法，同时可在肿瘤患者早期即监测复发转移，为判断患者预后情况、评估抗肿瘤药物的敏感性并选择个体化治疗方案等提供有力依据。
本文将近几年对循环肿瘤细胞生物学特性的研究进展做一综述。
1.循环肿瘤细胞的生物学特性1.1 CTCs与上皮间质转化肿瘤转移过程中发生的上皮间质转化（Epithelial-Mesenchymal Transition，EMT）指肿瘤细胞通过特定程序，失去原有的上皮样细胞极性及细胞间联系，变成梭形并具有可变细胞骨架的间质细胞样特性以完成转移的过程[6]，经历该过程的肿瘤细胞具更强的转移潜能。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
Ex vivo culture of circulating breast tumor cells for individualized testing of drug susceptibility
Liu Zixin
Department of Hepatic Surgery VI,EHBH 2015-01-05
CTC: EpCAM (+) white blood cells: CD45(+) and CD66(+)
Basic modes:
positive selection mode: anti-EpCAM
negative selection mode: anti-CD45 anti-CD66
CTC-iChip system
Report Content • • • • • • CTC-iChip system and CTC culture the Identification of CTC Gene mutation analysis Drug sensitivity Conclusion Discussion
Knowledge on CTC-iChip system Biomarkers
Results hared cytological features with the matched primary CTCs captured . Consisitent with standard CTC definitions: CK(+);CD45(-);proliferative index~30%(Ki67)； initial doubling time:3days to 3weeks. Five CTC lines retained ER(+),BRx-07 lost ER expresion,but regained in Xenograft tumor. CTC-derived tumors shared histological and immunohistochemical features with the matched primary tumor.
Discussion
Samples: patients with metastatic/PVTT which stage? Mode: negative mode. Drug targets :mutational gene analysis
@Liu Zixin
which stage?biomarkers?AFP?
Results of Drug Sensitivity (BRx-68)
• SERMs(tamoxifen) and SERD(raloxifene) were ineffective,alone or combined with inhibitors of PIK3-mTOR(everolimus). • HSP90 inhibitor STA9090 demonstrated cytotoxicity,alone or combinition with SERMs or SERD. • A low dose of STA9090 suppressed ER level.?
Results of Drug Sensitivity (BRx-07)
• Different FGFR mutations have different sensitivity to PIK3CA and FGFR2 inhibitors.
Conclusions
• Study patterns of drug susceptibility with CTC,combined with genetic context. • Enable monitoring of emerging subclones with alterd mutational and drug sensitivity profiles.
NGS platform:CTC culture and other mutation (1000 genes)
Results of gene analysis
• ESR1(BRx-68),TP53(BRx-68,61) and KRAS(BRx-42) are universally present in all independent CTC cell lines. • PIK3CA,KRAS and FGFR2 are arising mutations. • The mutant allele frequences of TP53 and ESR1 are increased upon prolonged culture.
Debulking by separation of nucleated cells from the enucleated.
Alignment of nucleated cells within a microfluidic channel. Deflection of magnetically tagged cells into a collection channel.
Results of CTC culture
CTC lines can only be generated from patients who were either off therapy or progressing on treatment. and cannot be generated from patients who were responding to treatment. For three patients, four additional CTC cell lines were established from blood samples drawn at multiple different time points during therapy.In these cases,CTCs were cultured only when patients were progressing on treatment.
Results of Drug Sensitivity (BRx-07)
• Cultured CTCs were highly sensitive to PIK3CA and FGFR2 inhibitors. • Combinations of PIK3CA and FGFR inhibitors showed cooperatove effects.? • iIGFR mitigate sensitivity to iPI3K;iHSP90 stablize mutant kinases.
• Choose drug targets ESR1 and PIK3CA for drug sensitivity test.
Results of Drug Sensitivity test
Some CTC drug sensitivity measurements were concordant with clinical history.
The Special conditions for CTC cultrue
• Blood samples:patients with metastatic ER(+) • Nonadherent culture conditions (critical) • Serum-free supplemented EGF and FGF • under hypoxic conditions (4% O2) • Establish long-term oligoclonal CTC (sustaimed in vitro >6months)
Gene analysis
RNA sequencing analysis
6 cultured cell lines; 13 commonly used breast cancer cell lines; 29 unclured single CTCs.
Mutation analysis
SNaPShot : primary tumor (~140 mutations in 25 gene)
Combines the strengths of microfluidics for rare cell handing and magnetic-based cell sorting.
Magnetic labeling of cells in blood cells.( pos- vs neg- )
Liu Zixin
Department of Hepatic Surgery VI,EHBH 2015-01-05
CTC: EpCAM (+) white blood cells: CD45(+) and CD66(+)
Basic modes:
positive selection mode: anti-EpCAM
negative selection mode: anti-CD45 anti-CD66
CTC-iChip system
Report Content • • • • • • CTC-iChip system and CTC culture the Identification of CTC Gene mutation analysis Drug sensitivity Conclusion Discussion
Knowledge on CTC-iChip system Biomarkers
Results hared cytological features with the matched primary CTCs captured . Consisitent with standard CTC definitions: CK(+);CD45(-);proliferative index~30%(Ki67)； initial doubling time:3days to 3weeks. Five CTC lines retained ER(+),BRx-07 lost ER expresion,but regained in Xenograft tumor. CTC-derived tumors shared histological and immunohistochemical features with the matched primary tumor.
Discussion
Samples: patients with metastatic/PVTT which stage? Mode: negative mode. Drug targets :mutational gene analysis
@Liu Zixin
which stage?biomarkers?AFP?
Results of Drug Sensitivity (BRx-68)
• SERMs(tamoxifen) and SERD(raloxifene) were ineffective,alone or combined with inhibitors of PIK3-mTOR(everolimus). • HSP90 inhibitor STA9090 demonstrated cytotoxicity,alone or combinition with SERMs or SERD. • A low dose of STA9090 suppressed ER level.?
Results of Drug Sensitivity (BRx-07)
• Different FGFR mutations have different sensitivity to PIK3CA and FGFR2 inhibitors.
Conclusions
• Study patterns of drug susceptibility with CTC,combined with genetic context. • Enable monitoring of emerging subclones with alterd mutational and drug sensitivity profiles.
NGS platform:CTC culture and other mutation (1000 genes)
Results of gene analysis
• ESR1(BRx-68),TP53(BRx-68,61) and KRAS(BRx-42) are universally present in all independent CTC cell lines. • PIK3CA,KRAS and FGFR2 are arising mutations. • The mutant allele frequences of TP53 and ESR1 are increased upon prolonged culture.
Debulking by separation of nucleated cells from the enucleated.
Alignment of nucleated cells within a microfluidic channel. Deflection of magnetically tagged cells into a collection channel.
Results of CTC culture
CTC lines can only be generated from patients who were either off therapy or progressing on treatment. and cannot be generated from patients who were responding to treatment. For three patients, four additional CTC cell lines were established from blood samples drawn at multiple different time points during therapy.In these cases,CTCs were cultured only when patients were progressing on treatment.
Results of Drug Sensitivity (BRx-07)
• Cultured CTCs were highly sensitive to PIK3CA and FGFR2 inhibitors. • Combinations of PIK3CA and FGFR inhibitors showed cooperatove effects.? • iIGFR mitigate sensitivity to iPI3K;iHSP90 stablize mutant kinases.
• Choose drug targets ESR1 and PIK3CA for drug sensitivity test.
Results of Drug Sensitivity test
Some CTC drug sensitivity measurements were concordant with clinical history.
The Special conditions for CTC cultrue
• Blood samples:patients with metastatic ER(+) • Nonadherent culture conditions (critical) • Serum-free supplemented EGF and FGF • under hypoxic conditions (4% O2) • Establish long-term oligoclonal CTC (sustaimed in vitro >6months)
Gene analysis
RNA sequencing analysis
6 cultured cell lines; 13 commonly used breast cancer cell lines; 29 unclured single CTCs.
Mutation analysis
SNaPShot : primary tumor (~140 mutations in 25 gene)
Combines the strengths of microfluidics for rare cell handing and magnetic-based cell sorting.
Magnetic labeling of cells in blood cells.( pos- vs neg- )