生物样品前处理方法

干湿结合生物学研究方法在生物学研究领域，干湿结合的方法已经成为一种高效、全面的研究策略，涵盖了从生物样品的前处理到测序与表达分析等多个步骤。

干湿结合生物学研究方法结合了湿法和干法两种技术，下面将详细介绍这些内容。

1、湿法生物样品前处理湿法生物样品前处理是一种常用的样品处理方法，主要利用液体介质进行样品破碎、细胞裂解和蛋白质、核酸等生物分子的提取。

湿法处理具有高效、温和的优点，适用于大部分生物样品的处理。

湿法生物样品前处理的主要步骤包括：样品收集、细胞破碎、细胞裂解、蛋白质变性、核酸提取等。

在操作过程中，需要注意保持无菌条件，避免样品污染，同时要尽量减少对生物分子的破坏，保持其天然活性。

2、干法生物样品前处理干法生物样品前处理主要利用干粉试剂或干式生化试剂进行样品破碎、细胞裂解和生物分子的提取。

干法处理具有简便、快速、无需特殊设备的优点，适用于一些不易获得的生物样品或需要快速处理的紧急样品。

干法生物样品前处理的主要步骤包括：样品收集、细胞破碎、细胞裂解、干燥、试剂添加等。

在操作过程中，需要注意避免样品污染，保证细胞的充分破碎和裂解，同时要保证生物分子的完整性。

3、蛋白质生物样品分离与纯化蛋白质生物样品分离与纯化是生物学研究中的重要步骤，其主要目的是将目标蛋白质与其他生物分子（如核酸、脂质等）进行有效分离，从而对其进行深入研究和应用。

蛋白质生物样品分离与纯化的主要方法包括：离子交换色谱、凝胶色谱、亲和色谱、电泳等。

这些方法各有特点，适用范围也不同，需要根据具体研究需求进行选择。

在操作过程中，需要注意保证样品的均一性和回收率，同时要尽量避免非特异性吸附和样品损失。

4、DNA生物样品提取与纯化DNA生物样品提取与纯化的目的是从生物样品中提取出高质量的DNA，去除其中的杂质和干扰物质，以便进行后续的基因组学研究。

DNA生物样品提取与纯化的主要方法包括：酚氯仿抽提法、硅胶膜吸附法、磁珠法等。

这些方法都能够高效地提取和纯化DNA，但操作过程和适用范围略有不同。

药物分析中的生物样品前处理方法研究近年来，随着生物医药领域的快速发展，药物分析在疾病的诊断和治疗中扮演着至关重要的角色。

为了获得准确可靠的分析结果，生物样品的前处理方法显得尤为重要。

本文将探讨药物分析中常用的生物样品前处理方法的研究进展。

一、血液样品的前处理方法研究血液样品作为一种常见的生物样品，在药物分析中扮演着重要的角色。

然而，血液样品中存在着各种成分的干扰，如蛋白质、血红蛋白等。

因此，研究人员提出了多种前处理方法来解决这些问题。

1. 血浆/血清的蛋白质沉淀方法血浆/血清中的蛋白质是最常见的干扰物之一。

为了降低蛋白质对分析结果的影响，研究人员开发了各种蛋白质沉淀方法。

例如，酸沉淀法可以通过改变pH值使蛋白质凝聚沉淀，从而去除蛋白质干扰。

此外，还有醇沉淀法、有机溶剂沉淀法等。

2. 血浆/血清的固相萃取方法固相萃取方法是血液样品前处理中常用的技术之一。

其原理是利用吸附剂对目标化合物进行特异性吸附，从而去除干扰物。

通过选择合适的吸附剂，可以实现对特定成分的富集。

例如，固相萃取柱常用于血浆/血清样品中药物的富集与净化。

二、尿液样品的前处理方法研究尿液样品常用于药物代谢和排泄的研究，但由于其复杂的成分和高度变异性，前处理方法显得尤为重要。

1. 尿液样品的前处理方法选择尿液样品前处理的关键是选择合适的方法。

常见的前处理方法包括尿液蛋白质去除、有机溶剂浓缩、尿液稀释等。

根据具体的分析需求和目标物质的特性，选择恰当的前处理方法可以显著提高分析结果的准确性和灵敏度。

2. 尿液样品的固相萃取方法研究固相萃取也是尿液样品前处理中常用的技术之一。

通过选择适当的吸附剂和前处理条件，可以有效地去除尿液中的杂质，提高目标物质的测量灵敏度。

例如，固相萃取柱结合气相色谱-质谱联用技术可以用于尿液样品中药物代谢产物的研究。

三、其他生物样品的前处理方法研究除了血液和尿液样品，还有其他生物样品在药物分析中的应用。

例如，头发样品被广泛用于毒品滥用的检测。

电镜样品制备步骤1、取材：放入2.5%戊二醛溶液中固定2-4h(4℃可保存1-2周，冷冻可保存2年)注：不可用自来水冲洗，被钳、镊夹取造成机械损伤的组织不可部分可取较大面积，但厚度必须小于1mm（戊二醛固定能力小于0.5mm）2、漂洗：牙签取出样品至新的1.5ml离心管，用0.1M pH7.0磷酸缓冲液（PBS）漂洗样品三次（摇床），每次15min3、锇酸固定与再漂洗：1%锇酸溶液固定样品1-2h（临用前计算用量≤50ul/样，用0.1M PBS将2%锇酸稀释至1%，通风橱操作），吸出固定液，用0.1M pH7.0 PBS漂洗样品三次，每次15min注：漂洗以清除固定液，避免产生沉淀物干扰结构观察4、脱水剂梯度脱水：用梯度浓度（50%，70%，80%，90%和95%）乙醇溶液对样品进行脱水处理，每个浓度处理15min再用100%乙醇处理20min （乙醇细胞内抽提少，但与包埋剂相容性差）最后用纯丙酮处理20min（若包埋剂为Epon改用环氧乙烷置换）注：脱水以清除游离水以便包埋剂均匀渗透；脱水剂易吸收空气中水分，密封，置换时应该迅速由低到高逐级脱水而不能急剧脱水，更换溶液时应迅速，以免组织内外产生气泡。

5、包埋剂梯度渗透：①用包埋剂丙酮混合液（V/V=1/1）处理样品1h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小)②用包埋剂丙酮混合液（V/V=3/1）处理样品3h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小)③纯包埋剂渗透样品过夜：将样品移至干燥的新离心管中，常温过夜(所用器具均应干燥)注：样品周围不能有气泡6、加热聚合：牙签取出经渗透处理的样品至0.5ml干燥离心管（预先装入约300ul包埋剂），加热聚合仪70℃加热过夜。

7、莱卡EM UC 7超薄切片仪修快、切片（50-70nm）8、正染色：塑料包埋模具（刀划几道缝隙），染色时温度低影响染色效果，冬天空调醋酸双氧铀50%乙醇饱和溶液100ul染色（15min-1h），双蒸水冲洗柠檬酸铅100ul染色15min（极易吸收空气中CO2产生PbCO3,染色时毋对着说话、呼吸，同时放置数块NaOH）9、日立H-7650透射电镜观察spurr包埋剂配制：ERL 2.5gNSA 5.2 g 混合均匀后再加入催化剂DMAE，搅拌30min；低温干燥保存DER 2.5 gDMAE 0.1g宜新鲜配制但由于使用期限长(3-4天)，混合物可在使用前一天制备。

生物制药技术中的生物样品处理与分析方法生物制药技术在医药领域的应用日益广泛，其关键环节之一是生物样品的处理与分析。

生物样品处理与分析方法的选择和优化对于保证生物制药产品的质量和效力至关重要。

本文将介绍生物制药技术中常用的生物样品处理与分析方法，包括样品采集、样品前处理、样品分析等，以及其所涉及的原理和应用。

一、样品采集在生物制药技术中，样品采集是第一步，直接影响后续的样品处理与分析结果。

常见的生物样品包括血液、尿液、组织等。

对于血液样品，最常用的采集方法是采用针头抽血，然后将血液转移到适当的采样管中。

对于尿液样品，通常采用尿杯收集新鲜尿液，然后进行必要的保存和处理。

对于组织样品，常用的方法是通过手术或穿刺获取组织样本，并将其保存在适当的容器中。

二、样品前处理生物样品经过采集后，需要进行前处理来去除干扰物和提取目标分析物。

常见的前处理方法包括离心、过滤、沉淀等。

离心是通过旋转离心机使样品分离成上清液和沉淀物，用于去除离心后产生的沉淀物。

过滤是通过使用合适孔径的过滤器去除样品中的固体颗粒和杂质，例如细胞碎块和蛋白质等。

沉淀是通过加入特定试剂使样品中的目标分析物凝聚成沉淀物，然后通过离心或过滤的方式将其分离出来。

这些前处理方法能够有效地去除样品中的干扰物，提高后续分析的准确性和灵敏度。

三、样品分析生物制药技术中的样品分析是通过对样品中的目标分析物进行定量或定性分析，来评估生物制药产品的质量和效力。

常见的样品分析方法包括免疫学分析、核酸分析、代谢物分析等。

1. 免疫学分析免疫学分析是通过检测样品中的特定抗原或抗体来定量或定性样品中的分析物。

免疫学分析常见的方法包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、免疫荧光分析、免疫电泳等。

通过这些方法，可以检测生物制药产品中的特定蛋白质、抗体等成分，评估产品的纯度和含量。

2. 核酸分析核酸分析是通过检测样品中的DNA或RNA来定量或定性样品中的分析物。

常见的核酸分析方法包括聚合酶链反应（PCR）、核酸杂交、基因测序等。

生物样品分析前处理技术生物样品的前处理涉及很多方面，但主要应考虑生物样品的种类，被测定药物的性质和测定方法三个方面的问题.样品的分离、纯化技术应该依据生物样品的类型。

例如，血浆或血清需除蛋白，使药物从蛋白结合物中释出；唾液样品则主要采用离心沉淀除去粘蛋白；尿液样品常采用酸或酶水解使药物从缀合物中释出,当原型药物排泄在尿中时，可简单地用水稀释一定倍数后进行测定.根据被测定药物的结构、理化及药理性质、存在形式、浓度范围等,采取相应的前处理方法。

例如，药物的酸碱性（pka)、溶解性质涉及到药物的提取手段；是否具有挥发性涉及到能否采用气相色谱法测定；药物的光谱特性及官能团性质涉及到分析仪器的选择、能否制成衍生物及应用特殊检测器的可能性。

药物在样品中的浓度相差很大，浓度大的样品，对前处理要求可稍低；浓度越低则样品前处理要求越高。

此外，药物在体内常产生许多代谢产物，其中一些代谢物仍具有药理活性，需要与原型药分别测定,因而也要了解药物的药理学性质和药物动力学特性.样品于测定前是否需要纯化以及纯化到什么程度均与其后采用的测定方法的不同而不同。

即纯化程度与所用测定方法的专属性、分离能力、检测系统对不纯样品污染的耐受程度等密切相关.一般说来,放射免疫测定法由于具有较高的灵敏度和选择性，因此当初步除去主要干扰物质之后即可直接测定微量样品；而对灵敏度和专属性较差的紫外分光光度法,分离要求就要相应高一些；至于常用的高效液相色谱法，为防止蛋白质等杂质沉积在色谱柱上,上柱前需对生物样品进行去蛋白,有时对被测组分进行提取、制备衍生物等前处理。

下图大致反映了检测方法与样品前处理要求的相三关系。

样品处理步骤与分析方法的选择—（一）去除蛋白质在测定血样时，首先应去除蛋白质.去除蛋白质可使结合型的药物均出来，以便测定药物的总浓度；去除蛋白质也可预防提取过程中蛋白质发泡，减少乳化的形成,以及可以保护仪器性能（如保护HPLC柱不被沾污)，延长使用期限.去除蛋白法有以下几种.1.加入与水相混溶的有机溶剂加入水溶性的有机溶剂;可使蛋白质的分子内及分子间的氢键发生变化而使蛋白质凝聚，使与蛋白质结合的药物释放出来。

基于液质联用技术的生物样本前处理方法开发及应用液质联用技术是一种结合了液相色谱和质谱技术的分析方法，广泛应用于生物样本的分析与检测。

在生物样本中，存在着复杂的生物大分子和低浓度的目标物质，如蛋白质、代谢产物、药物等。

因此，为了提取和富集目标物质，并去除样本中的干扰物质，必须采用合适的样本前处理方法，以提高液质联用技术的分析灵敏度和可靠性。

生物样本前处理方法的开发需要综合考虑以下几个方面的因素：1.样本的特性：生物样本的特性包括样品类型、样品处理及样品保存条件等。

研究者需要全面了解样本的特性，以便选择合适的前处理方法。

2.目标物质的性质：目标物质的性质包括其分子量、极性、稳定性等。

根据目标物质的性质，选择合适的前处理方法，以提高目标物质的提取效率和分析灵敏度。

3.干扰物质的消除：生物样本中存在众多的干扰物质，如蛋白质、胆固醇、脂肪、无机盐等。

在样本前处理过程中，需要采取合适的方法去除这些干扰物质，以提高样品的纯度和减少分析误差。

常用的生物样本前处理方法包括：1.蛋白质去除：蛋白质是生物样本中的主要干扰物质之一、在样品前处理过程中，可以采用有机溶剂沉淀、超滤、固相萃取等方法去除蛋白质，以提高目标物质的分离纯度。

2.样品分液：样品前处理过程中，可以根据目标物质的极性特点，采用液-液萃取、固相萃取等方法进行样品分液，以实现对目标物质的富集和纯化。

3.样品预处理：有时候，为了使样品更适合进行液质联用分析，需要对其进行预处理。

常见的预处理方法包括高速离心、加热处理、pH调节等。

生物样本前处理方法的应用主要有以下几个方面：1.临床医学：生物样本前处理方法在临床医学中广泛应用于血液、尿液、乳汁、组织等各种生物样本的分析与检测。

通过前处理方法，可以富集和纯化目标物质，提高分析的灵敏度和特异性。

2.生物医药研究：生物样本前处理方法在生物医药研究中有着重要的应用。

通过前处理方法，可以提取和富集生物样本中的目标蛋白质、代谢产物等，进一步分析其结构和功能，为新药研发提供重要的理论和实验依据。

生物样品前处理及在原子吸收光谱仪分析中应用引言：原子吸收光谱仪是一种广泛应用于分析化学和环境科学领域的仪器，它基于原子在特定波长的光的吸收来测定样品中特定元素的含量。

在样品分析之前，必须进行一系列的前处理步骤，以准确地测定元素的含量。

本文将介绍一些常见的生物样品前处理方法，并探讨其在原子吸收光谱仪分析中的应用。

一、生物样品前处理方法1.溶解方法：将生物样品溶解于适当的溶剂中，以便进一步处理和分析。

对于固体样品，常用的方法是使用强酸或共熔混合物进行溶解；对于液体样品，可以直接使用或进行适当的稀释。

2.液-液萃取：适用于有机物或水中低浓度的金属离子的分离和富集。

通过添加有机溶剂与水中的金属离子发生配位作用，使其从水相中转移到有机相中。

3.气-液萃取：适用于挥发性有机物的分离和富集。

将气相中的有机物吸附到液相中，通过溶解和挥发的反复过程来富集。

4.溅射：将固体样品溅射成为微细颗粒，以提高其表面积，便于进一步处理和分析。

5.气相色谱：通过样品的挥发性和分子量差异进行分离和富集，可用于分析挥发性有机物。

以上这些生物样品前处理方法可以根据样品类型、元素需要测定的量级、所需分析的基体元素等因素进行选择和操作，以获得准确可靠的测定结果。

二、原子吸收光谱仪分析中的应用原子吸收光谱仪是测定样品中金属元素含量的重要工具，其应用涉及许多领域，如环境科学、药学、食品安全等。

以下将以环境科学领域为例，介绍原子吸收光谱仪在生物样品分析中的应用。

1.土壤样品分析：土壤是环境中重要的污染介质，其中金属元素的含量与土壤质量和环境负荷密切相关。

使用原子吸收光谱仪可以准确测定土壤中的重金属元素，如铅、镉、铬等，从而评估土壤污染状况。

2.水样分析：水是人类生存的重要资源，其中金属元素的含量直接影响到水的质量。

原子吸收光谱仪可用于测定水中的重金属元素，如铜、锌、汞等，用于水质检测、环境监测等。

3.植物样品分析：植物在生态系统中起着重要的作用，并且可以作为环境污染的指示物。

生物样品前处理技术及其应用生物样品前处理技术是生物医学研究中不可避免的一部分，同时也是保证实验结果准确性的关键。

因此，研究生物样品前处理技术及其应用对于生物医学研究具有非常重要的意义。

一、生物样品前处理技术的定义生物样品前处理技术是指在功能分析前对生物样品进行分离、富集、净化、转化、分解、修饰等处理操作的方法。

它对于提高样品的分析精度和敏感度、减少干扰物的影响、清除样品中的杂质和提高分析效率具有非常重要的作用。

二、生物样品前处理技术的类型（一）样品分离技术样品分离技术是将混合的样品物质按特定的属性进行分离的一种技术。

常见的样品分离技术包括离心分离、过滤分离、电泳分离、毛细管电泳等。

其中最为常见的是离心分离和过滤分离。

（二）样品富集技术样品富集技术是将样品中需要分析的目标物质从大量的杂质和干扰物中富集出来的一种技术。

常见的样品富集技术包括固相萃取、液相萃取、直接萃取等。

其中固相萃取技术是最常用的样品富集技术之一。

（三）样品净化技术样品净化技术是将样品中不需要分析的组分或杂质去除的一种技术。

常见的样品净化技术包括超滤、离子交换、凝胶过滤等。

其中超滤技术被广泛应用于蛋白质和核酸等生物样品的净化和分离中。

（四）样品转化技术样品转化技术是将样品进行化学变化以实现对目标物质的分析的一种技术。

常见的样品转化技术包括水解、酶促反应、化学修饰等。

其中，水解技术常用于生物高分子的降解和分析。

三、生物样品前处理技术的应用（一）样品前处理技术在蛋白质质谱分析中的应用蛋白质质谱分析是一种非常重要的生物医学研究方法，但受到样品制备的影响而产生误差。

因此，样品前处理技术在蛋白质质谱分析中起到了非常重要的作用。

常用的技术包括蛋白质SOAP清洗、胶拍/台拍，PTM富集，等。

（二）样品前处理技术在DNA测序中的应用DNA测序是基因工程和分子生物学研究的重要代表。

在进行DNA测序前，通常需要对DNA样品进行前处理，以去除杂质和细胞碎片等非必要成分。

生物样品前处理第四节生物样品分析的前处理技术一般要在测定之前进行样品的前处理，即进行分离、纯化、浓集，必要时还需对待测组分进行化学衍生化，从而为测定创造良好的条件。

生物样品进行前处理的目的在于：1．药物进入体内后，经吸收、分布、代谢，然后排出体外。

在体液、组织和排泄物中除了游离型（原型）药物之外，还有药物的代谢物、药物与蛋白质形成的结合物、以及药物或其代谢物与内源性物质，如葡萄糖醛酸、硫酸形成的葡萄糖醛酸甙（glucuronides）、硫酸酯（sulphates）缀合物等多种形式存在，需要分离后测定药物及代谢物；2．生物样品的介质组成比较复杂。

如在血清中既含有高分子的蛋白质和低分子的糖、脂肪、尿素等有机化合物，也含有Na ＋、K＋、X-等无机化合物］。

其中影响最大的是蛋白质，若用HPLC法测定药物浓度时，蛋白质会沉积在色谱柱上发生堵塞，严重影响分离效果。

因此，为了保护仪器，提高测定的灵敏度，必须进行除蛋白等前处理。

一、常用样品的种类、采集和贮藏生物样品包括各种体液和组织，但实际上最常用的是比较容易得到的血液（血浆、血清、金血）、尿液、唾液。

在一些特定的情况下选用乳汁、脊髓液、精液等。

（一）血样血浆（plasma）和血清（serum）是最常用的生物样品。

血浆中的药物浓度反映了药物在体内（靶器官）的状况，因而血浆浓度可作为作用部位药物浓度的可靠指标。

供测定的血样应能代表整个血药浓度，因而应待药物在血液中分布均匀后取样。

由采集的血液制取血浆或血清。

血浆的制备将采取的血液置含有抗凝剂（如：肝萦、草酸盐、拘橡酸盐、EDTA、氟化钠等）的试管中，混合后，以2500～3000rpm 离心5min使与血细胞分离，分取上清液即为血浆。

血清的制备将采取的血样在室温下至少放置30min到1h，待凝结出血饼后，用细竹捧或玻璃棒轻轻地剥去血饼，然后以2000～3000rpm离心分离5～10min，分取上清液．即为血清。

血浆比血清分离快，而且制取的量多，其量约为全血的一半。

分析化学在生物医学领域的应用现状化学作为一门基础科学，一直以来都在生物医学领域发挥着重要的作用。

分析化学作为化学的一个重要分支，利用测定、鉴定、分离和定量物质成分的方法和技术，对生物医学领域的研究和应用起到了至关重要的作用。

本文将对分析化学在生物医学领域的应用现状进行分析和探讨。

一、生物样品前处理生物样品前处理是分析化学在生物医学领域中的重要应用之一。

生物体内的样品通常包含复杂的混合物，例如血液、尿液、组织等，这些样品中存在着大量的有机和无机物质，对于进行后续的分析和检测会产生很大的干扰。

因此，采用适当的前处理方法对样品进行预处理，可以有效提高后续分析的准确性和可靠性。

在生物医学领域，常用的生物样品前处理方法包括血液、尿液或组织样品的提取、固相萃取、液液萃取、蛋白质沉淀等。

这些方法可以有效地降低样品中的干扰物质含量，提高目标分析物的浓度和灵敏度，从而为后续的检测和分析提供可靠的样品基础。

二、药物分析在生物医学领域中，药物的质量控制和药代动力学研究是非常重要的。

分析化学在药物分析中发挥着重要作用，通过建立稳定、准确和可靠的分析方法，可以对药物的纯度、含量、质量和稳定性进行分析和评估。

分析化学常用的方法包括高效液相色谱法（HPLC）、气相色谱法（GC）、质谱法和核磁共振（NMR）等。

这些方法具有高分辨率、高选择性和高灵敏度的优点，可以准确地定量和鉴定药物分子。

三、生物分子分析分析化学在生物医学领域还广泛应用于生物分子的分析。

生物分子包括蛋白质、核酸、糖类等，它们在生物体内发挥着重要的生物学功能，例如蛋白质参与酶催化和信号传导，核酸参与遗传信息的传递和表达。

对于生物分子的分析，分析化学提供了一系列的方法和技术，包括聚合酶链式反应（PCR）、电泳、质谱法、红外光谱等。

通过这些分析方法，可以对生物分子的结构特征、功能和数量进行准确的测定和分析，从而为生物医学研究提供了重要的实验数据和依据。

四、生物传感器生物传感器是将生物识别元件与传感器技术相结合的设备，广泛应用于生物医学领域中的检测和监测。

透射电镜样品制备步骤取材醛类前固定缓冲液漂洗饿酸固定（后固定）缓冲液漂洗脱水剂梯度脱水丙酮/环氧丙烷臵换浸透（先于不同比例包埋剂-脱水剂再纯包埋剂长时间浸透）加热聚合修快超薄切片铀铅染色1、取材：4℃冰块上迅速取材，1mm3大小，立即放入2.5%戊二醛溶液中固定2-4h(4℃可保存1-2周，冷冻可保存2年)注：不可用自来水冲洗，被钳、镊夹取造成机械损伤的组织不可部分可取较大面积，但厚度必须小于1mm（戊二醛固定能力小于0.5mm）脑、胰等柔软组织先切成较大厚片于戊二醛固定数分钟增加硬度，再切成小块臵于新的戊二醛固定液小肠、周围神经、肌肉等方向性、易扭曲样本可绑在小波棒上固定，待硬化后纵行方向切成长方形固定2、漂洗：牙签取出样品至新的1.5ml离心管，用0.1M pH7.0磷酸缓冲液（PBS）漂洗样品三次（摇床），每次15min3、锇酸固定：1%锇酸溶液固定样品1-2h（临用前计算用量≤50ul/样，用0.1M PBS将2%锇酸稀释至1%，通风橱操作）注：饿酸固定时间过长会导致脂蛋白复合体溶解，使组织变脆，不利于切片3、再漂洗：吸出固定液，用0.1M pH7.0 PBS漂洗样品三次，每次15min注：漂洗以清除固定液，避免产生沉淀物干扰结构观察骨组织漂洗后需脱钙，EDTA-2Na脱钙液4、脱水剂梯度脱水：用梯度浓度（50%，70%，80%，90%和95%）乙醇溶液对样品进行脱水处理，每个浓度处理15min再用100%乙醇处理20min （乙醇细胞内抽提少，但与包埋剂相容性差）最后用纯丙酮处理20min（若包埋剂为Epon改用环氧乙烷臵换；Cell的固定脱水无需臵换）注：脱水以清除游离水以便包埋剂均匀渗透；脱水剂易吸收空气中水分，密封，臵换时应该迅速由低到高逐级脱水而不能急剧脱水，更换溶液时应迅速，以免组织内外产生气泡。

植物组织脱水时间延长，100%脱水剂中加入烤干的无水CuSO4、无水Na2SO45、包埋剂梯度渗透：①用包埋剂丙酮混合液（V/V=1/1）处理样品1h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小)②用包埋剂丙酮混合液（V/V=3/1）处理样品3h：计算用量80ul/样再配制(参考样品大小)③纯包埋剂渗透样品过夜：将样品移至干燥的新离心管中，常温过夜(所用器具均应干燥)注：样品周围不能有气泡6、加热聚合：牙签取出经渗透处理的样品至0.5ml干燥离心管（预先装入约300 ul包埋剂），加热聚合仪70℃加热过夜。