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几种金属离子的柱层析实验报告一、原理：有些高分子物质含有一些可以分离的基因，例如-SO3H，-COOH等，因此可以和溶液中的离子产生交换反应。
如：R-SO3H＋M+ ————R-S3M＋H+或R-NH3OH＋CL－—————R-NH3CL＋OH－这类高分子物质通称离子交换剂，其中使用最普遍的是离子交换树脂。
由于一定的离子交换剂对不同离子的亲和力不同，因此在洗提过程中，不同的离子在离子交换柱上的迁移速度也不同，最后得到分离。
二、目的与要求：本实验是采用Zerolit225型阳离子交换树脂所装的柱，选以特定的PH缓冲洗脱液来分离含有两个性质不同的氨基酸溶液。
通过实验要求掌握装柱、上样、洗脱、收集等离子交换柱层析技术的要点。
三、仪器与装置：玻璃层析柱：长475px，内径30px，3# 砂芯。
HL-2B型恒流泵。
HD-4型电脑核酸蛋白检测仪。
BS-100A自动部份收集器。
250ml烧杯。
1ml吸管。
水浴锅。
72型（或721型）分光光度计。
四、试剂与药品：树脂：Zerolit225型阳离子交换树脂。
洗脱液：0.45N，PH5.3柠檬酸缓冲液，取285g柠檬酸（C6O7H8·H2O）；186g 97℅NaOH；105ml浓硫酸溶于水中稀释至10升。
样品液：0.005M ASP和LYs的0.02N HCL混合溶液。
显色剂：显色剂列出两种可任选一种。
显色剂（Ⅰ）茚三酮-TiCL3溶液。
10g茚三酮溶于500ml乙二醇甲醚，再加入0.85 ml TiCL3（15%）显色剂（Ⅱ）：茚三酮-KCN溶液。
0.1M KCN:0.1628g KCN溶于水中稀释至250mlA、将1.25g茚三酮溶于25ml乙二醇甲醚，配成5%（W/V）浓度的溶液。
B、将2.5ml 0.01M KCN溶液与125ml乙醇甲醚混合。
将A和B合并置棕色瓶中过夜即可使用。
此溶剂用时，A、B两溶液在前一天合并，配好的溶液仅能在1-2天内使用，过时失效须重配。
酶法合成麦芽糖醇脂肪酸单酯的抑菌性*何志勇，王洁，曾茂茂，秦昉，陈洁(江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡，214122)摘要采用脂肪酶NOV435 催化麦芽糖醇分别与4 种脂肪酸( 月桂酸、辛酸、油酸和硬脂酸) 反应合成相应的麦芽糖醇脂肪酸酯，并经分离纯化制备获得高纯度的单酯产品，测定了它们在0.0625 ～6 m g/m L 质量浓度下对不同细菌和酵母的抑菌率及最低抑菌浓度( M I C) 。
结果表明，麦芽糖醇脂肪酸单酯具有良好的抑菌性能，对枯草芽孢杆菌和变异链球菌显示出很强的抑制作用，对大肠杆菌有较好的抑制效果，对酵母菌也有一定抑制能力。
比较不同脂肪酸酰基麦芽糖醇单酯的抑菌性发现，月桂酸单酯抑菌能力最强，辛酸单酯和油酸单酯次之，硬脂酸单酯较弱。
麦芽糖醇月桂酸单酯对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和变异链球菌的M I C值分别为2.0 m g/m L、0.5 m g/ m L 和0.25 m g/m L，具有比麦芽糖和蔗糖等亲水基月桂酸单酯更好的抑菌性。
关键词麦芽糖醇脂肪酸单酯，分离纯化，抑菌性，最低抑菌浓度( M I C)脂肪酸酯不仅是一类优良的表面活性剂，还具有较好的防腐抗菌功能。
目前国内外研究较多的主要是蔗糖酯类和甘油单脂肪酸酯类的抑菌性［1－5］，且研究发现，糖酯的酯化度会影响其抑菌性，蔗糖单酯的抑菌能力远远强于二酯或多酯［6］。
麦芽糖醇脂肪酸酯是由麦芽糖醇与脂肪酸反应而成的一类新型优良的非离子型表面活性剂［7］，但有关其抗菌功能性质的研究较少。
而且现有文献报道的大多是麦芽糖醇酯混合物的性质［8－9］，这样麦芽糖醇酯抑菌性与其化学结构和组成的关系就不是很清楚。
因此，为了探讨不同脂肪酸酰基和不同亲水基团对糖酯抑菌性质的影响，本论文通过脂肪酶NOV435 催化合成系列麦芽糖醇脂肪酸酯，经过分离纯化制备获得高纯度麦芽糖醇脂肪酸单酯产品，并重点研究不同单酯对细菌和酵母的抑菌性能，分析单酯结构与抑菌功能的关系，为其在食品工业中的进一步应用提供依据。
灵芝菌丝体多糖的分离纯化及其单糖组成分析与分子量测定王海燕;戴军;陈尚卫【摘要】前期杂交优化后赤芝菌种经液体深层发酵后,提取灵芝菌丝体多糖,并过DEAE-Sepharose Fast Flow柱分离纯化,利用高效体积排阻色谱(HPSEC)检测多糖级分的纯度,采用完全酸水解PMP柱前衍生化RP HPLC测定多糖级分的单糖组成,多角度光散射仪联用装置(SEC MALLS)测定其绝对重均分子量(Mw),并且根据分子旋转半径与分子摩尔数的关系曲线斜率初步推断其空间构象.结果显示:分离纯化得到3个多糖级分GLMP1、GLMP2和GLMP3,HPSEC检测其峰面积百分比分别为93.58％,97.64％,99.19％,单糖组成分析结果表明GLMP1、GLMP2和GLMP3均含有甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和岩藻糖,但单糖摩尔比各异.SEC-MALLS测试GLMP1、GLMP2和GLMP3的Mw分别为4.526×105,4.603×104,3.760×103 g/mol,3个多糖级分构象可能均为高度紧缩且具有分支结构的聚合物.【期刊名称】《食品与机械》【年(卷),期】2015(031)005【总页数】5页(P201-205)【关键词】灵芝;菌丝体;多糖;级分;分离纯化;分子量【作者】王海燕;戴军;陈尚卫【作者单位】江南大学食品学院,江苏无锡214022;江南大学食品学院,江苏无锡214022;江南大学食品科学与技术国家重点实验室,江苏无锡214022【正文语种】中文灵芝（G.lucidum）属担子菌纲、多孔菌目、灵芝科、灵芝属［1］，按其生长过程可分为菌丝体、子实体和孢子粉3个阶段。
中国灵芝属真菌有75种，常见的有赤芝、紫芝、黑芝、松杉灵芝等。
近年来，研究发现灵芝具有降血糖［2，3］、降血脂［4］、免疫调节［5］、抗肿瘤［6］、抗氧化［7］等保健功能，其主要功效成分为多糖和三萜［8］。
香菇多糖的纯化工艺优化梁敏【摘要】为获得纯度较高的香菇多糖,以香菇为原料,采用复合酶法提取香菇多糖并对其进行纯化,在单因素试验的基础上,对脱色温度、活性炭用量、脱色时间和pH 值4个因素进行正交试验并选取香菇多糖脱色的最佳工艺条件,采用酶法结合Sevage法脱除蛋白质对脱色后的香菇多糖进行纯化.结果表明:在脱色温度20℃,活性炭用量1.0％,脱色时间90 min,pH 3的条件下,香菇多糖脱色率为71.3％,多糖损失较低,为7.8％.脱色纯化后的香菇多糖为白色,蛋白去除率为90.26％.【期刊名称】《贵州农业科学》【年(卷),期】2013(041)010【总页数】4页(P165-167,171)【关键词】香菇多糖;纯化;工艺优化【作者】梁敏【作者单位】齐齐哈尔大学化学化工学院,黑龙江,齐齐哈尔161006【正文语种】中文【中图分类】S39香菇(Lentinus edodes)是侧耳科(Pleurota ceae)的担子菌，世界名贵食用兼药用菌之一。
香菇子实体中除含有蛋白质、氨基酸、矿物质、维生素和对人体有益的微量元素外还含有一种重要的生物活性高分子多糖。
现代研究表明，香菇多糖具有抑制肿瘤、抗病毒和抗氧化等药理活性，对提高肝炎及艾滋病人的免疫功能等均有较好的作用，且无任何毒副作用[1]。
Chihara等[2-3]从香菇子实体中分离得到一种具有抗肿瘤活性的β-(1-3)-D-葡聚糖，其抑制癌症和抗肿瘤效果不是直接作用于移植性癌细胞，而是通过宿主调节发生作用，其抗肿瘤的药理作用并非直接杀伤细胞或抑制细胞生长，而是表现在增强人体免疫调节作用。
因此，人们常称香菇多糖为生物反应修饰剂[4]。
香菇多糖通常被包裹在细胞壁内，往往和蛋白质结合在一起，以蛋白多糖的形式存在，中性蛋白酶能有效酶解与多糖结合在一起的蛋白质，从而将多糖释放出来，提高多糖的得率，降低多糖中蛋白质的含量，提高多糖的纯度。
传统的浸提法虽然是提取多糖的经典方法，但时间长、能耗大、效率低，酶法处理可以提高多糖的提取率、减少能源消耗、缩短提取时间。
香菇中糖类物质离与测定————————————————————————————————作者：————————————————————————————————日期：香菇中糖类物质的分离与测定摘要：本实验采用热水浸提和乙醇醇沉的方法提取香菇多糖（Lentinan，LNT），利用正交法得出最佳提取粗多糖的方案，得到的粗多糖回收率为14.05﹪，再对得到的粗多糖进行定性、定量分析。
用苯酚—硫酸法测定已提取出的粗多糖中单寡糖与多糖的含量为35.9%；经过薄层层析和纸层析法分析单糖的组成，其中组成多糖的单糖多属于葡萄糖和阿拉伯糖；用Sepharsose CL—6B柱层析法测定多糖的相对分子量约为5597.58道尔顿。
气象色谱分析单糖含的结果是香菇多糖中的单糖种类有半乳糖、葡萄糖、阿拉伯糖、岩藻糖等，其中含量较多的半乳糖和葡萄糖。
关键字：香菇多糖回收率含量组成相对分子量Separation and Determination of carbohydrates in Lentinus edodesAbstract：This experiment extracts of lentinan (Lentinan LNT) by using hot water extraction and ethanol alcohol precipitation method. The orthogonal method to get the optimum extraction of polysaccharides is the best program, resulting polysaccharides recovery of 14.05%, and then to get crude polysaccharide qualitative and quantitative analysis. By using Phenol-sulfuric acid method, extracted polysaccharides single oligosaccharides and polysaccharides content was 35.9%; TLC and paper chromatography analysis monosaccharide composition, the monosaccharide composes mostly of glucose and arabinose; Relative molecular weight of polysaccharide determined by Sepharsose CL-6B column chromatography is about 5597.58 daltons. The results of gas chromatographic analysis of a monosaccharide is galactose, glucose, arabinose, fucose, sugar, and other types of monosaccharides in the lentinan. galactose and glucose are much more among them.Key words： Lentinan; Recoveries; Content; Composition; Relative molecular weight0 引言：糖类化合物是中药的重要成分，随着现代生物化学与分子生物学的不断发展与进步，人们对糖的了解越来越多。
BSZ-100自动部分收集器使用说明书一、BSZ-100自动部分收集器使用说明书机身简介图二、BSZ-100自动部分收集器使用说明书指标参数外形尺寸LWH: 265350360主要技术参数: BSZ-100收集试管100支,每支最大容量12ml定时收集范围: 1秒—24小时;任意选择.特点: 操作简单,使用方便.断电数据保存时间：十年；特点：新型单片机芯片控制；六位超高亮数码管显示；菜单操作；功能提示；倒、顺定时选择;三、BSZ-100自动部分收集器使用说明书控制面板功能说明前面板按键功能说明“功能”键：设置操作功能;变化顺序：手动→顺计时→倒计时→计滴ASS特有具体符号参照面板“功能参数定义”;复位后不能直接按该键,需按“运行”键后才能激活该键;“”键：选择设置参数的位置;选择顺序从右第1位开始;“”键：在参数设置状态该位闪烁时,按此键可递增数值；在运行状态下,按此键可查阅设置的参数;“”键：在参数设置状态该位闪烁时,按此键可递减数值；在报警时,按此键可解除报警声;在参数设置状态,若将“”键与“”键同时按下,可将原有数值清零;“运行”键：功能参数设置完毕后,按此键能将仪器从参数设置转入实际正常运行状态;“手动”键：当功能设置为“S”,即手动功能时,在按下“运行”键后再按“手动”键,能将试管盘进行步进操作,按住不放能进行快速步进定位操作;按“复位”键后再按“运行”、“手动”键,能自动计管;“复位”键：进入运行状态后按此键,能将滴管口快速回到试管盘的第一支试管的上方;后面板插键说明“计滴传感器”插座：用于插入“计滴传感器”,输入计滴信号;“安全阀”插座：用于插入“安全阀”;“HL-2型恒流泵”插座：用于插入该型号泵的连接线接入HL-2型恒流泵,实现对该泵的联动输出控制;“记录仪”插座：用于插入记录仪连线,实现对记录仪的联动输出控制;“警控”插座：用于插入漏液报警板连线,实现漏液输入控制;“DHL-A/B型恒流泵”插座：用于插入该型号泵的连接线接入DHL-A/B型恒流泵,实现对该泵的联动输出控制;“电源”插座：用于接入总电源;四、BSZ-100自动部分收集器使用说明书使用操作准备工作将电源线、竖杆、安全阀、漏液报警板等按以下要求连接好;将电源线圆插头插入仪器后面板的“电源”插座中,另一头的三芯插头插入AC220V的三芯电源插座中;将“竖杆”插入仪器右后角的“竖杆”固定座中,同时旋紧固定螺钉;将“安全阀”安装在“竖杆”的上部,高低位置以“安全阀”前的“计滴传感器”中的滴管口或横杆中的滴管口与试管口略高2-5mm为宜,同时将连线插头四芯插入仪器后面板的“安全阀”插座中;将“漏液报警板”放入积液盘黑色胶木圆盘的方框中,同时将连接线插头从积液盘中间凹孔从上往下穿过,并插入仪器后面板的“警控”插座中;“积液盘”放置的位置以“积液盘”下面的三脚放入主机上面板的三个凹档,且将“漏液报警板”处于“计滴传感器”滴管口的下方为宜;定位开启电源后的定位开启电源后初始功能为手动状态,即数码管显示“S-----”,按“运行”键后再按“复位”键,仪器自动复位“秒”位数码管显示半个0;将滴管口手动对准试管盘中的起点第一支试管外圈第一根试管的中心位置;对准后固定好各自的固定螺钉;注意：在收集过程中,不能再移动滴管口的位置收集过程中的定位在收集过程中,若要重新定位可直接按“复位”键,仪器同样会自动复位重复步骤功能及参数设置手动设定及操作开启电源后初始功能为手动功能状态,即数码管显示“S-----”按“功能”键可改变功能设置;按“运行”键后再按“手动”键,可进行手动走管操作按一下走一管；按住不放可连续走管;自动收集顺定时收集顺定时功能及参数设置完毕后,按“运行”键即进入顺定时收集,直至终点最后一管报警数码管显示“STOP”;按“解警”键可解除报警声,按“复位”键,不但能解除报警声,还能复位至第一支试管复位后需重新定位,即重复步骤;逆定时收集逆定时功能及参数设置完毕后,按“运行”键即进入逆定时收集,直至终点最后一管报警数码管显示“STOP”;按“解警”键可解除报警声,按“复位”键,不但能解除报警声,还能复位至第一支试管复位后需重新定位,即重复步骤;定滴收集ASS特有定滴功能及参数设置完毕后,按“运行”键即进入定滴收集,直至终点最后一管报警数码管显示“STOP”;按“解警”键可解除报警声,按“复位”键,不但能解除报警声,还能复位至第一支试管复位后需重新定位,即重复步骤;若在定滴收集过程中发生断液8分钟后报警数码管显示“Err2”,则加入液体后自动解除报警,且继续进行定滴收集;注：在收集过程中,若要停止收集或终止正在进行的功能而进入其它功能,则可直接按“功能”键进入待机状态,即进入功能及参数设置；在收集过程中,若发生漏液故障而报警数码管显示“Err1”,则必须关闭电源,待漏液故障排除后,方可重新开启电源;操作举例顺定时6分38秒收集接通电源：按下机器后面板上的电源开关,数码管显示“S-----”,仪器处于手动功能状态;定位：按“运行”键后再按“复位”键,仪器自动复位“秒”位数码管显示半个0;将滴管口手动对准试管盘中的起点第一支试管外圈第一根试管的中心位置;对准后固定好各自的固定螺钉;在收集过程中,不能再移动滴管口的位置一管结束后报警数码管显示“STOP”;注意事项本仪器必须使用标准的三芯电源插座,应有可靠接地,确保安全;使用时将“漏液报警板”安放在滴管口下方的积液盘中的方框内,电线从积液盘中间孔通过,插头插入仪器后面板的“警控”插座中,可实现漏液报警;在收集过程中,若发生漏液故障而报警数码管显示“Err1”,则必须关闭电源;待漏液故障排除后,方可重新开启电源;每次使用前必须重新定位,按“”、“”步骤操作;仪器按“复位”键滴管口回到第一管后“秒”位数码管显示半个0,必须重新对滴管口进行调整,确保滴管口在第一管的中心位置;若要马上进入自动收集,则需按一下“运行”键;在正常使用过程中不可将安全阀、警控插头等拨出,若要插拨则必须在关闭电源后进行;试管盘的编号应与仪器的编号在后面板的右上方保持一致,不能配错、不可调换;。
黄芪多糖的提取、分离纯化及分子量测定伍兵靳凡张栋东北师范大学生科院长春130024摘要黄芪是一种常用中药，含有多种生物活性物质，其中黄芪多糖(Astragaluspolysaccharide，APS)是黄芪中最重要的天然有效成分。
黄芪多糖的生物活性与分子量、溶解度、粘度、一级结构和高级结构有关。
本实验通过苯酚-硫酸法对黄芪中多糖含量进行了测定、通过薄层层析法对多糖的单糖组成进行了分析、通过Sepharose CL-6B柱层析法对糖分子量分布进行了分析。
关键词：其中黄芪多糖(Astragaluspolysaccharide，APS) 提取苯酚-硫酸法柱层析关键词；多糖；分离；分子量分布、黄芪多糖Abstract:Astragalus is a commonly used traditional Chinese medicine, contains a variety of bioactive substances, including astragalus polysaccharide (Astragaluspolysaccharide, APS) is the most important Astragalus natural active ingredients. Astragalus Polysaccharide biological activity and molecular weight, solubility, viscosity, structure and a high-level structure. In this study, phenol - sulfuric acid method of astragalus polysaccharide content was determined by thin-layer chromatography of the monosaccharide composition of polysaccharides were analyzed by Sepharose CL-6B column chromatography molecular weight distribution of sugar analyzed.Key words:Polysaccharide；Extracting；molecular mass distribution、Astragaluspolysaccharide，APS前言黄芪(Radix Astragalus)是豆科植物蒙古黄芪或膜荚黄芪的干燥根,是重要的益气中药,主要产于山西、甘肃、黑龙江、吉林、辽宁、河北、内蒙等地,大兴安岭的黄芪又叫北芪,古书记载“北芪,生津滋阳、补阳血、补虚损、愈肾衰”被誉为“小人参”且比人参、西洋参更温和,男女老少皆宜,其味甘,性微温,具有益气补虚之功效,可生用,亦可炙用。
