液相芯片检测技术讲课稿

液相芯片技术在医学检验诊断中的应用张立营;刘国凤;李克峰【摘要】液相芯片技术可以从少量样本中快速得到大量的辅助诊断信息,正逐步从科学研究实验室进入临床实验室,在多种肿瘤标志物联合检测、自身抗体筛查、人类白细胞抗原分型及感染性病原体基因检测等方面具有重要的临床应用价值.现就液相芯片技术在医学检验中的应用做一综述.【期刊名称】《实用医药杂志》【年(卷),期】2016(033)002【总页数】3页(P179-180,184)【关键词】液相芯片技术平台;医学检验;应用【作者】张立营;刘国凤;李克峰【作者单位】266071山东青岛,济南军区青岛第二疗养院检验科;266034山东青岛,青岛市妇女儿童医院检验科;266071山东青岛,济南军区青岛第二疗养院检验科【正文语种】中文【中图分类】R319生物芯片主要包括基因芯片和蛋白芯片两大类，按寻址方式和最终检测载体又可分为固相芯片（flat microarrays）和液相芯片（liguid chip rmicrosphere arrays）。

近年来，液相芯片技术（liquid chip technology，LCT）以其独特的优点及临床实用性，正受到越来越多的重视，现就液相芯片的技术原理、特点及其在医学检验方面的临床应用做简要介绍。

液态芯片是一种全新概念的生物芯片，又称悬浮阵列、流式荧光技术，它是利用标记的微球为反应载体（最常用的标记物为荧光染料），在不同的微球上固定有不同的探针分子（蛋白质或核酸），不同的微球可通过荧光信号或大小进行区分［1，2］。

将这些微球混合后悬浮于液相体系中，与待检分子充分反应后，再加入合适的报告分子就构成了液相芯片系统，利用这个系统可以对同一样品中的多个不同的分子同时进行检测。

液相芯片技术除了美国Luminex公司开发的系列产品外，还包括在流式细胞仪平台上进行多参数检测的微球芯片技术。

目前应用最为广泛的为基于Luminex平台的各种检测应用。

1、液相芯片的概念液相芯片，又称悬浮阵列、流式荧光技术，是基于美国Luminex 公司研制的多功能流式点阵仪（Luminex 100TM）开发的多功能生物芯片平台，通常用于免疫分析、核酸研究、酶学分析、受体和配体识别分析等研究。

也是目前唯一得到权威机构和医学界共同认可用于临床诊断的生物芯片平台。

液态芯片是一种全新概念的生物芯片。

该技术的核心是把微小的聚苯乙烯小球（5.6um）用荧光染色的方法进行编码，然后将每种颜色的微球（或称为荧光编码微球）共价交联上针对特定检测物的探针、抗原或抗体。

应用时，先把针对不同检测物的编码微球混合，再加入微量待检样本，在悬液中靶分子与微球表面交联的分子进行特异性地结合，在一个反应孔内可以同时完成多达100种不同的生物学反应。

最后用LuminexTM分析软件进行分析，仪器通过两束激光分别识别编码微球和检测微球上报告分子的荧光强度。

因为分子杂交或免疫反应是在悬浮溶液中进行，检测速度极快，而且可以在一个微量液态反应体系中同时检测多达100个指标。

2、液相芯片的优势（1）一次检测，100个指标；（2）既能检测蛋白，又能检测核酸；（3）既能用于临床，又能用于科研。

3、液相芯片的应用（1）DNA杂交分析SNP检测基因表达谱分析（2）免疫学分析免疫分析受体－配体分析酶分析蛋白质－蛋白质相互作用分析蛋白质－DNA相互作用分析4、应用实例Liquichip液相系统是一个高度灵活的多元分析平台，可以适用于学研究，临床研究和药物研究中的各种蛋白质分析。

美国圣祖德儿童研究医院的Dr. Richard等人,使用液相对100μL样本中的15种不同的细胞因子同时进行了精确的定量测定。

结果说明在T辅助细胞1型与2型中，某些细胞因子的表达量有显著差异。

在测定过程中，Dr. Richard将15种不同的细胞因子的抗体分别标记在15种不同的球形基质上，混合后加入到一个反应体系中，对同一样本中的15种细胞因子进行测定。