白血病的多药耐药基因研究

新疆医科大学学报ＪＯＵＲＮＡＬ　ＯＦ　ＸＩＮＪＩＡＮＧ　ＭＥＤＩＣＡＬ　ＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ　２００７　Ｏｃｔ．，３０（ｉ０）　１１３７　

多药耐药基因在肺癌患者外周血中的表达及意义　

王　飞　，黄艳春，刘诚明　

（新疆医科大学附属肿瘤医院检验科，新疆　乌鲁木齐８３００１１）　

摘要：目的：探讨肺癌患者外周血中多药耐药基因（ＭＤＲ　）的表达水平及其与临床病理因素、化疗的关系。　方法：经病理证实为肺癌的患者４Ｏ例（病理组），鳞状细胞癌ｌ３例，腺癌ｌ４例，小细胞未分化癌ｌ３例。应用荧光　定量ＰＣＲ（ＦＱ＿ＰＣＲ）技术，动态监测化疗前后ＭＤＲ　ｍＲＮＡ的表达，并与３Ｏ例健康者（对照组）的检测结果进行比　较分析。结果：病理组化疗前ＭＤＲ　ｍＲＮＡ的检出率明显高于健康对照组，差异具有统计学意义（Ｐ＜Ｏ．０５）；各　种类型的肺癌患者随着化疗次数的增多ＭＤＲ　ｍＲＮＡ的表达增强；化疗前后肺鳞状细胞癌和肺腺癌ＭＤＲ　ｍＲＮＡ　

的表达明显高于小细胞肺癌，差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。结论：化疗可诱导各种病理类型肺癌　ＭＤＲ　ｍＲＮＡ表达增加；肺腺癌和肺鳞癌可能为原发性ＭＤＲ，小细胞肺癌可能为获得性ＭＤＲ；肺癌患者　ＭＤＲ　ｍＲＮＡ表达程度可作为指导化疗用药及预测预后的指标。　关键词：肺癌；多药耐药基因＿夕　周血；荧光定量ＰＣＲ　中图分类号：Ｒ７３４．２；Ｒ３４；Ｒ４４６．１　文献标识码：Ａ　文章编号：１００９—５５５ｌ（２００７）１０—１１３７—０３　

Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　ａｎｄ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ　ｏｆ　ｍｕｌｔｉｄｒｕｇ　ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ　ｇｅｎｅ　ＭＤＲ１　ｉｎ　

ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ　ｂｌｏｏｄ　ｏｆ　ｐａｔｉｅｎｔｓ　ｗｉｔｈ　ｌｕｎｇ　ｃａｎｃｅｒ　

ＷＡＮＧ　Ｆｅｉ，ＨＵＡＮＧ　Ｙａｎ—ｃｈｕｎ，ＬＩＵ　Ｃｈｅｎ—ｍｉｎｇ　（Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ，Ａｆｆｉｌｉａｔｅｄ　Ｔｕｍｏｒ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｘｉｎｊｉａｎｇ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　

消化道肿瘤多药耐药基因的表达与临床相关性的研究

摘要 目的：为了研究消化道肿瘤多药耐药基因及其产物表达对化疗效果的影响。方法：应用免疫组化SP法检测106份消化道肿瘤组织中pgp、GST-π和TopoⅡ表达并分析其与消化道肿瘤临床病理特征的关系。结果：消化道肿瘤组织中pgp、GST-π和TopoⅡ阳性率分别为63.1%、62.5%和52%，与性别、肿瘤大小、部位、临床分期及浸润深度无明显关系(P＜0.05)；高、中分化腺癌pgp阳性率明显高于低分化腺癌(P＜0.05)；GST-π和TopoⅡ表达与肿瘤淋巴结转移有关(P＜0.05)；印戒细胞癌TopoⅡ阳性率明显低于其他组织学类型(P＜0.05)。结论：pgp、GST-π及TopoⅡ在消化道肿瘤MDR发生中起重要作用，同时检测BCL-2基因在消化道肿瘤中的表达及其与MDR的消长变化，四者联合检测对化疗方案的制定及药物的选择意义重大，为开展个体化治疗提供依据。

关键词 消化道肿瘤 多药耐药基因产物 检测 个体化治疗

目前化疗是恶性肿瘤治疗中除手术、放疗以外最重要的手段，然而许多肿瘤常规化疗效果差，甚至失败。近年来研究表明肿瘤多药耐药（MDR）已成为肿瘤成功化疗的重要障碍之一。因此，克服MDR就成为肿瘤成功化疗的当务之急。选取消化道肿瘤患者106例，探讨MDR基因产物pgp、GST-π、TopoⅡ在消化道肿瘤MDR发生中的作用，为消化道肿瘤化疗药物的选择提供依据。

资料与方法

2006年3月～2010年12月收治消化道肿瘤患者106例，经病理学检查证实。病理类型：胃腺癌47例，胃印戒细胞癌11例，直结肠腺癌33例，食管腺癌15例。

组织标本的采集及贮存：全部标本均在手术切取肿瘤时收取，取材时避免取到肿瘤中心的坏死组织，106例消化道恶性肿瘤患者手术切除标本，经10%的福尔马林固定液固定，经脱水、包埋、切片进行免疫组织化学染色，试剂选自福州迈新公司。所选试剂有多药耐药化学基因糖蛋白-PgP，拓扑异构酶Ⅱ-Topo-Ⅱ，谷胱甘肽S转移酶-GST-π，Bcl-2。

RNA干扰HOX基因的表达与白血病基因治疗的研究进展

摘要 研究表明HOX基因与白血病的发生发展有着密切联系。HOX基因与早期造血干细胞的功能有关，又参与了后期造血细胞的分化与系定向分化过程，其表达异常可导致白血病的发生。RNA干扰技术是双链RNA（double strand

RNA,dsRNA)介导的序列特异性转录后引起同源靶基因表达沉默，从而阻断靶基因的表达，是一种高效的基因阻断技术。利用RNAi技术,抑制HOX基因的表达,可能成为白血病基因治疗的新途径，本文对RNA干扰HOX基因用于白血病基因治疗的研究作一综述。

关键词 HOX基因 RNA干扰 白血病基因治疗

1 HOX基因的概述

1.1 HOX基因的结构特点

同源异型盒基因（homeobox genes HOX)是在酵母乃至人类几乎所有真核细胞中表达的一类基因，最初由Mcginnis等[1]在果蝇发育调控的研究中发现。HOX被分为两大类，人类HOX基因家族属于HOX I类基因，迄今已鉴定出了39个人类HOX基因，成簇的出现，包含A、B、C、D 4个簇，依次定位于7、17、12、2号染色体上，每簇均含有9～11独立的，具有特定的时空表达模式基因；HOX基因不论片段大小，均含有183bp的高度保守序列，它编码61个氨基酸，称为同源结构域(Homeodomain，HD)。HOXⅡ类又称为non-HOX基因，根据附加的保守序列又可分以为若干个家族，包括Pax、Emx、Msx、Pou、Tale等。

1.2 HOX基因表达特点：

胚胎发育时期，HOX在基因簇中的表达是按照染色体中3’→5’端，以时间先后顺序逐个启动的，在特定空间位置依次表达或沉默。在同一表达区，同一染色体上越靠近5’端的基因比其前部的基因在表达上更有功能上的优势。HOX基因可以部分或完全代替被影响的异簇同序号的HOX基因的功能。等位基因突变越多，表现型变异就越严重[2]。每个HOX基因在胚胎发育过程中都有各自的范围，一定区域内的HOX基因的表达与其特定的体节形成有关[3]。

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技术支持： 电子邮件：service@ 免费电话：8008282330 8008571184 传真电话：86 512 68668874 多　药　耐　药（ＭＤＲ） 肿瘤细胞对化疗药物的耐受性是肿瘤治疗的主要障碍，也是白血病化疗效果改善缓慢的主要原因。尽管各种新的化疗药物和新的治疗方案连续不断地推出，但是收效却总是不太令人满意。在临床上，许多肿瘤特别是白血病的初次化疗一般可取得较好的结果，然而最终仍难免要复发，且复发后的治疗效果往往较差，其主要原因就是肿瘤细胞对化疗药物产生了耐药性。据估计，癌症死亡中有90%以上存在着耐药这一现象。因此对肿瘤耐药现象的研究与治疗方法的研究具有同样的重要性。 肿瘤细胞的耐药性可分为原发性耐药（intrinsic resistance）和获得性耐药（acquired resistance）。前者在化疗前就存在于肿瘤细胞中，与药物的使用无关，后者是由化疗药物诱导产生的，即在药物使用前对药物敏感，而在药物应用后产生的耐药。获得性耐药根据耐药谱不同可分为原药耐药（primary drug resistance, PDR）和多药耐药（multi resistance, MDR）。原药耐药只对使用过的药物产生耐药，对其他药物不产生交叉耐药，而多药耐药则是由一种药物诱发，而同时对其他多种结构和作用机制完全不同的药物产生交叉耐药，导致一些联合化疗方案的失败。 一，肿瘤细胞耐药机制 白血病治疗的失败在很大程度上是由于白血病细胞对化疗药物产生了耐药。虽然人们作了很大的努力来证明肿瘤细胞产生耐药的机制，但总的来说耐药的形成过程的了解还很少，从实验观察到的结果，可以归纳为以下几方面。 （一）药物吸收减少 药物对肿瘤细胞的杀伤作用，依赖于进入细胞内的药物浓度。许多药物通过细胞膜进入细胞，这是个个主动的领带能量的过程，与药物浓度梯度有关。参与此过程的载体蛋白结构的改变，可导致细胞对药物吸收的减少，细胞内有效药物浓度降低，其后果就细胞对药物产生耐药性。对MTX转运的研究认为，耐药性的产生可由于药物与细胞膜结合载体蛋白的亲和力下降，或者细胞所表达的载体蛋白的数量下降。 药物进入细胞依赖于细胞内外药物的浓度，因此细胞外药物浓度的降低或血浆药物浓度的降低也是药物进入细胞减少的原因之一。一些药物进入体内后可诱导机体的解毒机制，如肝脏的解毒机制、药物排泄加快等机制使血药有效浓度迅速降低，影响药物进入细胞，导致耐药。全反式维甲酸是诱导急性早幼粒白血病细胞分化的药物，但它的持续应用可诱导体内的清除机制，使血药有效浓度下降，影响药物进入细胞，导致耐药，这是维甲酸耐药的原因之一。 （二）细胞内药物溢出增多 1，P-170糖蛋白介导的药物泵出 导致细胞内药物浓度降低还可能是由于细胞主动泵出。P糖蛋白是常见的引起细胞内药物浓度降低的原因。P糖蛋白是一种由mdr1基因编码的具有ATP酶活性的跨膜泵，当肿瘤细胞与抗癌药物接触时，脂溶性药物按浓度梯度进入细胞，在细胞内，药物P糖蛋白结合，同时水解ATP获得能量，将药物从细胞内泵出，细胞内药物浓度不断下降，使药物对细胞的损伤减弱直至消失，最终出现耐药。可诱导P糖蛋白过度表达产生耐药的药物有蒽环类、长春新碱、柔红霉素、表鬼臼毒素、放线菌素D和紫杉醇等，这些药物一般是天然来源的，化学特性上属于疏水性。当这些药物诱导发生耐药时，即可同时对其他各类药物产生交叉耐药。 P-糖蛋白有两个ATP酶位点和两个药物结合位点，该位点的功能可通过蛋白激酶C联科生物技术有限公司 多药耐药分析[- 2 -]