穴位贴敷经皮给药药贴对哮喘豚鼠血清中环氧化酶2水平的影响
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穴位贴敷经皮给药药贴对哮喘豚鼠血清中环氧化酶2水平的影响(作者:__________ 单位:___________ 邮编:___________ )作者:王平平,王升旭,王艳杰,唐纯志,黄泳,廖韩波,李求实,陈静【摘要】【目的】观察穴位经皮给药药贴对实验性哮喘豚鼠血清中环氧化酶2(COX[2)水平的影响。
【方法】将48只豚鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组和经皮给药药贴组,每组各12只。
除正常对照组外,各组豚鼠均采用卵白蛋白致敏法复制实验性过敏性哮喘模型。
经皮给药药贴组采用大椎、肺俞、肾俞穴位贴敷治疗,地塞米松组采用腹腔注射地塞米松0]5 mg/kg治疗。
采用酶联免疫吸附法检测各组豚鼠血清COX2水平,采用苏木素一伊红染色检测各组豚鼠支气管肺组织病理形态变化。
【结果】模型组豚鼠血清COX2水平显著高于正常对照组(P005),经皮给药药贴组、地塞米松组血清COX[2水平显著低于模型组(P0[05)。
模型组豚鼠支气管肺组织出现明显病理损害,经皮给药药贴组支气管肺组织仅出现轻度病理改变。
【结论】穴位贴敷经皮给药药贴可能通过降低血清中COX_2水平,从而对哮喘产生治疗作用。
【关键词】经皮给药药贴/治疗应用;支气管哮喘/穴位疗法;环氧化酶2/血液;疾病模型,动物;豚鼠哮喘是以多种炎症基因表达增加或异常表达为特征,由多种炎症细胞(嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞、肥大细胞、巨噬细胞等)和气道结构细胞(上皮细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞等)及细胞组分(细胞因子、化学因子、黏附分子、酶类和受体)参与的一种气道慢性炎症性疾患[1]。
环氧化酶2(COX[2)是一种诱导酶,它能促进细菌脂多糖、炎性细胞因子、生长因子和肿瘤启动子的产生,与炎症反应及肿瘤发生相关[2]。
在哮喘的病理生理过程中COX]2可能起了关键作用[3]。
近年来,应用穴位贴敷疗法治疗哮喘的研究较多[4],经皮给药系统是药物经由皮肤吸收进入人体血液循环,并达到有效血药浓度、实现疾病治疗或预防的一类贴剂(或贴片)[5]。
穴位贴敷经皮给药药贴对哮喘豚鼠血清中环氧化酶2水平的影响王平平;王升旭;王艳杰;唐纯志;黄泳;廖韩波;李求实;陈静【期刊名称】《广州中医药大学学报》【年(卷),期】2010(27)3【摘要】[目的]观察穴位经皮给药药贴对实验性哮喘豚鼠血清中环氧化酶2(COX-2)水平的影响.[方法]将48只豚鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组和经皮给药药贴组,每组各12只.除正常对照组外,各组豚鼠均采用卵白蛋白致敏法复制实验性过敏性哮喘模型.经皮给药药贴组采用大椎、肺俞、肾俞穴位贴敷治疗,地塞米松组采用腹腔注射地塞米松0.5 mg/kg治疗.采用酶联免疫吸附法检测各组豚鼠血清COX-2水平,采用苏木素-伊红染色检测各组豚鼠支气管肺组织病理形态变化.[结果]模型组豚鼠血清COX-2水平显著高于正常对照组(P<0.05),经皮给药药贴组、地塞米松组血清COX-2水平显著低于模型组(P<0.05).模型组豚鼠支气管肺组织出现明显病理损害,经皮给药药贴组支气管肺组织仅出现轻度病理改变.[结论]穴位贴敷经皮给药药贴可能通过降低血清中COX-2水平,从而对哮喘产生治疗作用.【总页数】5页(P236-238,241,317)【作者】王平平;王升旭;王艳杰;唐纯志;黄泳;廖韩波;李求实;陈静【作者单位】南方医科大学中医药学院,广东广州,510515;南方医科大学中医药学院,广东广州,510515;南方医科大学中医药学院,广东广州,510515;广州中医药大学针灸推拿学院,广东广州,510405;南方医科大学中医药学院,广东广州,510515;南方医科大学中医药学院,广东广州,510515;南方医科大学中医药学院,广东广州,510515;南方医科大学中医药学院,广东广州,510515【正文语种】中文【中图分类】R245.9【相关文献】1.穴位贴敷经皮给药药贴对哮喘豚鼠支气管肺组织中基质金属蛋白酶-9的影响 [J], 王平平;王升旭;唐纯志;黄泳;李求实;陈静;陈俊琦2.穴位贴敷经皮给药药贴对哮喘豚鼠血清中IL-4水平的影响 [J], 廖韩波;唐纯志;黄泳;刘强;王升旭;王艳杰;王平平;郭佳铨;汪崇琦3.穴位贴敷天灸透皮吸收剂对哮喘豚鼠血清肿瘤坏死因子α的影响 [J], 王艳杰;唐纯志;王升旭;黄泳;刘强;廖韩波4.中药穴位贴敷对幼龄哮喘豚鼠血清超氧化物歧化酶、丙二醛的影响 [J], 王明明;汪受传5.三九贴穴位贴敷对哮喘大鼠血清IgE水平影响的研究 [J], 陈玉;郭冬梅;胡晓灵(指导)因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
穴位贴敷对支气管哮喘免疫功能影响的研究进展作者:张健郝丽华王海燕来源:《中国保健营养·中旬刊》2013年第02期【摘要】穴位贴敷是中医学独有的防治方法,广泛应用到呼吸系统疾病的预防和治疗,尤其在支气管哮喘方面疗效独特,本文整理了穴位贴敷对支气管哮喘免疫功能影响研究的进展,为今后此疗法治疗支气管哮喘的临床应用及实验研究提供理论依据。
【关键词】穴位贴敷;支气管哮喘;免疫功能【中图分类号】R56 【文献标识码】A 【文章编号】1004-7484(2013)02-0274-02支气管哮喘是呼吸科的常见病、多发病,是由多种细胞(如嗜酸性粒细胞、肥大细胞、T 淋巴细胞、中性粒细胞和气道上皮细胞等)和细胞成分参与的气道慢性炎症性疾病,具有反复发作的特点,严重影响了患者的生存质量。
冬病夏治穴位贴敷疗法是中医独特的内病外治法之一,已经广泛应用到呼吸系统疾病中,尤其在支气管哮喘方面疗效独特,随着现代医学的发展,穴位贴敷对支气管哮喘作用机制的研究增加,现就其对支气管哮喘免疫功能影响进行整理,为今后此疗法治疗支气管哮喘的临床应用及实验研究提供理论依据。
1 临床实验研究单翠英等1选择儿童哮喘患者进行穴位贴敷,结果发现血清免疫球蛋白IgE明显下降,IgA、IgG水平明显升高,CD8及CD4水平升高,CD4/CD8比值降低,使TH2反应减弱,从而使白细胞介素4(IL-4)减少,并使IgE下降,还可能使TH1反应增强,从而使干扰素γ(IFN-γ)产生增多,调节TH1/TH2的平衡,从而达到治疗哮喘的目的。
金平等2在西药吸入型激素治疗的基础上应用穴位贴敷控制哮喘患儿的复发率,发现血清免疫球蛋白IgE明显下降,IgA、IgG水平明显升高,CD4水平升高,且CD4/CD8比值升高,说明穴位贴敷可能使TH2反应减弱,并使IgE下降,嗜酸粒细胞浸润减少,从而减轻哮喘症状。
王丽新等3用透皮散穴位给药治疗支气管哮喘,发现中药组CD4+水平降低,CD8+水平升高,CD4+/CD8+比值下降,同时中药组IgE明显低于对照组,说明止哮散透皮给药可以增加抑制性T淋巴细胞的数量和活性,调整哮喘患者免疫功能,并降低血清IgE的水平。
穴位敷贴法对支气管哮喘患者生存质量影响研究常佳婧;马淑丽【期刊名称】《中西医结合研究》【年(卷),期】2013(005)002【总页数】3页(P85-86,88)【作者】常佳婧;马淑丽【作者单位】山西中医学院护理学院,太原 030024;山西中医学院护理学院,太原030024【正文语种】中文支气管哮喘是最常见的慢性肺系疾病之一。
临床主要表现为发作性伴有哮鸣音的呼气性呼吸困难或发作性胸闷或咳嗽[1]。
哮喘生存质量问卷调查(AQLQ)有32个简单的问题,从哮喘症状、活动受限、环境刺激、情感功能等治疗前后积分的改变几个方面对哮喘患者生存质量进行评估。
最近的研究[2]表明它可以准确地评估哮喘的严重程度。
肺功能检查是判断气流受限程度的客观指标,重复性好,对哮喘严重度评价、预后及治疗反应等均有重要意义。
本研究通过比较治疗前后患者AQLQ评分与肺功能的变化来探讨“喘敷贴”穴位贴敷对哮喘患者生存质量的影响。
1.1 一般资料143例病例均为2011年7月—2011年9月山西省中医院呼吸科门诊患者,符合哮喘西医诊断标准[3]。
所有患者均处于哮喘缓解期,在此之前未进行其他任何缓解期治疗。
将患者按数字表法随机分为治疗组及对照组。
治疗组75例,其中男36例,女39例;年龄19~65岁,平均年龄(37.21±12.90)岁;病程9~41个月,平均病程(18.28±8.90)个月。
对照组68例,其中男25例,女43例;年龄18~64岁,平均年龄(38.91±11.85)岁;病程7~38个月,平均病程(19.91±9.18)个月。
两组患者在性别、年龄、病程等一般资料方面比较差异无统计学意义(Pgt;0.05),具有可比性。
1.2 治疗方法对照组于三伏期间贴敷安慰剂,安慰剂成分:调味剂、白面、凡士林、色素及蒸馏水按一定比例混合而成,调和成糊状,用时取适量(直径为2.0 cm,厚为1.0 cm),置于5.0 cm×5.0 cm大小的胶布上,从夏季三伏的入伏第1日起,每4天贴1次,共8次,疗程共32 d。
穴位敷贴对过敏性哮喘豚鼠ET、IL-2的影响陈劼;赖新生【期刊名称】《上海针灸杂志》【年(卷),期】2003(022)009【摘要】目的观察穴位敷贴疗法对豚鼠血浆、支气管肺泡灌洗液中内皮素水平及血清、支气管肺泡灌洗液中IL-2水平的影响.方法采用卵蛋白致敏法制作豚鼠实验性过敏性哮喘模型,用穴位敷贴法治疗.结果治疗组血浆、支气管肺泡灌洗液中内皮素水平明显低于致敏组(P<0.01,P<0.001),与正常组无明显差异(P>0.05,P>0.05);治疗组血清中IL-2水平明显低于致敏组(P<0.01),与正常组无明显差异(P>0.05).结论提示穴位敷贴可能通过降低血浆、支气管肺泡灌洗液中内皮素含量,降低血清中IL-2含量对过敏性哮喘有治疗作用.【总页数】3页(P23-25)【作者】陈劼;赖新生【作者单位】广州中医药大学针灸推拿学院,广东,510405;广州中医药大学针灸推拿学院,广东,510405【正文语种】中文【中图分类】R562.2+5【相关文献】1.平哮合剂对过敏性哮喘豚鼠模型血清和肺泡灌洗液IL-5及IL-10水平的影响 [J], 张乐平;沈健2.麻枳清肺对豚鼠过敏性哮喘的影响 [J], 李莎莎;王秋红;王荔慧;王艳艳;王知斌;匡海学3.地氯雷他定对过敏性哮喘豚鼠模型肺组织IL-4R mRNA表达的影响 [J], 张丽;白茹芹4.逆针灸对过敏性哮喘大鼠血清IL-2含量及肺组织GATA-3蛋白表达的影响 [J], 华金双; 杨京京; 邵素菊; 王培育; 张君; 何竹青; 郑洁; 田丽; 徐宁; 胡晓京5.穴位敷贴对过敏性哮喘豚鼠血浆及支气管肺泡灌洗液前列腺素F_(2α)、E_2的影响 [J], 赖新生;李月梅;陈芝喜;陈津岩因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
不同时间穴位贴敷对过敏性哮喘大鼠免疫指标的影响金禹彤;吴凌韬;陈姗;宣丽华【摘要】目的观察不同时间穴位贴敷对过敏性哮喘大鼠行为学及血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)水平的影响,探讨穴位贴敷治疗哮喘的作用机制.方法 50只Wistar雄性大鼠按体重采用随机数字表法分为A组(正常对照组)、B组(哮喘模型组)、C组(地塞米松组)、D组(穴位贴敷2 h组)和E组(穴位贴敷4 h组).以鸡卵白蛋白(OVA)制备大鼠哮喘模型,14d后各组分别给予相应治疗.观察大鼠治疗前后引喘潜伏期和发作总持续时间变化;采用HE染色检测大鼠肺组织病理改变,ELISA法测血清中IgE、IL-4和IFN-γ水平变化.结果与A组比较,B 组引喘潜伏期显著缩短、发作持续时间显著延长(P<0.05);病理显示肺组织炎症明显;IgE、IL-4显著升高,IFN-γ显著降低(P<0.05).与B组比较,C组、D组、E组治疗后引喘潜伏期明显延长、哮喘发作持续时间明显缩短(P<0.05);肺病理组织观察显示穴位贴敷后支气管及肺实质炎性改变显著改善;血清中IgE和IL-4水平显著降低,IFN-γ水平显著升高(P<0.05).D组、E组各指标比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论穴位贴敷可以通过改善肺组织炎症,减低IgE、IL-4,升高IFN-γ的表达来治疗哮喘,且不同贴敷时间对治疗效果无明显影响.【期刊名称】《上海针灸杂志》【年(卷),期】2019(038)003【总页数】5页(P331-335)【关键词】穴位贴敷法;哮喘;大鼠;IgE;IL-4;IFN-γ【作者】金禹彤;吴凌韬;陈姗;宣丽华【作者单位】浙江中医药大学,杭州 310053;浙江中医药大学,杭州 310053;浙江中医药大学,杭州 310053;浙江中医药大学附属第一医院,杭州 310006【正文语种】中文【中图分类】R2-03过敏性哮喘是一种由肥大细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞等多种炎性细胞介导的Ⅰ型超敏反应性疾病,全球约有3亿哮喘患者,各国哮喘患病率1%~30%不等,中国约为0.5%~5%,且呈逐年上升趋势[1]。
World Latest Medicne Information (Electronic Version) 2016 Vo1.16 No.6572·临床研究·穴位贴敷不同皮肤反应对防治支气管哮喘发作的影响瞿慧(乌鲁木齐市友谊医院,新疆 乌鲁木齐 83000)摘要:目的研究穴位贴敷不同皮肤反应对防治支气管哮喘发作的效果;方法选取我院近年诊治支气管哮喘120例,根据中药贴敷后皮肤反应情况分为轻度组、中度组和重度组,比较治疗前后各组的血清免疫蛋白E、A、G、M及外周血嗜酸粒细胞计数( EOS)变化情况。
结果 3组EOS、IgE 、IgG等指标治疗后较治疗前明显改善。
治疗后中度组和重度组的EOS、IgE均明显低于轻微组(P<0.05),重度组治疗后IgM明显高于轻微组治疗后(P<0.05)。
结论中药穴位贴敷治疗支气管哮喘,可适度把握皮肤反应以调节患者机体的免疫功能,以抑制IgE的合成,从而减轻气道炎症反应,提高IgM、IgA、IgG水平,提高机体免疫力。
关键词:穴位贴敷;皮肤反应;支气管哮喘发作中图分类号:R562.2+5 文献标识码:A DOI:10.3969/j.issn.1671-3141.2016.65.0560 引言支气管哮喘是临床常见呼吸系统疾病,该病病程长且容易反复发作,给患者身心带来极大负担。
穴位贴敷由于其高效性和操作简便性被广泛应用于支气管哮喘的临床治疗中,有研究认为该种疗法的有效率大多在90%以上[1]。
穴位贴敷主要依靠白芥子刺激皮肤从而促进药物经皮肤吸收,以便最大限度发挥药效。
所以,中药贴敷的皮肤反应在一定程度上直接影响到疾病的治疗效果。
笔者现结合临床实例,探讨中药贴敷的皮肤反应对支气管哮喘防治的影响,具体如下。
1 资料与方法1.1 基本资料。
本研究中120例资料均来自于经我院中医科、呼吸科或儿科确诊的支气管哮喘患者,且对本研究知情同意。
具体资料为:男63例,女57例,年龄4~69岁,平均(36.5±4.6 )岁,病程1~20年,平均(8.3±1.5)年。
穴位贴敷后不同皮肤反应对治疗支气管哮喘疗效的影响探讨摘要:目的:观察穴位贴敷治疗支气管哮喘不同皮肤反应的疗效。
方法:对79例支气管哮喘患者进行夏季穴位贴敷治疗,共3次。
按用药后皮肤反应程度分为A组(无皮肤反应)24例,B组(皮肤红斑)30例,C组(皮肤起泡)25例。
观察三组治疗前及治疗后1年生活质量量表评分及血清IGE水平的变化,并比较三组的临床疗效。
结果:A组总有效率83.3%,B组86.7%,C组88.0%。
三组间比较无显著性差异(P>0.05)。
三组患者生活质量评分无显著性差异(P>0.05)。
C组治疗后血清IGE水平明显高于治疗前(P<0.01)。
治疗后A组与B组血清IGE水平无显著性差异(P>0.05)。
治疗后C组血清IGE水平明显高于A、B组(P<0.05)。
结论:穴位贴敷后皮肤反应的程度在一定程度上与支气管哮喘的疗效有关,皮肤起泡对提高血清IGE水平有显著作用。
关键词:穴位贴敷后;不同皮肤反应;支气管哮喘;疗效影响1临床资料1.1一般资料79例支气管哮喘患者均为2019年7月至2020年8月首都医科大学附属北京康复医院中医科患者,根据贴敷后的不同皮肤反应程度分为A组(皮肤无反应)24例、B组(皮肤红斑)30例和C组(皮肤发泡)25例。
A组中男10例,女14例;平均年龄为(49±11)岁;平均病程为(10.78±9.80)年。
B组中男11例,女19例;平均年龄为(50±11)岁;平均病程为(11.48±11.76)年。
C组中男9例,女16例;平均年龄为(50±11)岁;平均病程为(12.17±15.78)年。
3组患者性别、年龄及病程比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2方法1.2.1穴位贴敷取大椎、天突、肺俞 (双) 、心俞 (双) 、膈俞 (双) 、脾俞 (双) 、肾俞(双) 。
喘敷灵敷贴对哮喘豚鼠肺组织一氧化氮和一氧化氮合酶浓度的影响何丽;郭盛;熊先敏;陈陶后;刘昌玉【期刊名称】《现代中西医结合杂志》【年(卷),期】2007(016)016【摘要】目的观察喘敷灵敷贴对哮喘豚鼠肺组织中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)浓度的影响,探讨喘敷灵敷贴防治哮喘的机制.方法将40只健康豚鼠随机分为正常组、造模组、中药组、西药组,以卵蛋白致敏豚鼠并诱喘成功后,分别予喘敷灵穴位敷贴、西药酮替芬等不同治疗后,测定各组豚鼠肺组织中NO、NOS水平.结果造模组豚鼠肺组织中NO、NOS水平较正常组明显升高(P<0.01),中药组豚鼠肺组织NO、NOS水平较造模组明显降低.结论中药喘敷灵穴位敷贴可降低哮喘豚鼠肺组织NO、NOS水平,对哮喘有一定的防治作用.【总页数】2页(P2200-2201)【作者】何丽;郭盛;熊先敏;陈陶后;刘昌玉【作者单位】上海交通大学附属儿童医院,上海,200040;苏州大学附属儿童医院,江苏,苏州,215003;湖北中医学院附属医院,湖北,武汉,410063;湖北中医学院附属医院,湖北,武汉,410063;湖北中医学院附属医院,湖北,武汉,410063【正文语种】中文【中图分类】R-332【相关文献】1.喘敷灵敷贴疗法对哮喘豚鼠血清IL-8、TNF-a的影响 [J], 何丽;郭盛;熊先敏;陈陶后;刘昌玉2.穴位敷贴对哮喘豚鼠引喘潜伏期及肺组织病理变化的影响 [J], 李月梅;赖新生;苏宁3.喘敷灵穴位敷贴防治儿童哮喘80例临床研究 [J], 鄢素琪;刘昌玉;金建年;吴燕祥;汤建桥;陈正洪4.喘敷灵冬季敷贴防治儿童哮喘的临床观察 [J], 刘昌玉;罗菲;尹杉杉;鄢素琪;乐芹5.喘敷灵贴剂三伏穴位敷贴防治小儿哮喘的疗效观察 [J], 向希雄;司银梅因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
穴位贴敷对支气管哮喘患者肺功能及IL-5的影响陈生;高雪;叶小丹;李敏芳【期刊名称】《中医药学报》【年(卷),期】2009(037)003【摘要】目的:观察穴位贴敷对支气管哮喘患者治疗前后肺功能及白细胞介素-5(IL-5)的变化.方法:①采用酶联免疫吸附法(ELISA),分别测定267例患者治疗前、治疗后10天血清IL-5.②于北京时间11点,分别测定267例患者治疗前、治疗后10天1秒钟用力呼气量(FEV1)占预计值百分比、呼气峰流速(PEF)占预计值百分比、1秒钟用力呼气容积占用力肺活量比值(FEV1/FVC).结果:治疗后,两组患者血清IL-5浓度明显下降,肺功能中各项指标均显著改善.但治疗组较对照组效果更好.结论:在常规治疗的基础上加用穴位贴敷可明显改善肺的通气功能,使IL-5浓度下降,值得临床推广应用.【总页数】2页(P60-61)【作者】陈生;高雪;叶小丹;李敏芳【作者单位】深圳市中医院,广东,深圳,518033;深圳市中医院,广东,深圳,518033;深圳市中医院,广东,深圳,518033;深圳市中医院,广东,深圳,518033【正文语种】中文【中图分类】R244.9;R562.2+5【相关文献】1.三伏天穴位贴敷对支气管哮喘患者血清IL-5、IL-10及ECP的影响 [J], 朱英;邓朋翼;苗芙蕊;周丽晶;杜氏春草;陈日兰2.穴位经皮给药联合痰热清对支气管哮喘急性发作期患者肺功能及血清ESR、CRP、IL-5水平的影响 [J], 陈丽丽3.金匮肾气汤结合穴位贴敷治疗肺肾两虚支气管哮喘的效果及对患者肺功能和生活质量的影响 [J], 梁楚; 周小燕4.孟鲁司特及布地奈德对支气管哮喘患者TNF-α、IL-5、肺功能及生活质量的影响[J], 闫梅5.孟鲁司特及布地奈德对支气管哮喘患者TNF-α、IL-5、肺功能及生活质量的影响[J], 闫梅因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
穴注加贴敷对哮喘大鼠血清IL-10、IL-17和肺组织ICAM-1表达的影响耿立梅; 闫红倩; 于向艳; 马璇雯; 牛晓艳【期刊名称】《《中国中医基础医学杂志》》【年(卷),期】2019(025)008【总页数】4页(P1137-1140)【关键词】哮喘; 穴位注射; 贴敷【作者】耿立梅; 闫红倩; 于向艳; 马璇雯; 牛晓艳【作者单位】河北省中医院呼吸一科石家庄 050011; 石家庄市中医院呼吸科石家庄 050000; 郑州市管城中医院内科郑州 450000【正文语种】中文【中图分类】R244.9哮喘是一种呼吸道慢性炎症性疾病,具有复杂的发病机制。
研究证实,ICAM-1、IL-10以及IL-17在哮喘发生发展中发挥了重要作用。
ICAM-1参与呼吸道炎症形成的早期阶段,可介导白细胞在呼吸道黏膜的黏附和转移;IL-10在炎症早期可抑制促炎因子、趋化因子的合成,阻断炎症细胞释放促炎性细胞因子;IL-17是T 细胞诱导的炎症反应的启动因素,对炎症细胞有强大的化学趋化作用。
Treg/Th17细胞及其相关细胞因子IL-10/IL-17比例失衡是哮喘发病的重要基础。
中医的贴敷及穴注治疗哮喘的疗效也被研究所证实。
本研究旨在探讨穴注加贴敷对哮喘大鼠血清IL-10、IL-17和肺组织ICAM-1表达的影响。
1 材料与方法1.1 动物与分组雄性Wistar SPF级大鼠60只,体质量(120±20) g,由河北医科大学实验室提供。
将动物按随机数字表法分为正常组(A)、模型组(B)、贴敷组(C)、穴位注射组(D)和贴敷组+穴位注射组(E)各12只。
1.2 主要试剂和仪器鸡卵蛋白(Sigma),氢氧化铝(分析纯,成都科龙化工试剂厂),IL-10定量酶检测试剂盒(北京普尔伟业生物科技有限公司), IL-17定量酶分析试剂盒(上海森雄科技实业有限公司),免疫组化试剂盒:一抗:兔抗小鼠ICAM-1(北京博安生物科技有限公司),二抗:山羊抗兔 IgG抗体-HRP多聚体(北京中山金桥生物技术),显微图像分析系统HMIAS-2000(武汉同济医科大学),数码显微镜 DP73(Olympus公司),草分枝杆菌 FU36 注射液1.72 μgml(成都金星健康药业有限公司),贴敷(河北省中医院呼吸科)。
咳喘停贴剂穴位贴敷对慢性哮喘气道炎症大鼠肺组织T-bet、GATA-3 mRNA表达的影响刘兰英;乔明;高峰;王和生;孙建华【期刊名称】《南京中医药大学学报》【年(卷),期】2014(30)6【摘要】目的观察咳喘停贴剂穴位贴敷治疗对慢性哮喘气道炎症大鼠以Th1/Th2为主的上游特异性转录因子表达的影响.方法将50只Wistar雄性大鼠随机分成5组,每组10只,分别为正常组(A)、哮喘模型组(B)、地塞米松组(C)、假穴位贴敷组(D)、穴位贴敷组(E).B、C、D、E组以卵蛋白(OVA)致敏和激发制作慢性哮喘气道炎症模型,观察治疗后各组大鼠肺组织Th1/Th2上游特异转录因子T-bet、GATA-3 mRNA表达的差异性.结果与正常组比较,哮喘模型组、假穴位贴敷组T-betmRNA含量降低,GATe3 mRNA含量升高,T-bet/GATA-3比值下降(P<0.05);地塞米松组、穴位贴敷组则差异无统计学意义.与哮喘模型组比较,地塞米松组、穴位贴敷组T-bet mRNA均升高,GATA-3 mRNA均降低,T-bet/GATA-3比值均升高(P<0.05);假穴位贴敷组则差异无统计学意义.地塞米松组、穴位贴敷组之间差异无统计学意义.结论咳喘停贴剂穴位贴敷治疗慢性哮喘气道炎症,可通过增加Th1相关T-bet mRNA的表达,降低Th2相关GATA-3 mRNA的表达来调节Th1/Th2的失衡,从而起到改善慢性气道炎症的作用.咳喘停贴剂穴位贴敷治疗的疗效与地塞米松相似.【总页数】4页(P550-553)【作者】刘兰英;乔明;高峰;王和生;孙建华【作者单位】南京中医药大学附属医院,江苏南京210029;南京中医药大学第二临床医学院,江苏南京210023;南京中医药大学附属医院,江苏南京210029;南京中医药大学附属医院,江苏南京210029;南京中医药大学附属医院,江苏南京210029【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.咳喘停贴剂穴位贴敷对慢性哮喘大鼠肺组织促炎细胞因子的影响 [J], 刘兰英;乔明;高峰;王和生;孙建华2.咳喘停贴剂穴位贴敷对慢性哮喘大鼠肺组织抑炎细胞因子的影响 [J], 刘兰英;乔明;周媛;高峰;王和生;滕凤猛;3.咳喘停贴剂穴位贴敷对慢性哮喘大鼠肺组织抑炎细胞因子的影响 [J], 刘兰英;乔明;周媛;高峰;王和生;滕凤猛4.尼可地尔对哮喘大鼠气道反应性和肺组织T-bet/GATA-3表达的影响 [J], 王志强;李杰;周鑫5.哮喘大鼠肺组织T-bet、 GATA-3和RORγt mRNA表达变化及特异性免疫治疗的干预影响 [J], 李绍波;陈玲玲;赖小英;金小红因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
穴位贴敷经皮给药药贴对哮喘豚鼠血清中环氧化酶2水平的影响(作者:___________单位: ___________邮编: ___________)作者:王平平,王升旭,王艳杰,唐纯志,黄泳,廖韩波,李求实,陈静【摘要】【目的】观察穴位经皮给药药贴对实验性哮喘豚鼠血清中环氧化酶2(COX2)水平的影响。
【方法】将48只豚鼠随机分为正常对照组、模型组、地塞米松组和经皮给药药贴组,每组各12只。
除正常对照组外,各组豚鼠均采用卵白蛋白致敏法复制实验性过敏性哮喘模型。
经皮给药药贴组采用大椎、肺俞、肾俞穴位贴敷治疗,地塞米松组采用腹腔注射地塞米松05 mg/kg治疗。
采用酶联免疫吸附法检测各组豚鼠血清COX2水平,采用苏木素—伊红染色检测各组豚鼠支气管肺组织病理形态变化。
【结果】模型组豚鼠血清COX2水平显著高于正常对照组(P005),经皮给药药贴组、地塞米松组血清COX2水平显著低于模型组(P005)。
模型组豚鼠支气管肺组织出现明显病理损害,经皮给药药贴组支气管肺组织仅出现轻度病理改变。
【结论】穴位贴敷经皮给药药贴可能通过降低血清中COX2水平,从而对哮喘产生治疗作用。
【关键词】经皮给药药贴/治疗应用;支气管哮喘/穴位疗法;环氧化酶2/血液;疾病模型,动物;豚鼠哮喘是以多种炎症基因表达增加或异常表达为特征,由多种炎症细胞(嗜酸性粒细胞、T淋巴细胞、肥大细胞、巨噬细胞等)和气道结构细胞(上皮细胞、血管内皮细胞、平滑肌细胞等)及细胞组分(细胞因子、化学因子、黏附分子、酶类和受体)参与的一种气道慢性炎症性疾患[1]。
环氧化酶2(COX2)是一种诱导酶,它能促进细菌脂多糖、炎性细胞因子、生长因子和肿瘤启动子的产生,与炎症反应及肿瘤发生相关[2] 。
在哮喘的病理生理过程中COX2可能起了关键作用[3] 。
近年来,应用穴位贴敷疗法治疗哮喘的研究较多[4] ,经皮给药系统是药物经由皮肤吸收进入人体血液循环,并达到有效血药浓度、实现疾病治疗或预防的一类贴剂(或贴片) [5] 。
本实验根据清代《张氏医通》中记载的消喘膏加用麻黄为处方,利用现代药物提纯和经皮给药技术制作成一种药贴,观察穴位贴敷经皮给药药贴对哮喘模型豚鼠血清COX2水平的影响,并探讨其治疗哮喘的疗效机制。
现报道如下。
1材料与方法11实验药物、仪器及试剂鸡卵白蛋白(美国Sigma公司,批号:A5253)由广州市威佳科技有限公司提供,地塞米松注射液由广州白云山制药厂提供,经皮给药药贴药物质量比为:白芥子∶麻黄∶延胡索∶甘遂∶细辛=2∶2∶2∶1∶1,由南方医科大学中药制剂实验室制备。
WH22000型超声雾化仪由广东粤华公司生产,Multi skan II ELISA 检测仪由芬兰生产,LD42A型水平离心机由北京医用离心机厂生产,BX50生物组织显微镜由日本Olympus公司生产,EG1140石蜡包埋机、TP1020生物组织自动脱水机、RM2050石蜡切片机均为德国徕卡公司产品,COX2酶联免疫吸附(ELISA)试剂盒由武汉博士德生物有限公司提供(产品编号为EK0603)。
12实验动物分组及造模48只成年豚鼠,雌雄各半,体质量200~250 g,由广州中医药大学实验动物中心提供(动物质量合格证号:0031706)。
所有豚鼠随机分为正常对照组、模型组、经皮给药药贴组和地塞米松组,每组各12只。
控制室温,各组在相同条件下饲养,先将动物饲养3 d适应环境后开始造模。
第4天,除正常对照组外,其他各组均采用鸡卵白蛋白致敏,常规消毒后一次性腹腔注射100 g/L卵白蛋白生理盐水1 mL,使豚鼠处于致敏状态[6]。
第18天开始,将致敏的豚鼠置于密闭透明的塑料盒内,给予10 g/L卵白蛋白生理盐水混悬液雾化吸入加以激发,每次30 s,1次/d,连续14 d,以腹式呼吸明显,呼吸频率加快且节律不整,活动减少等症状为诱喘成功。
正常对照组以生理盐水代替卵白蛋白生理盐水,其致敏及诱喘时间同造模组。
13治疗方法于哮喘发作次日开始治疗:地塞米松组采用腹腔注射地塞米松05 mg/kg,隔天治疗1次,共治疗7次。
经皮给药药贴组进行穴位贴敷治疗,穴位选择:大椎穴、肺俞穴(双)、肾俞穴(双)[7]。
具体方法:将豚鼠颈背部穴位处用宠物电剪刀剪毛,剪毛范围:纵向大椎至肾俞,横向脊柱两侧各旁开15 cm,用大块胶布将药物敷贴固定于穴位处。
每次敷药6 h,治疗时间与次数同地塞米松组。
模型组造模成功后令其自然恢复,正常对照组不给予任何干预治疗。
14样本制备在末次诱喘后2~4 h内,给豚鼠称体质量,用30 g/L戊巴比妥钠按50 mg/kg腹腔注射麻醉豚鼠,迅速断头取血,每只取5 mL,室温放置2 h后,3 000 r/min离心15 min,取上清液,放冰箱-20 ℃保存待测。
同时迅速打开胸腔,暴露肺及心脏,常规取支气管肺组织,避免钳夹组织引起组织受压影响观察,取材部位:右中下肺取一横切面,包括肺门。
所取组织经100 g/L多聚甲醛固定,常规石蜡包埋和切片(厚4 μm)待测。
15检测方法采用ELISA法定量检测各组豚鼠血清中COX2水平,严格按照试剂盒说明的方法和要求操作。
采用光镜观察各组经苏木素—伊红(HE)染色切片的支气管肺组织形态变化。
16统计学方法所有实验数据均在SPSS 130上建立数据库、进行数据录入与统计分析。
各组间差异采用单向方差分析(One Way ANOVA),方差齐用LSD检验,方差不齐用Tamhane s检验,检验水平α=005。
2结果21动物数量实验结束后,共剩豚鼠30只,每组随机取6只,共24只纳入结果分析。
22各组豚鼠血清COX2水平比较表1结果显示:模型组豚鼠血清COX2水平显著高于正常对照组(P005),经皮给药药贴组、地塞米松组血清COX2水平显著低于模型组(P005)。
23各组支气管肺组织形态观察结果正常对照组支气管黏膜上皮完整,平滑肌无明显的增厚,肺泡壁清晰完整,间隔形态正常,无明显的炎症细胞表1各组豚鼠血清COX2水平比较(x±s)浸润。
模型组支气管管壁黏膜上皮细胞受损和脱落明显,气道壁不完整,黏膜下层炎症明显,气道平滑肌增厚,胶原纤维增加,管腔狭窄,气道腔内黏液分泌增多,黏液栓堵塞,气道周围嗜酸性粒细胞明显增加,肺泡内可见弥漫性慢性炎细胞浸润、管腔变窄,肺泡基本上实变,充满炎症细胞,有肺大泡形成,肺泡间隔有明显充血。
地塞米松组支气管黏膜上皮基本完整,管壁平滑肌层有轻度的增厚,间质炎症细胞较少,肺泡间隔基本完整,腔内有少量的炎症细胞,肺泡间隙轻度充血以及有少数的炎症细胞浸润。
经皮给药药贴组支气管的黏膜上皮基本完整,平滑肌层有轻度的增厚,管周有少量的炎症细胞,肺泡完整,间质轻度充血,结果见图1(彩图见第317页)。
3讨论支气管哮喘(哮喘)是当今世界最常见的慢性疾病,其病理生理改变以气道慢性非特异性炎症、气道反应性增高及气道重建为主要特征,三者相互作用、互相影响[8] 。
哮喘的治疗目前国内外首选消除非特异炎症的糖皮质激素,但由于副作用大、成瘾性强及易反复发作等缺点的存在,使其有效应用受到一定限制。
穴位敷贴治疗哮喘则是在传统中医针灸理论指导下发挥其独特疗效的[9] 。
穴位敷贴给药为一古老的中医外治法,具有不经消化系统破坏和肝脏分解,维持较长时间且稳定的血药浓度,从而使药物作用时间长而稳定的优点。
而且由于穴位给药,药物成分通过经络感传影响多层次的生理功能,它们之间可能产生相互激发和协调作用,导致生理上的放大效应,使药物的外治效果可能优于内服[10-11] 。
本实验光镜观察到的结果从病理角度验证了穴位贴敷经皮给药药贴治疗豚鼠哮喘的有效性。
哮喘的本质是炎性反应,来自体液直接反映炎症存在情况的细胞因子或炎症介质成为近年来的研究重点,如炎性反应环节中起着关键作用的COX2,已被视为快速炎症反应的重要标志之一[12] 。
COX2主要存在于气道上皮细胞和平滑肌细胞,生理状态下它几乎不被表达,只有在炎性细胞因子或炎性介质将细胞激活的情况下才被表达[13]。
哮喘患者气道黏膜中有大量的单核—巨噬细胞、嗜酸性粒细胞及中性粒细胞浸润,被激活后可产生大量的COX2,COX2是一种炎性酶,它的表达可诱导多种炎症介质的表达,如前列腺素E2(PGE2)、白细胞介素6(IL6)、IL8、IL18等,这些炎症介质又加重了炎症反应,从而诱发哮喘或使哮喘加重,而且COX2的过度表达与气道重塑和气道气流阻塞程度加重有关[14-17] 。
本研究结果显示,模型组豚鼠血清COX2水平显著高于正常对照组(P005),表明COX2的表达与哮喘的发作密切相关。
经皮给药药贴组、地塞米松组血清COX2水平显著低于模型组(P005),说明地塞米松与经皮给药药贴均可能是通过影响COX2的表达而对哮喘发作产生治疗作用。
【参考文献】[1]Barnes P J,Godfrey S.Asthma therapy[M].London:Martin Dunitz,1998:L1-L22.[2]支玉香,张宏誉.102例阿司匹林性哮喘病例分析[J].临床内科杂志,2004,21(2):105.[3]蔡芳芳,杨炯,倪岚.糖皮质激素对大鼠哮喘模型肺组织环氧化酶基因表达的影响[J].实用医学杂志,2006,22(5):504.[4]李广涛.“冬病夏治”贴敷治疗哮喘68例[J].实用中医内科杂志,2003,17(5):379.[5]梁旭霞,黄小平,陈兴兴,等.均匀设计法筛选蟾酥贴剂的透皮吸收促进剂[J].广东药学院学报,2008,24(3):212.[6]方厚华.医学实验模型动物[M].北京:军事医学科学出版社,2002:106-107.[7]李忠仁.实验针灸学[M].北京:中国中医药出版社,2003:325-326.[8]钟南山.支气管哮喘——基础与临床[M].北京:人民卫生出版社,2006:14-50.[9]赖新生,李月梅,张家维.天灸对哮喘患者血清可溶性IL2受体及T淋巴细胞亚群的影响[J].中国针灸,2000,20(1) :33.[10]成建山.中医外治的现状与展望[J].中医杂志,1992,33(12):46.[11]刘因华,赵远,郭世民.浅谈经皮给药的机制方法和发展前景[J].云南中医中药杂志,2008,29(1):59.[12]苗润宏,周敏,赵红纪.支气管哮喘外周血单核细胞环氧化酶2的表达及临床意义[J].中国误诊学杂志,2008,8(12):2841.[13]蒋萍.阿司匹林性哮喘发病机制研究的新进展[J].国外医学:内科学分册,2000,27(4):146.[14]Martey C A,Pollock S J,Turner C K,et al. Cigarette smoke induces cyclooxygenase2 and microsomal prostaglandin E2 synthase in human lung fibroblasts:implications for lunginflammation and cancer[J]. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol,2004,287(5) :L981 .[15]陈燕,陈平.慢性阻塞性肺疾病患者环氧合酶2和基质金属蛋白酶2的表达及其与气流阻塞的关系[J].中华结核和呼吸杂志,2005,28(5):324.[16]陈伟宁,曹爱红,马广伟,等.哮喘急性发作患儿血清COX2动态改变的临床意义[J].热带医学杂志,2005,5(4):447.[17]李洪琼.哮喘患儿血清COX2、IL28、Ig E的动态变化及其临床意义[J].蚌埠医学院学报,2003,3(1):70.。