菌落计数器的使用注意事项

全自动菌落计数器安全操作及保养规程概述全自动菌落计数器是一种广泛应用于生物科研、医疗、环保等领域的实验仪器。

使用全自动菌落计数器，能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定，提高实验效率和准确度。

为了更好地使用全自动菌落计数器，保障实验安全和设备使用寿命，本文提供了全自动菌落计数器安全操作和保养规程。

全自动菌落计数器安全操作规程1. 选择合适的环境充分了解实验特点，并保证在适宜的环境中操作仪器。

在使用前应保证仪器环境符合要求：干燥、清洁、无噪音和极少的振动。

2. 准备仪器在使用前，需要进行事先准备。

将仪器表面的灰尘和污垢除去，并连接电源。

操作人员应全程佩戴手套、防护眼镜等个人防护装备。

3. 操作前检查按照仪器说明书检查仪器的机械、电器和软件系统的运转是否正常。

特别需要检查的是，玻璃门、窗户和面板是否有破损或损坏。

如果发现异常情况，应及时整修或修理。

4. 样品的操作将需要检测的样品外转0.8mL的LB平板，自然晾干后，直接放在仪器样本架。

取样器轨道上放置含菌样品的架子，然后启动程序，开始自动检测和计数。

5. 操作完成后将样品架从样品架装置中取出，并断开电源。

检查操作位置是否清洁，如有样品残渣，则应及时清除干净。

全自动菌落计数器保养规程1. 日常保养除按照操作规程使用仪器外，要注意仪器表面的干净，并保持干燥。

使用后，要及时清除仪器表面的细颗粒。

2. 周期性维护在正常运行中，定期进行全自动菌落计数器的日清洁和消毒，避免积累过多的细菌或菌落。

3. 不适用时的处理当全自动菌落计数器长时间不使用，应放置在干燥、清洁、无噪音和极少的振动的环境中，不要暴露在阳光下，以免受到紫外线的侵蚀。

4. 维修保养如果全自动菌落计数器出现故障或其他异常情况，应及时找专业的技术人员进行维修保养，以免影响实验或造成二次污染。

总结全自动菌落计数器是一种实验室中常用的仪器，它能够方便、快速地对菌落进行计数和鉴定，提高实验效率和准确度。

在使用全自动菌落计数器时，需要遵守安全操作规程，并进行日常和周期性的保养维修，以保障实验安全和设备使用寿命。

一、实验目的1. 掌握细菌菌落总数测定的原理和方法。

2. 学会使用细菌菌落计数器，并正确操作。

3. 通过实验了解不同样品中细菌菌落的生长情况，评估样品的卫生质量。

二、实验原理细菌菌落总数（Colony Forming Units, CFU）是指在一定条件下，一个细菌在固体培养基上生长繁殖所形成的可见菌落数量。

通过测定样品中的细菌菌落总数，可以评估样品的卫生质量。

实验原理基于以下步骤：1. 样品处理：将样品进行适当的稀释，以便在平板上形成单菌落。

2. 平板培养：将稀释后的样品涂布在含有营养物质的平板上。

3. 培养与计数：在一定温度下培养平板，待菌落生长成熟后，使用菌落计数器进行计数。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 样品：食品、水、土壤等。

- 培养基：营养琼脂平板。

- 稀释剂：生理盐水、无菌水等。

- 菌落计数器。

- 无菌操作台、无菌棉签、镊子等。

2. 实验仪器：- 电热恒温培养箱。

- 电子天平。

- 移液器。

- 烧杯。

- 移液管。

四、实验步骤1. 样品处理：- 称取适量样品，用无菌水进行10倍递增稀释。

- 将稀释后的样品分别取1mL，涂布在营养琼脂平板上。

2. 平板培养：- 将涂布好的平板倒置放入电热恒温培养箱中，培养温度为37℃，培养时间为24小时。

3. 菌落计数：- 使用菌落计数器，在显微镜下观察菌落，记录每个平板上的菌落数。

- 计算每个样品的细菌菌落总数。

五、实验结果与分析1. 实验结果：- 样品A：细菌菌落总数为2.5×10^6 CFU/g。

- 样品B：细菌菌落总数为1.2×10^5 CFU/g。

- 样品C：细菌菌落总数为8.0×10^3 CFU/g。

2. 分析：- 样品A的细菌菌落总数较高，可能存在一定的卫生问题。

- 样品B的细菌菌落总数较低，卫生质量较好。

- 样品C的细菌菌落总数最低，卫生质量最佳。

六、实验结论通过本次实验，我们成功掌握了细菌菌落总数测定的原理和方法。

微生物室使用要求1、超净工作台微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养，那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。

超净工作台的主要用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。

2、无菌室（接种室）或接种箱要培养微生物，首先就需要接种，而接种必须在无菌条件下进行。

这就需要建造无菌室或接种箱，为接种创造必要的条件。

无菌室可以建在实验室内，作为实验室的一个小套间。

面积为4~5平方米，高2.5米左右。

无菌室外应连接一个小缓冲间，面积为2平方米左右。

缓冲间和无菌室的门不要建在同一条直线上，以减少空气中杂菌进入无菌室。

无菌室和缓冲间应作到清洁、密闭性好，室内最好有换气设备，以便在工作结束后更换室内空气。

两个房间中应各安装1盏30瓦紫外线灯管和照明用的日光灯，无菌室的紫外线灯应悬吊在工作台的正上方，距台面1米，以发挥最大的消毒功能。

无菌室内的工作台等用具用品，应经常保持清洁，避免杂菌污染。

如果没有条件建造无菌室，可以用木制的接种箱代替。

接种箱结构简单，容易制作，其正面安装玻璃，便于观察。

箱前方开两个圆洞各接连1只套袖，操作时将两臂从套袖伸入箱内进行操作。

箱内也应悬吊一盏紫外线杀菌灯和一盏日光灯。

3、培养箱培养箱有很多种类型，它的用途在于为微生物提供一个适宜的生长环境。

主要类型包括生化培养箱，霉菌培养箱，厌氧培养箱等。

它们的区别主要在于：a. 生化培养箱只能控制温度。

这类培养箱可作为一般细菌的平板培养。

b. 霉菌培养箱可以控制湿度和温度。

它主要用在霉菌的培养。

c. CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养，例如，双歧杆菌。

4、天平它是用于精确称量各类试剂。

实验室常用的是电子天平，电子天平按照精度不同又有不同的级别。

5、微生物均质器它的作用在于从固体样品中提取细菌。

用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无损伤、无污染、不升温、不需要洗刷器皿，不需灭菌处理等特点，是微生物实验中使用较为方便的仪器。

6、菌落计数器菌落计数仪可帮助操作者计数菌落数量。

菌落总数操作手册
一、概述
菌落总数是指在一定条件下生长的细菌菌落数，用于评估食品或环境的卫生质量。

本操作手册将详细介绍如何进行菌落总数检测，以确保实验结果的准确性和可靠性。

二、实验材料
1. 培养基：平板计数琼脂（PCA）
2. 试剂：无菌生理盐水
3. 器具：无菌棉签、无菌培养皿、无菌移液管（1mL）、天平、pH计、恒温培养箱、计时器、灭菌锅
三、实验步骤
1. 样品采集：使用无菌棉签采集适量样品，并放入无菌容器中。

对于液体样品，直接使用无菌移液管取样；对于固体或半固体样品，需将样品研磨或搅拌均匀后取样。

2. 样品稀释：将采集的样品进行稀释，使细菌能更好地在培养基上生长。

根据样品性质和预计菌落数，选择适当的稀释倍数。

一般采用10倍稀释法。

3. 制备平板：将PCA培养基加热融化后，冷却至45℃左右，倒入无菌培养皿中，每皿约15mL。

4. 接种样品：将稀释后的样品取1mL加入已制备好的平板中，用无菌玻璃棒均匀涂布在培养基上。

5. 培养：将培养皿倒置放入恒温培养箱中，在37℃下培养24-48小时。

6. 计数：计数平板上的菌落数，并记录结果。

根据实验要求，计算出样品中的菌落总数。

7. 结果报告：根据实验数据，撰写实验报告并向上级汇报检测结果。

四、注意事项
1. 实验前应保证所有器具和试剂的无菌状态，避免交叉污染。

2. 实验过程中要保持清洁卫生，避免人为误差。

细菌计数板计数原理细菌计数板是一种用于测定液体中细菌数量的仪器，也称为细菌平板计数器。

它是一种简单、快速、准确的方法，被广泛应用于医学、食品、环境等领域。

本文将介绍细菌计数板的计数原理和使用方法。

一、细菌计数板的构成和原理细菌计数板由一块透明的塑料板和一层含有营养物质的琼脂层组成。

琼脂层的营养物质可以提供细菌生长所需的营养物质，而透明的塑料板可以方便观察细菌的生长情况。

使用细菌计数板时，首先需要将待测样品加入到琼脂层上，然后将细菌计数板放入恒温箱中，在适宜的温度下培养一定时间。

细菌在琼脂层上生长形成菌落，每个菌落代表着一定数量的细菌。

最后，用显微镜观察每个菌落的数量，就可以得到样品中细菌的数量。

二、细菌计数板的使用方法1. 准备细菌计数板和待测样品。

2. 打开细菌计数板的包装，将琼脂层朝上放在无菌工作台上。

3. 取出待测样品，使用消毒酒精灯或紫外线灯消毒。

4. 使用无菌的移液管将待测样品滴在琼脂层上。

5. 用无菌的铁环将琼脂层划分成四个区域，每个区域上滴一定量的待测样品。

6. 用无菌的铁环在琼脂层上划分出小块，每个小块上只留下一个菌落。

7. 将细菌计数板放入恒温箱中，在适宜的温度下培养一定时间。

8. 取出细菌计数板，用显微镜观察每个菌落的数量。

9. 记录每个区域中菌落的数量，并计算出样品中细菌的数量。

三、细菌计数板的注意事项1. 细菌计数板必须保持无菌状态，使用前应消毒。

2. 待测样品应在细菌计数板上均匀涂布，避免过多或过少。

3. 细菌计数板应在适宜的温度和时间下培养，否则会影响结果的准确性。

4. 观察菌落时应使用显微镜，避免肉眼观察造成误差。

5. 计算细菌数量时应注意单位的转换，避免计算错误。

细菌计数板是一种简单、快速、准确的方法，可以用于测定液体中细菌数量。

使用细菌计数板时需要注意保持无菌状态、均匀涂布样品、适宜的温度和时间、使用显微镜观察菌落、注意单位的转换等事项，才能得到准确的结果。

目的：本程序《菌落计数器使用说明书》规定了菌落计数器操作程序。

范围：本程序适用于JLQ—S型菌落计数器。

职责：质量管理部、QC内容：1接通200V电源，打开照明开关，将待检菌落平板翻转，底部朝上，放在灯光透射处，调节放大镜位置至菌落看的最清楚后固定镜头，探笔插入面板右上角孔中。

2按以下步骤操作计数计算器，先按一下ON/C键，显示器上显示“0”，再按一下“1”的数字键，显示器显示“1”，再按一下“+”号键，此时显示器显示“1”，再按一下“=”号键，显示器仍显示“1”，再按一下“0”字键，此时显示器显示“0”。

这时即可用探笔在菌落平板上进行累加计数。

3探笔使用方法：探笔是由三种不同颜色的针管尼龙笔和一支金属探笔头组成，在使用探笔时，需拔下尼龙笔的笔套、笔杆、将相同于笔杆颜色的彩色小墨水瓶剪开，对准储水芯徐徐挤入，墨水不宜加得太多，将加好墨水的储水芯连同笔尖套插入有带引线及插头的金属探笔头的套管内，使尖套塑料部分暴露在金属管外28mm左右，并有插入到底的感觉。

然后插入计数器插孔中进行计数器是否正常计数的试验。

探笔一般按平常书写钢笔时的握法（但不能握在笔尖塑料部分），宜倾斜一些，不能垂直于工作面，探笔在平板上进行碰触计数器时，能感觉到探笔有轻微的摆动。

计数完毕后，应将笔尖塑料杆连同储水芯从金属探笔头上取下，装入原来的塑料笔套中，以免墨水干掉，为了区别菌落在不同培养阶段的检测记录，仪器所备的三种颜色笔，后按上述方法换装不同的颜色。

4在计数时，将探笔在平板上碰触一下，计数器即计一个数，与此同时，探笔在平板上点上一个色点，表示此菌落已被数过。

以后每碰触一次，探笔点一个色点，计数器即累加一个数，直到所有的菌落都被点上色点，显示器中显示的读数即为该平板的菌落数。

5在计完某菌落平板后，如需再计其它平板的菌落数，可继续直接累加，待总的平板都数完后除以平板数即是平均数，也可使用存储键求平均数，在数完一个平板后，按一下M±键显示器上角显示“MEM”，表示此数已被存入，再按一下“0”字键，显示器上角显示“MEM”，右边显示“0”，即可继续计数。

菌落计数器计数方法详解菌落计数器（Colony Counter）是一种用于快速计算微生物菌落数量的仪器，广泛用于微生物学研究、环境保护、食品工业、医学和农业等领域。

本文将详细介绍菌落计数器的使用方法及注意事项。

1. 菌落计数器的结构一般来说，菌落计数器包括菌落计数板、LED光源、灯罩、目镜、宽幅板调节钮、突起按钮等部分。

在计数过程中，将培养基平板放在菌落计数板上，开启LED光源照射培养基平板，目镜上方会出现大量菌落，使用突起按钮进行纪录和计数。

2. 菌落计数器的使用方法2.1 准备工作在开始使用菌落计数器前，需要进行以下准备工作：1.准备好待测样本，应按照标准操作流程进行操作。

2.准备好培养基平板，应在标准条件下进行制备，避免污染和偏差。

3.清洁菌落计数器，并将培养基平板放在菌落计数板上。

2.2 计数步骤1.打开菌落计数器，并调节合适的光源亮度。

2.选择一个适宜的倍率，一般为1-1.5倍，使用宽幅板调节钮使目镜聚焦。

3.开始计数前，应将菌落计数板上的菌落进行清点，以免重复计数或漏计。

4.用突起按钮逐个记录每个菌落的数目，轻按一下突起按钮记录一个菌落。

5.计数结束后，应将目镜反转清洗，以避免污染。

2.3 防止误差的注意事项1.尽量避免检测手部微生物的可能性，操作人员必须在洁净间内使用无菌手套等防护装备。

2.培养基平板质量和保存条件应符合标准，以保证菌落的形成和生长。

3.菌落计数板的数量应符合要求，并根据菌落的密度调整倍率和光源亮度。

4.计数过程中应切勿使用手指或其他物体触碰培养基平板或菌落计数板，避免污染和误差。

5.若发现菌落过多或过密，可采用分区方法计数，避免漏计或重复计数。

3. 菌落计数器的常见问题3.1 菌落计数结果偏低菌落计数结果偏低可能是因为培养基平板制备不当，或者是计数过程中操作不规范，应重新制备培养基平板并检查计数方法。

3.2 菌落计数与实际数量不符这可能是因为样本不均匀或者操作错误导致的，应重新操作，并注意操作规范。

菌落总数检验操作规程目的：该操作规程用于规范公司产品及原料的活菌数量检验操作。

范围：该操作规程适用于公司要求检查该项的产品和原料的菌落总数检验责任人：微生物检验员，QC主管内容：1 技术依据及原理菌落总数计数采用平板菌落计数法，这是活菌计数方法之一。

该方法以在琼脂平板上，样品经过处理在一定条件下培养后，所得1ml（或1g）检样中形成菌落的总数。

测定结果只反映在规定条件下，只包括一群在平板计数琼脂生长发育的嗜中温需氧菌或兼性厌氧菌的菌落总数。

在进行本法测定时，必须严格按本法规定的条件操作，以免产生实验误差。

2 材料、仪器、试剂的准备及基本要求2.1 无菌室2.1.1 结构和要求无菌室面积不超过10m2，高度不超过2.4m，应采光良好、避免潮湿、远离厕所所及污染区，有缓冲间（2个）、操作间组成。

操作间与缓冲间之间应有样品传递窗（箱），出入操作间和缓冲间的门不应直对。

无菌室应六面光滑平整，能耐受清洗消毒。

墙与地面及墙壁、天花板连接处应呈凹弧形，无缝隙，不留死角。

操作间内不得安装下水道。

无菌室照明灯应嵌装在天花板内，室内光照分布均匀，光照度不低于300勒克斯。

缓冲间和操作间均应设置紫外线杀菌灯（2～2.5W/m3）, 紫外线杀菌灯距实验台面高度不超过1 m，并定期检查其辐射强度，辐射强度不低于70µW·cm-2（1 m距离），不符合要求的紫外线杀菌灯应即使更换。

2.1.2 温度、湿度无菌室内温度和相对湿度直接影响紫外线杀菌灯的杀菌效果，故应控制温度18～26℃，相对湿度40～60%。

操作间或净化工作台的洁净空气应保持对环境形成正压，压差不低于4.9Pa。

2.1.3 操作间操作间应安装空气除菌过滤层流装置。

洁净度应不低于10000级，局部净化度100级，或放置同等级净化工作台，并准备药物天平，乙醇灯、打火机、大小橡皮乳头等。

2.1.4 缓冲间缓冲间应有洗手盆，无菌衣、帽、口罩、拖鞋等。

平板菌落计数实验报告注意事项反思(1)如果稀释度大的平板上菌落数反比稀释度小的平板上菌落数高，则系检验工作中发生的差错，属实验室事故。

此外，也可能因抑菌剂混入样品中所致，均不可用作检样计数报告的依据。

(2)如果平板上出现链状菌落，菌落之间没有明显的界限，这是在琼脂与检样混合时，一个细菌块被分散所造成。

一条链作为一个菌落计，如有来源不同的几条链，每条链作为一个菌落计，不要把链上生长的各个菌落分开来数。

此外，如皿内琼脂凝固后未及时进行培养而遭受昆虫侵入，在昆虫爬过的地方也会出现链状菌落，也不应分开来数。

(3)如果所有平板上都有菌落密布，不要用多不可计作报告，而应在稀释度最大的平板上，任意数其中2cm2个，除2求出每cm2内平均菌落数乘以皿底面积63.6cm2数，再乘其稀释倍数作报告。

例如10-1～10-3稀释度的所有平板上均菌落密布，而在lO-3稀释的平板上任数2个cm2。

内的菌落数是60个，皿底直径为9cm，则该检样每g(或m1)中“估计”菌落数为：60／2×63．6×1000=1908000或1.9×106。

63.6cm2数系按皿底直径为9cm时计算而得，即：(9／2)2×3．14=63．6；如所用平皿的皿底直径不是9cm，则可按其直径的实际cm数代人圆面积公式求出。

(4)菌落计数中，如能使用国产JLQ-S。

型菌落计数器，则比较方便，灯光由侧面射向平板，菌落易于观察。

由于仪器带有电子音响讯号，用特制金属探笔点数中，在发出音响之下始显示数字增加，不会发生差错。

且灯光与平板之间夹有多用方格玻质规板(方格面积为lcm2)，也有助于对菌落密布的平板进行计数。

(5)检样如系微生物类制剂(如酸牛乳、酵母制酸性饮料)，则平板计数中应相应地将有关微生物(乳酸杆菌、酵母菌)排除，不可并入检样的菌落总数内作报告。

一般在校正检样的pH7．6后，再进行稀释和培养，此类嗜酸性微生物往往即不易生长。