尼康Ti倒置显微镜简易操作流程

倒置荧光相差显微镜简明操作规程
1. 左侧面的固定功能按钮
①TL/IL 反复切换明视场/荧光
②AP孔径光圈（BF模式下的图像反差）
③INT照明强度（明视场/荧光的亮度）
④FD 视野光圈
2. 初始化后的前方显示屏上的图形功能按钮
①显微镜观察方法的状态
②当前使用的物镜倍数
③Σ显微镜总放大倍数
④光线强度 / INT ；AP 孔径光圈 FD 视野光圈
⑤视频/目镜
3. 前方按钮功能
荧光虑块 A 颜色表达蓝
荧光虑块 I3 颜色表达绿
荧光虑块 N21 颜色表达红
SHUTTER 荧光挡板(阻挡或释放荧光)
其它固定功能按键为空
4. 开机
位于显微镜左侧，①为显微镜开关：只使用明场观察时，只打
开此开关即可；②为荧光汞灯开关，需要荧光观察时，两个开关均
需开启。

另需拍照时，请打开电脑。

5. 根据样品标记的荧光素选择相应的滤光片；
6. 放好样品，找到合适的视野进行观察；
7. 双击开启软件
8. 如需拍照点击采图键，
注意：拍照时应将CCD下方的拉杆拉出方可在屏幕上
显示图像
9. 拍照过程中如需白平衡，在空白处，按住鼠标左键画
一个框，即可显示相关信息；
10. 拍照完毕，及时关闭电脑、汞灯及电源，清理试验台；
11. 如需将数据带走，请到办公室取专用U盘拷取，严禁私自用自己的盘拷贝资料。

Nikon Ti-U荧光倒置显微镜操作规范操作前须知：使用荧光显微镜的荧光观察功能需提前填写预约记录，使用后填写使用记录。

普通观察切片和细胞无需登记（只有荧光观察或荧光拍照才需要打开汞灯，明场、相差图像和观察细胞不需要打开汞灯）。

填写预约记录是为避免频繁开、关汞灯，延长汞灯寿命，当操作者看到有人预约在自己后面时间不长时，可以不用关汞灯。

（汞灯打开后40分钟后才能关：汞灯关闭后无论多急，40分钟后才能开）。

彩色相机的开机:1. 首先确认电源连接正常，打开外置灯箱电源控制器开关（2-2）；2. 打开机身底座左侧白色（正方形）卤素灯开关（2-3），通过调节机身左侧开关下方的旋钮（3-1）控制灯泡亮度确认显微镜处于工作状态。

把透射照明器中的“NCB11 滤色片”和“D滤色片”（3-2）插入光路中以保证色彩真实。

明场图像观察：1. 先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位，把准备观察的切片（切片的方向应是盖玻片朝下）放到显微镜载物台上；2. 聚光镜（5-1）的选择：（一）聚光镜对应空白挡位A（二）聚光镜孔径光栏：将聚光镜的孔径值设定在物镜数值孔径值的60%—80%之间即可3. 通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度，达到最佳位置图像最清晰；4. 将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”（相机端口）的位置上，通过计算机进行图像采集保存。

相差图像观察：1. 先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位，把准备观察的样本放到显微镜载物台上；2. 聚光镜（5-1）的选择：（一）聚光镜根据物镜选择对应的相差环（注：4倍物镜对应PHL，10倍、20倍物镜对应PH1，40倍物镜对应PH2）（二）可根据物镜倍数的提升结合镜下效果来调整聚光镜上的孔径光阑的数值3. 通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度，达到最佳位置图像最清晰。

20,40倍物镜上有较正环，可配合使用获得清晰图像；4. 将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”（相机端口）的位置上，通过计算机进行图像采集保存。

显微镜及数码成像系统操作简要第一部分观察方法步骤1、明场观察方法步骤2、相差观察方法步骤3、荧光观察方法步骤) (使用IPP第二部分拍摄图像流程相差观察、荧光观察) 明场观察(拍摄图像流程第三部分BX2-BSW使用观察方法步骤第一部分 1、明场观察方法步骤涉及部件步骤”主开关拨到“I打开电源开关三目观察筒选择杆拨至最内选择目镜观察光路聚光镜选择钮聚光镜选择明场（BF）相差移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路开始观调节瞳间观察筒瞳间距调节调节屈光目镜屈光度调节环寻找标载物台控制手柄手动调调节光照亮图像采准备工作：柯勒照明光轴中心调节第一次观察须完成此调试，完成后不需要再调节，直至装卸过部件后，使用过程中请不要扭动聚光镜中心调节旋钮。

①聚光镜升高到最高位置聚光镜高度升降旋钮②用10X物镜聚焦至清晰③视场光阑打至最小视场光阑④逐步下降聚光镜，使视场中出现清晰正多边形图像聚光镜升降旋钮⑤调节聚光镜中心调节旋钮，使正多边形移至视场中心聚光镜中心调节旋钮⑥逐步打开视场光阑，使正多边形与视场边缘内切视场光阑⑦稍加大视场光阑，使它的图象刚好与视场外切即可视场光阑2、相差（PH）观察方法步骤步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路选择与物镜匹配的相差环聚光镜选择钮进入光路PH对10物镜PH对20物镜PH对40物开始观调节瞳间观察筒瞳间距调调节屈光目镜屈光度调节寻找标载物台控制手手动调调节光照亮图像采3、荧光观察方法步骤准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）步骤涉及部件主开关拨到“I”打开电源开关选择目镜观察光路三目观察筒选择杆拨至最内聚光镜选择明场（BF）聚光镜选择CD+或CD-钮相差环移出光路载物台、标本夹放入标本于载物台物镜选择钮选择合适物镜进入光路标本定位调节瞳间距观察筒瞳间距调节调节屈光度目镜屈光度调节环寻找标本载物台控制手柄手动调焦卤素灯电源调至最暗机身架光强调节按钮打开汞灯电源供电器主开关拨到“I”选择合适的荧光激发块打开光开始观选择合适的物物镜选择按钮选用合适N滤色荧光反射照明器上ND片插槽调节汞灯透镜聚焦旋钮使视场亮度均汞灯透镜聚焦旋钮调节视场光阑和孔径光阑改善反视场光阑/孔径光阑图像采准备工作：高压汞灯对中（第一次观察时调整，以后观察时不需调整，除非更换汞灯）调整完成后，请不要触动对中部件，如汞灯对中旋钮，视场光阑对中钮等。

倒置显微镜使用详解及注意事项
1.开机
打开开关①、开关②、开关③显微镜及操作台④开电脑、软件
注：荧光电源需在使用荧光时开，开关间隔时间保持30min以上，相机电源在需要拍照时打开
2.制片放在载物台上，倒置
①用控制面板进行物镜选择，点击OBJ按钮，选择物镜倍数；
②点击CON按钮，选择观察通道：彩色制片选择
A：明场：任何倍数
需要用浮雕效果选择
Phl:4×
DICN1:10×、20×、40×
DICN2:60×油镜
注：荧光不需要选择油镜
3.荧光:打开荧光电源，点击控制面板选择荧光模式
打开荧光操作面板Open键，选择荧光强度
4.拍照:打开相机电源选择黑白或彩色相机拍照，保存为JPEG2000原始图像
5.关机:先关软件，电脑，再关硬件。

倒置显微镜的原理结构是怎样的呢及操作规程倒置显微镜的原理结构是怎样的呢倒置显微镜构成和一般显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在载物台之上，用于察看培育的活细胞，具有相差物镜。

倒置显微镜的原理构成和一般显微镜一样，只不过物镜与照明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在载物台之上，用于察看培育的活细胞，具有相差物镜。

倒置显微镜和放大镜起着同样的作用，就是把近处的微小物体成一放大的像，以供人眼察看。

只是显微镜比放大镜可以具有更高的放大率而已。

物体位于物镜前方，离开物镜的距离大于物镜的焦距，但小于两倍物镜焦距。

所以，它经物镜以后，必定形成一个倒立的放大的实像AB。

AB靠近F2的位置上。

再经目镜放大为虚像AB后供眼睛察看。

目镜的作用与放大镜一样。

所不同的只是眼睛通过目镜所看到的不是物体本身，而是物体被物镜所成的已经放大了一次的像。

结构倒置显微镜的构造紧要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。

机械部分⑴镜座:是显微镜的底座，用以支持整个镜体。

⑵镜柱:是镜座上面挺立的部分，用以连接镜座和镜臂。

⑶镜臂:一端连于镜柱，一端连于镜筒，是取放显微镜时手握部位。

⑷镜筒:连在镜臂的前上方，镜筒上端装有目镜，下端装有物镜转换器。

⑸物镜转换器（旋转器）:接于棱镜壳的下方，可自由转动，盘上有3—4个圆孔，是安装物镜部位，转动转换器，可以调换不同倍数的物镜，当听到碰叩声时，方可进行察看，此时物镜光轴恰好对准通光孔中心，光路接通。

⑹镜台（载物台）:在镜筒下方，形状有方、圆两种，用以放置玻片标本，中央有一通光孔，我们所用的显微镜其镜台上装有玻片标本推动器（推片器），推动器左侧有弹簧夹，用以夹持玻片标本，镜台下有推动器调整轮，可使玻片标本作左右、前后方向的移动。

⑺调整器:是装在镜柱上的大小两种螺旋，调整时使镜台作上下方向的移动。

①粗调整器（粗螺旋）:大螺旋称粗调整器，移动时可使镜台作快速和较大幅度的升降，所以能快速调整物镜和标本之间的距离使物象呈现于视野中，通常在使用低倍镜时，先用粗调整器快速找到物象。

Nikon Ti-U荧光倒置显微镜操作规范操作前须知：使用荧光显微镜的荧光观察功能需提前填写预约记录，使用后填写使用记录。

普通观察切片和细胞无需登记（只有荧光观察或荧光拍照才需要打开汞灯，明场、相差图像和观察细胞不需要打开汞灯）。

填写预约记录是为避免频繁开、关汞灯，延长汞灯寿命，当操作者看到有人预约在自己后面时间不长时，可以不用关汞灯。

（汞灯打开后40分钟后才能关：汞灯关闭后无论多急，40分钟后才能开）。

彩色相机的开机:1. 首先确认电源连接正常，打开外置灯箱电源控制器开关（2-2）；2. 打开机身底座左侧白色（正方形）卤素灯开关（2-3），通过调节机身左侧开关下方的旋钮（3-1）控制灯泡亮度确认显微镜处于工作状态。

把透射照明器中的“NCB11 滤色片”和“D滤色片”（3-2）插入光路中以保证色彩真实。

明场图像观察：1. 先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位，把准备观察的切片（切片的方向应是盖玻片朝下）放到显微镜载物台上；2. 聚光镜（5-1）的选择：（一）聚光镜对应空白挡位A（二）聚光镜孔径光栏：将聚光镜的孔径值设定在物镜数值孔径值的60%—80%之间即可3. 通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度，达到最佳位置图像最清晰；4. 将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”（相机端口）的位置上，通过计算机进行图像采集保存。

相差图像观察：1. 先把显微镜的物镜转盘转到低倍物镜档位，把准备观察的样本放到显微镜载物台上；2. 聚光镜（5-1）的选择：（一）聚光镜根据物镜选择对应的相差环（注：4倍物镜对应PHL，10倍、20倍物镜对应PH1，40倍物镜对应PH2）（二）可根据物镜倍数的提升结合镜下效果来调整聚光镜上的孔径光阑的数值3. 通过目镜观察调节显微镜视野内的亮度，达到最佳位置图像最清晰。

20,40倍物镜上有较正环，可配合使用获得清晰图像；4. 将显微镜机座右侧的分光旋钮旋到“L”（相机端口）的位置上，通过计算机进行图像采集保存。

感谢您选择了尼康显微镜产品， 尼康为您提供最为出色的显微成像技术。

1.显微镜功能说明显微镜各部件（1） 电源开关 （2） 聚光器 （3） 孔径光阑（4） 相差或Emboss 滑块（视具体配置） （5） Emboss 滑块 （6） 调焦旋钮 （7） 物镜切换 （8） 载物台移动（9） 透射光/荧光照明开关（10） 透射光/荧光切换（左侧按钮明场，右侧按钮荧光。

） （11） 明场（透射光）亮度调节 （12） 荧光亮度调节 （13） 荧光滤色块转盘 （14） 相机及光路切换 （15）手动透射光闸①②③④⑤ ⑥⑧⑦ ⑨⑥⑬ ⑩⑪⑭⑫⑮1)打开主机电源开关，2)将光路切换到肉眼观察，3)打开手动透射关闸4)聚光镜Emboss滑块移入光路，滑块右端的旋钮可调节浮雕显示效果。

5)目镜筒Emboss滑块与物镜倍数对应；6)荧光滤色块移到空位，7)切换到DIA透射光，8)打开照明开关，9)调节照明强度，10)调焦，移动载物台，肉眼观察。

1)打开主机电源开关，2)将光路切换到肉眼观察，3)关闭手动透射关闸，4)移出目镜筒Emboss滑块，5)转动荧光转盘选择荧光滤色块，6)切换到EPI（荧光/落射光），7)打开照明开关，8)调节照明强度（通常调最亮），9)调焦，移动载物台，肉眼观察。

经过培训后操作者所必须掌握的概念：显微镜部件：倒置显微镜物镜倍率数值孔径矫正环明场照明开关调节荧光照明开关调节调焦旋钮光路切换荧光转盘聚光镜转盘观察方式：明场相差相差环荧光荧光染料虑色块激发光发射光。

倒置显微镜操作流程倒置显微镜是一种常用的显微镜，它的设计使得它在观察生物细胞等大尺寸标本时非常方便。

下面将详细介绍倒置显微镜的操作流程。

一、准备工作1. 将倒置显微镜放置在平稳的桌面上。

2. 确保显微镜电源已连接，打开电源开关，并将亮度调节到适当的亮度。

3. 准备待观察的标本，并将其放置在显微镜的载物台上。

4. 调整载物台的高度，使得标本与物镜能够接触。

二、调整光源1. 观察显微镜的光源，确保其工作正常。

2. 根据需要，调节光源的亮度和角度，以获得清晰的光线投射在标本上。

三、调节镜头1. 选择合适的目镜，并将其插入目镜筒上。

2. 选择合适的物镜，并将其插入物镜筒上。

3. 使用焦距调节钮，将物镜与标本调至适当的焦距。

4. 使用调节装置，使得目镜和物镜等距标本表面。

5. 根据需要，使用液体浸润物镜，以提高高倍观察的分辨率。

四、观察标本1. 通过目镜观察标本，调整光源和镜头，以获得清晰的图像。

2. 使用焦距调节钮，改变焦点，观察标本的不同深度位置。

3. 根据需要，调整镜头的放大倍数，以获得更清晰的细节。

4. 如需拍摄图像，可将相机与显微镜相连。

五、清理和关闭1. 使用显微镜清洁纸轻轻擦拭物镜和目镜的表面，确保清洁干净。

2. 关闭显微镜光源开关，并拔下电源插头。

3. 将目镜和物镜从显微镜上拆下，并放置在安全的位置。

4. 清理并储存载物台和其他附件。

5. 将显微镜盖上，并存放在安全干燥的地方。

以上就是倒置显微镜的操作流程。

在操作过程中，请注意保持标本与显微镜的稳定，避免碰撞和损坏。

同时，确保显微镜的清洁和妥善保养，以保证其正常工作和延长使用寿命。

希望这份操作流程能够对你使用倒置显微镜提供帮助。