植物组织培养---绪论

绪论复习题及参考答案★1、根据培养的材料;植物组织培养分：愈伤组织培养、器官培养、细胞培养、原生质体培养、悬浮培养等类型..2、植物组织培养的发展分为三个阶段：萌芽阶段、奠基阶段和快速发展和应用阶段 ..3、1902年; Haberlandt提出了植物细胞“全能性”学说 ;1934年;White出版了植物组织培养手册从而使植物组织培养为一门新兴学科..★1、植物组织培养plant tissue culture：是指通过无菌和人工控制的环境条件下;利用适当的培养基;对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养;使其再生细胞或完整植株的技术..由于培养材料已脱离了母体;又称为植物离体培养 Plant culture in vitro..2、脱分化dedifferentiation：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程;称为植物细胞的脱分化..3、再分化redifferentiation：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养又可以重新分化成根或芽等器官;这一过程称为植物细胞的再分化..★4、外植体explant：由活体in vivo植物体上切取下来的;用于组织培养的各种接种材料..包括各种器官、组织、细胞或原生质体等★5、愈伤组织callus：原指植物在受伤之后于伤口表面形成的一团薄壁细胞;在组培中则指在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则的薄壁细胞;多在植物体切面上产生..1、简述植物组织培养的理论依据植物组织培养的理论依据是细胞全能性学说;即植物体的每一个细胞都携带有一套完整的基因组;并具有发育成为完整植株的潜在能力..★2、植物组织培养有哪些特点1培养条件可以人为控制2生长周期短;繁殖率高：3管理方便;利于工厂化生产和自动化控制：★3、植物组织培养的分类1 根据培养对象不同：组织培养、器官培养、胚胎培养、细胞培养、原生质体培养等；2 根据培养物培养过程：初代培养、继代培养；3 根据培养基的物理状态：固体培养、液体培养..★4、植物组织培养主要应用于哪些方面1快速繁殖运用组织培养的途径;一个单株一年可以繁殖几万到几百万个植株；2种苗脱毒针对病毒对农作物造成的严重危害;通过组织培养可以有效地培育出大量的无病毒种苗；3培育和创制新品种利用组织培养可以使难度很大的远缘杂交取得成功;从而育成一些罕见的新物种；4大量生产次生代谢物质通过植物细胞培养获得的生物碱、维生素、色素、抗生素以及抗肿瘤药物不下50多个大类;其中已有30多种次生物质的含量在人工培养时已达到或超过亲本植物的水平..植物细胞次生物质的研制与生产硕果累累;后来居上..5植物种质资源的离体保存植物组织培养结合超低温保存技术;可以给植物种质保存带来一次大的飞跃..因为保存一个细胞就相当于保存一粒种子;但所占的空间仅为原来的几万分之一;而且在-193度的液氮中可以长时间保存;不像种子那样需要年年更新或经常更新..6人工种子人工种子便于贮藏和运输;适合机械化播种；繁殖速度快;不受季节和环境限制;利于工厂化生产；体细胞胚由无性繁殖体系产生;可以固定杂种优势..第1章实验室及基本操作复习题及参考答案一、填空：1、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、天平、显微镜、蒸馏水发生器、酸度计等 ..★2、培养基成分主要包括①无机营养成分、②有机营养成分、③植物生长调节物质、④碳水化合物、⑤其它物质 ..3、培养基最常用的碳源是蔗糖;使用浓度在1%-5% 常用 3 %..4、糖在植物组织培养中是不可缺少的;它不但作为离体组织赖以生长的碳源 ;而且还能维持培养基渗透压 ..5、在固体培养时琼脂是使用最方便、最好的凝固剂和支持物 ;一般用量为 6-10g／L 之间..6、驯化的目的：在于提高试管苗对外界环境条件的适应性;提高其光合作用的能力;促使试健壮;提高苗的移裁成活率 ..★7、生长素/细胞分裂素的高低决定着外植体的发育方向;其比值高：有利于根的形成和愈伤组织的形成；低：有利于芽的形成..8、培养基灭菌一般在 108 kPa的压力下;锅内温度达 121 ℃ ;维持 20-30 min..9、选择外植体时应选择①选择优良的种质、②选健壮的植株、③选最适的时期和④选取适宜的大小 ..10、诱导胚状体比诱导芽的优点： 1数量多、 2速度快、 3结构完整 ..11、试管苗的生态环境：高温且恒温、高湿、弱光、无菌 ..12、培养基中加入活性炭的目的：利用其吸附能力;减少一些有害物质的影响 ..★13、筛选培养基的方法：单因子试验法、多因子试验法、光谱实验法★14、植物培养技术：灭菌、接种、培养、驯化四个环节★15、试管苗的驯化注意：基质、温、光、水、肥、气的综合管理二、名词解释：1、MS培养基 MS culture medium：它是1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的..是目前应用最广泛的培养基..特点是无机盐离子浓度较高;有高含量的N、K;硝酸盐量大;营养丰富..★2、母液：是欲配制液的浓缩液..配成比所需浓度高10-100倍..母液配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等..好处: ①保证各物质成分的准确性②配制时的快速移取③便于低温保藏..3、褐变：是指外植体在培养中体内的多酚氧化酶被激活;使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醌类物质;有时使整个培养基变褐;从而抑制其他酶的活性;影响材料的培养..4、玻璃化现象vitrification phenomenon：在长期的离体培养繁殖时;有些试管苗的嫩茎、叶片呈现半透明水渍状;这种现象称为玻璃化..5、消毒：指杀死、消除或充分抑制部分微生物;使之不再发生危害作用..6、灭菌：是指用物理或化学的方法;杀死物体表面和孔隙内的一切微生物或生物体;即把所有生命的物质全部杀死..7、接种：在无菌条件下;用灼烧过的镊子将外植体放到培养基上的操作过程..1、一般组织培养的操作工序：1、培养器皿的清洗；2、培养基的配制、分装和高压灭菌；3、无菌操作——材料的表面灭菌和接种；4、将培养物放到培养室培养；5、试管苗的驯化、移栽和初期管理..★2、论述植物生长调节物质在组织培养中的作用并列举常见的种类1 生长素类：主要被用于诱导愈伤组织形成;促进细胞脱分化；促进细胞伸长；诱导根的分化;促进生根..如：IAA吲哚乙酸；NAA萘乙酸；IBA吲哚丁酸； 2;4—D2;4—二氯苯氧乙酸2细胞分裂素类：①诱导芽的分化促进侧芽萌发生长..②促进细胞分裂与扩大..③抑制根的分化..抑制衰老;减少叶绿素分解;有保鲜效果..如：包括6—BA6—苄基腺嘌呤、Kt 激动素、Zt 玉米素等..★3、常用的培养基有哪些说明其特点1MS培养基：1962年由Murashige和Skoog为培养烟草细胞而设计的..是目前应用最广泛的培养基..特点是无机盐离子浓度较高(2)white培养基：无机盐浓度较低;适于生根培养..3N6培养基： KNO3和NH42SO4含量高;不含钼..广泛应用于禾谷类植物的花粉和花药培养..4B5培养基：主要特点是含有较低的铵盐;较高的硝酸盐和盐酸硫胺素..适宜双子叶植物特别是木本植物的培养★4、如何配制MS培养基1配制母液：一般母液配成比所需浓度高10-100倍的浓缩液;配制时可分别配成大量元素、微量元素、铁盐、有机物和激素类等..(2)配制方法：①将母液按顺序摆放②取适量的蒸馏水加入配制容器中③按需要量依次取母液及生长调节物质④加入蔗糖30g/L溶解⑤定容⑥调pH值⑦加琼脂6-10g/L;完全融化后;分装至培养瓶中;封口⑧高压灭菌★5、如何对外植体进行表面消毒1 将需要的材料用水洗干净..2 表面灭菌：用70%酒精浸30-60s左右..3 灭菌剂处理：0.1%升汞10分钟、或在2%次氯酸钠液中浸泡20-25分钟..4 用无菌水冲洗3-5次左右6、接种后离体培养物对光、温、湿等环境条件的要求1 光照：愈伤组织的诱导不需光照或弱光;器官分化需要光照;一般12－16h/d;光照度1000－5000lx..2 温度：一般25±2℃3 湿度：培养室内的湿度要求保持70％－80％的相对湿度..7、论述离体培养污染产生的原因及防治措施..污染：污染原因从病源分面主要有细菌和真菌和两大类..原因：1外植体材料消毒不彻底 2培养基灭菌不彻底3操作环境不洁净 4操作人员操作不规范、不熟练..预防措施：1减少或防止材料带菌 2外植体灭菌要彻底 3 培养基灭菌要彻底4 玻璃器皿和金属器皿的灭菌要彻底 5无菌室的消毒6操作人员一定要严格按照无菌操作的程序进行接种..8、固体培养基与液体培养基相比有何特点优点:操作简便;通气问题易于解决;便于经常观察研究.缺点:培养物与培养基的接触即吸收面积小;各种养分在琼脂中扩散较慢;影响养分的充分利用;同时培养物排出的一些代谢废物;聚集在吸收表面;对组织产生毒害作用..9、在培养基中加入活性炭有什么作用1主要是利用其吸附作用;减少一些有害物质的影响2活性炭使培养基变黑;有利于某些植物生根3对形态发生和器官形成有良好的效应★10、植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容1培养基的配制及灭菌 2外植体的选择及灭菌3外植体的接种及培养 4试管苗的驯化与移栽★11、组织培养中常用的灭菌方法分为物理的和化学的两类;1物理方法如干热烘烧和灼烧、湿热常压或高压蒸煮、射线处理紫外线、超声波、微波、过滤和大量无菌水冲洗等措施；2化学方法是使用升汞、甲醛、过氧化氢、高锰酸钾、来苏儿、漂白粉、次氯酸钠、抗菌素、酒精化学药品处理..12、怎样进行培养基的高压湿热灭菌方法是：关闭放气阀;通电后;待压力上升到49kPa时;打开放气阀;放出空气注意完全排除锅内空气;使锅内全部是水蒸气;灭菌才能彻底;待压力表指针归零后;再关闭放气阀..当压力表上升达到108kPa时;锅内温度达121℃在此蒸气温度下;可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢;维持20-30min..13、无菌操作时应注意哪些事项1 在接种4h前用甲醛熏蒸接种室；2 在接种前15-20min;打开超净工作台的风机以及台上的紫外灯；3 接种员先洗净双手;在缓冲间换好专用实验服;并换穿拖鞋等；4 上工作台后;用酒精棉球擦拭双手;特别是指甲处..然后70%酒精喷雾降尘;并擦拭工作台面；5 接种工具蘸95%酒精;灼烧；6 接种时将试管斜着;使试管口在酒精灯火焰上转动;灼烧数秒钟..接完种后;将管口在火焰上再灼烧数秒钟..7 接种时;接种员双手不能离开工作台;不能说话、走动和咳嗽等；8 接种完毕后要清理干净并用酒精擦工作台..14、在植物组织培养中;通过哪些途径可以得到完整的植株1 外植体→愈伤组织→根、芽→试管苗①同时长芽和根②先长芽;再长根③先长根;再长芽2 外植体→胚状体→试管苗3 外植体→根、芽→试管苗..15、与常规苗相比;试管苗具有哪些特点1生长细弱； 2光合作用差 3叶片气孔数目少;活性差4根的吸收功能弱 5对逆境的适应和抵抗能力差16、如何提高试管苗移栽的成活率1试管苗的生理状况应选择壮苗;以提高移栽后的成活率2加入植物生长调节物质如生长素 3降低无机盐的浓度4加入少量活性炭;尤其是用酸、碱和有机溶剂洗过的活性炭5环境因子适当的环境条件能提高移栽的成活率6移栽过程中让试管苗从无菌向有菌逐渐过渡★17、接种程序：1植物材料表面的消毒2切割外植体3将外植体移入培养基第2章基本原理复习题及参考答案一、填空：1、绝大多数培养植物再生植株时都先经过愈伤组织阶段..★2、愈伤组织形成大致经历诱导期、分裂期和分化期三个时期..3、使用植物生长调节物质时要注意：种类和浓度生长素和细胞分裂素的比值 ..★4、愈伤组织的形态发生方式主要有不定芽方式和胚状体方式..5、组织培养细胞再分化包括四个水平：细胞水平的再分化、组织水平的再分化、器官水平的再分化器官发生和植株水平的分化二、名词解释：★1、愈伤组织培养callus culture:是指将母体植株上的外植体;接种到无菌的培养基上;进行愈伤组织诱导、生长和发育的一门技术..★2、继代培养subculture：愈伤组织在培养基上生长一段时间以后;由于营养物质枯竭;水分散失;以及代谢产物的积累;必须转移到新鲜培养基上培养..这个过程叫做继代培养3、体细胞胚somatic embryo又称胚状体embryoid：指在组织培养中;由一个非合子细胞体细胞;经过胚胎发生和胚胎发育过程经过原胚、球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚5个时期;形成的具有双极性的胚状结构..4、体细胞胚胎发生：植物组织培养细胞产生胚状体的过程;称为体细胞胚胎发生..5、细胞全能性cell totipotency：每一个植物细胞具有该植物的全部遗传信息;在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息;分化出植物有机体所有不同类型细胞;形成不同类型的器官甚至胚状体;直至形成完整再生植株★6、形态建成：外植体细胞在适宜的培养条件下发生脱分化、再分化;产生芽和根;或者形成胚状体;发育成苗或完整植株..三、问答题★1、愈伤组织细胞的分化一般分几个时期各有何特点1诱导期起动期：是细胞准备分裂的时期..细胞大小几不变;内部发生生理生化变化;迅速合成蛋白质和核酸..2分裂期：外层细胞分裂;中间细胞常不分裂;形成小芯..细胞分裂快;结构疏松;缺少结构;浅而透明..在原培养基上;细胞必分化;及时转移;其可无限制地进行细胞分裂;维持不分化状态..3分化期：细胞在形态和生理功能上的分化;出现形态和功能各异的细胞..2、优良的愈伤组织必须具备哪4个特性1高度的胚性或再分化能力;以便从这些愈伤组织得到再生植物2容易散碎;以便用这些愈伤组织建立优良的悬浮系;并且在需要时能从中分离出全能性的原生质体3旺盛的自我增殖能力;以便用这些愈伤组织建立大规模的愈伤组织无性系..4经过长期继代保存而不丧失胚性;便有可能对它们进行各种遗传操作..3、愈伤组织的形态发生有哪些情况1愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成;即无根的芽或无芽的根；2先形成芽;再在芽伸长后;在其茎的基部长出根而形成小植株;多数植物属这种情况；3先产生根;再从根基部分化出芽而形成小植株..这种情况较难诱导芽的形成;尤其对于单子叶植物；4先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根;然后两者结合起来形成一株小植株..少见..单子叶植物：与双子叶植物诱导发生过程类似;只是在形态上无鱼雷形胚等阶段;成熟体胚上有盾片、胚芽鞘和胚根等结构..4、简述细胞脱分化过程..细胞的脱分化过程可分为3个阶段：第一阶段为启动阶段;表现为细胞质增生;并开始向细胞中央伸出细胞质丝;液泡蛋白体出现；第二阶段为演变阶段;此时细胞核开始向中央移动;质体演变成原质体；5、影响植物离体形态发生的因素有哪些不是重点1植物种类和基因型2培养材料的生理状态发育年龄：一般幼态比老态组织形态发生能力高；培养器官或组织类型：细胞分裂旺盛的器官较好；培养时间和细胞倍性：一般取处于旺盛生长期的愈伤来诱导器官形成..3培养基a营养成分：一般认为;培养基中的铵态氮和K+有利于胚状体形成;提高无机磷的含量可促进器官发生; 茎尖培养和芽诱导培养基主要是MS及其修改的培养和B5培养基; 碳水化合物种类及浓度对胚状体发育有重要作用;缺糖或低糖无法形成胚状体..b 植物激素及生长调节剂起主导作用;通过影响内源激素的平衡起作用c培养基的性质：愈伤组织诱导：在固体培养基上；细胞和胚状体的诱导在液体培养基上4培养条件：光照；温度；气体；湿度等★6、分裂期愈伤组织的共同特征：细胞分裂快;结构疏松;缺少有组织的结构;维持其不分化的状态;颜色浅而透明..★7、胚状体发生途径与器官发生途径形成植株的区别:①胚状体具有两极性;即在发育的早期阶段;从其方向相反的两端分化出茎端和根端；而不定芽和不定根都为单向极性..②胚状体的维管组织与外植体的维管组织无解剖结构上的联系..而不定芽或不定根往往总是与愈伤组织的维管组织相联系..③胚状体维管组织的分布是独立的“Y”字形..而不定芽的维管组织无此现象..★8、器官发生形成小苗的方式1愈伤组织仅有根或芽器官的分别形成;即无根的芽或无芽的根；2先长芽;后长根;多数情况；3先长根;再从根的基部长芽..这种情况较难诱导芽的形成;尤其对于单子叶植物；4先在愈伤组织的邻近不同部位分别形成芽和根;然后两者结合起来形成一株植株..第3章器官和组织培养复习题及参考答案一、填空：1、植物器官培养主要是指植物的根、茎、叶、花器和幼小果实的无菌培养..★2、茎尖培养根据培养目的和取材大小分为茎尖分生组织培养和普通茎尖培养两种类型..前者主要是对茎尖长度不超过0.1mm;最小只有几十微米的茎尖进行培养;目的是获得无病毒植株；后者是对几毫米乃至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养;目的是离体快繁 ..3、不定芽产生的途径：一是从外植体上直接产生二是从由外植体诱导产生的愈伤组织上产生..4、离体叶培养是指包括叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、子叶等叶组织的无菌培养..5、在离体叶培养中;6-BA和KT利于芽的形成；2;4-D利于愈伤组织的形成二、名词解释：★1、植物器官培养Organ Culture：是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养的技术..分为营养器官根、茎、叶和繁殖器官果实、种子、花器官培养..2、花器官培养：是指对植物的整朵花或花的组成部分包括花托、花瓣、花丝、花药、子房、胚珠进行离体培养的技术..3、植物分生组织meristem culture培养：是指对植物的分生组织进行离体培养的技术;包括植物根尖、茎尖等顶端分生组织和形成层组织的培养..其中茎尖培养广泛应用于植物再生和脱病毒研究..三：问答题：★1、离体叶组织中再生植株发生途径有哪些在离体叶组织脱分化和再分化培养中;茎和芽分化的4个途径：1直接产生不定芽2离体叶-----愈伤组织------不定芽3离体叶--------愈伤组织------胚状体 -----不定芽4离体叶→小鳞茎或球状体↘愈伤组织↗★2、根培养的取材部位：答：一端切取长1.2厘米的根尖;接种于培养基中..这些根的培养物生长甚快;几天后发育出侧根..待侧根生长约1周后;即切取侧根的根尖进行扩大培养;它们又迅速生长并长出侧根;又可切下进行培养;如此反复;就可得到从单个根尖衍生而来的离体根的无性系..这种根可用来进行根系生理生化和代谢方面的实验研究..培养条件为暗光和25～27℃..★3、离体根培养的一般方法：1100ml三角瓶;装40~50ml培养液；2液体培养;3反复继代培养;4流动式★4、根培养的培养基的选择：无机离子较低White培养基或者其他培养基MS、B5也可用;但其浓度要稀释2/3或1/2★5、影响离体根生长的因素1、基因型：品种差异大..2、培养基：生根培养基—盐浓度为MS的一半或四分之一..3、生长物质：适当的生长素;常用NAA和IBA;浓度为0.1-10.0毫克每升..但水仙;草莓等无需激素..4、PH：中性偏酸..5、光照和温度：暗培养和25～27℃★6、茎尖培养的含义：是切取茎的先端部分或茎尖分生组织部分;进行无菌培养..★7、茎尖培养的类型：茎尖分生组织培养：对长度0.1mm左右;含1-2个叶原基的茎尖进行培养;即微茎尖培养；目的是获得无病毒植株普通茎尖培养：对几毫米至几十毫米长的茎尖、芽尖及侧芽的培养;目的是快速繁殖和用于植物开花生理的研究..★8、茎段的培养材料的选择、处理和培养基的调整选择：取生长健壮无病虫的幼嫩枝条或鳞茎盘;若是木本;取当年生嫩枝或一年生枝条;剪去叶片;剪成3～4cm的小段..处理：在自来水中冲洗1～3h;在无菌条件下用75％酒精灭菌30～60s;再用浓度为0.1％升汞浸泡3～8min;或用饱和漂白粉浸泡10～20min;因材料老嫩和蜡质多少而定时间..最后用无菌水冲洗数次;以备接种..培养基的调整：最常用的基本培养基为MS培养基;加入3％蔗糖;用0.7％的琼脂固化.. 9茎尖微繁过程有哪几个阶段茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段: 1 的建立.. 2 芽的.. 3 中间的增殖.. 4 诱导.. 5 苗的移栽第4章胚胎培养及离体授粉复习题及参考答案一、填空：★1、胚胎培养包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养..2、离体胚的培养分为二种类型：成熟胚培养和幼胚培养..★3、胚珠培养分二类：受精胚珠的培养和未受精胚珠的培养..受精胚珠培养目的一是打破种子的休眠；二是挽救胚的发育;以获得杂交种..未受精胚珠培养的目的是获得单倍体植株 ..4、子房培养分授粉子房培养和未授粉子房的培养..前者培养的目的是挽救杂种胚;后者培养的目的是获得单倍体植株..5、离体授粉的类型有离体柱头授粉、离体子房授粉、离体胚珠授粉..★6、离体胚培养方法：成熟胚和幼胚培养7、胚珠培养的培养基：Nitsch或N5;B5;MS;子房培养的培养基：N6;MS二、名词解释：★1、胚胎培养embryo culture：指对植物的胚、子房、胚珠和胚乳进行离体培养;使其发育成完整植物的技术..包括幼胚培养、成熟胚培养、胚乳培养、胚珠培养以及子房培养..★2、胚培养embryo culture：采用人工的方法将胚从种子、子房或胚珠中分离出来;再放在无菌的条件下;让其进一步生长发育;以至形成幼苗的过程..★3、胚乳培养endosperm culture：是指将胚乳从母体上分离出来;放在无菌的人工环境条件下;让其进一步生长发育;以至形成幼苗的过程..4、胚珠培养ovule culture：是指将胚珠从母体上分离出来;在无菌的人工环境条件下培养;使其生长发育形成幼苗的过程..5、子房培养ovary culture：是指将子房从母体上分离出来;在无菌的人工环境条件下培养;使其生长发育形成幼苗的过程..6、植物离体授粉：指将未授粉的胚珠或子房从母体上分离下来;进行无菌培养;并以一定的方式授以无菌花粉;使之在试管内实现受精的技术..三、问答题：★1、胚培养的作用有哪些1在远缘杂交育种中的应用:克服杂种胚不能正常发育2克服珠心胚的干扰;提高育种效率3缩短育种周期4测定休眠种子的萌发率5理论研究中的应用2、简述离体授粉的程序..课件上没有1确定开花、花药开裂及授粉时间2去雄后将花蕾套袋隔离3制备无菌子房或胚珠4制备无菌花粉5胚珠或子房的试管内授粉★3、胚胎培养的操作步骤..取子房常规表面消毒解剖镜下;取胚珠、去珠被、取出完整幼胚..。

绪论引言：植物组织培养是20世纪初开始，以植物生理学为基础，在植物细胞全能性(totipotency)理论的指导下，特别是对植物生长调节剂(growth regulator)的应用而发展起来的一项技术。

经过各国科学家100多年的辛勤探索，现在可以说几乎所有的植物，其器官、组织或细胞都能离体培养成功。

大多数还能从细胞的一部分，甚至没有细胞壁的裸露的原生质体中，再生出无数的小植株。

近40多年来，植物组织培养技术已渗透到生物学科的各个领域，成为生物学科研究的重要技术手段，并在农业、林业、工业、医药业等行业中被广泛应用，产生了巨大的经济效益和社会效益，成为了举世瞩目的生物技术之一。

那么，什么是植物组织培养呢？1.植物组织培养的概念和种类1.1 植物组织培养的概念植物组织培养的概念有广义和狭义之分。

广义的植物组织培养（plant tissue culture ）是指在无菌和人工预知的控制条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织或细胞进行离体培养，使其再生细胞或生长、分化成完整植株的技术。

植物组织培养概念中所提到的无菌(asepsis)是指使培养器皿、器械、培养基和培养材料等处于无真菌、细菌、病毒等微生物的状态，以保证培养材料在培养器皿中正常生长和发育。

人工控制的环境条件是指对光照、温度、湿度、气体等条件进行人工控制，以满足植物培养材料在离体条件下的正常生长和发育。

适当的培养基是指培养基含有适当营养物质和植物生长调节物质等。

植物组织培养中，使用的各种器官、组织和细胞统称为外植体(explant)。

在植物组织培养中，由于培养的植物材料已脱离了母体，故植物组织培养又称为植物离体培养(plant culture in vitro)。

对离体培养环境条件控制的研究内容被称为离体生态学(in vitro ecology)，其构成是培养基、植物材料和人工环境条件。

狭义的植物组织培养仅指对植物的组织（如分生组织、表皮组织、薄壁组织等）及培养产生的愈伤组织（callus）进行离体培养的技术。

植物组织培养复习资料第一章绪论一、概念：植物组织培养：在无菌条件下，将离体的植物器官.组织，细胞以及原生质体. 培养在人1:培养基上和人工控制的环境中，使其生长，分化，增殖，甚至长出新的植株的过程和技术。

外植体：在无菌条件下，离体培养于人工培养基上的，用于达到某种培养目的的原始植物材料C培养基：根据植物营养原理和植物组织离体培养的要求而人匚配制的营养基质即为培养基。

细胞全能性：植物体每一个细胞都含有该植物全部的遗传信息，在合适的条件下，具有形成完整植株的能力。

脱分化：一个成熟细胞恢复到分生状态或胚性细胞状态的现象。

再分化：是脱分化细胞重新恢复细胞分化能力，沿若正常的发育途径，形成具有特定结构和功能的细胞C二、组织培养的类型，不同分类依据（根据培养材料不同）可分为植株培养，胚胎培养，器官培养，组织或愈伤组织培养.细胞或原生质休培养5类：（根据培养目的）可分为试管嫁接，试管受精，试管加倍，试管育种等：（根据培养方法）可分为平板培养，微室培养，悬浮培养，单细胞培养等：（根据培养过程）可分为初代培养和继代培养：（根据培养基类型）可分为固体培养和液体培养。

三、三个发展阶段的关键人物1,haberlandt-一于1902年提出植物细胞全能性理论，被称为“组织培养之父”。

2,white—于1943年出版《植物组织培养手册》。

3,murashine和skoog -- 在1962年筛选出MS培养基。

四、植物全能性表达的过程培养一►脱分彳~再分化一培养五、组织培养的特点：1、植物基础学科研究的良好系统。

2、生物技术的基础。

3、经济高效.管理方便，利于自动化。

4、技术含量高，实验误差小，人工控制能力强。

5、生长周期短，生长速度快，实验重复性好。

6、实验材料经济，来源单一。

六、缺点：需要设备负复柴，投入资金多，电能消耗大：对人员技术水平要求高，对实验场所要求也高，不能代替田间试验。

第二章植物组织培养设备与培养条件一、实验室的组成及主要仪器和设备准备室：干燥箱，高压灭菌锅，电子天平，酸度计，水浴锅，冰箱。