茯苓多糖提取分离的方法PPT课件

（2）去蛋白
常用的去除多糖中蛋白质的方法有：Sevag法、三氟三氯乙烷法、三氯 醋酸法，这些方法的原理是使多糖不沉淀而使蛋白质沉淀，其中Sevag 方法脱蛋白效果较好，它是用氯仿：戊醇或丁醇，以4：1比例混合，加 到样品中振摇，使样品中的蛋白质变性成不溶状态，用离心法除去。
Sevage 法：利用蛋白质在三氯乙烷等有机溶剂中变性的特点，将提取 液与 Sevage试剂[氯仿：正丁醇=5：1（V/V）]5：1 混合，振荡，离心， 变性后的蛋白质介于提取液与 Sevage 试剂交界处。此法的优点是条件 温和，不会引起多糖的变性。
若样品分数多， ⑤ 若样品分数多 ， 可将索氏提取器串联起来同时 使用。 所用乙醚应不含过氧化物、 水分及醇类。 使用 。 所用乙醚应不含过氧化物 、 水分及醇类 。 过氧化物的存在会促使脂肪氧化而增量， 且在烘 过氧化物的存在会促使脂肪氧化而增量 ， 烤提脂瓶 时残留过氧化物易发生爆炸事故。 烤提脂 瓶 时残留过氧化物易发生爆炸事故 。 水分 及醇类的存在会因糖及无机盐等物质的抽出而增 量。 过氧化物检查方法： 取乙醚10ml加入 100g/l 10ml 加入100 过氧化物检查方法 ： 取乙醚 10ml 加入 100g/l 碘化钾溶液2ml，用水振摇放置1min， 碘化钾溶液2ml， 用水振摇放置1min， 若碘化钾层 出现黄色证明有过氧化物存在。 出现黄色证明有过氧化物存在 。 此乙醚需经处理 后方可使用。 后方可使用。 乙醚的处理：于乙醚中加入1 10~ 20体积的 乙醚的处理 ： 于乙醚中加入 1/10~1/20体积的 200g/L 硫代硫酸钠溶液洗涤， 再用水洗， g/L硫代硫酸钠溶液洗涤 200g/L 硫代硫酸钠溶液洗涤 ， 再用水洗 ， 然后加 入少量无水氧化钙或无水硫酸钠脱水， 于水浴上 入少量无水氧化钙或无水硫酸钠脱水 ， 进行蒸馏。 蒸馏时， 进行蒸馏 。 蒸馏时 ， 水浴温度一般调至稍高于溶 剂沸点， 能达到烧瓶内沸腾即可。 剂沸点 ， 能达到烧瓶内沸腾即可 。 弃去最初及最 后的1 10馏出液 收集中间馏出液备用。 馏出液， 后的1/10馏出液，收集中间馏出液备用。

致谢: 本文得到 成都地 奥制 药公 司的 刘忠 荣博 士、吴 洽庆博士大力帮助; 得到成都中 医药大学 裴瑾博士的 热心 指导, 在此一并致谢。
参考文献:
பைடு நூலகம்
[ 1] K anayam a H, A dach i N, Fuka i Y. Yakugaku Zasshi [ J] , 1986, 103( 3): 199- 205.
11 00
化学研究与应用
第 18卷
加入 110m ol /L 的 N aOH 溶液 100m L, 搅拌, 于上述 相应温度下静置提取 4h, 6000r /m in离 心 15m in。 合并两次上清液, 加 10% 乙酸中和至 pH = 6, 加 3 倍 量 的 95% 乙 醇, 冷 藏 12h。 6000r/m in 离 心 20m in, 收集沉淀, 低温干燥得茯苓碱 溶性胞内粗 多糖。将茯苓碱 溶性 胞内 粗多糖 依次 用无 水乙 醇、丙酮、乙醚洗涤, 低温干燥, 得茯苓碱溶性胞内 多糖。用电子天平精确称量。
N um be r o f test
Con tents of a lka li resolvab le endoce lluar
A verage
1
2
3
con ten t
21950 21893 21 917 21920
po ly sacchar ide( g /L)
2. 3 茯苓发酵液中胞外多糖含量和胞内多糖 含 量的比较
Por ia cocos in d ifferent concen trations of N aOH
concentrations o fN aOH (mo l/L ) 01 5 0175 11 0 115 Contents of a lka li

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四、结论与展望
茯苓多糖作为一种天然的生物活性物质，具有广泛的应用前景。在医药领域 中,茯苓多糖对机体各方面表现出多种生理功能,具重要的药理活性,在临床治疗 及药物开发方面展现出了广阔的前景；在食品领域中,茯苓多糖可以作为食品添 加剂改善食品口感和质地,同时也可以作为生产保健食品的原料；
在化妆品领域中,茯苓多糖具有保湿和抗氧化等作用,可以用于生产化妆品提 高产品的性能。然而,对于如何充分发挥其潜在的药用价值,还需要进行深入的研 究与探讨,在实际应用过程中也需要不断进行工艺优化以提高产品的质量和产量, 使茯苓这一传统中药中的有效成分更好地服务于人类健康和生活。
3、超声波辅助法
超声波辅助法是一种利用超声波的振动作用加速茯苓中多糖成分的释放的方 法。该方法具有操作简单、提取时间短、提取效率高等优点。在超声波的作用下， 茯苓组织的细胞壁被破坏，多糖成分更容易释放出来。同时，超声波的振动作用 还可以加速溶剂的渗透和扩散，进一步提高了提取效率。然而，超声波辅助法也 存在一些缺点，如超声波的噪音较大、对设备的要求较高等。
二、茯苓多糖的提取纯化方法
1、溶剂提取法
溶剂提取法是提取茯苓多糖的常用方法之一。该方法主要是利用多糖在不同 溶剂中的溶解度不同，将多糖从茯苓中分离出来。常用的溶剂包括水、醇类和酮 类等。其中，水是常用的提取溶剂，因为多糖在水中的溶解度较大。然而，水提 取法也存在一些缺点，如提取时间长、需要大量的水等。因此，一些研究人员尝 试使用其他溶剂进行提取，如醇类和酮类等。
多糖纯化技术
多糖的纯化技术主要包括沉淀法、色谱法、电泳法和膜分离法等。其中，沉 淀法操作简单，但纯化效果较差；色谱法能够实现高效分离，但成本较高；电泳 法能够分离出具有电泳活性的多糖，但不适用于大规模生产；膜分离法能够实现 分子级别的分离，但膜的制备和清洗成本较高。近年来，一些新的纯化技术，如 亲和色谱法、免疫分离法和纳米膜分离法等也逐渐应用于多糖的纯化。