第九章 维生素及辅酶类药物的分析

脂溶性 水溶性
VitA、D2、D3、E、K1等 VitB族(B1、B2、B6、B12) VitC、叶酸、烟酸、烟酰胺
VitM
VitPP
二、辅酶的种类与作用
1.焦磷酸硫胺素(TPP)
焦磷酸硫胺素是脱羧酶、缩合酶等的辅酶，它的前 体是硫胺素 ( 维生素 B1) 。 TPP 涉及糖代谢中羰基碳的 合成与裂解反应的辅酶及α－羟酮的形成，真正的作 用是稳定羰基碳（过渡态中）的负电荷。
•
5. CoQ(泛醌) • 辅酶Q又称为泛醌，广泛存在于动物和细菌的线 粒体中，其结构为：
O CH3O CH3O O CH3 (CH2CH C CH2)nH CH3
n=6-10
辅酶Q的活性部分是它的醌环结构，主要功能是作 为线粒体呼吸链氧化-还原酶的辅酶，在酶与底物 分子之间传递电子。
第二节 维生素类药物的分析
VitC 戊糖 糠醛 或盐酸 50℃ 吡咯 蓝色
三氯醋酸 脱水
CH 2 OH H C OH O HO
CH 2 OH H C OH O HO H
H2O
O
O OH
O
OH C C O O CHOH 3 CH 2 OH
- CO2
HC O
CHOH 3
CH 2 OH
- H2O
第九章 维生素及辅酶类药物的分析
一、概述
主 要 内 容
二、维生素类药物的分析
三、辅酶类药物的分析
第一节 概述
• 一、维生素的分类与作用 • 维生素（ Vitamins ）是维持人类机体正常代谢功能 所必需的一类活性物质，主要用于机体的能量转移 和代谢调节，体内不能自行合成，须从食物中获得。 • ChP2010 收载了维生素 A 、 B1 、 B2、 B6 、 B12 、 C 、 D2 、 D3、E、 K1、叶酸、烟酸、烟酰胺、泛酸钙等原料 及制剂共46个品种。
H

CH 2 O
CH 2 OH H C OH O O
O O
+ 2 HI
操作方法
取本品约0.2g，精密称定，加新 沸过的冷水100ml与稀醋酸10ml使溶解， 加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液 （0.1mol/L）滴定，至溶液显蓝色，在30 秒内不褪。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相当 于8.806mg的C6H8O6。
3’,5’-ADP
4.维生素B12辅酶
•
维生素B12又称为氰钴胺素。维生素B12分子中与Co+ 相连的CN基被5’-脱氧腺苷所取代,形成维生素B12 辅酶。
•
维生素B12辅酶的主要功能是作为变位酶的辅酶,催
化底物分子内基团(主要为甲基)的变位反应。如分 子内重排或甲基转移反应。 广泛来源于动物性食品,特别是肉类和肝中含量丰 富。人和动物的肠道细菌也能合成。
• VitPP 广泛存在于自然界，尤以酵母、花生、肉类 中含量丰富，体内Trp能转变为Vpp
NH2 CONH2 O O N
+ -
N N
N
O
CH2OPOPOCH2 N O O O OH OH
OH
OH(OPO3H2)
• 3.辅酶A
• 辅酶 A 主要起传递酰基的作用 , 是各种酰化反应 的 辅 酶 ,-SH 携 带 酰 基 , 故 通 常 以 CoASH 表 示 ， CH3-CO-SCoA。
NH2 N H3C N CH2 Cl + N S
-
CH3
O OH
O OH
CH2CH2 O P O P OH
TPP辅酶参与的反应
1.α－裂解反应
2.α－缩合反应
3.α酮转移反应
O CH3 C COOO
丙酮酸脱羧酶
O CH3 C H + CO2
O OH 乙酰乳酸合成酶 CH3 C COO- +CH3 C COOCH3 C C-COO- + CO2 CH3
（戊糖） (糠醛)
50℃
N
O
CHO
O
CH
N H
N
（蓝色）
(吡咯)
3.紫外分光光度法
在盐酸液中0.01mol/L
max 243 nm
1% E1 cm 545 ~ 585
（二）检查
（三）含量测定
1.容量分析法
（1）碘量法
原理
VitC I 2 去氢抗坏血酸 I
指示剂 淀粉指示液
Cl
VitC
OH Cl
Vit C
O
N 玫瑰红 有氧化性
H+
去氢Vit C
Cl H N
HO
OH Cl
无色 还原型酚亚胺
操作方法
样品 HPO3 HAc 二氯靛酚液 V样 V空 空白
自身指示终点法
玫瑰红 蓝色
OH
H
无色
还原
• CoA 在糖、脂、 AA 代谢 ,体内重要物质如乙酰胆碱、 卟啉和肝糖原等的合成中起重要作用。酰基载体蛋白 与脂肪酸的合成关系密切。 • 泛酸在酵母、肝、肾、蛋、米糠、豌豆中含量丰富， 蜂王浆中含量最多。CoA广泛用于各种疾病的重要辅 助药物。
磷 酸 泛 酰 巯 基 乙 胺
CH3 OH O CH2 C O O O P O P OH O HO P OH O OH O CH2 N O N OH N CH C NH2 N NH CH3 O CH2 CH2 C NH CH2CH2SH
OH CH2OH H OH O Cl O + Cl H N O O CH2OH OH O O Cl OH Cl
+
N H
HO
OH
O 玫瑰红色
OH 无色
(3)与碱性酒石酸铜反应
碱性酒石酸铜 Cu O 红
(4)与KMnO4反应
VitC
KMnO Mn
VitC

2.利用糖类的性质
O
2.VitPP和烟酸胺辅酶 Vit PP包括烟酸和烟酸胺，属吡啶衍生物。
COOH N CONH2 N
NAD+
NADH NADPH
烟酸胺合成
NADP+ 辅酶
• NAD+ ( 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，又称辅酶 I) 和 NADP+(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸,又称辅酶II )
• 它是氧化还原酶（脱氢酶）的辅酶，起着递氢和递 电子的作用，同时NAD+又是呼吸链递氢过程中的 一员，参与能量代谢，也是DNA连接酶的辅酶。
CH2OH H OH O H O + 2 AgNO 3 O O CH2OH OH O O + 2 HNO 3 + 2 Ag
HO
OH
（2）2，6二氯靛酚反应
2,6-二氯靛酚为一染料，其氧化型在酸性介质中为玫 瑰红色，碱性介质中为蓝色。与维生素C作用后生成还 原型无色的酚亚胺。
本品→加水溶解→2,6二氯靛酚试液→颜色消失
一、维生素C( Vit C)
H
6
5
CH2OH O OH O
1 3 2
C
4
HO
OH
维生素类药，ChP2010收载维生素C、维生素C片、维生素 C泡腾片、维生素C泡腾颗粒、维生素C注射液、维生素C 颗粒、维生素C钙、维生素C钠。
COONa(H) CH2OH H C O OH O OH H CH2OH C C C O OH-(H+) H O O OH H
C M 0.1 176.13 T n 2 8.806 （mg / ml）
N a 2 S2 O5 + H 2 O
CH 3COCH 3
N a H SO3 HC HO
CH 3 CH 3
C
SO3 Na
OH
OH
H 2C S O 3N a
（2）2，6 - 二氯靛酚钠滴定法 原理
， 二氯靛酚 酚亚胺
-2H +2H
O
O
OH
HO
O
H2O
C C
HO
CH2OH
L-抗坏血酸
L-去氢抗坏血酸
L-二酮古罗糖酸
有生物活性
有生物活性
无生物活性
（一）鉴别试验
1.利用其还原性 硝酸银（银镜） 2.6-二氯靛酚(褪色） 高锰酸钾（褪色） 亚甲蓝（蓝色褪去） 磷钼酸（钼蓝） 斐林氏溶液（红色氧化亚铜）
（1）与硝酸银反应 本品→加水溶解→加硝酸银试液 →银黑色沉淀（ChP、BP采用）