双波长薄层色谱扫描法测定蒲公英总黄酮含量(精)
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蒲公英炮制前后总黄酮含量差异研究巨红叶;葛心怡;焦莹;赵波;刘长乐;宋逍【期刊名称】《吉林中医药》【年(卷),期】2018(38)10【摘要】目的采用紫外分光光度计法测定蒲公英炮制前后总黄酮的含量的变化,为临床上采用蒲公英及蒲公英炭治疗胃炎、胃溃疡的效果提供科学依据.方法以乙醇浓度,超声时间,超声温度,超声功率为影响因素,设计正交试验L9(34)对蒲公英及蒲公英炭中的黄酮进行提取;用紫外分光光度计测定总黄酮含量并确定最优超声方法;并比较蒲公英及蒲公英炭的总黄酮含量. 结果在提取溶剂为65%乙醇,超声功率为462 W,超声时间为35 min,超声温度为60 ℃的条件下,蒲公英与蒲公英炭提取率最高,分别为3.9%和2.9%;蒲公英及蒲公英炭中芦丁在0.017 2~0.062 7 mg/mL 具有良好的线性关系,回归方程为C = 0.091A - 0.001,r = 0.997 5;蒲公英供试品溶液与蒲公英炭供试品溶液的稳定性RSD分别为0.42%和0.60%;重复性RSD分别为0.85%和0.70%,精密度为1.04%,表明该工艺稳定可行,准确性高.结论蒲公英炮制后其总黄酮的含量明显小于蒲公英原药材,就总黄酮含量这一指标来说,临床上治疗胃炎、胃溃疡应优先考虑选用蒲公英原药材.%Objective This experiment by ultraviolet spectrophotometer method, the change of the content of total flavonoids determination of dandelion before and after processing, for clinical using dandelion raw medicinal herbs to treat gastritis, gastric ulcer or dandelion charcoal will provide a scientific basis for treatment of gastritis, gastric ulcer. Methods Ethanol concentration, ultrasonic time, ultrasonic temperature, ultrasonic power for influence factors, the designof orthogonal test L9(34) of dandelion extract and flavonoids of dandelion carbon; Flavonoids content calculated to determine the optimal ultrasonic method; And the optimal method of ultrasonic extraction of dandelion and a comparative study on flavonoids content of dandelion carbon. Results The extraction solvent was 65% ethanol, ultrasonic power is 462 W, ultrasonic time is 35 min, ultrasonic temperature is 60℃ under the condition of ultrasonic, dandelion and dandelion charcoal withdrawal rate is highest, at 3.9% and 2.9% respectively; Dandelion and rutin in dandelion carbon at 0.017 2~0.062 7 mg/mL has A good linear relationship, the regression equation for C = 0.091 A - 0.001, r = 0.997 5; Dandelion and dandelion carbon of test sample solution stability of test sample solution RSD were 0.42% and 0.60% respectively; Repeatability RSD were 0.85% and 0.70% respectively, the precision is 1.04%, show that the process stability is feasible and high accuracy. Conclusion Dandelion processing after the flavonoids content is much smaller than the dandelion, total content of flavonoids as the index for the clinical treatment of gastritis, gastric ulcer priority should be given to choose the dandelion raw medicinal materials.【总页数】4页(P1209-1212)【作者】巨红叶;葛心怡;焦莹;赵波;刘长乐;宋逍【作者单位】陕西中医药大学药学院,陕西咸阳 712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳 712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳 712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳 712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳 712046;陕西中医药大学药学院,陕西咸阳 712046【正文语种】中文【中图分类】R94【相关文献】1.荧光法测定蒲公英中总黄酮的含量 [J], 高生平;吴晓红;张雅欣;张玉婷2.蒲公英总黄酮含量测定及对小鼠体液免疫功能的影响 [J], 孙珊珊;张千;丁林;刘树玲;刘玉国;李艳芝3.蒲公英复方制剂中总黄酮含量的测定 [J], 刘春辉;高媛4.不同遮荫处理对蒲公英生长及总黄酮含量的影响 [J], 谢小翌;张喜春5.蒲公英炮制中总黄酮含量变化及对胃炎治疗分析 [J], 周学东;陈艳;林瑞因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
蒲公英总黄酮含量测定
金京玲;金南革;金永日;金哲洙
【期刊名称】《延边大学医学学报》
【年(卷),期】2001(24)2
【摘要】[目的 ]探讨测定蒲公英总黄酮含量的方法 .[方法 ]利用比色法 ,以芦丁为对照品 ,分别测定东北蒲公英和碱地蒲公英的总黄酮含量 .[结果 ]东北蒲公英总黄酮含量为 5 3 3 % ,碱地蒲公英总黄酮含量为 4 16% .[结论 ]蒲公英含有丰富的黄酮类物质 ;东北蒲公英具有进一步研究和开发利用的价值 .
【总页数】3页(P100-102)
【关键词】黄酮类;比色法;植物;药用;蒲公英
【作者】金京玲;金南革;金永日;金哲洙
【作者单位】延边大学医学院生物免疫研究所;延边大学医学院生理学教研室;延边大学医学院附属医院消化内科
【正文语种】中文
【中图分类】R284.1
【相关文献】
1.荧光法测定蒲公英中总黄酮的含量 [J], 高生平;吴晓红;张雅欣;张玉婷
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3.蒲公英总黄酮含量测定及对小鼠体液免疫功能的影响 [J], 孙珊珊;张千;丁林;刘
树玲;刘玉国;李艳芝
4.双波长薄层色谱扫描法测定蒲公英总黄酮含量 [J], 王亚娟;卢敬华;于铃
5.蒲公英复方制剂中总黄酮含量的测定 [J], 刘春辉;高媛
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摘要】黄酮类化合物是一类植物次生代谢产物,因其在医药、食品及化工方面有着重要的研究价值而得到了广泛关注。
各种用于研究黄酮类化合物的分离分析技术也在迅速发展,薄层色谱技术仍以其快速、简便、准确度高等优点而成为鉴别黄酮类化合物的首选方法。
文章综述了薄层层析技术在植物黄酮类化合物中的应用。
【关键词】黄酮类化合物;薄层层析;分离分析技术Application of Thin layer Chromatography in Flavonoids of PlantsTANG Li juan,LIU Wei wei,SHI Da hua,ZHAO Yue qiang,TAO Chuan zhouDept. of Chemical Engineering ,Huaihai Institute of Technology ,Lianyungang 222005 ,ChinaAbstract∶Flavonoids which are a kind of secondary plant metabolites have been widely investigated for their potential of medicine,food and chemical engineering. And separation analysis technologies applied in flavonoids are developing rapidly. Thin layer chromatography is firstly selected in identification of flavonoids for the rapid,simple and highly accurate advantages. Application of thin layer chromatography in flavonoids of plants was reviewed in this paper.Key words∶Flavonoids;Thin layer chromatography;Separation analysis technologies黄酮类化合物属植物多酚化合物,是植物次生代谢产物,该类化合物在医药、食品及化工方面有着重要的研究价值,已报道其有抗氧化性、抗炎抗菌、抑制血小板凝集及肥大细胞组胺释放等作用,在癌症及心脏病等疾患上也显示出治疗潜力,因其在花色素中的存在而可能用来代替毒性合成颜料[1]。
两面针药材薄层色谱分析两面针是一种常见的中药材,其具有清热解毒、祛风止痛等功效,在临床中被广泛应用。
为了对其进行分析和定量,可以采用多种分析方法,其中薄层色谱是一种简单、快速、经济的方法。
1. 实验目的本实验的目的是采用薄层色谱法对两面针的成分进行分离和鉴定,并通过比色法定量成分含量。
2. 实验原理薄层色谱是一种在薄层材料表面上分离化合物的方法。
其原理是利用固定在薄层材料表面的固定相和涂在薄层材料表面上的涂层,使样品中的化合物在这些相中发生分离。
薄层色谱具有分离效率高、手操作简单、分析速度快等优点,被广泛应用于化学分析中。
本实验中采用硅胶薄层色谱分离两面针中的化合物,并采用比色法对分离得到的目标化合物进行定量分析。
比色法的原理是根据物质在吸收电磁波时的颜色深浅程度,来推断物质的量,一般使用紫外分光光度计进行测量。
3. 实验步骤(1)制备样品的甲醇提取液:取2g干燥的两面针,加入50ml甲醇,超声混合5min,静置30min并过滤,将提取液转移至干燥皿中,保持60℃加热使甲醇完全挥发后即可。
(2)检测试样:将1μl样品溶液均匀地点于硅胶薄层上,在20min至30min内待薄层完全干燥。
(3)薄层色谱分离:将硅胶薄层放置于走相槽中,走相液为正己烷-乙酸乙酯-醋酸(10:2:0.1),走相距离为10cm左右,待色谱结束后,视化;(4)比色法定量:将目标化合物从薄层中刮取下来,溶于甲醇,经过紫外分光光度计测量其最大吸收波长和吸光度,并根据标准曲线计算出其含量。
4. 实验结果经过薄层色谱分离和比色法定量后,得到两面针样品中黄酮苷、异岩龙胆苦苷、青蒿素的含量分别为0.007mg/g、0.012mg/g、0.005mg/g。
5. 实验结论本实验通过薄层色谱分离和比色法定量的方法,成功地分离和测定了两面针样品中的黄酮苷、异岩龙胆苦苷、青蒿素的含量。
由此可知,在有限的条件下,薄层色谱法是一种有效的方法,能够对中药材进行快速分析和定量。
蒲公英复方制剂中总黄酮含量的测定
刘春辉;高媛
【期刊名称】《中国饲料》
【年(卷),期】2014(000)010
【摘要】本实验以芦丁为对照品,采用分光光度法对蒲公英复方制剂中总黄酮含量的测定方法进行方法学研究,结果表明,当芦丁含量在0.2006 ~ 1.2036mg范围内与吸光度呈良好线性关系,回归方程为:A=0.5721C-0.0029(r=0.999),平均回收率为97.42%,RSD为1.56%.该方法准确、经济、操作简便,是一种简单、有效的蒲公英复方制剂中总黄酮含量的测定方法.
【总页数】2页(P40-41)
【作者】刘春辉;高媛
【作者单位】北京康华远景科技有限公司,北京100085;北京康华远景科技有限公司,北京100085
【正文语种】中文
【中图分类】R816.17
【相关文献】
1.荧光法测定蒲公英中总黄酮的含量 [J], 高生平;吴晓红;张雅欣;张玉婷
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礼西;邹锡明
5.复方制剂水煎液中总黄酮含量测定方法 [J], 王曙;贾运涛;孙毅毅
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蒲公英药物的鉴别方法和含量测定蒲公英药物的鉴别方法和含量测定蒲公英药物的鉴别方法和含量测定理化鉴别(1)取本品甲醇提取液1ml, 置水浴上蒸干.用冰醋酸1ml溶解残渣, 加入醋酐一浓硫酸(19∶1)试剂1ml, 观察颜色由黄色很快变为红色→紫色→青色→污绿色.(检查甾醇类)(2)取本品粉末1g, 加乙醇10ml冷浸过夜, 滤过.滤液蒸干, 残渣加稀盐酸4ml溶解, 滤过.取滤液1ml, 加改良碘化铋钾试液2滴,产生橙色沉淀.(检查水溶性生物碱)(3)薄层色谱①取本品粉末250g, 加乙醇500ml, 加热回流8小时, 减压回收乙醇至干, 加10%氢氧化钾乙醇液30ml皂化3小时, 加水60ml稀释, 加稀盐酸调至中性, 加乙醚10ml萃取(同量萃取3次).再用一定量水洗3次, 用无水硫酸钠脱水, 回收乙醚浓缩后作为供试品溶液.用β-谷甾醇、α-香树脂醇的乙醇溶液作为对照品溶液.取供试品溶液和对照品溶液分别点样于同一硅胶G薄板上, 用氯仿展开, 展距16.5cm.取出晾干.喷以5%磷铝酸的乙醇溶液, 烘烤加热后, 可见供试品色谱在与对照品色谱的相度位置上, 显相同的蓝色斑点.②取本品粉末50g, 加乙醇250ml, 于索氏提取器中回流提取, 回收乙醇2/3后, 加少量蒸馏水滤过.滤液浓缩蒸干, 加甲醇1ml溶解后作为供试品溶液.另以胆碱的甲醇溶液作为对照品溶液.取供试品溶液与对照品溶液, 分别点样于同一硅胶G薄层板上.用正丁醇-乙酸-水(4∶l5)展开, 展距16.5cm.取出晾干.喷以碘化铋钾溶液后, 则供试品色谱在与对照品色谱的相应位置上显相同的橘红色斑点.成分分析研究进展:略含量测定1. 抗菌:50%鲜草汁用平板挖沟法, 对金黄色葡萄球菌、伤寒杆菌有抑制作用;50%全草煎剂用平板挖沟法, 对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌有抑制作用。
中药蒲公英花中总黄酮的分离纯化研究摘要】目的:研究确定分离纯化中药蒲公英花中总黄酮的实验条件。
方法:应用D-101大孔吸附树脂对蒲公英花中的总黄酮进行精制纯化,确定最好的精制纯化条件。
结果:最佳精制纯化条件pH3.0,2BV上样量,2BV/h流速。
结论:在最佳条件下,蒲公英花中总黄酮的分离纯化效果最好,可为蒲公英花中总黄酮的分离纯化提供更完善的科学依据。
【关键词】蒲公英总黄酮分离纯化【中图分类号】R284.2 【文献标识码】B 【文章编号】1672-5085(2014)05-0278-02【Abstract】 Objective: To study the separation and purification of total flavonoids determined experimental conditions of Chinese medicine dandelion flowers. Methods: the total flavonoids by macroporous resin D-101 to dandelion flowers was purified, determine the best purification the purification condition. Results: the optimum purification conditions of pH3.0, 2BV, sample volume, flow rate of 2BV/h. Conclusion: under the optimal conditions, total flavone from dandelion flowers best purification purification effect, provide better scientific basis for total flavonoids from dandelion flowers.【Key words】dandelion; total flavonoids; separation and purification蒲公英(Taraxacum mongolicum Hand-Mazz),性寒,味甘苦,有利湿退黄、消肿散结、清热解毒的功效,从蒲公英中提取分离出的黄酮类化合物,有治疗乳痈、小便淋沥涩痛、湿热黄疸、肺痈咳痰、痈肿疔毒的功效[1]。
薄层扫描法测定药物的含量一、实验目的1.掌握处理样品的方法和思路。
2.掌握薄层扫描法测定药物含量的原理和实验操作。
二、仪器与试剂1.仪器Mettler AL204电子天平双波长扫描仪HHS型电热恒温水浴锅分液漏斗规格:125mL、250mL容量瓶规格:10mL、25mL、50mL 、100mL刻度移液管规格:1mL、2mL、5mL、10mL圆底烧瓶规格:50mL、100mL、250mL硅胶G(薄层层析用)玻璃板铺板器锥形瓶规格:250mL 滤纸研钵球形冷凝管2.试剂甲醇乙醇二氯甲烷醋酸等均为分析纯三、实验原理薄层扫描法是以一定波长的光照射展开后的薄层色谱板,测定其对光的吸收或所发出的荧光,进行定量分析的方法。
其原理与双波长分光光度计相似,从光源发出的光,通过两个单色器分光后,成为不同波长的λ1和λ2,斩光器使它们交替地照射到薄层上,经透射或反射后分别由光电倍增管接收,再输出电讯号,由对数放大器变换成吸光度,记录下的讯号是λ1和λ2两波长吸光度之差。
选择斑点中化合物的吸收峰波长作为测定波长、选择化合物吸收光谱的基线部分,即化合物无吸收的波长作为参比波长。
用一定波长的光束对薄层板进行扫描,记录其吸光值随展开距离的变化,得到薄层色谱扫描曲线,曲线上的每一个色谱峰相当于薄层上的一个斑点,色谱峰高或峰面积与组分的量之间有一定的关系,比较对照品与样品的峰高或峰面积,可得出样品中待测组分的含量。
四、实验内容实验题目:益新颗粒(人参皂苷Rg1)保肝灵颗粒(黄芪甲苷)脑复清胶囊(阿魏酸)胃舒胶囊(盐酸小檗碱)扑感片(马来酸氯苯那敏)颈复康冲剂(芍药苷)1.处理样品方法的设计要求:选择任意一项实验题目,查阅文献资料,设计合理的提取分离纯化样品的实验方法(至少两种方法)。
2.薄层扫描法测定主成分含量要求:从设计的多种处理样品方法中选择最优方案,此方案所处理的样品,选择适宜展开系统展开后,采用薄层扫描法测定时,杂质对主成分无干扰,得到满意的含量测定结果。
【摘要】目的:建立蒲公英中总黄酮的含量测定方法。
方法:应用双波长薄层色谱扫描法,以芦丁为对照品,测定波长λs=278nm,参比波长
λR=356nm,测定蒲公英中总黄酮的含量。
结果:回归方程为
Y=873851X+80.593,r=0.999,RSD=2.6%,蒲公英总黄酮含量为4.236%。
结论:用该方法测定蒲公英中总黄酮的含量,操作简便,结果可靠,重复性好。
【关键词】双波长薄层色谱扫描法总黄酮芦丁
蒲公英属菊科类为植物蒲公英,是常用的中药类抗菌、抗真菌的药物,具有清热解毒、利胆保肝、医治乳痈疔疮等药理作用。
主要成分含有蒲公英甾醇、绿原酸、总黄酮等成份,现已制成注射剂、片剂、糖浆等不同剂型,广泛应用于人与畜各科多种感染性炎症,均有良好疗效。
这种中草药价廉物美,药源丰富,应当进一步开发,做到物尽其用。
针对其总黄酮的含量,我们采用双波长薄层色谱扫描法对其进行测定,现报道如下。
1 仪器与试剂
1.1 仪器
CS930型双波长飞点式薄层扫描仪(日本岛津);高硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂生产);旋转蒸发仪RE52A型(上海亚荣生化仪器厂);5ul微量进样器(上海医用激光仪器厂)。
1.2 试剂
芦丁对照品(中国药品生物制品检定所);蒲公英(产地为内蒙,由内蒙古成大方圆有限公司饮片分装);其它试剂均为分析纯。
2 薄层分析与鉴定
2.1 对照品溶液的配置[1]
精密称取芦丁对照品25mg,置50ml容量瓶中,以85%乙醇溶解并加至刻度,精密吸取10ml置20ml容量瓶中,用60%乙醇稀释至刻度,摇匀,备用。
2.2 供试品溶液的制备
精密称取内蒙蒲公英(提前粉碎研磨成细粉)10g,用13倍量药材的85%乙醇加热回流2次,每次1小时[2],回收蒸发乙醇至干(旋转蒸发仪),残渣加入50ml热水溶解,先用石油醚(50,50,30ml)萃取3次,要下层液(除去叶绿素、胡萝卜素等脂溶性色素),再用正丁醇(50,50,30ml)萃取3次,要上层液(除去蛋白质、多糖类等水溶性杂质),合并正丁醇提取液用85%乙醇30ml溶解,过滤至50ml容量瓶中,再用85%乙醇洗涤滤纸至刻度,摇匀。
精密量取10ml置20ml容量瓶中,加60%乙醇至刻度,摇匀,备用。
2.3 分离与鉴定
分别取供试品溶液和对照品溶液各6ul,点于同一硅胶G薄层板上,以醋酸乙酯甲酸水(体积比8:1:1)为展开剂展开[3],取出,晾干。
3 含量测定
3.1 扫描条件[4]
反射锯齿扫描,测定波长为λs=278nm,参比波长λR=356nm,背景校正ON,灵敏度中,狭缝1.2mmⅹ1.2mm,SX=3。
3.2 标准曲线制备
取芦丁对照品溶液,以不同点样量(2.0,4.0,6.0,8.0,10.0ul)点于同一硅胶G板上,相同展开剂展开,取出,晾干后进行扫描,以峰面积积分
值为纵坐标,点样量为横坐标,绘制标准曲线,回归方程为
Y=873851X+80.593,r=0.999。
3.3 样品测定
取供试品溶液和对照品溶液各6ul点于同一硅胶G薄层板上,按相同薄层层析条件展开,扫描测定的结果,供试品溶液的峰面积积分值为2301.454,测得量为0.00254mg,按药材计算,总黄酮含量为0.4236%。
3.4 精密度测定
精密吸取同一样品溶液6ul,同板点5个点,依照薄层层析的条件醋酸
乙酯甲酸水(8:1:1)展开,扫描测得其峰面积积分值分别为
2488.456、2602.963、2578.821、2644.531、2499.685 ,其平均值为
2562.8912,RSD=2.6%。
3.5 回收率测定
精密称取蒲公英用品1g,共15份,同2.2项下的操作一样,精密吸取
供试品溶液1.5ml,5份为1组,共3组。
按低、中、高分别加入芦丁对照品溶液0.8、1.6、2.4ml,各自混匀,加60%乙醇定容至5ml,取6点样,展开,晾干,扫描测定结果见表1。
表1 回收率测定结果(略)
4 讨论
我们探讨了蒲公英黄酮类物质含量的测定方法,并发现蒲公英中含有丰富的黄酮类物质。
在预实验中曾做过用70%乙醇和用50%乙醇提取,提取3次,每次30分钟,结果其提取效率很低。
在流动相的选择上我们用文献报道[3]的方法分离效果好,配制简单,所以没有尝试自拟的流动相。
对于其药材的质量控制,本实验采用双波长薄层扫描法测定蒲公英中总黄酮含量,方法简便,准确快速。
【参考文献】
1 金京玲,金南革,金永目,等.蒲公英总黄酮含量测定.延边大学医学学报,2001,24(2):100~102.
2 马丽春, 魏凤玲.蒲公英提取工艺优选. 中国中药杂志, 2005 ,30(13):995~997.
3 刘景东, 钱彦丛,等. 薄层扫描法测定槐叶总的芦丁含量. 黑龙江医药, 2003,16(1):17~18.
4 常军民,高宏,王青,等. 双波长薄层扫描法测定天山大黄中大黄素的含量.新疆医科大学学报,2003,26(16): 601.。