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一、目的：保证流式细胞仪检测外周血淋巴细胞上HLA-B27表达量检验的工作质量，旨在保证HLA-B27检测的正确操作程序和控制检测结果的精确度。
二、修改程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任），方可改动。
三、适用范围：外周血中T淋巴细胞HLA-B27表达量检测。
四、溯源：Anti-HLA-B27 Kit(美国BD Biosciences公司；CAT:340183)。
五、实验原理：HLA-B27属于1型MHC基因。
基本上表达在机体所有有核细胞上，特别是淋巴细胞表面有丰富的含量。
使用荧光定量标准微球，校正HLA-B27实验条件后，测定样本中T淋巴细胞HLA-B27表达水平。
若HLA-B27表达水平大于标准微球设定MARK，则为阳性结果；若HLA-B27表达水平低于标准微球设定MARK，则为阴性结果。
六、主要试剂：Anti-HLA-B27 Kit(美国BD Biosciences公司；CAT:340183)，其中包括：1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE2、HLA-B27 Calibration beads3、FACS Lysing Solution七、实验操作：抗凝真空采血管，抽取静脉血2ml。
1、标本采集：使用EDTA-K22、染色和固定细胞：（1）标本管编号A，取一只流式专用管A1。
（2） A1管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 30ul。
（3） A1管中再加入全血50Ul，混均。
（4）置室温，避光孵育15min。
（5）加入FACSLysing溶血液2.0ml，置室温，避光孵育10min。
（6） 300g离心5min，弃上清液。
（7） PBS洗涤细胞两次，300g离心5min，弃上清液。
（8） 1%多聚甲醛0.5mL。
3、上机检测；分析结果；打印实验报告。
八、参考值：HLA-B27:阴性九、临床意义：HLA-B27抗原表达与强直性脊椎炎发病具有高度的疾病相关性。
论著·临床辅助检查CHINESE COMMUNITY DOCTORS中国社区医师2020年第36卷第10期人类白细胞抗原(HLA)是人类主要组织相容性复合体(MHC)的表达产物，在整个人体免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，能调节人体的免疫应答功能。
人白细胞抗原B27(HLA-B27)属于1型组织相容性复合体，基本上表达在人类机体的所有有核细胞上，尤其是在淋巴细胞表面含量丰富。
HLA-B27属于HLA-B 的1类抗原，存在于所有有核细胞表面。
本文就HLA-B27检测结果进行探讨。
资料与方法收治进行HLA-B27检测的患者759例，男373例，女386例；年龄17～75岁。
标本采集：使用EDTA 抗凝剂的静脉血采血管，静脉血室温20～25℃静置保存，勿剧烈震荡。
试剂与仪器：①试剂：由深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司提供。
②检测原理：参照试剂说明书。
③仪器：迈瑞BriCyte E6流式细胞仪，离心机。
统计学方法：采用SPSS 10.0软件包进行数据处理。
结果759例患者中阳性198例(26.09%)。
198例阳性患者中，男122例(61.61%)，女76例(38.38%)；年龄10～20岁31例(15.66%)，20～60岁156例(78.79%)，＞60岁11例(5.56%)。
20～60岁156例患者中男96例(61.54%)，女60例(38.46%)。
讨论HLA-B27抗原的表达与强直性脊柱炎(AS)有一定的相关性，特别是检测外周血淋巴细胞中的HLA-B27抗原表达有利于AS 等疾病的辅助诊断。
在AS 的诊断上虽然主要依靠临床表现和影像学检查，但是HLA-B27的实验室检测更有利于AS 的早期诊断。
人类白细胞相关抗原的检测在一些疾病的诊断和人体器官移植中具有重要的临床意义，在AS 患者亲属中发病率比一般人高30倍左右[1]。
在实验室检测中要做好HLA-B27抗原检测的质量控制，检测前必须保证试剂的有效性，做好从标本采集前患者的准备，采集标本后的保存及运输，检测过程的整个环节质量控制，才能保障HLA-B27抗原检测结果的真实可靠性。
HLA-B27与流式细胞术一、检测HLA-B27的意义HLA抗原是人类主要组织相容性复合体（Major Histocompatibity Complex，MHC）的表达产物，在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，调节免疫应答的功能。
根据HLA抗原结构，功能与组织分布的不同，可分为三类：Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原，广泛分布于各组织有核细胞表面，包括血小板和网织红细胞，成熟的红细胞一般不含HLA抗原；Ⅱ类分子为HLA-D/DR、-DP、-DQ系列抗原，主要在B细胞和抗原提呈细胞上表达，这两类抗原都与移植有关，其中Ⅱ类抗原更为重要；Ⅲ类分子为补体成分。
近年来研究HLA与疾病相关性的资料表明，某些疾病的发生率与一些特殊型别的HLA检出率有关，这些病大多是发病机理不明并伴有免疫功能异常和有遗传倾向性的疾病，因此，分析HLA抗原表达情况不仅有助于了解发病机理，对于疾病的诊断、预防和预后判断都有重要意义。
HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因，基本上表达在机体中所有含核的细胞上，尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量。
早在二十多年前，人们就已发现HLA-B27抗原的表达与强直性脊椎炎有着高度相关性，超过90%的强直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表达为阳性，普通人群中仅5-10%的为阳性，而强直性脊椎炎由于其症状与许多疾病相似而难以确诊，因此HLA-B27的检测在病情的诊断中有着重要意义。
在脊椎性关节病这一类的疾病中除了强直性脊椎炎以外，还有许多其它的疾病与HLA-B27抗原的表达有着或多或少的相关性，比如说Reiter，s综和症，HLA-B27阳性率为70-90%；银屑病性关节炎，HLA-B27阳性率为50-60%；葡萄膜炎（眼色素层炎），HLA-B27阳性率为40-50%；溃疡性结肠炎伴有关节病，HLA-B27阳性率为5-10%等等，因此HLA-B27的检测在这些疾病的诊断中是一个非常有价值的指标。
HLA-B27的检测——流式细胞术【申请单】请完成申请单所要求项目×××市人民医院检验申请单姓名性别年龄门诊住院号诊断或症状检验标本检验目的送检科室医师送检日期【方法选择】表4-1 HLA-B27检测方法方法ELISA PCR 流式细胞术本次检查选择√【检测方法】单克隆抗体和荧光素的开发使得流式细胞仪在各个领域得到空前的发展，多参数同时测定使得流式细胞术得以快速，灵敏，特异地检测某一特定细胞群中某一特异性抗原的表达。
用流式细胞仪来检测HLA-B27的表达，无须分离淋巴细胞，操作简单，自动化程度高；灵敏度可达100%，特异性达97.4%；结果稳定，样本之间，不同仪器之间，不同实验室之间可重复性高。
【实验步骤】1.样本的收集和准备用K3EDTA或heparin或ACD抗凝的真空采血管收集至少1ml的外周血，若不能及时染色，则最好选用ACD或Heparin，因此两种抗凝剂对保存细胞表面抗原之抗原性，为保证实验结果的可靠性，持久性较佳。
请尽量在采血后24h内进行染色，染色前将抗凝血室温放置，无须冷藏。
固定保存、冷藏保存的样本和发生溶血的样本都不应该使用。
2. 染色和固定①取流式试管，加入30ul试剂Anti-HLA-B27 FITC/CD3 PE到试管中；②用微量移液器小心地将50ul充分混匀的抗凝血加到试管的底部，确保WBC的浓度在3.5×103-9.4×103WBC/ul之间，轻轻混匀，室温避光静置15-20min；③取出试管，每管加入10倍稀释的1×Lysing Solution 2ml，轻轻混匀，避光室温静置10-12min（不要超过12min）。
待管内液体透亮，然后1200转/min，离心5min，弃上清液。
④轻轻混匀，重悬细胞，每管中加入2ml PBS，轻轻混匀，1200转/min，离心5min，弃去上清液。
⑤每管加入0.3ml PBS 混匀，4℃避光1h内上机检测；若不能及时上机，加入0.3ml 1%的多聚甲醛保存液，放4℃冰箱保存，24h内上机检测。
HLA-B27检测操作程序一、目的：保证流式细胞仪检测外周血淋巴细胞上HLA-B27表达量检验的工作量，旨在保证HLA-B27检测的正确操作程序和控制检测结果的精确度。
二、修改程序：本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：质量主管、授权人（科主任），方可改动。
三、适用范围：外周血中T淋巴细胞HLA-B27表达量检测。
四、溯源：Anti-HLA-B27 kit(美国BD Biosciences 公司；CA T:340183)五、试验原理：HLA-B27属于1型MHC基因。
基本上表达在机体所有有核细胞上，特别是淋巴细胞表面有丰富的含量。
使用荧光定量标准微球，校正HLA-B27试验条件后，测定样本中T淋巴细胞HLA-B27表达水平。
若HLA-B27表达水平大于标准微球设定MARK,则为阳性结果；若HLA-B27表达水平低于标准微球设定的MARK，则为阴性结果。
六、主要试剂：Anti-HLA-B27 kit(美国BD Biosciences 公司；CA T:340183)其中包括：1、Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE2、HLA-B27 Calibration beads3、FACS Lysing Solution七、试验操作：1、标本采集：使用EDTA-K2抗凝真空管，抽取静脉血2ml。
2、染色和固定细胞：(1)取一只流式专用管，标本管编号A(2)A管加入Anti-HLA-B27-FITC/CD3-PE 10ul(3)再加入全血18ul,混匀。
(4)置室温，避光孵育15min.。
(5)加入FACSLysing溶血液2.0ml,置室温，避光孵育10min。
(6)3000r离心10min，弃上清液。
(7)PBS洗涤细胞两次，3000r离心10min,弃上清液。
(8)PBS或鞘液200ul。
3、上机检测：分析结果：打印试验报告。
八、参考值：HLA-B27：阴性九、临床意义：HLA-B27抗原表达与强直性脊柱炎发病具有高度的疾病相关性。
HLA-B27与流式细胞术一、检测HLA-B27的意义HLA抗原是人类主要组织相容性复合体（Major Histocompatibity Complex，MHC）的表达产物，在免疫系统中主要负责细胞之间的相互识别和诱导免疫反应，调节免疫应答的功能。
根据HLA抗原结构，功能与组织分布的不同，可分为三类：Ⅰ类分子为HLA-A、-B、-C系列抗原，广泛分布于各组织有核细胞表面，包括血小板和网织红细胞，成熟的红细胞一般不含HLA抗原；Ⅱ类分子为HLA-D/DR、-DP、-DQ系列抗原，主要在B细胞和抗原提呈细胞上表达，这两类抗原都与移植有关，其中Ⅱ类抗原更为重要；Ⅲ类分子为补体成分。
近年来研究HLA与疾病相关性的资料表明，某些疾病的发生率与一些特殊型别的HLA检出率有关，这些病大多是发病机理不明并伴有免疫功能异常和有遗传倾向性的疾病，因此，分析HLA抗原表达情况不仅有助于了解发病机理，对于疾病的诊断、预防和预后判断都有重要意义。
HLA-B27基因属于Ⅰ型MHC基因，基本上表达在机体中所有含核的细胞上，尤其是淋巴细胞的表面有丰富的含量。
早在二十多年前，人们就已发现HLA-B27抗原的表达与强直性脊椎炎有着高度相关性，超过90%的强直性脊椎炎患者其HLA-B27抗原表达为阳性，普通人群中仅5-10%的为阳性，而强直性脊椎炎由于其症状与许多疾病相似而难以确诊，因此HLA-B27的检测在病情的诊断中有着重要意义。
在脊椎性关节病这一类的疾病中除了强直性脊椎炎以外，还有许多其它的疾病与HLA-B27抗原的表达有着或多或少的相关性，比如说Reiter，s综和症，HLA-B27阳性率为70-90%；银屑病性关节炎，HLA-B27阳性率为50-60%；葡萄膜炎（眼色素层炎），HLA-B27阳性率为40-50%；溃疡性结肠炎伴有关节病，HLA-B27阳性率为5-10%等等，因此HLA-B27的检测在这些疾病的诊断中是一个非常有价值的指标。
样本hla-b27荧光测定值
HLA-B27是人类白细胞抗原系统中的一种特定蛋白质，它与一些自身免疫性疾病如银屑病关节炎、强直性脊柱炎等密切相关。
荧光测定值是指通过荧光法对HLA-B27进行检测的结果。
首先，HLA-B27荧光测定值通常以荧光素单位（fluorescence units，FU）来表示。
这个值是通过实验室检测得出的，用于判断一个人体内的HLA-B27蛋白质的含量或者活性水平。
正常情况下，HLA-B27的荧光测定值应该在一定的范围内，而异常高或异常低的值可能与一些疾病或症状相关。
其次，荧光测定值的具体意义需要结合临床情况来进行解读。
例如，对于强直性脊柱炎（AS）患者来说，HLA-B27阳性可以作为诊断的辅助依据之一，但并非AS的唯一诊断标准。
因此，单纯依靠荧光测定值来做出诊断是不够的，还需要结合临床症状、其他实验室检测结果等综合判断。
此外，HLA-B27荧光测定值在不同实验室和不同检测方法下可能会有所不同，因此在进行结果解读时需要参考具体的参考范围和标准。
另外，一些药物或疾病状态也可能影响HLA-B27的荧光测定
值，因此在解读结果时需要考虑这些影响因素。
总的来说，HLA-B27荧光测定值是一个重要的实验室指标，可以作为一些自身免疫性疾病的辅助诊断依据，但需要结合临床情况和其他检测结果来进行综合判断。
希望以上信息能够全面回答你的问题。
HLA-B27检测应用于强直性脊柱炎的诊断价值分析摘要目的：探讨HLA-B27检测对强直性脊柱炎的诊断价值。
方法：58例患者作为试验组，另选择58例健康人士作为对照组，对比分析两组HLA-B27阳性率试结果：HLA-B27阳性率实验组为91.37%，对照组为6.90%，两组比较差异有显著性（X279.472，P＜0.01）。
结论：HLA-B27检测用于强直性脊柱炎的诊断，可提供重要的参考指标，从而进一步提高确诊率。
关键词HLA-B27 强直性脊柱炎诊断价值AbstractObjective:To explore the diagnostic evaluation of HLA-B27 detection for ankylosing spondylitis.Methods:58 cases of patients with ankylosing spondylitis were as experimental group,other 58 cases of healthy peoples were chosen as control group.The positive rate of HLA-B27 was compared,then.Results:The positive rate of HLA-B in experimental group was 91.37%,in control group was 6.90%,it showed significant differences（X279.472,P＜0.01）.Conclusion:HLA-B27 detection used for ankylosing spondylitis,can provide important guidance index and enhance the diagnostic rate further.KeywordsCut surgery of thyroid gland;Tumor of thyroid gland;Clinical meaning强直性脊柱炎是临床常见疾病，其不仅可导致患者形成驼背，而且还可能导致多种心血管疾病和神经系统疾病，给患者带来很大痛苦。
HLA-B27详细解读HLA-B27是什么？简单地说，HLA-B27可以指的是HLA-B27基因，也可以指的是HLA-B27分子。
HLA-B27基因是存在于人体细胞的细胞核里面的遗传物质DNA的一部分。
HLA基因是人体固有的部分，HLA可以分成HLA-A、HLA-B、HLA-C等。
HLA-B有更多如HLA-B7、HLA-B8、HLA-B13、HLA-B18，当然也包括有HLA-B27。
HLA-B27就像人的血型一样，A型血的人不会下次查变成B型血，HLA-B27也不是痛的厉害时是阳性，缓解后变阴性。
它是一旦查出是阳性的，就说明这个人的基因具有这种特征，就不可能再转变成阴性了。
HLA-B27并不是人人都有的基因。
HLA-B27基因通过转录、翻译，最后生成HLA-B27分子出现在细胞膜表面。
要检测HLA-B27，既可以查HLA-B27分子，也可以查HLA-B27基因。
目前检查HLA-B27的方法主要是查HLA-B27分子，即查细胞膜表面是否有HLA-B27蛋白质分子。
虽然各家医院可能用的检测方法不同，有的是用微量淋巴细胞毒法，有的是用流式细胞术，这些方法检测的准确性都很高。
但是蛋白质是很奇怪的东西，蛋白质的稳定性受到的影响因素多，结构或环境变化可能影响到检测结果，所以极少数情况下，可能出现本来是HLA-B27阳性的，结果检测成阴性。
这种情况下，可以通过检测HLA-B27基因来确定。
因为基因的稳定性很高，比如考古界对古代的动物或人类尸体都能进行基因检测，保存那么久都能检测基因，足可见基因有多稳定了。
所以严格的基因检测得出的结果是最确定的了。
既然基因检测的方法这么准确，为什么不直接采用基因检测呢？要知道基因检测的程序是很多的，需要花很长时间，比如第一步，要提取DNA，单提取DNA就有很多步骤；第二步，进行基因扩增，然后进行电泳。
电泳要配胶，等待热的胶冷却变成固体也需要半小时左右。
胶变成固体后再跑电泳，又要10~20分钟。
