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转实验中医学课件实验中医学--中医药实验研究基本知识1河北北方学院中医系综合实验室贺金靳国印2009-7实验中医学的性质、内容、任务一.性质定义：实验中医学是用科学实验的方法研究和发展中医学的一门科学。

此定义涉及的4个层次：实验中医学一.性质1.实验的定义实验是指科学上为阐明某一现象而创造特定的条件，以便观察它的变化和结果的过程。

这是因为自然状态下，影响到所观察对象，如人、实验动物的因素太多，不创造特定的条件，所观察的变化可能由一些其他因素所引起。

比如肥胖，有遗传、运动、睡眠、饮食、工作、情绪、社会环境等许多因素引起，不把条件限制，就不能确定肥胖的成因，也难以观察不同治疗或预防方法的区别。

一.性质--1.实验实验就是为了调查一个或多个自变量对一个或多个因变量的效应控制过程。

自变量由实验者操纵，因变量是被观察和记录的变量。

而实验给调查者提供消除或尽可能减少额外变化的最好机会。

实验用来检验理论，重复和扩展以前的发现，或者表明以前的研究不能被证实，部分观察什么会发生。

实验实际上只是促成的观察。

实验者应当怀疑和不抱成见，永远保持精神的自由。

实验研究的出发点是假设或理论。

一.性质--1.实验实验的目的之一是发现。

发现--就是看见大家都看见的和思考没有人思考过的。

实验的优点和重要性：自然观察法的缺点：1)其描述性致使无法评估事件之间的关系。

2)有时所提供的资料不太充足。

3)没有严格地维持在描述的水平上，却经常出现对观察结果的解释。

实验的局限：各方面都优越的研究方法是不存在的…关键是要选择最适合于被检验假设的研究方法。

如果…是关于自然环境中发生的行为，那么自然观察法将比严格控制的实验研究更适合；相反，如果理论假设能够通过相关法或者实验法合理地验证，那么就该运用实验研究方法。

该著认为自然观察法中，无干扰观察、测量法更好。

(B.H.坎特威茨等.实验心理学)2.中医学的定义1)首先是传统医学。

世界卫生组织曾对传统医学作过如下定义："不论是否能解释，它是用于诊断、预防和消除身心和社会失衡的全部知识和实践的总结。

它主要是依靠世代相传的实践经验和观察的结果，这些经验和结果不论是口头流传的或是文字记载的。

"(1976年)"它是在现代医学传播和发展以前就已存在几百年的医疗实践的总结，而且至今还在应用。

这些实践由于各国的社会传统和文化不同而存在很大差异。

"(1996年)2)传统医学向现代化的过渡。

过渡期的医学。

这点十分重要，但一直被忽略。

新中国成立以来，在党和政府的引导支持下，传统的中医学焕发出生机，迅速发展、壮大，其标志之一便是实验中医学的中兴，实现了与现代医学的接轨，并不断缩小两者间的差距，使古老的中医学注入了现代科学的新生命。

3.与实验针灸学、中药药理学的区别这两门学科是实验中医学分化得最早的学科。

实验针灸学主要研究经络及其传感的本质，针灸、推拿以及建立在经络理论基础之上的不同诊疗方法的本质和规律。

中药药理学研究单味中药和复方的药理，与实验中医学中普遍运用复方的区别在于两者的着眼点或目的不同：中药药理学的着眼点在药，研究药的作用机制和开发新药，而实验中医学则以药为干预因素，通过药的干预，来探究有关生理、病理、治则、治法、预防、养生等等。

中医学要不要发展、如何发展、如何高效地发展?通过几十年的探索，形成了比较一致的认识，即实验中医学以中医学为研究对象，以现代科学技术方法为主要研究手段，用以挖掘、解释并丰富中医学伟大宝库，加速中医学的现代化。

其基础包括传统中医、现代中医、现代西医；要求顺应社会和中医药学自身发展的规律；要提高中医药的竞争力。

比如治疗上是最安全的、最有效的、最方便的、最廉价的，以及有特色的。

实验中医学--2、内容1.基本方法--中医学所特有的，以及一般医学、其他科学共有的。

2.不同实验对象--人、实验动物。

3.翔实的实验指导。

4.科学、严谨的实验报告。

实验中医学--3.任务实验中医学的任务是验证和发展中医学。

1.验证中医学。

中医学对生命的认识、对生理病理的认识、对不同的诊疗手段、养生方法的论述等是不是符合实际，是不是有效，需要给予验证，阐释其机制。

例如，历代对某一疾病的防治积累了丰富的资料，有不同的治则、治法，不同的单方、验方，不同的剂型、剂量等，哪些是有效的，哪些效果要优越些，不同方法的适应证有何不同，有没有地域、季节差异等等，只有通过反复的实验才能给予验证，并解释其原理。

迄今为止，实验中医学的工作主要集中在这一领域。

中医药实验研究中医药实验研究是根据中医实践理论体系，采用现代科学技术方法来研究中药的组方、成分、作用机理及用途的一门科学。

(弥补临床观察、直觉领悟之不足)中医药实验研究首要问题，就是遵循中医基本理论对实验研究的周密设计。

因为实验设计是实验过程的依据，是实验数据处理的前提，也是提高实验研究质量的一个重要保证。

中医药实验研究实验研究的一般原则和基本内容中医药实验研究实验设计基本要求中医药实验研究实验设计基本要求--选用解剖、生理特点符合实验目的要求的实验动物催吐实验--适宜选用猴、猫，不选用大小鼠，因为小/大鼠无呕吐反应。

胆囊功能实验--不选用大鼠，因为大鼠无胆囊。

发汗中药的研究--不能选用小鼠(无汗腺)。

慢性支气管炎的实验--不能选用大小鼠，因为小/大鼠气管及支气管腺不发达。

计划生育研究--常选用小鼠和大鼠。

因繁殖力强，性周期和妊娠期短，生长快。

如常用小鼠做抗生育、抗着床、抗早孕、抗排卵等实验应用上的首选动物。

中医药实验研究⑴空白对照：是指在不加任何处理的"空白"条件下进行观察的对照，较少用。

⑵假处理对照：即除不用被研究的药物外，对照组的动物要经受同样的处理，如麻醉、手术、注射不含药物的溶媒等。

这种对照的可比性好，较常用。

⑶标准对照：指以标准值或正常值作为对照，以及在所谓标准的条件下进行观察的对照。

⑷组间对照：系在实验组间互为对照进行对比。

常用的是已知药的标准药对照组。

中医药实验研究常用的设计方法单组比较设计：配对比较设计：随机区组设计：完全随机设计：拉丁文设计：正交设计：序贯设计：中医在实验设计研究方面的不足中医药实验研究-新(中)药研制与实验设计新药的分类：按药品管理要求分为5类：第一类--创制第二类--新用法第三类--新制剂第四类--新剂型第五类--新适应症。

中医药实验研究--实验动物与人用药量的换算目前，基本上是以g/kg、mg/kg或ml/kg的形式来计算实验动物用药量的。

如以这种形式直接进行实验动物间用量的互换，甚至换算为人的剂量，或由人的剂量换算成实验动物的用量，则因种类、敏感性、耐受性等的不同，实用量会偏小或偏大，以致无法进行实验。

按动物与人体表比换算法已知A种动物每公斤体重用药剂量，欲估算B种动物每公斤体重用要量时，可先查表，找出折算系数W，再以下式计算：B种动物剂量(mg/kg)=W×A 种动物剂量(mg/kg)例一：已知体重12kg的犬，其每日服药剂量为10mg/kg，每日总量为120mg，试求人的日服药量。

人日服总量=犬日服总量×人与犬体表比=120×3.1=372mg实验报告的基本要求1实验前应仔细阅读实验指导，做到心中有数。

2实验结束应及时整理和总结实验结果，写出报告。

实验报告内容应包括实验名称、目的、原理、材料(包括仪器、药品、动物)、方法、结果、讨论及结论。

河北北方学院中医系综合实验室基础知识2贺金靳国印实验动物科学实验动物学是20世纪50年代崛起的一门独立的综合性边缘学科，是现代生命科学前沿领域研究中最为活跃的学科门类之一。

实验动物科学以实验动物为材料，采用各种手段和方法在实验动物身上进行实验，研究实验过程中实验动物的反应、表现及其发生机制和发展规律，确保动物实验的可靠性、准确性和可重复性。

即如何使动物实验合理化、规范化。

简而言之，实验动物科学就是关于实验动物标准化和动物实验规范化的科学。

(实验动物饲养学、实验动物医学等)一般分类实验用动物实验用动物泛指所有用于科学实验的动物。

它包括实验动物、家畜(禽)和野生动物。

家畜(禽)以满足人类社会生活需要而生产的动物。

野生动物直接从野外捕获的动物。

微生物学控制分类实验动物微生物学质量控制是实验动物标准化的主要内容之一，按微生物学等级分类，实验动物分为普通级动物、清洁级动物、无特定病原体动物、无菌动物。

微生物学控制分类一、普通级动物普通级动物指不携带所规定的人兽共患病病原和烈性传染病病原的动物。

饲养于开放环境，微生物等级要求最低，但要有良好的饲养设施和饲养管理操作规程及规章制度。

如饲料、垫料要消毒；饮水要符合城市卫生标准；外来动物必须严格隔离检疫；房屋要有防野鼠、昆虫设备；经常进行环境及笼器具的消毒，严格处理淘汰及死亡动物。

微生物学控制分类二、清洁级动物除普通动物应排除的病原外，不携带对动物危害大和对科学研究影响大的病原的动物。

清洁动物饲养于屏障环境或IVC(独立过滤通风笼具系统)，饲料、垫料、笼器具都要经过消毒灭菌处理，饮用水除用高压灭菌外，也可采用pH值2.5-2.8的酸化水，工作人员需换灭菌工作服、鞋、帽、口罩，方能进入动物室操作。

微生物学控制分类三、无特殊病原体动物或称SPF动物除清洁级动物应排除的病原外，不携带主要潜在感染或条件致病和对科学实验干扰大的病原，这类动物称无特殊病原体(specific pathogen free，SPF)动物。

SPF动物来源于无菌动物，必须饲养在屏障系统中，实行严格的微生物学控制。

各种疫苗生产所采用的动物应为SPF级动物，在放射、烧伤等研究中具有特殊的价值。

微生物学控制分类四、无菌动物无菌(germ-free，GF)动物指动物身上不可检出一切生命体的动物。

进一步说，是指用现有的检测技术在动物体内外的任何部位均检不出任何微生物和寄生虫的动物。

中药制剂的制备1、水煎液的常规制备2、水煎醇沉剂的制备3、流浸膏、浸膏的简易制备4、中药总成分提取水煎液的常规制备1、药物2、容器具3、用水和量4、煎药时间5、药液煎出量小鼠实验动物基本技术操作部分(一)河北北方学院中医系实验室贺金靳国印实验动物基本技术(一)实验动物：实验动物基本技术(一)实验项目：抓取、固定编号给药麻醉采血处死实验动物基本技术(一)抓取、固定右手提起小鼠尾巴，将其放在鼠笼盖或其他粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳和颈部皮肤，将小鼠置于左手掌心，无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。

实验动物基本技术(一)编号：化学药品：3-5%苦酸液。

编号的原则：先左后右，从上到下。

一般把涂在左前腿上的计为1号，头顶部计为2号,右前腿为3号，左侧腹部计为4号，腰背部为5号，右侧腰部为6号，左后腿为7号,尾基部为8号，右后腿为9号.实验动物基本技术(一)给药①皮下注射：注射时用左手拇指及食指轻轻捏起皮肤，右手持注射器将针头刺入，固定后即可进行注射。