实验小鼠给药与采血方法

实验小鼠眼眶静脉丛采血方法

优点：眼眶后静脉丛采血法方法简单，便于掌握。血流较快，采血量多，能在较短时间内采约0.5mL血。伤口较小，愈合较快。成功率高，死亡率低。

缺点：不能避免组织液的混入，对于血样要求较高的研究应谨慎使用。

小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧，阻碍静脉回流，使眼球充分外突，提示眼眶后静脉丛充血。也可以将小鼠放置在侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。抓握时要避免对气管施压，否则可能会影响小鼠呼吸。

将毛细采血管（建议采用0.5*100mm规格的毛细管，在使用前折成小段，每段大约3-4cm）置于内侧眼角处，并且以与鼻翼平面成30-45度沿内眦插入内眼角，滑入眼球后方，轻轻向眼底方向刺入。

当感到有阻力时即轻轻旋转采血管的同时施加压力以切开静脉丛，血液将通过毛细作用流入采血管。不能刺地过深，一般2-3mm即可。

采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。可用干棉球压住眼眶，确保止血。一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。

小鼠灌胃

小鼠灌胃方法比较简单，需要关注的只有两点：

一是要保持小鼠的头部和颈部成一直线，方便灌胃针头进入；

二是动作要轻柔，从口角进入，防止损失食道。做的多了自然就熟练了。

具体操作过程如下：

1. 准备灌胃针头。一般可以从市场上面买到，实在没有的话，可以用12号的针头，剪去针尖，用砂纸将头端磨平，也可以用。但是买的灌胃针头的头端用锡或者适宜的方法处理了针头的锐口，自己用砂纸不可能将所有的锐口都磨掉，用这样的针头灌胃，损失小鼠食道的可能性比较大。

2.抓住小鼠，使其头、颈和身体呈一直线。抓小鼠的动作很简单，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部即可。因为小鼠始终在活动中，若一次抓的感觉不是很顺手，要放开重新抓，不要逞强进行下一步操作。

3. 抓好小鼠就可以灌胃了，一般用1ml的注射器配灌胃针头。灌胃针头从小鼠的嘴角进入，压住舌头，抵住上颚，轻轻向内推进，进入食管后会有一个刺空感，进入食道后就可以推注药液了。（我认为，所谓的灌胃，不必要灌胃针头进入小鼠的胃部，进入食管后就可以推药了，这样对小鼠食道的损伤要小点，特别是要长期灌胃给药的情况下。）当然，灌胃针头也可以再往里面深入一点，防止药液从口中流出。

4. 灌胃容积一般是0.1～0.2ml/10g，最大0.35ml/10g，每只小鼠的灌胃最大容积不超过0.8ml。

小鼠腹腔注射

腹腔注射是常见的给药方式，尤其是在麻醉时。常见的麻醉方法均是麻醉药物腹腔注射。

1. 小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器，配合4号针头。

2. 腹腔注射时右手持注射器，左手的小指和无名指抓住小鼠的尾巴，另外三个手指抓住小鼠的颈部，使小鼠的头部向下。这样腹腔中的器官就会自然倒向胸部，防止注射器刺入时损伤大肠、小肠等器官。进针的动作要轻柔，防止刺伤腹部器官。

3. 尤其是对于体重较小的小鼠，腹腔注射时针头可以在腹部皮下穿行一小段距离，最好是从腹部一侧进针，穿过腹中线后在腹部的另一侧进入腹腔，注射完药物后，缓缓拔出针头，并轻微旋转针头，防止漏液。

实验动物给药和采血方法

1.割(剪）尾采血

当所需血量很少时采用本法。固定动物并露出鼠尾。将尾部毛剪去后消毒，然后浸在45℃左右的温水中数分钟，使尾部血管充盈。再将尾擦干，用锐器（刀或剪刀）割去尾尖0.3-0.5cm，让血液自由滴入盛器或用血红蛋白吸管吸取，采血结束，伤口消毒并压迫止血。也可在尾部作一横切口，割破尾动脉或静脉，收集血液的方法同上。每鼠一般可采血10余次以上。小鼠每次可取血0.1ml，大鼠0.3～0.5ml。

2.鼠尾刺血法

大鼠用血量不多时（仅做白细胞计数或血红蛋白检查），可采用本法。先将鼠尾用温水擦拭，再用酒精消毒和擦拭，使鼠尾充血。用7号或8号注射针头，刺入鼠尾静脉，拔出针头时即有血滴出，一次可采集10～50mm3。如果长期反复取血，应先靠近鼠尾末端穿刺，以后再逐渐向近心端穿刺。

3.眼眶静脉丛采血 采血者的左手拇食两指从背部较紧地握住小鼠或大鼠的颈部（大鼠采血需带上纱手套），应防止动物窒息。当取血时左手拇指及食指轻轻压迫动物的颈部两侧，使眶后静脉丛充血。右手持续接7号针头的1ml注射器或长颈（3～4cm）硬质玻璃滴管（毛细管内径0.5-1.0mm），使采血器与鼠面成45℃的夹角，由眼内角刺入，针头斜面先向眼球，刺入后再转180度使斜面对着眼眶后界。刺入浓度，小鼠约2～3mm，大鼠约4～5mm。当感到有阻力时即停止推进，同时，将针退出约0.1-0.5mm，边退边抽。若穿刺适当血液能自然流入毛细管中，当得到所需的血量后，即除去加于颈部的压力，同时，将采血器拔出，以防止术后穿刺孔出血。

若技术熟练，用本法短期内可重复采血均无多大困难。左右两眼轮换更好。体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml；体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml，可适用于某些生物化学项目的检验。

4.断头取血

采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大（小）鼠的颈部皮肤，并作动物头朝下倾的姿势。右手用剪刀猛剪鼠颈，约1/2-4/5的颈部前剪断，让血自由滴入盛器。小鼠可采用约0.8～1.2ml;大鼠约5-10ml。

小鼠尾巴采血实验报告

1. 引言

小鼠尾巴采血是一种常用的实验方法，用于获取小鼠体内的血液样本。通过采血可获得小鼠体内的生化指标、免疫指标等信息，对于研究疾病机制、药物作用等具有重要价值。本实验旨在探究小鼠尾巴采血的操作步骤、采血量对实验结果的影响，并总结其优缺点。

2. 材料与方法

2.1 材料

- 健康小鼠若干只

- 0.9% 生理盐水

- 无菌注射器（1 mL）

- 反应器（托盘）

- 75% 乙醇

- 棉球

2.2 方法

1. 预备工作：

- 将实验用小鼠放置在实验室饲养箱中，适应环境。

- 准备好所需的材料和仪器。

- 清洗操作台和仪器，确保无菌环境。

2. 术前准备：

- 将小鼠固定在反应器中，使其尾巴暴露在外。

- 使用棉球蘸取75%乙醇，消毒小鼠尾巴的采血部位。 - 等待乙醇挥发，确保消毒充分。

3. 采血操作：

- 使用无菌注射器，吸取适量的生理盐水。

- 将采血部位的尾巴轻轻按压，使血管突出。

- 将无菌注射器的针头插入突出的血管中。

- 缓慢注入生理盐水，使其与血液混合。

- 缓慢拔出针头，将采血部位覆盖好。

4. 术后处理：

- 将采血完毕的小鼠放回饲养箱中，保持其舒适和安全。

- 清洗和消毒使用过的仪器。

- 妥善处理实验中产生的废液和废弃物。

3. 结果与分析

3.1 操作步骤对实验结果的影响

在实验过程中，正确的操作步骤对采血结果具有重要影响。首先，在采血前应充分消毒小鼠尾巴以避免感染。其次，必须掌握插入针头的深度和角度，以避免对尾部组织造成损伤。最后，缓慢注入和拔出针头是减少血液外渗和损伤的关键步骤。

3.2 采血量对实验结果的影响

采血量对实验结果同样具有重要影响。过大的采血量可能导致小鼠失血过多，影响其生理状态。过小的采血量可能无法获得足够的血液样本，影响结果的准确性。因此，在实验中需要根据具体要求和小鼠的体重、品系等因素来确定合适的采血量。 4. 优缺点与展望