PCR仪操作说明

pcr仪操作规程PCR仪操作规程一、实验前准备1. 确保PCR仪及其相关设备工作正常，温度控制准确。

2. 检查所需试剂和试验用品是否齐全，并确保其完好无损。

3. 充分准备好所需样品和试剂。

二、实验操作步骤1. 打开PCR仪电源，将仪器温度设置为所需温度。

2. 准备PCR试管，根据实验需要选择合适的试管尺寸和材质。

3. 将待测样品转移到试管中，确保样品转移时避免污染。

4. 加入适量的引物、模板DNA和酶，确保试管中各组分加入正确。

5. 轻轻混匀试管中的液体，尽量避免产生气泡。

6. 紧贴试管盖，将试管放入PCR仪保护套中，确保密封。

7. 将试管架放入PCR仪中，确保试管数量合适，不要过多或过少。

8. 关上PCR仪盖，开始PCR扩增反应。

三、PCR程序设置1. 打开PCR仪操作面板，选择“PCR”模式。

2. 设定所需的扩增程序参数，包括温度和时间等。

3. 设置好反应程序后，按下“开始”按钮，启动PCR 反应。

四、PCR扩增反应1. PCR反应过程中要保持实验环境的干净和整洁，避免污染。

2. 定时观察PCR反应状态，确保仪器温度控制准确。

3. 扩增反应完成后，关闭PCR仪电源，停止反应。

五、PCR反应后处理1. 打开PCR仪盖，将试管从仪器中取出。

2. 迅速将试管放入冰浴中，以停止反应。

3. 根据实验需要，可进行进一步的处理，如电泳分析或提取目标产物等。

六、实验结束后1. 清洗PCR试管，避免残留物的污染。

2. 关闭PCR仪电源，确保仪器处于安全状态。

3. 整理实验台面，注意清理实验区域，保持实验环境的清洁。

七、实验数据记录与分析1. 记录实验过程中的相关数据，如PCR仪设置温度、反应时间等。

2. 对实验结果进行分析和解读，根据需要进行数据处理和统计。

八、实验安全注意事项1. 在实验过程中要注意个人防护，佩戴实验手套、实验服等。

2. 注意对PCR试管的正确处理和处置，避免造成污染和危险。

3. 遵守实验室规范，注意实验场所的卫生和安全。

PCR仪
操作指南
一、开机
连接电源线后，打开机器后部的主开关（在机器的左下角）。

开机后机器进行自检“Self Test”，自检结束后出现用户主界面，显示加热模块“Block”格式和温度“Temp”和热盖温度“Lid”，在屏幕左上角显示“Ready”。

二、程序设置
1.建立新程序
按“File”→“New”→“Program”，进入一个编辑窗口输入程序名称按“Enter”键确认，之后进入程序编辑器；在“Header”中设置热盖的参数，输入温度和压力，温度默认值为96℃，一般设置为99℃，如变性温度较低时默认值也可以满足使用要求，压力默认值为90N。

按“Step”设置PCR循环在“Temp”中输入温度后按“Enter”，“Time”中输入时间按“Enter”，依次编辑步骤。

输入“Goto”要返回的步骤序号，形成PCR 循环，输入循环数。

2.编辑模板程序
按“File”→“Edit”→“Program”，进入编辑窗口后按“Edit”键开始修改程序，修改完毕后按“Save”键保存后关闭该窗口返回主界面。

三、运行程序
程序设置好后，按“Run”+“Start”，打开一个子窗口选择要运行的程序（最后一次修改的程序将自动被选中），确认选择的程序后按“Start Now”开始运行程序。

四、暂停与终止
如果要暂停或终止正在运行的程序，按“Run”+“Pause”或“Run”+“Stop now”，暂停后要继续原来的程序按“Run”+“Continue”。

五、关机
程序运行结束后，界面返回至主菜单。

关闭仪器后部的主开关。

PCR仪操作规程一、PCR仪的准备工作1.将PCR仪放置在坚固平稳的工作台上。

2.确保PCR仪能够正常通电，并连接稳定的电源。

3.检查PCR仪是否有足够的耗材，如：PCR试剂盒、PCR板、PCR管等。

4.确保PCR仪的外壳干净整洁，无尘。

5.检查PCR仪的温控系统是否正常运作，温度探头是否正确连接。

二、程序设置1.打开PCR仪的电源，等待仪器启动。

2.进入PCR仪的操作界面，在设置中选择需要运行的PCR程序。

3.设置PCR程序的相关参数，包括：反应体系、产物大小、温控方式、梯度设置等。

4.确认无误后，保存设置。

三、样本处理1.根据实验需求，准备所需的样本和试剂。

2.将待测样本和控制样本分别加入PCR管中，并按照试剂盒说明书的要求，分别加入PCR试剂。

3.小心混匀，避免产生气泡。

4.使用电动移液器，将样品转移到PCR板的相应孔中。

5.确保试管盖扣紧并密封，避免蒸发和污染。

四、样品放置1.使用PCR板架，将PCR板放入PCR仪中。

2.确保PCR板放置稳定，不晃动。

3.在关闭仪器时，检查所有的孔位是否已经满。

4.根据实验要求选择合适的PCR模式。

五、运行PCR程序1.确保PCR仪处于关机状态，将PCR板放入PCR仪中。

2.关闭PCR仪的盖子，并轻轻按下，确保盖子紧密贴合。

3.打开PCR仪的电源，启动PCR程序。

4.开始运行程序后，定期检查PCR仪的运行状态，确保温度的稳定和反应的正常进行。

5.在PCR反应过程中不要移动或震动PCR仪。

6.必要时对PCR反应进行监测，可使用实时荧光PCR功能。

六、PCR反应后处理1.PCR反应结束后，停止PCR程序运行。

2.打开PCR仪盖子，取出PCR板。

3.将PCR板置于洗涤台上，进行样本的后续处理。

4.根据实验要求，可以选择对PCR产物进行凝胶电泳分析或进一步测序。

七、清洁和维护1.每次使用后，将PCR仪的工作台面、盖子等部位用75%乙醇擦拭干净。

2.定期清洁PCR仪的内部，检查温控系统的工作情况。

EPPENDORF PCR仪简易操作说明1、打开仪器的电源开关，仪器显示完软件版本号及型号后，进入主菜单（如下图）。

2、新建、编辑程序1）新建程序：在Main-Menu主菜单下通过光标移动键移动光标到FILES菜单上，按ENTERN 键进入，在FILES子菜单下选择STANDAND按ENTERN确认，即可将STANDARD标准程序调用修改，修改完后可另存为其它程序名（也可选择NEW子菜单建立全新的程序）。

如下图：在上图界面上，移动光标到BLOCK选项上，通过SEL键选择BLOCK（对热模块进入温控）或TUBE（对样品管温控），再将光标移到LID，设置热盖温度为103度。

NOWAIT和AUTO 同BLOCK选项一样的设置过程。

再将光标下移到空格行，按一次SEL键，出现1 T=* *，将光标移到*上设置温度，再将光标后移设置时间，再将光标下移设置下一个温度过程；若要在该步温度下设置温度或时间递增或递减条件，则将光标移动该语句行号的正下方，按再OPTION键，即可设置递增或递减条件；若程序中需要循环语句，则可反复按SEL键直至出现GOTO ** REP **，设置返回到第几步共有多少个循环（目标循环数减1），依此类推设置完整个程序即可。

程序保存：设置完程序后按EXIT键退出程序，仪器将提示是否保存程序，通过SEL键选择YES，再给程序取个名称，先用光标移动键移动原程序名称上，用DELE键逐个删除原名称名称，输入新的程序名称（名称中通过反复按SEL键可输入字母），最后按ENTERN保存程序。

2）编辑程序同上过程。

3）在Main-Menu主菜单下选择DELE按ENTERN进入删除程序界面，用光标移动键选择需要删除的程序，再按ENTERN键即可删除程序。

4）在Main-Menu主菜单下选择START子菜单，通过光标移动键选择需要运行的程序，按START键即可运行该程序。

5）程序运行过程中可按OPTION键显示程序运行时间及结束时间（只显示5秒钟）。

PCR仪操作指南
引言：
PCR（聚合酶链反应）是一种常用的分子生物学技术，用于检测和扩
增特定DNA序列。

PCR仪是进行PCR实验的必备设备之一，本操作指南将
详细介绍PCR仪的使用流程和操作注意事项，旨在帮助使用者正确操作PCR仪，提高实验的成功率。

一、实验前的准备工作：
1.根据实验需要，选择合适的引物，设计PCR反应体系。

2.准备好PCR反应物，包括DNA模板、引物、核酸酶、脱氧核苷酸三
磷酸、聚合酶等。

3.根据PCR仪的使用手册，检查设备的工作状态，保证设备正常运行。

4.准备PCR反应管，确保干净无污染。

二、操作步骤：
1.打开PCR仪电源，启动设备。

根据使用手册，设置合适的温度和时
间参数，并选择合适的热启动模式（立即开始或延迟开始）。

2. 调整PCR仪的温度设置。

根据PCR实验需要，设置热循环的温度
范围和时间参数，包括Denaturation（变性）、Annealing（退火）和Extension（延伸）步骤的温度和时间。

3. 预热PCR仪至所需的初始温度。

根据实验需要，将PCR仪的温度
调整至Denaturation步骤所需的温度（通常为95℃）。

4.添加PCR反应物至PCR反应管中。

按照预先设计的PCR反应体系，
将DNA模板、引物、核酸酶、脱氧核苷酸三磷酸、聚合酶等加入PCR反应
管中。

5.将PCR反应管放置在PCR仪的样品架中。

确保PCR反应管放置稳定，避免管内反应物溢出。

6.关闭PCR仪的上盖。

PCR仪的使用步骤及原理引言聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，简称PCR）是一种在分子生物学研究中广泛应用的技术。

PCR仪作为PCR操作的关键工具，能够快速无误地扩增目标DNA 序列，为科学研究和临床诊断提供了重要的支持。

本文将介绍PCR仪的使用步骤及原理。

PCR仪的使用步骤以下是PCR仪的使用步骤：步骤一：准备反应体系1.准备PCR反应液，包括DNA模板、引物、核酸酶、缓冲液等。

2.将反应液分配到PCR试管中，确保每个试管的反应体系一致。

3.在一个试管中加入水作为空白对照。

步骤二：设置PCR仪的程序1.打开PCR仪，确保仪器处于正常工作状态。

2.设置PCR仪的反应程序，包括温度、时间等参数。

根据不同的PCR实验设计，设置合适的程序。

步骤三：装载样品1.将准备好的PCR试管放置在PCR仪的样品架上。

2.检查样品架是否放置正确，确保试管紧密接触PCR仪的加热块。

步骤四：运行PCR程序1.关闭PCR仪的盖子，启动程序运行。

2.PCR仪将根据设定的程序依次进行加热、变性、退火和延伸等反应步骤。

3.在PCR反应结束后，PCR仪会保持在设定温度，以保持PCR产物的稳定。

步骤五：PCR产物分析1.关闭PCR仪的电源，打开PCR试管。

2.可通过凝胶电泳、PCR产物可视化试剂等方法对PCR产物进行分析。

3.根据实验需求，进一步处理PCR产物。

PCR仪的原理PCR仪采用了温度循环技术，利用特定的酶（聚合酶）和核酸引物来引导DNA链的复制。

其原理主要包括以下三个步骤：1.变性（Denaturation）：通过升高温度（通常为95℃），使DNA双链分离成两条单链DNA。

2.引物结合（Annealing）：降低温度（通常为55-60℃），使引物与目标序列的单链DNA互补结合。

3.延伸（Extension）：增加温度（通常为72℃），使聚合酶在引物的引导下合成新的DNA链。

通过不断重复这三个步骤，PCR仪可以在短时间内扩增特定的DNA序列。

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在进行 PCR 实验之前，需要进行充分的准备工作。

一、开机在确认接通相应电源后，打开仪器电源开关，仪器发出“嘟”声，表明电源已通，此时屏幕显示开机界面，然后仪器将进行系统自检，自检完成后进入待机界面。

图1 开机界面图2 待机界面二、文件在“主菜单”界面里选择“文件”，进入“文件”界面可以选择“打开文件”或者“创建文件”。

（如图3）图3注：“创建文件”——创建新的文件。

“打开文件”——打开已保存过的文件。

三、设置在“主菜单”界面里选择“设置”，进入“运行参数设置”界面。

（如图4）图4注：其中升降温速率范围为：℃/S～℃/S。

低温保存的温度范围℃～℃。

温控方式有：样品座温控方式和模拟管温控方式两种。

四、热盖在“主菜单”界面里选择“热盖”，进入“热盖功能设置”界面。

（如图5）、图5注：其中热盖温度范为：20℃～110℃。

五、梯度在“主菜单”界面里选择“梯度”，进入“梯度查看”界面。

（如图6）图6注：其中心温度范围为：31℃～99℃，梯度值范围为：1℃～15℃，中心温度值与梯度范围值的代数和的范围为：30℃～100℃。

设置完成后用户可查看对应模块12 列的各列温度值。

由于384模块梯度功能不可用，所以如果放入的是384 模块，则不可查看梯度分布表。

六、网络在“主菜单”界面里选择“网络”，进入“网络设置”界面。

（如图7）图7注：网络设置主要是设置与上位机网络连接的IP 地址和端口号。

端口号11126 为固定值。

IP 地址设定好后，需与上位机保持一致。

七、日志在“主菜单”界面里左击“日志”子菜单，进入“日志查看”界面。

（如图8）图8注：若当前所建文件数≤200 个，则在该界面显示当前所有文件信息。

若当前所建文件数﹥200 个，则在该界面显示最近新建200 个文件信息。

这些信息包括：文件名、运行时间、新建日期等。

八、系统在“主菜单”界面里选择“系统”，进入“系统参数设置”界面。

（如图9）图9注：在该界面下按移位键选择系统日期时间、提示音、文件列表排序方式等设置项。

PCR仪（Veriti 96-Well）使用说明操作步骤：1．打开PCR仪的热盖，插入0.2 ml的样品管，盖好热盖。

打开PCR仪的电源，仪器程序开始初始化，需等待几分钟。

初始化完成后，显示主菜单，点“Browse/New Methods”，进入PCR程序列表。

2．可以直接点一个PCR程序，选择“Start Run”运行；点右边的符号，可以选择不同的文件夹。

如要新建一个PCR程序，点“New”，出现PCR程序。

3．添加一段程序：点中上方的“Stage”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一段新的程序。

修改循环数、温度、时间：点中循环次数、温度或时间位置，下方出现数字键。

依次点数字键，出现合适数字后，点“Done”确定。

4．增加一个步骤：点“Step”位置，该位置变红；再点“Add”，软件将加入一个新的步骤；删除一个步骤：点“Step”位置，在点“Delete”，软件将该步骤删除。

5．建立梯度模式：点中一个步骤，再点“Option”键，在出现的选项中，点“VeriFlex step”，出现梯度创建窗口：输入6个梯度温度，温度下方的“1－2”是指对应的1、2两行加热孔，全部输好后，点“Done”确定。

注意：相邻的两个梯度温度之差最大不能超过5℃！6．建立渐变模式：点中一个步骤，再点“Option”键，在出现的选项中，点“Auto Delta”，出现渐变模式创建窗口。

点“Staring Cycle”，输入起始循环数；点“Delta Temperature”，输入温度变化值；点“Delta Time”，输入时间变化值。

7．增加暂停步骤：点中一个步骤，再点“Option”键，在出现的选项中，点“Pause”，输入暂停的起始位置，暂停间隔和暂停时间，点“Done”确定。

8．编辑PCR程序完成后，点“Save”保存。

点“Run Method”，输入PCR程序名称，选择保存PCR程序的文件夹，再输入反应体积和热盖温度（这两项在运行程序时可以修改），点“SaveδExit”确定。