第 1 页 共 8 页 色谱柱的保养 色谱柱如何做好保养
在正常情况下，色谱柱至少可以使用3—6个月，能完成数百次以上的分别。但是，若操作不慎，将使色谱柱很易损坏而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量及渗透性，必需对色谱柱进行认真地保养。
1．色谱柱极 在正常情况下，色谱柱至少可以使用3—6个月，能完成数百次以上的分别。但是，若操作不慎，将使色谱柱很易损坏而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量及渗透性，必需对色谱柱进行认真地保养。
1．色谱柱极易被微小的颗粒杂质培塞，使操作压力速上升而无法使用，因此必需将流动相认真地蒸馏或用0.45μm孔径的滤膜过滤。在流动相组贮槽与色谱柱间，安装0.45μm孔径的过滤器。在柱子上端接头处装上多孔过滤片，以防止固体颗粒进入色谱柱中。在水溶液流动相中，细菌简单生长，可能堵塞筛板加入0.01％NoHa能防止能防止细菌生长。
2．可以使用进祥阀进样，以防止注射器进样时、注射隔膜碎屑堵塞柱子入口。
3．对硅胶基键合相填科，水溶液流动相的PH值不得超出2—8．5的范围，使温度不宜过高。柱子在酸性或碱性条件下使用之后。应依次用水、甲醇清洗，对短时间不用而需要较长时间保存的柱子，要用纯甲清洗，柱子两端用金属螺帽封闭，保存于干净的有机溶剂中。
4．要防止色谱柱被振动或撞击，否则柱内填料床层产生裂缝 第 2 页 共 8 页 和空隙，会使色谱峰显现“驼峰”或“对峰”。
5．要防止流动相逆向流动，否则将使固定相层位移，柱效下降。
6．使用保护柱。连续注射含有未被洗脱样品时，会使柱效下降，保留值更改。为了延长柱寿命，在进样阀和分析柱间加上保护柱，其长度一般为3—5cm，填充与分析柱性质相像的表面多孔型固定相，因此可干法填装。而且价廉、更换简单。试验表明，使用保护柱后，除了使扩为零的组分的塔板数削减外，其柱效下降很少。
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液相色谱柱维护保养及仪器冲洗
注意:每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书、
色谱柱维护保养就是很重要得,关系到色谱柱得使用寿命与检测结果得准确性,所以任何人用过色谱柱之后,一定要对色谱柱进行保养,管理人员与使用者互相监督。
总得原则就是色谱柱要轻拿轻放,避免损坏填料;另外没有使用得情况下,一定要保证两端得堵头封好、对于具体得色谱柱,下面列出常用色谱柱维护保养得具体方法与注意事项,以便使用者参考。
对于未启用得新得色谱柱,先用甲醇或乙腈以小流速(0.2mｌ/min缓慢升高到0.5ml/miｎ)不接检测器冲洗色谱柱30分钟后,将色谱柱与检测器连上,流速调为1。0 ml/min冲洗色谱柱60分钟,然后不断降低有机相得比例(如80%、5０％、1０%甲醇或乙腈)各冲洗至少３0分钟。若色谱柱暂时不用,则将色谱柱保存在高比例有机相中(如８0%甲醇或乙腈,或者参考该色谱柱使用说明书中建议得溶剂中);色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例得有机溶剂(将缓冲盐溶液换成水)冲洗色谱柱１5分钟,然后再换成流动相进行样品分析。
样品分析完后,色谱柱维护与保养方法:
流动相中若含酸、碱、盐类物质,则要先用10%甲醇或乙腈冲洗,1、０ｍl/ｍin得流速冲洗至少30min,再用8０％甲醇或乙腈冲洗至少30ｍin,柱子保存在80％甲醇或乙腈里(具体问题具体分析,洗脱程序可以就是梯度洗脱程序,注意如果最后色谱柱保存得就是高有机相,第二天用之前一定要用高水相过渡一下,再换成流动相)。如柱子长时间未用,则柱子保存在1０0％得甲醇或乙腈里。
对于含有离子对试剂得流动相如庚烷磺酸钠与十二烷基磺酸钠等,柱子应采用梯度洗脱,一般用乙腈-水系统(水:９0-１0;乙腈:10－90)冲洗时间要稍长些,然后保存于90％乙腈。
需要特别强调得就是,目前所有得C18柱均不能用纯水进行长时间(1小时以上)冲洗,除非有专门耐水得专用柱,否则,用纯水长时间冲洗色谱柱,会导致色谱柱得固定相流失与相塌陷,损坏色谱柱。
1 阴离子交换色谱柱安全操作及保养规程
阴离子交换色谱柱（Anion Exchange Chromatography Column）是一种常用的色谱分离技术。在实验中，操作人员需要密切关注柱子的使用情况，以确保实验结果的准确性和人身安全。本文将介绍阴离子交换色谱柱的基本操作规程和保养维护方法。
一、操作规程
1. 准备工作
• 在进行操作之前，需要将色谱柱和固定装置进行清洁消毒。
• 提前准备好所需的阴离子交换色谱树脂并按照要求进行催化活化。
• 校准pH和Elution Buffer的浓度。
2. 样品预处理
• 根据实验要求对样品进行预处理，以提高阴离子交换色谱柱分离效果。
• 样品必须保持干燥和无菌状态，以防止杂质和细菌的干扰。
• 样品pH值和盐浓度的调整应根据实验要求进行。
3. 样品注入
• 注入样品之前，必须先将磷酸缓冲液从柱子上进行洗脱。
• 样品注入时，流量应控制在柱子最大负荷的1/3以内。 2 • 样品的浓度应根据实验要求进行，一般情况下，其浓度控制在0.2-1.0mg/mL。
4. 洗脱和洗涤
• 洗脱液的浓度要根据实验需要进一步调节。一般而言，扰动强度和洗脱浓度成正比。
• 在洗涤前，应该先用纯水或缓冲液将杂质洗出。
• 洗脱和洗涤过程中，需要测定各阶段的洗脱液pH值，以确定实验关键点。
5. 清洗和储存
• 在操作结束后，需要对柱子进行清洗，以保证下次使用时能正常使用。
• 阴离子交换色谱柱的储存条件需要根据实验方法进行。一般来说，常温下可储存6-12个月。
二、柱子保养
1. 储存和清洗
• 在使用之后，需要对柱子进行彻底的清洗，并将其储存在干燥通风的环境中。
• 没有独立的储存条件时，柱子应储存在关闭的塑料袋内，以保证干燥和无菌状态。
• 使用前应先对柱子进行检查，确定是否有磨损或裂纹等损坏状况。 3 2. 身体安全
• 在插入阴离子交换色谱柱或更换样品时，要避免接触柱子的端口或开启柱子，以免溶液或样品误飞溅。
色
谱
柱
使
用
与
维
护
记
录
年度
色谱柱使用与维护记录 起草人 审核人 批准人
文件编码：F08-0118 版本号：01 页码：1/1
生效日期
柱子型号：
开始使用时间：
柱子编号：
尺 寸：
最大流速：
ml/min 温度范围：
典型压力： 最大压力：
冲洗方法：
使用时间 检品名称 流速
(ml/min) 柱温
（℃） 压力 主成分板数 冲洗情况
