紫花毕岱提取物对肥胖大鼠血脂及瘦素水平的影响

紫花毕岱提取物对肥胖大鼠血脂及瘦素水平的影响【摘要】目的通过紫花毕岱提取物对肥胖大鼠的干预,观察大鼠体重、血脂、血浆瘦素水平的变化及血浆中肝酯酶和脂蛋白酯酶活性的变化,探讨紫花毕岱提取物对肥胖大鼠的减肥作用及机制。

方法用高能量饲料造成雄性大鼠肥胖模型,按体重将其随机分为4组,各组均继续给予高能量饲料。

肥胖对照组灌胃生理盐水;阳性西药组灌胃盐酸西布曲明;另外2组灌胃紫花毕岱提取物,剂量分别为6、12 g/kg。

给药6周后,观察紫花毕岱提取物治疗前后大鼠体重、肥胖指数、内脏脂肪重量、血脂、血浆中肝酯酶和脂蛋白酯酶、血浆中瘦素水平的变化。

结果给予紫花毕岱提取物治疗后,营养性肥胖大鼠体重、肥胖指数、内脏脂肪重量均明显低于肥胖对照组(P<0.05);血浆瘦素水平明显降低(P<0.01);紫花毕岱提取物高、低剂量组血三酰甘油、总胆固醇明显降低(P<0.05),血浆中肝酯酶和脂蛋白酯酶活性明显升高。

结论紫花毕岱提取物灌服6周后对营养性肥胖大鼠有明显减肥作用,该作用未显示与促进血浆瘦素分泌有关,机制可能与紫花毕岱提取物降血脂作用有关。

【关键词】紫花毕岱;肥胖;瘦素;血脂;大鼠Abstract：Objective To study the effects of violet flower Bidai extracts on body weight, blood lipid level, serum leptin level, the activity of lipoprotein lipase and hepatic lipase of obese rats, and to discuss the mechanism of violet flower Bidaiextracts on weight reduction. Methods Male obese rats which induced by high energy diet were randomly divided into four groups. All rats were given high energy diet. One control group was gavaged with normal saline and one western medicine group was gavaged with sibutramine, and two violet flower Bidai extracts groups was gavaged with water solutions of violet flower Bidai extracts at doses of 6 g (crude drug)/kg BW, 12 g (crude drug)/kg BW, respectively. After six weeks, body weight, obese index, weight of abdominal fat tissue, fasting lipid, leptin in serum, the activity of lipoprotein lipase and hepatic lipase were measured. Results Body weight, obese index, weight of abdominal fat tissue in the two violet flower Bidai extracts groups were significantly lower than those in obese control group (P<0.05). Level of serum leptin in violet flower Bidai extracts groups declined markedly (P<0.01) and level of serum cholesterol and triglyceride decreased in a certain degree (P<0.05). Meanwhile, the activity of lipoprotein lipase and hepatic lipase step up. Conclusion Administration of violet flower Bidai extracts to rats for six weeks shows evident weight-reducing effect. No evidence shows that the effect is related to the ability of violet flower Bidai extracts enhancing the serum leptin level, but the effect is likely related tolowering the blood lipid level.Key words：violet flower Bidai;obesity;leptin;blood lipid;rat紫花毕岱(哈萨克语又称毕岱)是新疆的一种特色植物,广泛分布于新疆北部。

皂苷[1]是毕岱中的主要次生代谢产物之一,也是毕岱中重要的生物及药理活性物质。

在对毕岱自身生长及对环境的适应力方面,毕岱皂苷具有抗草食昆虫、抗真菌及自毒作用;在对人及动物的作用方面,毕岱皂苷具有降血脂[2]、抗炎及抗癌作用,另外还有抗营养作用[3]等对动物生长不利的方面。

本实验主要观察毕岱提取物对肥胖大鼠血脂和血浆瘦素水平的影响,以探讨毕岱提取物对肥胖大鼠影响的作用机制。

1 材料与方法1.1 动物SPF级SD雄性大鼠80只,体重60～80 g,新疆维吾尔自治区实验动物研究中心提供,许可证号：SCXK(新)2003-0002。

1.2 药物和试剂参照文献[4]方法,毕岱提取物由作者自制,主要成分为皂苷,用蒸馏水配置成溶液;盐酸西布曲明为太极集团涪陵制药厂产品,批号H,用蒸馏水溶解配置成一定浓度。

瘦素酶联免疫法测定试剂盒,批号0903252。

脂蛋白酯酶和肝酯酶测试盒由南京建成生物公司提供,批号。

1.3 分组、造模及给药大鼠购买回来后适应性饲养1周,从中随机抽取10只作为基础对照组,喂饲基础饲料(石河子大学动物中心提供),另外70只作为肥胖组喂饲高能量饲料(在石河子大学动物中心普通大鼠饲料配方的基础上加以改进,即基础饲料60%,猪油15%,鸡蛋10%,雀巢全脂奶粉15%及鱼肝油适量)。

自由饮水与摄食8周后,按照喂饲高脂饲料大鼠的平均体重大于基础饲料组大鼠平均体重的20%为肥胖判断标准,筛选出肥胖模型大鼠42只。

将此42只肥胖大鼠按体重随机分为肥胖对照组(灌胃生理盐水)、阳性西药组(灌胃盐酸西布曲明)和高、低毕岱提取物组(剂量分别为12 g原药材/kg和6 g原药材/kg灌胃给予),其中高、低剂量组各11只大鼠,肥胖对照组与阳性西药组各10只。

各组均继续喂养高脂饲料,每周称重。

基础对照组继续喂饲基础饲料,与肥胖模型大鼠同步进行各指标检测。

1.4 观察指标以给药前体重(始重)、给药后体重(终重)计算总增重(总增重=终重-始重)。

大鼠处死后测体长(从大鼠鼻尖至肛门的长度),计算肥胖指数(LT)[LT=体重(1/3)×1 000×体长-1][5];剥离内脏脂肪称湿重。

于第6周眼眶取血,用酶标仪测定血浆三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)。

脂蛋白酯酶(LPL)和肝酯酶(HL)活性的测定：给予大鼠肌肉注射130 U/kg肝素,15 min后,于大鼠眼眶取血,分离血浆[6],按试剂盒说明书,用铜试剂测定所生成的游离脂肪酸(FFA),分别计算LPL和HL的活性。

血浆瘦素酶免法,按试剂盒说明书进行。

1.5 统计学方法统计学处理采用SPSS16.0软件,数据采用—x±s表示,组间差异采用t检验。

2 结果(见表1～表3)表1 毕岱提取物对肥胖大鼠体重、体长、LT及内脏脂肪重量的影响注：与肥胖对照组比较,☆P<0.05,☆☆P<0.01;与基础对照组比较,##P<0.01(下同)表 2 毕岱提取物对肥胖大鼠血脂和血浆瘦素水平的影响表 3 毕岱提取物对肥胖大鼠HL、LPL活性的影响 3 讨论本实验结果表明,肥胖大鼠给予毕岱提取物后,体重明显降低。

除体重外,LT结合体长,更能全面反映大鼠肥胖程度,本结果显示,毕岱提取物使大鼠LT显著降低。

同时内脏脂肪重量明显降低,可能与毕岱皂苷降血脂的作用有关,提示毕岱提取物对高脂肪高营养饲料造成的营养性肥胖大鼠起到减轻体重作用。

LPL是TG降解为甘油和FFA反应的限速酶。

该酶的主要作用是使血浆中富含脂质的脂蛋白降解。

LPL主要在脏器实质细胞中合成,但在毛细血管内皮发挥作用,在肝素的作用下迅速释放入血,在血中需与载脂蛋白Ⅱ结合后发挥其脂解活性。

它主要作用于血浆富含TG的脂蛋白,如乳糜微粒、低密度脂蛋白(LDL)、极低密度脂蛋白(VLDL)等。

而在白色脂肪组织中,LPL活性升高有助于脂质的贮存。

肝脂酶是重要的脂代谢调节酶,在肝脏合成并降解。

其主要功能为继续LPL的工作。

进一步催化水解乳糜微粒和VLDL代谢残骸颗粒中的TG,将其TG水解掉80%～90%,水解高密度脂蛋白(HDL)颗粒中磷脂分子上的脂肪酸甘油键。

调节HDL分子间的相互转换。

另外,HDL中积累的未脂化胆固醇在肝酯酶作用下被肝细胞摄取,这一逆胆固醇转运作用可防止组织中过量胆固醇的积累,肝酯酶活力降低时使VLDL向LDL转变减少,VLDL清除障碍将影响脂质的代谢,造成血脂水平升高。

LPL和HL的活性受多种因素的影响,其缺陷或活性降低可导致VLDL降解障碍,引起高TG血症[7-9]。

毕岱提取物通过提高血浆中LPL和HL的活性使血脂降低,进而使脂肪降解,内脏脂肪含量降低,可能与毕岱提取物的减肥作用有关。

瘦素是由肥胖基因编码,由脂肪组织产生的一种蛋白质激素。

它作用于下丘脑的体重调节中枢,引起食欲降低,能量消耗增加,从而减轻体重[10-14]。

瘦素水平受多种因素调节,普遍认为机体的体脂量是影响瘦素水平的主要因素,而体重也与血浆瘦素水平呈正相关。

实验结果显示,肥胖模型组大鼠血浆瘦素水平较正常对照组明显升高,提示肥胖大鼠体内可能存在着瘦素抵抗,使瘦素不能发挥正常的效应,这与以往的研究结果一致。