培养基配制的基本过程教学提纲
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《培养基配制》说课稿各位领导、老师好:今天我说课的题目是:培养基的配制。
下面我将从八个角度来谈谈我今天的说课,它们分别是:教材分析、学情分析、目标定位、教学重难点、教学分析、学法分析、教学过程和总结。
首先谈谈我对教材的理解:一、教材分析培养基的配制这一节课是选自北邮出版社出版的《微生物检验技术》教材项目六中的任务三,这门课是制药技术专业的专业核心课程,是连接基础课和专业课之间的桥梁。
从教材的前后关联来看,学生们已经学习了微生物形态类群、常用器皿的清洗包扎、相关设备的使用等,这为过渡到本课题的学习起到了铺垫的作用;同时,本节课的理论、实践也为今后的课题打下了“物质”基础,所以,它在整个教材中起着承前启后的作用。
二、学情分析备课不仅要背教材还要备学生,我所教授的是职业中专二年级的学生,大多来自农村,由于长久的价值观念使然,中专学生一般由基础薄弱、学习态度不端正的弱势群体组成,他们很少得到赏识,缺乏自信。
鉴于此,课上我会多对学生进行鼓励,提高自信,使其找到课堂归属感;同时,较于乏味的理论知识讲解,中专学生乐于动手操作练习,所以我采取以项目任务引领的项目教学法开展教学活动,老师在做中教、学生在做中学,提高学生的专注力。
三、目标定位根据本教材的结构和内容分析,结合着二年级学生他们的认知结构及其心理特征,同时本着以人为本,以服务为宗旨,我侧重体现实用性和实践性,使理论与实践相结合,着重培养学生的应用能力,引导学生重点掌握课程的基础理论知识,又注重实践技能的培养,以满足职业岗位能力需要,同时还考虑到与其他课程之间的联系与分工,尽量做到在内容上不重复,在知识上不脱节;因此,我制定了以下的三级目标:(一)能力目标:1.能够依据培养基配方,准确熟练计算出配制培养基所需的材料;2.能够准确熟练配制培养基;能够准确完成分装和灭菌工作;3.树立无菌操作意识。
(二)知识目标:1.掌握所需培养基成分计算公式;2.掌握不同培养基的配制方法、流程及注意点;(三)情感目标:1.培养学生严谨的科学态度和实事求是的作风;2.培养责任心、团队精神和竞争意识,提高观察、操作、分析问题和解决问题的能力,培养学生勤俭节约、爱护公物和相互协作的良好作风,同时为进一步学习后续的专业知识打下良好的基础。
培养基的配制高中生物教案
目标:学生能够了解培养基的概念和作用,掌握常见培养基的配制方法。
教学重点:培养基的组成和配制方法。
教学难点:掌握不同培养基的配制要点。
教学准备:实验室用具、所需试剂、培养基配制方案、培养基配制步骤等。
教学过程:
一、导入 (5分钟)
通过图片或视频展示不同类型的培养基,引起学生的兴趣,引出培养基的作用和重要性。
二、讲解培养基的概念和分类 (10分钟)
1.介绍培养基的定义和作用。
2.讲解培养基的分类,如固体培养基、液体培养基等。
三、分组讨论培养基的配制方法 (15分钟)
1.将学生分成小组,每组分配一种培养基配制方案,让他们讨论并总结出配制要点。
2.组内学生互相讨论,解决问题,确保每位学生都掌握了配制方法。
四、实验操作 (30分钟)
1.学生按照所分配的配制方案,准备所需试剂和材料。
2.学生根据配制步骤操作,并观察结果,记录实验过程。
五、讨论与总结 (10分钟)
1.带领学生讨论实验中的问题和收获。
2.总结不同培养基的特点和配制要点。
六、作业布置 (5分钟)
要求学生回家复习课堂内容,准备下节课的学习任务。
七、教学反思 (5分钟)
对本节课的教学过程进行反思,总结教学亮点和不足之处,为下节课的教学做准备。
培养基的配制过程1.材料准备:配制培养基需要准备一系列的材料,包括溶液、固体成分和试剂。
常见的溶液成分有蛋白胨、蔗糖、葡萄糖、酵母提取物等。
固体成分通常包括琼脂、琼脂糖或者琼脂葡萄糖。
试剂则包括酸碱试剂、染色剂等。
2.秤重和称量:根据配方,使用准确的天平将所需的材料进行称量。
确保称量的准确性,以避免配制出来的培养基浓度不合适。
3.溶解固体成分:将固体成分加入适量的蒸馏水中,并通过搅拌等方法将其充分溶解。
4.调整pH值:测定溶液的pH值,并根据实验需求进行调整。
通常使用盐酸或氢氧化钠进行酸碱调节。
5.添加其他成分:根据实验需求,将其他需要的溶液成分添加到培养基中。
比如,添加抗生素、试剂等。
6.蒸馏水补足体积:根据所需体积,使用蒸馏水补足培养基的总体积。
在此过程中,需使用一种无菌的容器。
7.烧瓶或培养皿灭菌:将配制好的培养基倒入烧瓶或培养皿中,并进行灭菌处理。
灭菌的方法包括高压灭菌器、滤过消毒器、微波炉等。
8.装瓶和标记:将灭菌好的培养基倒入培养瓶中,并进行标记。
标记应包括培养基的配制日期、配方、pH值等重要信息。
在配制培养基的过程中,需要注意以下几个关键点:1.保持无菌:在配制培养基的过程中,需要使用无菌的材料和操作台,以避免杂菌的污染。
同时,注意避免培养基与外界环境接触,以防止污染。
2.准确称量:为了确保培养基的配制浓度准确,需要使用准确的天平进行称量。
避免因称量不准确而导致培养基浓度上下起伏,影响到微生物的生长。
3.pH值调节:培养基的pH值对微生物的生长有重要影响,因此在配制培养基时,需要测定pH值,并根据实验需求进行调节。
4.灭菌处理:在配制好的培养基倒入培养瓶中之前,必须进行灭菌处理,以杀灭可能存在的微生物。
灭菌方法有多种,可以根据实验需求和设备条件选择适当的灭菌方法。
总结起来,培养基的配制过程需要准备材料、秤重和称量、溶解固体成分、调整pH值、补足体积、灭菌处理、装瓶和标记等步骤。
在配制过程中需要注意无菌、准确称量、pH值调节和灭菌处理等关键点。
实验一培养基的配置(一)牛肉膏蛋白胨培养基的配置(用于分离培养细菌以及测定其数目、天然培养基,)1、称量牛肉膏可以放在小烧杯、表面皿、称量纸中称量,热水溶解后倒入大烧杯。
蛋白胨极易吸潮,故称量时要迅速;滤纸不可称量牛肉膏。
2、溶解加水加热搅拌,药品完全溶解(若配置固体培养基,则加入1%~2%的琼脂,再加热融化,此过程需不断搅拌,以防止琼脂糊底或溢出)定容。
若偏酸,滴加1mol/L NaOH3、调pH 待培养基冷却至室温时检测其pH 不停搅拌并随时用pH试纸检测,若偏碱,滴加1mol/L HClpH调节通常放在加琼脂之前;应注意pH不要调过头,以免回调影响各离子浓度。
液体培养基:滤纸4、过滤固体培养基:4层纱布趁热过滤固体培养基:试管高度的1/5,灭菌后摆斜面、三角瓶的1/25、分装半固体培养基:试管高度的1/36、加透气膜7、包扎将三角瓶的棉塞外包双层报纸,以防灭菌时冷凝水沾湿透气膜。
8、灭菌上述培养基121.0℃湿热灭菌20min9、摆斜面斜面长度不超过试管总长1/210、无菌检查37℃温箱培养1-2d(二)高氏1号培养基的配制(放线菌、组合培养基)1、称量和溶解可溶性淀粉加冷水调成糊状,再加水加热溶解;微量成分FeSO4*7H2O 现配成高浓度的储备液后加入:100ml+1g=0.01g/ml 再在1000ml+1ml储备液。
2、同上(三)马丁氏培养基(霉菌、半组合培养基)1、称量和溶解土豆去皮切块煮开半小时,各成分溶解好后,将孟加拉红配成1%的水溶液,在1000ml培养液中加3.3ml,加入琼脂加热融化2、同上3、链霉素的加入它受热易分解,故临用前将培养基融化后待温度降至45℃左右才能加入。
可先将其配成1%溶液,在100ml培养基中加0.3ml,使每ml培养集中含其30μg。
注意事项:称药品时牛角匙不要混用,称完药品应及时盖紧瓶盖;谨慎调pH,避免多次回调影响各离子浓度;分装过程中注意不要使培养基沾在管上,以免引起试剂污染。
培养基的配制过程及注意事项
培养基是一种用于培养微生物和其他生物体的溶液,通常包含营养物质、溶剂和添加剂等成分。
配制培养基的过程需要遵循一定的步骤和技巧,以确保培养基的质量和稳定性。
以下是培养基的配制过程简述:
1. 收集和准备成分:培养基的主要成分包括营养物质、溶剂和添加剂等。
营养物质通常包括葡萄糖、氨基酸、维生素、矿物质等,溶剂通常是水,而添加剂可以是抗生素、激素、缓冲剂等。
这些成分的质量和配比对培养基的质量至关重要。
2. 计量和称量:准备好所需成分后,需要按照一定比例进行计量和称量。
计量和称量的准确性对于培养基的质量和稳定性非常重要,因此需要使用精确的计量和称量工具。
3. 溶解和混合:将称量好的营养物质、溶剂和添加剂等成分倒入容器中,然后进行充分溶解和混合。
在溶解和混合过程中,需要注意不要混入气泡和沉淀物,以免影响培养基的质量和稳定性。
4. 调整 pH 值:培养基的 pH 值对微生物的生长和代谢有重要影响,因此需要对培养基进行适当调整。
通常可以使用氢氧化钠或氢氧化钾等化学试剂进行调整,但要注意控制 pH 值的范围,避免过高或过低的 pH 值对微生物的影响。
5. 冷却和储存:将配制好的培养基冷却至适当的温度,通常是室温或稍低,然后密封储存在冰箱里。
储存的温度和时间是培养基制备过程中非常重要的因素,过长的储存时间和温度过高都会影响培养基的质量和稳定性。
培养基的配制过程需要认真、细心的工作态度,以确保培养基的质量和稳定性。
同时,不同种类的培养基还需要根据不同的微生物和实验需要进行专门的配
制和调整。
培养基配制的过程和注意事项一、培养基配制的基本步骤1. 材料准备:首先,需要准备培养基所需的各种原料和试剂。
常用的培养基原料包括蛋白胨、葡萄糖、琼脂等。
此外,还需要准备适量的水和试剂的称量工具。
2. 称量试剂:按照配方中的比例,准确地称取所需的试剂。
在称量过程中,应注意保持实验环境的清洁,并使用洁净的称量工具,以避免试剂受到污染。
3. 溶解试剂:将称取好的试剂溶解于适量的水中。
在溶解过程中,可以通过搅拌或加热的方式促进试剂的溶解。
溶解完毕后,应检查溶液的透明度和均匀性,确保试剂充分溶解。
4. 调整pH值:根据具体的培养基配方,使用酸碱溶液调整培养基的pH值。
通过逐滴加入酸碱溶液,并经过搅拌均匀,逐步调整pH 值至所需范围。
在调整pH值的过程中,应注意避免过度调节,以免对培养细胞产生不良影响。
5. 加热消毒:将配制好的培养基加热至沸腾,保持沸腾状态持续5-10分钟,以达到消毒的目的。
在加热过程中,应注意避免溢出和烧焦,同时要保持试剂的充分混合。
6. 灭菌冷却:将消毒完毕的培养基冷却至适宜的温度,通常为45-50摄氏度。
在冷却过程中,应避免引入环境中的微生物污染,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。
7. 分装保存:将冷却好的培养基分装到无菌培养皿或试管中,并密封保存。
在分装过程中,要注意避免试剂接触到外界空气,以防止污染。
二、培养基配制的注意事项1. 实验环境要保持清洁,操作过程要注意无菌操作,以避免试剂受到污染。
2. 在配制过程中,应准确称取试剂的质量,并按照配方中的比例进行配比,以保证培养基的质量和配方的准确性。
3. 在试剂溶解和调整pH值时,应充分搅拌均匀,确保试剂充分溶解和均匀混合。
4. 加热消毒时,应注意控制加热时间和温度,以避免试剂烧焦或溢出。
5. 冷却过程中,要避免污染和细菌的侵入,可使用无菌工作台或灭菌过滤器进行操作。
6. 培养基的分装要在无菌条件下进行,并尽快密封保存,避免试剂受到外界空气和微生物的污染。
简述配制培养基的基本步骤及注意事项以简述配制培养基的基本步骤及注意事项为标题,写一篇文章。
配制培养基是细胞生物学和微生物学研究中的重要步骤之一。
培养基是供给细胞或微生物生长和繁殖所需的营养物质的溶液,通过合适的配制可以提供细胞或微生物生长所需的营养物质、调节pH值和温度等环境因素,促进其生长和繁殖。
下面将简要介绍配制培养基的基本步骤及注意事项。
一、基本步骤:1. 确定培养基配方:根据研究目的和被培养的细胞或微生物的需求,选择合适的培养基配方。
常见的培养基包括无机盐、有机营养物、维生素和生长因子等。
根据具体需求,可以在基础培养基中添加不同的添加剂,如血清、抗生素等。
2. 计算配方中的成分:根据所选培养基配方,按比例计算各个成分的用量。
注意根据实验需求调整各个成分的浓度,确保培养基中的营养物质满足细胞或微生物的需求。
3. 配制溶液:将所需的固体成分称取并溶解于适量的溶剂中,通常是蒸馏水。
溶解固体成分时,可以先将其加热至溶解温度,然后搅拌均匀。
4. 调节pH值:使用酸或碱溶液调节培养基的pH值至所需范围。
pH值的调节对于细胞或微生物的生长和繁殖至关重要,一般培养基的pH值在7.0左右。
5. 滤过消毒:将配制好的培养基溶液通过0.22微米的滤器进行滤过消毒,以防止细菌和其他微生物的污染。
滤过消毒后的培养基应保存在无菌条件下,避免细菌再次污染。
二、注意事项:1. 严格按照配方计算成分的用量,避免过量或不足,以免影响细胞或微生物的生长和繁殖。
2. 使用高纯度的试剂和溶剂,以确保培养基的质量和纯度。
3. 注意培养基的pH值调节,过高或过低的pH值都会影响细胞或微生物的生长。
4. 注意培养基的温度调节,一般情况下,培养基的温度应与被培养的细胞或微生物的生长温度相匹配。
5. 避免细菌和其他微生物的污染,应在无菌条件下操作,使用无菌器材和耗材。
6. 培养基的保存应在低温和无菌条件下进行,以防止营养物质降解和细菌污染。
培养基的配制过程
培养基的配制过程
培养基是实验中常用的培养材料,其质量和性能对试验数据的准确性有很大的影响。
合理配制培养基,是保证实验质量和可靠性的重要一步。
以下分步介绍培养基配制过程。
第一步,准备原料。
准备所需培养基原料,包括氮来源、碳来源、催化剂、维生素、矿物质和无机盐。
这些原料及添加量应按照培养基配方要求准备好。
第二步,蒸馏水灭菌。
所有材料,包括悬浮成分在内的所有培养基,都应使用蒸馏水加热灭菌。
第三步,全部成分混合。
将所有成分混合搅拌均匀,直到培养基完全溶解,形成无色透明液体。
第四步,灭菌处理。
将混合后的培养基放入灭菌器中,以121℃、
15psi的压力对培养基进行30-60分钟的高温杀菌处理。
第五步,检测培养基。
检测培养基的 pH 值,通常可用 pH 计或试纸检测。
第六步,培养基存储。
将灭菌后的培养基储存在4℃的冰箱内,以避免受到可能的污染。
以上就是培养基的配制过程,它可以有效地确保培养基的质量和可靠
性,从而确保实验效果的准确性。
正确的配制培养基非常重要,只有这样才能确保实验的可靠性和准确性。
实验一培养基的制备一目的要求1 明确培养基的配制原理2 通过对基础培养基的配制,掌握配制培养基的一般方法和步骤二基本原理不同培养基中含有不同的微生物生长所需要的营养物质,其可供微生物生长繁殖用,为微生物提供C源、能源、N源和维生素。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96度溶化,实际应用时,一般在沸水中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免烧焦,琼脂在40度时凝固,通常不被微生物分解利用,固体培养基中琼脂含量根据琼脂的质量和气温的不同有所不同。
牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏:3.0g,蛋白胨10.0g,NACl5.0g,水1000ml,pH 7.2-7.4.马铃薯培养基是霉菌的基本培养基,培养基配方如下:马铃薯100g 蔗糖10g 琼脂10g 水500ml pH 自然三器材:1试剂或溶液:马铃薯、蔗糖、琼脂、蒸馏水。
2仪器或其它用具:试管、三角瓶、烧杯、玻璃棒、天平、牛角勺,纱布、麻绳、牛皮纸、高压灭菌锅四操作步骤1称量:依次称取马铃薯块、蔗糖、,切碎的琼脂放入三角瓶中并加入500ml蒸馏水2 把三角瓶放入锅中,锅盖好后放在电热炉上加热,等琼脂溶解后取出三角瓶3过滤:趁热用多层纱布过滤,去除里面的杂质4分装:将配制好的培养基分装入试管。
5加塞:分装完后在试管口塞上塞子,以阻止外界微生物进入培养基造成污染,并保证有良好的勇气性能。
6包扎:用牛皮纸再包扎瓶口,以防灭菌时弄湿棉塞。
7灭菌:用高压蒸汽锅在0.1MP下灭菌20min8搁置斜面:趁热将试管里的培养基斜面,注意斜面的长度大约为试管长度的1/29无菌检查五:注意事项1培养基配制后,必须立即灭菌2分装过程中,注意不要使培养基沾在管口上,以免沾在塞子上而引起污染实验二革兰氏染色法一目的要求1学习并初步掌握革兰氏染色法2了解革兰氏染色法的原理及其在细菌分类鉴定中的重要性二基本原理革兰氏染色法是1884年丹麦病理学家christain Gram 创立的而后作了些改进,革兰氏染色法是细菌学中最重要的鉴别染色法。
培养基配制的基本过程1、配制溶液向容器内加入所需水量的一部分,根据培育基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最终补足所需水分.对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足.配制固体培育基时,先将上述已配好的液体培育基煮沸,再将称好的琼脂加入,连续加热至完全溶化.并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦.2、调整pH值用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培育基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调整,直到调整到配方要求的pH值为止.3、过滤用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培育基过滤.用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤.4、分装已过滤的培育基应进行分装.假如要制作斜面培育基,须将培育基分装于试管中.假如要制作平板培育基或液体、半固体培育基,则须将培育基分装于锥形瓶内.分装时,一手捏松弹簧夹,使培育基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培育基.分装时,留意不要使培育基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染.装入试管的培育基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定.一般制作斜面培育基时,每只15150毫米的试管,约装3~4毫升(1/4~1/3试管高度),如制作深层培育基,每只20230毫米的试管约装12~15毫升.每只锥形瓶装入的培育基,一般以其容积的一半为宜.5、加棉塞分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口.堵棉塞的主要目的是过滤空气,避开污染.棉塞应采纳一般新奇、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用.制作棉塞时,要依据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞.棉塞作成后,应快速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入.棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适.棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取.塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,预备灭菌.6、制作斜面培育基和平板培育基培育基灭菌后,如制作斜面培育基和平板培育基,须趁培育基未凝固时进行.(1)制作斜面培育基.在试验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右.将试管头部枕在木条上,使管内培育基自然倾斜,凝固后即成斜面培育基.(2)制作平板培育基.将刚刚灭过菌的盛有培育基的锥形瓶和培育皿放在试验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯上稍加灼烧,左手打开培育皿盖,右手快速将培育基倒入培育皿中,每皿约倒入10毫升,以铺满皿底为度.铺放培育基后放置15分钟左右,待培育基凝固后,再5个培育皿一叠,倒置过来,平放在恒温箱里,24小时后检查,如培育基末长杂菌,即可用来培育微生物.。
一、教学目标1. 知识目标:- 了解培养基的基本组成及其在微生物培养中的作用。
- 掌握培养基配制的步骤和方法。
- 熟悉不同类型培养基的特点和应用。
2. 能力目标:- 能够独立完成培养基的配制过程。
- 能够根据实验需求选择合适的培养基配方。
- 培养实验操作技能和实验室安全意识。
3. 情感目标:- 培养学生对微生物学的兴趣和好奇心。
- 增强学生的团队协作能力和责任感。
- 增强学生的科学素养和严谨的科研态度。
二、教学对象本教学设计方案适用于生物学、微生物学等相关专业的本科生。
三、教学内容1. 培养基的基本组成:- 营养成分:碳源、氮源、水、无机盐、生长因子。
- 添加剂:指示剂、抗生素、抑制剂等。
2. 培养基的配制步骤:- 原料准备:称量、溶解、灭菌。
- 配制方法:液体培养基的配制、固体培养基的制备。
- 分装与灭菌:分装、封口、高压灭菌。
3. 常见培养基的类型及其应用:- 选择培养基:用于分离和纯化特定微生物。
- 培养基:用于培养和保存微生物。
- 差异培养基:用于观察微生物的特定特征。
四、教学过程1. 理论教学:- 讲解培养基的基本组成、配制步骤和常见类型。
- 通过PPT、视频等多媒体手段展示培养基配制的实际操作。
2. 实验教学:- 学生分组进行培养基配制实验。
- 教师现场指导,解答学生疑问。
- 学生独立完成培养基配制,包括原料准备、溶解、灭菌、分装与封口等步骤。
3. 课后作业:- 完成实验报告,包括实验目的、原理、步骤、结果和分析。
- 撰写实验总结,反思实验过程中的问题及改进措施。
五、教学评价1. 课堂表现:学生的出勤率、参与度、提问积极性等。
2. 实验操作:学生的实验技能、操作规范性、实验结果等。
3. 作业完成情况:实验报告的质量、实验总结的深度等。
六、教学资源1. 教材和参考书籍:《微生物学》、《微生物实验技术》等。
2. 实验室设备:天平、高压灭菌器、移液器、培养皿、试管等。
3. 多媒体资源:PPT、视频、实验操作指南等。
简述配制培养基的步骤
一、配制培养基的步骤:
1、准备培养基原料:根据科研实验要求,准备正确的培养基原料(如琼脂,碳源,氮源,营养素,细胞毒);
2、检验培养基原料:检查培养基原料(如结晶,味道,颜色),确认未受污染,质量合格;
3、称量:按科学比例称量培养基原料,批次相同,才能制备出与同一培养基组成比例完全一致的培养基;
4、清洗:清洗所有的培养基原料,将不合格的原料扔掉,以确保所配制培养基的质量;
5、添加:将称好的培养基原料添加到容器中,按照一定的比例将培养基原料充分混合;
6、煮沸:将混合好的培养基仔细地放入烧杯或容器中,放入微波炉或加热器内加热,并调节温度,保持恒温;
7、杀菌:将温度调节好的培养基置入抗菌灭菌器中进行灭菌,然后在室温下孵育15-30min;
8、过滤:将杀菌后的培养基进行滤过以去除杂质;
9、储存:将完全配制好的培养基放入密封瓶或烧杯中,存放于-20℃冰箱中进行保存。
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2014-----2015 学年第一学期植物组织培养技术课程教案课程编码:_______________________________________ 课程类型:理实一体化课程(理论课,理实一体化课程,纯实践(技能)课)总学时/周学时:___________64______________________ 开课时间:2014年至2015年第一学期;第1周至第8周授课年级、专业、班级:2013级生物制药使用教材:__________植物组织培养_石文山主编_______ 授课教师:__________ 王玉珍______________班级2013生物制药课程植物组织培养教学内容马铃薯培养基的配制教学时数 2执教教师王玉珍时间2014.11.17上午课型理论(),理实一体化(√),实践()教学目标知识目标1.进一步认识培养基的配制方法2.掌握培养基的配制的要点能力目标1.能够正确进行培养基的配制2.能够对实验结果进行分析3. 能够对实验过程出现的异常现象进行应急处理素质目标1.相互合作的意识2.提高安全意识3.培养创新能力教学方法 1.项目教学法2.理实一体化教学3.小组合作式教学创新精神和职业核心能力(或职业素养)培养 1.培养学生利用基本操作规范,研究发现最适合于红掌和百合生长的培养基,从而形成创新意识,掌握科学研究的方法。
教学难点重点 1.培养基母液的正确移取 2.移液管的正确使用3. 药品的正确称量4. 分装培养基的操作教学条件在理实一体化教室进行操作,多媒体教学,实验药品器材齐全,教师具有丰富的教学经验,教学仪器及药品 1.仪器:电磁炉1个、MS母液6瓶、搪瓷杯(1000ml)1个、培养瓶12个、烧杯(200ml)1个、2L广口瓶(装有蒸馏水)、洗瓶1个、量筒(500ml)1个、量筒(50ml)1个、移液管(10ml)1个、移液管(5ml)5个、0.1mol/L HCl 1瓶、0.1mol/L NaOH 1瓶、pH试纸(5.0-7.0)1包、吸耳球1个、镊子1个、玻璃棒1个、抹布1块、称量纸1包、卷纸1包、标签纸1张、草稿纸2张、水芯笔1支、计算器1个。
简述培养基的配制过程培养基是用于培养和繁殖微生物的营养物质的混合物,也是微生物研究和实验的基础。
培养基的配制过程可以简单概括为选取合适的营养物质、调节pH值和灭菌处理。
下面将具体介绍培养基的配制过程。
第一步,选择合适的营养物质。
培养基的成分需要提供微生物所需的营养物质,如碳源、氮源、矿物质和生长因子等。
不同的微生物对营养需求各有不同,因此配制培养基前需要了解对应微生物的特点及营养需求,选择适当的营养物质来满足其生长需求。
第二步,调节pH值。
微生物的生长与环境的酸碱度密切相关,过高或过低的pH值都会对微生物的生长产生影响。
根据微生物的要求和培养条件,将配制好的培养基调节至适宜的pH值范围内,一般为6.5-7.5之间。
常用的调节剂有盐酸和氢氧化钠,可以根据需要逐滴加入培养基中,反复检测pH值,直至达到所需范围。
第三步,灭菌处理。
在使用培养基之前,必须杀灭其中的任何现有微生物,以保证只有所需微生物生长在培养基上。
灭菌处理通常有两种方式:物理灭菌和化学灭菌。
物理灭菌可以采用高温高压的压力灭菌器或自动两用压力锅,也可以使用紫外线照射培养基,但需注意时间和距离控制。
化学灭菌则是通过添加抗生素、消毒剂或其它抑菌物资来实现。
以上便是培养基的配制过程。
通过选择合适的营养物质、调节pH值和灭菌处理,可以制备出适合培养和繁殖微生物的基质。
在培养基配制过程中,我们需要确保所选部件的质量与浓度准确无误,以提供微生物生长的最佳环境。
合理的配制培养基不仅对于微生物的生长和研究至关重要,同时在实验操作过程中也能够提高实验结果的准确性和可靠性。
简述配制培养基的基本步骤及注意事项配制培养基是微生物学实验中必不可少的步骤,它直接影响到实验结果的准确性和可重复性。
下面将详细介绍配制培养基的基本步骤及注意事项。
一、基本步骤1.准备原料:根据所需培养菌种的不同,选择相应的培养基成分,并准备好所需量的水、试剂瓶、量筒、称量器等。
2.称量成分:按照配方比例,精确地称取各种成分,并放入干燥无菌容器中。
3.溶解成分:向称取好的各种成分中加入适量的水,进行溶解。
在此过程中应注意搅拌均匀,以防止产生团块。
4.调节pH值:根据所需菌种对pH值的要求,在溶液中加入适当量的盐酸或氢氧化钠等试剂进行调节。
调节后应使用pH计检测pH值是否达到所需范围。
5.加水至定容:将调节好pH值的溶液加入干燥无菌容器中,并用蒸馏水加至定容。
在此过程中也要注意搅拌均匀,以确保各种成分均匀分布。
6.灭菌:将配制好的培养基进行灭菌处理。
常用的方法有高压蒸汽灭菌和过滤灭菌等。
二、注意事项1.选择合适的培养基成分:不同的微生物对于营养成分的需求不同,因此在配制培养基时应选择合适的成分,以保证微生物能够正常生长和繁殖。
2.精确称量各种成分:在称量各种成分时应精确到毫克级别,以确保配方比例正确。
3.搅拌均匀:在溶解成分和加水至定容时应注意搅拌均匀,以防止产生团块或不均匀混合导致部分培养基无法使用。
4.严格控制pH值:微生物对于pH值的要求非常严格,因此在调节pH值时应精确控制,并使用pH计检测是否达到所需范围。
5.注意灭菌处理:在培养基配制完成后,必须进行灭菌处理。
如果没有进行有效的灭菌处理,则可能会导致细菌污染,从而影响实验结果。
6.注意无菌操作:在培养基配制过程中,应严格遵守无菌操作规范,以防止微生物污染。
例如,使用无菌器皿、试剂瓶等,并在无菌操作台上进行操作。
7.注意保存条件:配制好的培养基应存放于干燥、阴凉、避光处,并尽快使用。
如果需要长期保存,则应冷藏或冷冻保存。
总之,在配制培养基时,应根据实验需要选择合适的成分和比例,并严格控制各种操作步骤和条件,以保证培养基的质量和可靠性。
简述培养基配制的过程。
培养基配制是指根据微生物的生长特性和营养需求,将各种化学物质按一定比例配制成适合微生物生长的培养基。
培养基配制的过程主要包括选择培养基类型、选择培养基成分、计算配方比例、称量和溶解培养基成分、调节pH值、灭菌和储存等步骤。
首先,选择培养基类型。
根据微生物的生长特性和营养需求,可以选择不同类型的培养基,如富含蛋白质的肉汤培养基、富含糖类的糖盐培养基、富含脂类的脂肪培养基等。
选择合适的培养基类型是培养特定微生物的基础。
其次,选择培养基成分。
根据微生物的营养需求,选择适当的有机和无机成分。
有机成分包括蛋白质、糖类、脂类等,无机成分包括盐类、微量元素等。
不同微生物对培养基成分的需求不同,因此需要根据微生物的特性选择合适的成分。
然后,计算配方比例。
根据培养基成分的需求和浓度,计算各个成分的配方比例。
通常使用质量百分比或体积百分比来表示配方比例。
计算配方比例时需要考虑到微生物的生长需求和培养基成分的相互作用。
接下来,称量和溶解培养基成分。
根据计算得到的配方比例,准确称量各个成分。
称量时需要注意准确度和卫生条件,以避免外源性污染。
称量完成后,将各个成分溶解在适当的溶剂中,通常是蒸馏水或缓冲液。
然后,调节pH值。
微生物对pH值的要求不同,因此需要根据微生物的需求调节培养基的pH值。
调节pH值可以使用酸碱溶液,如盐酸或氢氧化钠溶液。
调节pH值时需要使用pH计进行准确测量,并逐渐调节至目标值。
接着,灭菌。
灭菌是为了杀灭培养基中的微生物和其他污染物,以保证培养基的无菌性。
常用的灭菌方法包括高温灭菌、压力灭菌和化学灭菌。
高温灭菌通常使用高压高温的蒸汽,压力灭菌使用高压的蒸汽,化学灭菌使用抗菌剂或过滤器。
最后,储存。
配制好的培养基可以储存在适当的容器中,如试管、烧杯或培养皿中。
储存时需要注意密封和避光,以防止培养基的变质和污染。
储存的时间一般不宜过长,以保证培养基的质量。
总结起来,培养基配制的过程包括选择培养基类型、选择培养基成分、计算配方比例、称量和溶解培养基成分、调节pH值、灭菌和储存等步骤。
培养基配制的基本过
程
培养基配制的基本过程
1.配制溶液
向容器内加入所需水量的一部分,按照培养基的配方,称取各种原料,依次加入使其溶解,最后补足所需水分。
对蛋白胨、肉膏等物质,需加热溶解,加热过程所蒸发的水分,应在全部原料溶解后加水补足。
配制固体培养基时,先将上述已配好的液体培养基煮沸,再将称好的琼脂加入,继续加热至完全融化。
并不断搅拌,以免琼脂糊底烧焦。
2.调节pH值
用pH试纸(或pH电位计、氢离子浓度比色计)测试培养基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH进行调节,直到调节到配方要求的pH 值为止。
3.过滤
用滤纸、纱布或棉花趁热将已配好的培养基过滤。
用纱布过滤时,最好折叠成六层,用滤纸过滤时,可将滤纸折叠成瓦棱形,铺在漏斗上过滤。
4.分装
已过滤的培养基应进行分装。
如果要制作斜面培养基,须将培养基分装于试管中。
如果要制作平板培养基或液体、半固体培养基,则须将培养基分装于锥形瓶内。
分装时,一手捏松弹簧夹,使培养基流出,另一只手握住几支试管或锥形瓶,依次接取培养基。
分装时,注意不要使培养基粘附管口或瓶口,以免浸湿棉塞引起杂菌污染。
装入试管的培养基量,视试管和锥形瓶的大小及需要而定。
一般制作斜面培养基时,每只15×150毫米的试管,约装3~4毫升(1/4~1/3试管高度),如制作深层培养基,每只20×220毫米的试管约装12~15毫升。
每只锥形瓶装入的培养基,一般以其容积的一半为宜。
5.加棉塞
分装完毕后,需要用棉塞堵住管口或瓶口。
堵棉塞的主要目的是过滤空气,避免污染。
棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作,不要用脱脂棉,以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。
制作棉塞时,要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度,揪取手掌心大小一块,铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中,用右手食指插入棉花中部,同时左手食指与姆指稍稍紧握,就会形成1个长棒形的棉塞。
棉塞作成后,应迅速塞入管口或瓶口中,棉塞应紧贴内壁不留缝隙,以防空气中微生物沿皱折侵入。
棉塞不要过紧过松,塞好后,以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。
棉塞的2/3应在管内或瓶内,上端露出少许棉花便于拔取。
塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札,准备灭菌。
6.制作斜面培养基和平板培养基
培养基灭菌后,如制作斜面培养基和平板培养基,须趁培养基未凝固时进行。
(1)制作斜面培养基。
在实验台上放1支长0.5~1米左右的木条,厚度为1厘米左右。
将试管头部枕在木条上,使管内培养基自然倾斜,凝固后即成斜面培养基。
(2)制作平板培养基。
将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上,点燃酒精灯,右手托起锥形瓶瓶底,左手拔下棉塞,将瓶口在酒精灯
上稍加灼烧,左手打开培养皿盖,右手迅速将培养基倒入培养皿中,每皿约倒入10毫升,以铺满皿底为度。
铺放培养基后放置15分钟左右,待培养基凝固后,再5个培养皿一叠,倒置过来,平放在恒温箱里,24小时后检查,如培养基末长杂菌,即可用来培养微生物。