第11章 流式细胞技术和流式细胞仪习题

临床医学检验：流式细胞仪及免疫自动化仪器找答案真题1、单选藻红蛋白(PE)的荧光发射强度比FITC强多少倍()A．9B．19C．190D．1900E．19000正确答案：B2、单选以催化反应或能量传递参与（江南博哥）发光的最常用酶标记物是() A．HRP或ALPB．HRP或THBC．ALP或TMBD．ALP或OPDE．三联吡啶钌正确答案：A3、单选定时散射比浊分析中，如果待测标本的预反应时间段的光散射信号超过预设阈值时，则应()A．进行全量样本检测B．将待测标本稀释后重新测定C．照常进行反应D．测量结果更可靠E．增加抗体的浓度后重新检测正确答案：B4、填空题根据发光反应中形成激发态分子的能量来源不同，将发光又分为______________、__________________、________________。

正确答案：光照发光；生物发光；化学发光5、填空题荧光信号的放大测定通常使用______________和____________________。

免疫测量中最常使用的是______________。

正确答案：线性放大器；对数放大器；对数放大器6、单选光束成形器的作用是将激光器发射的激光束聚焦成下列哪种光斑() A．高15μm、宽57μm的椭圆形光斑B．高10μm、宽57μm的椭圆形光斑C．高15μm、宽50μm的椭圆形光斑D．高10μm、宽50μm的椭圆形光斑E．高20μm、宽60μm的椭圆形光斑正确答案：A7、单选下列可与蛋白质、半抗原激素及核酸等物质结合的标记物是()A．吖啶醇类B．三丙胺C．鲁米诺类D．三联吡啶钌E．三氧乙烷正确答案：D8、单选前向散射光(FS)信号的强弱与细胞的哪项成正比() A．体积大小B．细胞性状C．颗粒多少D．位移速度E．荧光强弱正确答案：A9、单选对培养细胞的分选不宜选择高速的最可能原因是() A．细胞太多B．细胞太大C．细胞膜脆弱D．细胞核脆弱E．胞浆所占比例大正确答案：C10、单选免疫透射比浊分析制备标准曲线时，标准品至少应设() A．2个浓度点B．3个浓度点C．4个浓度点D．5个浓度点E．1个浓度点正确答案：D11、单选目前的流式细胞仪的分选速度可达到()A．20000个/秒B．10000个/秒C．7000个/秒D．5000个/秒E．3000个/秒正确答案：C12、单选电化学发光免疫分析中，最常使用的方法是()A．双抗体夹心法B．竞争法C．间接法D．直接法E．补体参与的结合法正确答案：A13、单选被分选细胞形成液滴时会被()A．染色B．充电C．酶标记D．抗体捕捉E．以上都不是正确答案：B14、单选流式细胞仪的基本结构组成是()A．液流系统B．光学系统C．计算机系统D．液流系统、光学系统和信号处理系统E．液流系统、光学与信号转换测试系统和信号处理及放大的计算机系统正确答案：E15、单选其作用为反射较长波长的光而通过较短波长的光的是()A．气冷氩离子激光器B．分色反光镜C．光束成形器D．透镜组E．光电信增管正确答案：B16、填空题Rayleigh的设计原理是，散射光的强度与复合物的量成________________，与散射夹角成______________，与波长成________________。

二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

1．流式细胞仪中的鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆形流束，自喷嘴的圆形孔喷出，与水平方向的激光束垂直相交，相交点称为（）A．敏感区B．测量区C．激光区D．计算区E．观察区2．流式细胞仪使用的染色细胞受激光照射后发出荧光，同时产生（）A．电离辐射B．光散射C．电磁辐射D．光反射E．光电子3．流式细胞仪中的光电倍增管接收（）A．散射光B．荧光C．激光D．射线E．反光4．流式细胞仪中的光电二级管接收（）A．散射光B．荧光C．激光D．射线E．反光5．通过测量区的液柱断裂成一连串均匀液滴的原因是在（）A．在流动室上加上了频率为30kHz的信号B．在测量区上加上了频率为30kHz的信号C．在压电晶体上加上了频率为30kHz的信号D．在光电倍增管上加上了频率为30kHz的信号E．在光电二级管上加上了频率为30kHz的信号6．将悬浮分散的单细胞悬液，经特异荧光染料染色后，放人样品管，悬浮在样品管中的单细胞悬液形成样品流垂直进入流式细胞仪的流动室，动力来自于（）A．激光B．压电晶体C．气体压力D．荧光E．散射光7．流动室轴心至外壁的鞘液向下流动，形成包绕细胞悬液的是（）A．鞘液流B．细胞流C．散射光D．荧光E．测量区8．各类细胞的特性信息在测量区被测定的时间为（）A．在细胞形成液滴以前B．在细胞形成液滴以后C．在细胞形成液滴过程中D．在细胞形成液滴前后E．在细胞形成液滴一小时9．样品流在鞘流的环包下形成流体动力学聚焦，使样品流不会脱离液流的轴线方向，并且保证每个细胞通过（）A．荧光照射区B．散射光照射区C．激光照射区D．X光照射区E．太阳光照射区10．前向角散射可以检测（）A．细胞膜厚薄B．被测细胞的大小C．细胞质多少D．核膜的折射率E．DNA含量11．在对细胞膜表面抗原的荧光检测时通常使用（）A．线性放大器B．指数放大器C．对数放大器D．整数放大器E．函数放大器12．一般对DNA倍体测量时采用（）A．荧光信号的面积B．散射光信号的面积C．前向角散射信号面积和宽度D．散射光信号的宽度E．荧光信号的宽度13．荧光信号的宽度常用来区分（）A．淋巴细胞B．红细胞C．白细胞D．双联体细胞E．单倍体细胞14．光谱重叠校正的最有效方法是使用（）A．放大电路B．荧光电路C．散射光电路D．衰减电路E．双激光立体光路15．若每秒钟产生4万个水滴,每秒钟流出的细胞是1000个，则平均每40个水滴中有（）A．三个水滴是有细胞的B．二个水滴是有细胞的C．四个水滴是有细胞的D.一个水滴是有细胞的E．五个水滴是有细胞的16．流式细胞术对HIV感染者或AIDS发病者进行区别是通过（）A．测DNA凋亡峰B．胞质抗原含量测定C．动态监测T细胞亚群D．测凋亡调节蛋白E．DNA倍体含量测定17．下落的水滴通过一对平行板电极形成的静电场时，带正电荷的水滴向（）A．带负电的电极板偏转B．带正电的电极板偏转C．不偏转D．前向角偏转E．侧向角偏转18．什么是鉴别良、恶性肿瘤的特异指标为（）A．非特异性酯酶含量测定B．胞质抗原含量测定C．DNA含量测定D．过氧化物酶含量测定E．DNA倍体含量测定19．衡量流式细胞仪检测微弱荧光信号的重要指标是（）A．灵敏度的高低B．荧光强度C．散射光大小D．精密度大小E．准确度的高低20．分辨率是衡量仪器测量精度的指标，通常用（）A．误差值表示B．标准差值表示C．灵敏度值表示D．变异系数值表示E．精密度值表示21．与前向角散射密切相关的是（）A．细胞直径B．细胞直径的平方C．细胞核的形状D．血小板数量E．病毒性质22．流式细胞仪测定的标本，不论是外周血细胞,还是培养细胞，首先要保证是（）A．单倍体细胞悬液B．双倍体细胞悬液C．红细胞悬液D．白细胞悬液E．单细胞悬液23.光路与流路校正的主要目是确保（）A．激光光路稳定B．样品流稳定C．激光光路与样品流处于正交状态D．荧光光光路与样品流处于正交状态E．散射光光路与样品流处于正交状态24．为保证样品检测时仪器处于最佳工作状态，PMT校准采用（）A．样品B．质控品C．鞘液D．生理盐水E．缓冲液25．为保证仪器在计数时的准确性，流式细胞仪应建立绝对计数（）A．样品B．细胞C．鞘液D．细菌E．标准品26．样品和鞘液管道应用漂白粉液清洗的间隔时间为（）A．每月B．每天C．每季度D．每周E．每年27．FCM显示激光器开启错误,引起故障的可能原因是（）A．激光器关闭B．激光器门打开C．流式细胞仪连接错误D．清洗液少了E．数据太大，难以处理28．FCM显示清洗液高度警示,引起故障的可能原因是（）A．激光器关闭B．激光器门打开C．流式细胞仪连接错误D．清洗液少了E．清洗液传感器失灵29．FCM显示数据处理速率错误,引起故障的可能原因是（）A．数据太大，难以处理B．激光器门打开C．流式细胞仪连接错误D．清洗液少了E．清洗液传感器失灵二、选择题【A型题】1．B 2．B 3．B 4．A 5．C 6．C 7．A 8．A 9．C 10．B 11．C 12．A 13．D 14．E15．D 16．C 17．A 18．E 19．A 20．D 21．B 22．E 23．C 24．B 25．E 26．D 27．B 28．E29．A【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。

流式培训理论题（开卷）一、流式基本理论知识1、解释FSC和SSC。

2、解释何为荧光素、荧光信号强度、并分别解释三种流式图谱。

3、流式细胞仪能用来做什么？4、设门的目的是什么？如何设门？5、流式的对照有哪些？说明每种对照的用途。

6、解释一下调节荧光补偿的原理。

7、简述使用流式细胞仪检测细胞特异蛋白marker的实验流程。

包括每一步骤的具体操作以及需要注意的事项。

8、如何去选择抗体？9、常用的荧光染料以及其检测通道（有的不止一个通道），至少说出5个。

二、Guava流式细胞仪知识考查1、我们的流式细胞仪的型号：2、Guava流式细胞仪与普通鞘液流式细胞仪的区别，分别从优缺点以及应用范围来说明。

3、简述Guava流式细胞仪的基本组成。

4、简述guava流式细胞仪的微毛细管液流系统。

5、简述guava流式细胞仪的光路系统。

6、我们的Guava流式细胞仪的激光器和荧光通道有哪些？7、Guava流式细胞仪软件的常用模块有哪些？8、简述Guava流式的开机关机流程。

三、应用题1、小鼠中，淋巴细胞、T细胞、T helper细胞、T Cytotoxic细胞、B细胞、NK细胞、DC细胞、中心粒细胞、单核细胞的marker是什么？2、现有一特定方法得到的细胞，我们要研究里面的中心粒细胞、T细胞、T helper细胞、T Cytotoxic细胞的比例，怎么做？请采用多色标记的方法来设计，尽量减少抗体荧光素的串扰。

3、如果要研究细胞凋亡，用流式细胞仪怎么做？需要同时检测早期凋亡、晚期凋亡/死亡细胞的比例。

四、注意事项1、guava流式细胞仪对细胞密度的要求？如果细胞密度过高有什么影响？该如何处理？2、guava流式细胞仪对颗粒粒径的的要求？提取的细胞，上样前必须如何操作来避免堵塞毛细管？3、如果跑着跑着没有细胞了，可能是哪些原因？4、没有用完的96孔板怎么处理？。

临床医学检验：流式细胞仪及免疫自动化仪器试题及答案1、单选分选得率与下列哪项因素密切相关()A．分选速度相关B．分选目的细胞总量相关C．不选细胞总量相关D．分选细胞的生物学性质E．不选细胞的生物学（江南博哥）性质正确答案：A2、单选假三维等高图中的一维表示()A．细胞B．细胞数C．线性D．对数E．峰值正确答案：B3、判断题荧光染料浓度较稀时，荧光强度与溶液成反比。

()正确答案：错4、单选流式细胞仪测定时，激发光与稳态单细胞液柱成哪种相交() A．方向一致B．平行C．垂直D．成45度角E．成30度角正确答案：C5、单选线性放大器中输入信号放大10倍，输出信号放大()A．1倍B．2倍C．3倍D．10倍E．100倍正确答案：D6、单选前向散射光(FS)信号的强弱与细胞的哪项成正比()A．体积大小B．细胞性状C．颗粒多少D．位移速度E．荧光强弱正确答案：A7、名词解释能量传递复合染料正确答案：主要用化学法将两种不同激发波长的染料结合一起，在488nm波长激发光照射下，通过一个荧光染料被激发后产生的发射波长激发另一荧光染料产生荧光信号，从而检测到该特定荧光信号。

8、单选流式细胞仪的绝对计数的校准，选择的质控品是()A．FlowcountB．Immuno-TrolCellsC．Flow-SetFluoropheresD．Flow-checkFluoropheresE．以上均不对正确答案：A9、单选面积脉冲信号是指()A．电压脉冲曲线内外区域的大小B．电压脉冲曲线外区域的大小C．电压脉冲曲线内区域的大小D．电压脉冲的高度E．以上都不是正确答案：C10、填空题流式细胞术是对__________________的理化特性进行多参数定量分析和分选的新技术。

正确答案：单个细胞11、单选免疫透射比浊分析应保证()A．抗原过量B．抗体过量C．抗体与抗原处于最适比D．抗原与抗体比例为1:1E．抗原与抗体比例为2:1正确答案：B12、问答题免疫透射比浊分析有何实验要求?正确答案：免疫透射比浊分析的实验要求如下：⑴溶液中存在的抗原抗体复合分子应足够大，分子太小则阻挡不了光线的通过；⑵溶液中抗原抗体复合物的数量要足够多；⑶检测中仍需较长的抗原抗体反应温育时间；⑷检测用抗体一般应选择亲和力高的抗体。

流式细胞仪分析技术及应用一、选择题（一）A1型题（标准型）1．流式细胞仪是由下述哪项基本结构组成A．流体系统B．光学系统C．计算机系统D．流体系统、光学系统和信号处理系统E．流体系统、光学与信号转换测试系统和信号处理与放大的计算机系统2．流式细胞仪流动池鞘液孔径通常为A．50μmB．50～100μmC．50～200μmD．50～300μmE．300μm3．关于液流系统的鞘液，下述哪项是正确的A．鞘液是辅助样本作正常检测的基质液B．鞘液是用来与样本作对比的C．鞘液是包裹在样本流周围D．使样本保持处于喷嘴中心位置，保证检测精确性E．防止样本流细胞靠近喷孔而形成堵塞4．流式细胞仪光学系统的组成为A．激光系统B．激光光源与分光镜C．激光光源、分光镜与光束成形器D．激光光源、分光镜、光束成形器和透镜组E．激光光源、分光镜、光束成形器、透镜组和光电倍增管5．下述哪项关于激光光源的叙述是正确的A．采用气冷式氩离子激光器B．激光波长488nm，15mWC．激光束波长466 nm，10mWD．不散焦E．容易聚焦成有高斯能量分布的光斑6．光束成形器的作用是将激光器发射的激光束聚焦成A．高15μm、宽57μm的椭圆形光斑B．高10μm、宽57μm的椭圆形光斑C．高15μm、宽50μm的椭圆形光斑D．高10μm、宽50μm的椭圆形光斑E．高20μm、宽60μm的椭圆形光斑7．反射较长波长的光而通过较短波长的光的是A．气冷氩离子激光器B．分色反光镜C．光束成形器D．透镜组E．光电信增管8．检测荧光和反射光，并将光学信号转换成电脉冲信号的是A．气冷氩离子激光器B．分色反光镜C．光束成形器D．光电倍增管E．透镜组9．流式细胞仪组成部件中对实验分析数据存储、显示与分析的是A．液流系统B．光学系统C．光电倍增管D．软件E．数据处理系统10．一台好的流式细胞仪每秒钟可测量A．25000个细胞B．20000个细胞C．15000个细胞D．10000个细胞E．5000个细胞11．一台好的流式细胞仪每秒钟可测定荧光染料粒子A．5000个B．4000个C．3000个D．2000个E．1000个12．前向散射光（ＦＳ）信号的强弱与下述哪项成正比A．体积大小B．细胞性状C．颗粒多少D．位移速度E．荧光强弱13．前向散射光是用于检测细胞或其他粒子的A．内部属性B．表面属性C．着染属性D．粒子属性E．以上都不是14．侧向检测器与发射激光束的方向A．平行B．在激光前方C．在激光上方D．垂直E．在激光下方15．侧向散射光（ＳＳ）用于检测细胞的A．表面属性B．内部结构属性C．着染属性D．物理属性E．化学属性16．荧光信号由被检细胞上标记的特异性荧光染料受A．荧光激发后产生B．紫外光激发产生C．红外光激发产生D．发光物质激发产生E．激光激发产生17．流式细胞仪检测原理中最重要的一点是A．检测荧光的特定发射波长B．检测激发光的波长C．检测荧光的颜色D．检测前向散射光E．检测侧向散射光18．对数放大器中输入信号放大10倍，输出信号放大A．1倍B．2倍C．3倍D．10倍E．100倍19．对数放大器中输入信号放大10倍，输出信号由A．1转变为2B．2转变为3C．3转变为4D．1转变为3E．1转变为420．线性放大器用于测量的信号A．强度变化范围较广B．放大倍数较大C．放大倍数较小D．强度变化范围较少E．以上都不是21．对数放大器用于测量信号是A．强度变化大但信号简单B．强度变化小但信号复杂C．强度变化大且信号复杂D．强度变化小且信号简单E．以上都不是22．流式细胞仪中最常用于单抗标记的荧光染料是A．FITC、RB200、TRITCB．FITC、PE、PCC．FITC、RB200、PED．FITC、TRITC、PEE．FITC、PE、ECD或PECY523．消除重叠信号通常采用A．荧光补偿B．滤光片C．调整荧光染料D．线性转换E．对数转换24．分选细胞时液流柱形成液流的速率约每秒钟A．50000个B．40000个C．30000个D．20000个E．10000个25．均匀连串的液滴中大量液滴是A．含有细胞B．含有淋巴细胞C．含被荧光染色的淋巴细胞D．不含细胞的空白液滴E．以上都不是26．待分选细胞形成液滴时会被A．染色B．充电C．酶标记D．抗体捕捉E．以上都不是27．带电荷的液滴在落入电极偏转板的高压静电场后会A．聚集B．散开C．继续下落D．停止下落E．向左或右偏转28．一般要求分选速度至少达到A．20000个/秒B．10000个/秒C．7000个/秒D．5000个/秒E．3000个/秒29．分选速度与细胞悬液中分选细胞的下述哪项直接相关A．细胞含量B．细胞性质C．细胞大小D．有否胞膜E．单核或多核30．骨髓来源细胞的分选宜选择高速是因为A．细胞太多B．细胞太大C．细胞膜坚固D．细胞核坚固E．在总细胞群体中所占比例不高31．分选纯度除与仪器的精密度相关外，还与A．被分选细胞的性质相关B．其他细胞的性质相关C．被分选细胞的数量相关D．其他细胞的数量相关E．分选细胞与其他细胞有无相互重叠相关32．要想取得分选高收获率，就应A．提高被分选细胞的纯度B．降低被分选细胞的纯度C．提高被分选细胞的浓度D．降低被分选细胞的浓度E．降低其他细胞的浓度33．现在设置收获率均在A．100%B．99%以上C．98%以上D．95%以上E．90%以上34．分选得率是指A．分选收获率B．通过测量点的分选细胞的比率C．从悬液中分辨出的目的细胞的总量D．通过测量点的细胞与实际收获的分选细胞的比率E．从悬液中分辨出的目的细胞总量，再经分选后获得的实际比率35．分选得率与A．分选速度相关B．分选目的细胞总量相关C．不选细胞总量相关D．分选细胞的生物学性质E．不选细胞的生物学性质36．面积脉冲信号是指A．电压脉冲曲线内外区域的大小B．电压脉冲曲线外区域的大小C．电压脉冲曲线内区域的大小D．电压脉冲的高度E．以上都不是37．流式细胞仪的数据参数中荧光信号反映的是A．颗粒中被染上荧光部分数量的多少B．颗粒的大小C．细胞内部结构复杂程度D．细胞表面的光滑程度E．以上都不是38．单参数直方图反映的是A．不同荧光强度的颗粒数量B．同样荧光强度的颗粒数量C．不同荧光强度的颗粒性质D．同样荧光强度的颗粒性质E．以上都不是39．单参数直方图中A．纵坐标表示被测细胞的数量，横坐标分为1024脉冲信号通道B．纵坐标表示被测细胞的性质，横坐标分为1024测量参数C．纵坐标表示被测细胞的数量，横坐标分为1124测量参数D．纵坐标表示被测细胞的性质，横坐标分为1024脉冲信号通道E．纵坐标表示被测细胞的数量，横坐标分为1024细胞40．双参数直方图包括A．点图B．点图、二维等高图C．点图、二维等高图、三维等高图D．点图、二维等高图、假三维等高图E．点图、二维、三维和假三维等高图41．等高线图由类似地图上的下述哪种线组成A．实线B．虚线C．连线D．双线E．等高线42．假三维等高图中的一维不是参数，而是A．细胞B．细胞数C．线性D．对数E．峰值43．Regiou设置是根据下述哪项信号强弱划定分析区域A．同一张单参数和三参数直方图B．同一张双参数和三参数直方图C．同一张单参数和双参数直方图D．同一张单参数和多参数直方图E．同一张双参数和多参数直方图44．gate设置是指在某一张选定参数的直方图上根据该图的细胞群分布选定待分析的特定细胞群，并要求该样其他参数组合的直方图只体现A．该群细胞的分布情况B．ＲBC的分布情况C．ＷBC分布情况D．Pt分布情况E．CD4+细胞分布情况45．进行流式细胞分析第一步是制备A．两个细胞的重叠B．多个细胞的粘连C．细胞碎片D．单细胞悬液E．细胞荧光染色46．制备单细胞悬液时，测定前通常要把哪项从血液中分离出来A．单核细胞或淋巴细胞B．单核细胞或血小板C．淋巴细胞或血小板D．Ｔ淋巴细胞或B淋巴细胞E．红细胞或血小板47．从新鲜实体组织制备单细胞悬液的目的是A．分离细胞B．不损伤细胞C．既分离细胞又不损伤细胞D．破坏组织间的胶原纤维E．分解组织间的蛋白质48．新鲜实体组织单细胞悬液制备的常用方法有A．机械法B．酶处理法C．化学试剂处理法D．表面活性剂处理法E．以上都不是(二)A2型题(否定型)1．流式细胞仪分析技术不包括A．激光技术B．计算机技术C．电子显微镜技术D．流体喷射技术E．分子生物学技术2．不是带通滤片允许通过的光波长是A．525 nmBPB．575 nmBPC．620 nmBPD．625 nmBPE．675 nmBP3．与散射光的强弱无关的是A．细胞的大小B．细胞的形状C．细胞的标记D．细胞的光学同性E．胞内颗粒折射4．荧光染料在488nm激发光下发出荧光颜色错误的是A．绿色B．橙色C．白色D．橙红色E．红色5．对培养细胞的分选不宜选择高速，是因为A．细胞太多B．细胞太大C．细胞膜脆弱D．细胞核脆弱E．胞浆所占比例大6．不是流式细胞仪数据显示的方式是A．单参数直方图B．双参数直方图C．三参数直方图D．假三维等高图E．前向散射光示意图（三）B1型题（配伍题）问题1～3A．量子产额和消光系数B．吸收C．波长差D．标记染色E．荧光信号1．荧光染料应有较高的：2．发射光波长与激发光波间有较大的：3．荧光染料对488nm激发光波长有强的：问题4～6A．深蓝B．橙红色C．橙色D．红色E．深红色4．FITC的荧光颜色是：5．PE（RD1）的荧光颜色是：6．ＰeCy7的荧光颜色是：问题7～9A．CD3+、CD4+、CD8-B．CD3+、CD4+、CD8+C．CD19、CD20、CD21、CD22D．CD16、CD56、CD11a/CD18E．CD3-、CD16+、CD56+7．临床确定为ＮＫ细胞的是：8．成熟B细胞主要表达的是：9．Ｔh细胞表达的是：问题10～12A．ＴdＴB．ＰＩC．ＭDＲD．CD4+/CD8+倒置E．ＨＬA－B2710．用流式细胞仪检测的胞质内抗原之一是：11．用于肿瘤耐药基因分析时，可检测到的是：12．AIDS患者免疫诊断指标之一是：二、填空题1．血液中各类细胞的密度不同，其中____________与Ｆicoll分层液密度1.077相当，离心后位于分层液与血浆层的界面中。

2019年流式细胞技术复习题一、简答题1简述流式细胞仪的分析检测原理。

用于流式细胞仪检测的样品必须是从标本制备的单细胞悬液，经荧光染料（或荧光素标记的单克隆抗体）染色后上机检测。

流式细胞仪通常以激光作为激发光源,经过聚焦整形后的光束垂直照射在样品流上,细胞悬液样本通过高速流动的液流系统，细胞排成单行,一个一个经过检测区，在检测区中,经荧光染料染色的细胞经激光照射产生散射光信号和荧光信号，由光电倍增管接受,转换成脉冲信号, 入计算机系统后经过专业软件的处理后储存为数据文件，可形成细胞理化特性分析图进行各种分析。

2流式细胞仪散射光信号有哪两种，有何意义。

细胞的散射光参数代表了细胞最基本的物理性的光学参数，无论细胞是否经过荧光抗体或者荧光染料的染色标记，均可以检测到细胞的这两种散射光参数。

而且，通常在检测细胞的特异性荧光参数的前（或同时），均需要对细胞的这两种散射光的参数进行测量和分析，特别实在检测混合细胞群体的时候。

1)前向散射光(Forward scatter, FSC/FS): 表示细胞大小，FSC信号越大,表示细胞越大。

2)侧向散射光(Side scatter, SSC/SS): 表示细胞的颗粒性程度，包括细胞核大小, 细胞器，胞质的数量及细胞膜粒度等，而SSC信号越大,表示细胞粒度越大。

反之,则越小荧光信号也有两种,一种是细胞自发荧光它一般很微弱,一种是细胞样本经标有特异荧光素的单克隆抗体染色后经激光激发发出的荧光，它是我们要测定的荧光,荧光信号较强。

自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。

一般说来，细胞成分中能够产生的自发荧光的分子(例核黄素、细胞色素等)的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞/活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。

3流式细胞术中，常用的标记染色方法有哪几种。

488nm激光光源常用的荧光染料有FITC（异硫氰酸荧光素）、PE（藻红蛋白）、PI （碘化丙啶）、PreCP(叶绿素蛋白)。

流式细胞术简介考核试题一、单选题1、流式细胞仪技术中，表示细胞体积大小的指标是（）A、前向角散射光信号(正确答案)B、侧向角散射光信号C、自发光信号D、激发荧光信号E、特异荧光信号2、流式细胞仪技术中，表示细胞内颗粒复杂程度的指标是（）A、前向角散射光信号B、侧向角散射光信号(正确答案)C、自发光信号D、激发荧光信号E、特异荧光信号3、FCM通过荧光抗原抗体检测技术对细胞表面抗原分析，可对细胞（）进行分析A、形状B、质量C、大小D、病理性E、亚群(正确答案)4、散射光和激发荧光被多少度方向的光电倍增管接收（）A、90°(正确答案)B、60°C、30°D、45°E、80°5、为保证流式检测的准确性，不必要的是（）A、单细胞悬液的制备B、进样速度越慢越好(正确答案)C、特定荧光染料的选择D、同型对照E、仪器工作状态的校准6、流式细胞仪鞘液的主要作用是（）A、形成细胞悬液B、维持pH值稳定C、包裹细胞形成稳定的液流层(正确答案)D、清洗管路E、维持细胞渗透压7、下列哪一项反映的是流式检测细胞的内部结构情况（）A、峰值脉冲信号B、面积脉冲信号C、前向散射光D、侧向散射光(正确答案)E、荧光8、流式细胞仪测定的标本，不论是外周血细胞,还是培养细胞，首先要保证是（）A、单倍体细胞悬液B、双倍体细胞悬液C、红细胞悬液D、白细胞悬液E、单细胞悬液(正确答案)9、流式细胞术的英文名称是（）A、Flow Cytometry(正确答案)B、LiushixibaoshuC、Next Generation SequencingD、Real time PCR10、应用流式细胞术的仪器为（）A、化学发光仪器B、流式细胞仪(正确答案)C、自动分样仪D、温育仪11、与临检组其他仪器不同的是，流式细胞术还可以检测细胞的（）A、荧光信号(正确答案)B、前向散射光C、侧向散射光D、细胞大小12、目前利用流式细胞术区分细胞亚群的主要原理是依据细胞表面的（）A、抗原数量B、CD分子类别(正确答案)C、细胞膜薄厚D、蛋白通道的有无13、在流式常见的散点图十字门中，右上角的细胞群为（）A、双阴B、双阳(正确答案)C、一阴一阳D、一阳一阴14、负责激发细胞表面的荧光的是（）A、进样系统B、激光器(正确答案)C、电子系统D、鞘液15、流式细胞仪电子系统是将哪种信号转为电信号（）A、声信号B、振动信号C、光信号(正确答案)D、温度信号二、多选题1、流式细胞仪综合了（）A、激光技术(正确答案)B、电子技术(正确答案)C、流体力学(正确答案)D、生物化学(正确答案)E、计算机技术(正确答案)2、流式细胞仪广泛应用于（）A、细胞生物学(正确答案)B、物理学C、免疫学(正确答案)D、电子学E、血液学(正确答案)3、流式细胞仪的结构可分为（）A、进样系统(正确答案)B、激光光源及光束成形系统(正确答案)C、前处理系统D、信号检测与分析系统(正确答案)4、流式细胞术的优势有（）A、可检测细胞大小(正确答案)B、可检测细胞内容物多少(正确答案)C、可区分细胞种类(正确答案)D、可定向培养某种细胞5、为提高实验效率，哪些做法是可取的（）A、合理分工，互相配合(正确答案)B、提前将仪器开启进行预热(正确答案)C、充分混匀样本与试剂(正确答案)D、将进样速度调整至越快越好。

流式细胞仪分析技术及应用题库1-0-8问题：[单选,A2型题,A1A2型题]多参数定量测定和分选的技术称（）A.荧光免疫分析B.酶联免疫分析C.流式细胞免疫分析D.化学发光免疫分析E.放射免疫分析本题考查对流式细胞术的认识。

流式细胞术是综合光学、流体力学、电子计算机技术，利用荧光素产生荧光的特点，对单个细胞进行多参数定量测定和分选的技术。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]流式细胞仪采集的荧光信号反映（）A.细胞的大小B.细胞的寿命C.细胞内部结构的复杂程度D.细胞表面的光滑程度E.被染成荧光部分细胞数量的多少通过流式细胞仪采集的不同荧光信号可检测出不同理化特性的细胞，从而进行计数，反映细胞的多少。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]关于液流系统的鞘液，下述哪项是不正确的（）A.鞘液是辅助样本被正常检测的基质液B.鞘液是用来与样本作对比的C.鞘液包裹在样本流周围D.使样本保持处于喷嘴中心位置，保证检测精确性E.防止样本流细胞靠近喷孔而形成堵塞鞘液是辅助样本被正常检测的基质液，其主要作用是包裹在样本流周围，使样本保持处于喷嘴中心位置，保证检测精确，同时又防止样本流细胞靠近喷孔而形成堵塞。

/ 篮球比赛问题：[单选,A2型题,A1A2型题]分选速度与细胞悬液中分选细胞的下述哪项直接相关（）A.细胞含量B.细胞性质C.细胞大小D.有否胞膜E.单核或多核分选速度与细胞悬液中分选细胞的细胞含量直接相关。

一般分析速度为5000～10000；分选速度掌握在1000以下。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]流式细胞术细胞分选的技术要求包括（）A.分选速度B.分选纯度C.分选收获率D.分选得率E.以上均是细胞分选对仪器的性能要求很高，为保证分选细胞的纯度，应考虑分选速度、分选收获率和分选得率对结果的影响。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]AIDS免疫功能的检测最重要的检测手段是（）A.流式细胞术B.抗体检测C.抗原检测D.病毒学检测E.细胞数量的检测流式细胞术用于AIDS免疫功能的检测，是最重要的检测手段，通过动态监测T细胞亚群可对HIV感染者或AIDS发病者进行鉴别。

流式细胞仪分析技术及应用练习题
一、A1
1、分选速度与细胞悬液中分选细胞的下述哪项直接相关
A、细胞含量
B、细胞性质
C、细胞大小
D、有否胞膜
E、单核或多核
2、多参数定量测定和分选的技术称
A、荧光免疫分析
B、酶联免疫分析
C、流式细胞免疫分析
D、化学发光免疫分析
E、放射免疫分析
3、流式细胞术可对单个细胞理化特性进行多参数的（）分析。

A、定性
B、定量
C、直接
D、间接
E、定性及定量
4、流式细胞仪的主要组成部分不包括
A、流动室和液流系统
B、温育和比色系统
C、激光源和光学系统
D、光电管和检测系统
E、计算机和分析系统
5、FCM通过荧光抗原抗体检测技术对细胞表面抗原分析，可对细胞（）进行分析
A、形状
B、质量
C、大小
D、病理性
E、亚群
6、流式细胞仪采用发光源系统为
A、荧光
B、激光
C、射线
D、白光
E、单色光
7、流式细胞免疫学技术操作的质量控制不包括
A、单细胞悬液制备
B、细胞悬液免疫荧光染色
C、仪器操作技术
D、免疫检测
E、室间质评
8、关于液流系统的鞘液，下述哪项是不正确的
A、鞘液是辅助样本作正常检测的基质液
B、鞘液是用来与样本作对比的
C、鞘液是包裹在样本流周围
D、使样本保持处于喷嘴中心位置，保证检测精确性
E、防止样本流细胞靠近喷孔而形成堵塞。

第十一章流式细胞技术与流式细胞仪首页习题习题参考答案习题名词解释选择题简答题一、名词解释1．流式细胞仪2．流式细胞术3．狭缝扫描流式细胞仪4．测量区5. 样品流6．鞘液流7．侧向角散射8．延迟时间9．荧光灵敏度10．分选收获率11．分选速度12．分选纯度13．长通滤光片14．短通滤光片15．带通滤光片16. 细胞自发荧光17．零分辨率的流式系统二、选择题【A型题】在五个选项中选出一个最符合题意的答案（最佳答案）。

1．流式细胞仪中的鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆形流束，自喷嘴的圆形孔喷出，与水平方向的激光束垂直相交，相交点称为（b ）A．敏感区B．测量区C．激光区D．计算区2．流式细胞仪使用的染色细胞受激光照射后发出荧光，同时产生（ b）A．电离辐射B．光散射C．电磁辐射D．光反射E．光电子3．流式细胞仪中的光电倍增管接收（ b ）A．散射光B．荧光C．激光D．射线E．反光4．流式细胞仪中的光电二级管接收（a ）A．散射光B．荧光C．激光D．射线E．反光5．通过测量区的液柱断裂成一连串均匀液滴的原因是在（ c）A．在流动室上加上了频率为30kHz的信号B．在测量区上加上了频率为30kHz的信号C．在压电晶体上加上了频率为30kHz的信号D．在光电倍增管上加上了频率为30kHz的信号E．在光电二级管上加上了频率为30kHz的信号6．将悬浮分散的单细胞悬液，经特异荧光染料染色后，放人样品管，悬浮在样品管中的单细胞悬液形成样品流垂直进入流式细胞仪的流动室，动力来自于（c ）A．激光B．压电晶体C．气体压力D．荧光E．散射光7．流动室轴心至外壁的鞘液向下流动，形成包绕细胞悬液的是（ a ）A．鞘液流C．散射光D．荧光E．测量区8．各类细胞的特性信息在测量区被测定的时间为（ a ）A．在细胞形成液滴以前B．在细胞形成液滴以后C．在细胞形成液滴过程中D．在细胞形成液滴前后E．在细胞形成液滴一小时9．样品流在鞘流的环包下形成流体动力学聚焦，使样品流不会脱离液流的轴线方向，并且保证每个细胞通过（ c ）A．荧光照射区B．散射光照射区C．激光照射区D．X光照射区E．太阳光照射区10．前向角散射可以检测（ b ）A．细胞膜厚薄B．被测细胞的大小C．细胞质多少D．核膜的折射率E．DNA含量11．在对细胞膜表面抗原的荧光检测时通常使用（ c）A．线性放大器B．指数放大器C．对数放大器D．整数放大器E．函数放大器12．一般对DNA倍体测量时采用（ a）A．荧光信号的面积B．散射光信号的面积C．前向角散射信号面积和宽度D．散射光信号的宽度E．荧光信号的宽度13．荧光信号的宽度常用来区分（d ）A．淋巴细胞B．红细胞C．白细胞D．双联体细胞E．单倍体细胞14．光谱重叠校正的最有效方法是使用（ e ）A．放大电路B．荧光电路C．散射光电路D．衰减电路E．双激光立体光路15．若每秒钟产生4万个水滴,每秒钟流出的细胞是1000个，则平均每40个水滴中有（ d ）A．三个水滴是有细胞的B．二个水滴是有细胞的C．四个水滴是有细胞的D.一个水滴是有细胞的E．五个水滴是有细胞的16．流式细胞术对HIV感染者或AIDS发病者进行区别是通过（c ）A．测DNA凋亡峰B．胞质抗原含量测定C．动态监测T细胞亚群D．测凋亡调节蛋白E．DNA倍体含量测定17．下落的水滴通过一对平行板电极形成的静电场时，带正电荷的水滴向（a ）A．带负电的电极板偏转B．带正电的电极板偏转C．不偏转D．前向角偏转E．侧向角偏转18．什么是鉴别良、恶性肿瘤的特异指标为（ e ）A．非特异性酯酶含量测定B．胞质抗原含量测定C．DNA含量测定D．过氧化物酶含量测定E．DNA倍体含量测定19．衡量流式细胞仪检测微弱荧光信号的重要指标是（ a ）A．灵敏度的高低B．荧光强度C．散射光大小D．精密度大小E．准确度的高低20．分辨率是衡量仪器测量精度的指标，通常用（ d ）A．误差值表示B．标准差值表示C．灵敏度值表示D．变异系数值表示E．精密度值表示21．与前向角散射密切相关的是（ b ）A．细胞直径B．细胞直径的平方C．细胞核的形状D．血小板数量E．病毒性质22．流式细胞仪测定的标本，不论是外周血细胞,还是培养细胞，首先要保证是（ e ）A．单倍体细胞悬液B．双倍体细胞悬液C．红细胞悬液D．白细胞悬液E．单细胞悬液23.光路与流路校正的主要目是确保（ c）A．激光光路稳定B．样品流稳定C．激光光路与样品流处于正交状态D．荧光光光路与样品流处于正交状态E．散射光光路与样品流处于正交状态24．为保证样品检测时仪器处于最佳工作状态，PMT校准采用（b ）A．样品B．质控品C．鞘液D．生理盐水E．缓冲液25．为保证仪器在计数时的准确性，流式细胞仪应建立绝对计数（ e）A．样品B．细胞C．鞘液D．细菌E．标准品26．样品和鞘液管道应用漂白粉液清洗的间隔时间为（ d ）A．每月B．每天C．每季度D．每周E．每年27．FCM显示激光器开启错误,引起故障的可能原因是（ b ）A．激光器关闭B．激光器门打开C．流式细胞仪连接错误D．清洗液少了E．数据太大，难以处理28．FCM显示清洗液高度警示,引起故障的可能原因是（ e）A．激光器关闭B．激光器门打开C．流式细胞仪连接错误D．清洗液少了E．清洗液传感器失灵29．FCM显示数据处理速率错误,引起故障的可能原因是（ a）A．数据太大，难以处理B．激光器门打开C．流式细胞仪连接错误D．清洗液少了E．清洗液传感器失灵【X型题】每题的备选答案中有两个或者两个以上正确答案。

流式细胞仪分析技术及应用题库1-1-8问题：[单选,A2型题,A1A2型题]流式细胞仪的主要组成部分不包括（）.A.流动室和液流系统B.温育和比色系统C.激光源和光学系统D.光电管和检测系统E.计算机和分析系统流式细胞仪主要由4部分组成：流动室和液流系统；激光源和光学系统；光电管和检测系统；计算机和分析系统。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]关于液流系统的鞘液，下述哪项是不正确的（）.A.鞘液是辅助样本作正常检测的基质液B.鞘液是用来与样本作对比的C.鞘液是包裹在样本流周围D.使样本保持处于喷嘴中心位置，保证检测精确性E.防止样本流细胞靠近喷孔而形成堵塞鞘液是辅助样本作正常检测的基质液，其主要作用是包裹在样本流周围，使样本保持处于喷嘴中心位置，保证检测精确，同时又防止样本流细胞靠近喷孔而形成堵塞。

问题：[单选,A2型题,A1A2型题]分选速度与细胞悬液中分选细胞的下述哪项直接相关（）.A.细胞含量B.细胞性质C.细胞大小D.有否胞膜E.单核或多核分选速度与细胞悬液中分选细胞的细胞含量直接相关。

一般分析速度为5000～10000；分选速度掌握在1000以下。

出处：安徽11选5 https://;问题：[单选,A4型题,A3A4型题]流式细胞术是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分，进行定量分析和分选的检测技术，它可以高速分析上万个细胞，并能从一个细胞中测得多个参数，是目前最先进的细胞定量分析技术。

流式细胞仪的主要组成不包括（）.A.A.液流系统B.光路系统C.抗原抗体系统D.信号测量E.细胞分选问题：[单选,A4型题,A3A4型题]流式细胞术是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分，进行定量分析和分选的检测技术，它可以高速分析上万个细胞，并能从一个细胞中测得多个参数，是目前最先进的细胞定量分析技术。

流式细胞仪的技术特点不包括（）.A.A.采用鞘流原理B.以激光作激发光源C.使用散射光检测D.检测荧光信号E.采用电阻抗及化学染色原理问题：[单选,A4型题,A3A4型题]流式细胞术是一种对单细胞或其他生物粒子膜表面以及内部的化学成分，进行定量分析和分选的检测技术，它可以高速分析上万个细胞，并能从一个细胞中测得多个参数，是目前最先进的细胞定量分析技术。

流式细胞术复习题
1. 什么是流式细胞术？
2. 流式细胞术和共焦显微镜图像分析的最大区别是什么？
3. 流式细胞分选仪内部结构包括哪些系统，每个系统中的重要部件
和作用是什么？
4. LP500、SP500、BP500/50三种滤光片的含义是什么？
5. 光电转换器的作用是什么？包括哪两种探测器？接受哪些信号？
6. 流式细胞分选有几种分选模式？每种模式的主要部件是什么？
7. 流式细胞仪能够检测哪些信号？分别举例说明
8.什么叫荧光信号的线性测量与对数测量？
9. 什么叫光谱交叉？如何做荧光之间补偿？
10. FCM数据采集的基本程序和注意事项是什么？
11. 什么叫参数？单参数和双参数时可出现什么样的图像？
12. 什么叫DNA指数（DI）？
13. DNA分析时主要影响因素是什么？
14. 双粘体辨别模式（DDM）的主要作用是什么？
15. 通过你所学到的知识试举两例FCM的应用例子。

要求绘出分析
图，并简述分析结果。