高中生物选修三基因工程知识点填空

高中生物选择性必修三知识点积累（填空版）1、酿醋用____________菌，________细菌，要持续通入____________，发酵过程中无气体释放。

2、酿酒用酵母菌，____________菌，先有氧呼吸____________，再无氧呼吸进行____________3、泡菜，酸奶用____________菌是__________细菌，发酵过程严格控制无氧环境。

4、腐乳用____________是__________真菌。

5、培养基一般都含有_______________________，固体培养基加了____________，琼脂不提供____________。

6、灭菌方法:____________灭菌法、____________灭菌法，____________灭菌法7、培养基灭菌用____________灭菌法8、将单个微生物分散在固体培养基上的方法有:____________法和_____________________法，其中____________法可用来对微生物计数，此方法为_______计数法，得到的菌落数比实际活菌数_____，原因:__________________________________________________________。

对微生物计数还可用_________直接计数法，该方法的统计结果一般是活菌数和死菌数的总和因此比实际活菌数目偏____________。

9、发酵工程的中心环节:____________10、植物组织培养的原理:________________________，经历了____________和____________的过程植物细胞培养的原理:____________，选择____________中的高产细胞系进行培养。

动物细胞培养的原理:____________诱导植物细胞融合和诱导动物细胞的融合的原理都是:_____________________诱导动物细胞融合特有的方法:____________诱导11、利用动物细胞融合的方法可以使____________细胞和____________细胞融合形成杂交瘤细胞，该诱导过程经历了两次筛选，第一次用____________筛选出杂交瘤细胞，第二次用____________方法筛选出能产生专一抗体的杂交瘤细胞杂交瘤细胞的特点:________________________________杂交瘤细胞产生的抗体为单克隆抗体，单克隆抗体的特点:__________________12、植物体细胞杂交:先诱导两种植物细胞融合形成____________，再用____________技术把杂种细胞培育成____________。

高中生物选修三基因工程知识点总结
高中生物选修三(基因工程)知识点总结如下:
1. 基因工程的基本步骤:
- 分离基因:从目标DNA序列中分离特定的基因。

- 转录:将分离得到的基因转录成RNA。

- 修饰:对转录后的基因进行修饰,使其更具表达效果。

- 克隆:用适当的载体将修饰过的基因导入目标细胞中。

- 表达:使目标细胞中导入的基因表达。

2. 基因工程的主要方法:
- 重组DNA技术:包括文库制备、扩增和筛选。

- 外源DNA片段导入技术:包括限制性内切酶消化、连接、转化、融合等。

- 自组织培养技术:包括离心、培养基选择、细胞培养等。

- 基因编辑技术:包括CRISPR/Cas9、CRISPR-Cas13a等。

3. 基因工程的应用:
- 细胞治疗:通过基因工程手段治疗一些遗传性疾病。

- 农业育种:通过基因工程技术改良作物品质和产量。

- 生物恐怖袭击防御:通过基因工程技术检测和防御生物恐怖袭击。

- 环境污染治理:通过基因工程技术处理污染物。

4. 基因工程的限制:
- 伦理和道德问题:基因工程技术可能会带来未知的伦理和道德
问题。

- 技术成本:基因工程技术相对其他技术更为复杂,成本较高。

- 技术安全:基因工程技术的安全性需要持续进行研究和维护。

5. 基因工程的安全性问题:
- 基因突变:基因工程过程中可能会引发基因突变,导致不良后果。

- 质量控制:基因工程技术的产品需要进行质量控制,以确保其质量和稳定性。

生物选修3知识点专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过_____________________ ,赋予生物以 _____________ 创造出_____________________________ 。

基因工程是在上进行设计和施工的，又叫做。

（一）基因工程的基本工具1•“分子手术刀” 一一 ___________________________（1）来源：主要是从____________ 分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种__________________ 的核苷酸序列，并且使每一条链中_ _ 部位的两个核苷酸之间的______________ 开，因此具有性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：________________ 和__________________2.“分子缝合针” 一一_______________⑴ 两种DNA连接酶（____________________ 和_____________________ ）的比较：①相同点：都缝合 __________________ 键。

②区别：E - coliDNA连接酶来源于_________________ ，只能将双链DNA片段互补的______________ 之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合__________________ ，但连接平末端的之间的效率较____________ 。

⑵ 与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将__________________ 加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接 _____________________ 的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车” 一一_（1）______________________________________________ 载体具备的条件：① 。

2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第3章基因工程第2节基因工程的基本操作程序第2节基因工程的基本操作程序第1课时目的基因的筛选与获取和基因表达载体的构建课程内容标准核心素养对接1.阐明基因工程的原理和基本操作程序。

2.尝试进行PCR的基本操作并用电泳鉴定PCR的产物。

1.科学思维——对基因工程的基本程序有整体的认识。

2.科学探究——能复述PCR技术的原理和基本过程，了解扩增目的基因的方法。

知识点1目的基因的筛选与获取1.筛选合适的目的基因2.获取目的基因的方法3.利用PCR获取和扩增目的基因（1）PCR的含义：PCR是聚合酶链式反应的缩写，它是一项根据DNA半保留复制的原理，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。

（2）条件：一定的缓冲溶液（一般要添加Mg2＋）、DNA模板、分别与两条模板链结合的2种引物、4种脱氧核苷酸、耐高温的DNA聚合酶以及能自动调控温度的仪器。

（3）过程（4）PCR产物的鉴定：常采用琼脂糖凝胶电泳来鉴定。

知识点2基因表达载体的构建1.构建基因表达载体的目的（1）使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且遗传给下一代。

（2）使目的基因能够表达和发挥作用。

2.基因表达载体的组成3.基因表达载体的构建过程（1）首先用一定的限制酶切割载体。

（2）然后用同种限制酶或能产生相同末端的限制酶切割含有目的基因的DNA 片段。

（3）再利用DNA连接酶将目的基因片段拼接到载体的切口处（如图所示）。

（1）目的基因一定是编码蛋白质的基因（×）（2）DNA聚合酶能够从引物的5′端开始连接脱氧核苷酸（×）（3）每一次循环后目的基因的量可以增加一倍，呈指数形式扩增（√）（4）真核细胞和细菌的DNA聚合酶都需要Mg2＋激活。

因此，PCR反应缓冲溶液中一般要添加Mg2＋（√）（5）PCR过程不需要解旋酶（√）（6）基因表达载体中含有启动子和密码子（×）（7）终止子相当于一盏红色信号灯，使翻译在所需要的地方停下来（×）教材P78图示拓展1.结合下图分析PCR过程中DNA链复制的方向是怎样的。

基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过，赋予生物以，创造出。

基因工程是在上进行设计和施工的，又叫做。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种的核苷酸序列，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：和。

2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段互补的之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合，但连接平末端的之间的效率较。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——（1）载体具备的条件：①。

②。

③。

（2）最常用的载体是,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，并具有的双链DNA分子。

（3）其它载体：(二)基因工程的基本操作程序第一步：1.目的基因是指：。

2.原核基因采取获得，真核基因是。

人工合成目的基因的常用方法有_和_。

3.PCR技术扩增目的基因（1）原理：（2）过程：第一步：加热至90～95℃；第二步：冷却到55～60℃，；第三步：加热至70～75℃，。

第二步：1.目的：使目的基因在受体细胞中，并且可以，使目的基因能够。

2.组成：＋＋＋（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。

（2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将筛选出来。

常用的标记基因是。

第三步：1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。

一、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过_____________和________等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

由于基因工程是在______________水平上进行设计和施工的，因此又叫做_________________.二、基因工程的三大工具：______________—“分子手术刀”；________________—“分子缝合针”；___________—“分子运输车”。

三、限制性核酸内切酶的来源_________________作用部位__________________结果__________________________识别序列______________四、DNA连接酶作用部位是___________________两种常见的DNA连接酶：1._________________.来源____________，只连接______末端；2.______________提取自___________，可连接__________________，连接平末端效率______。

五、质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有______________能力的_________________________DNA分子。

六、标记基因的作用：____________________________.七、使用的载体除质粒外，还有_________________,_________________八、基因工程的步骤__________________________,__________________________,__________________________ ____，________________________________.九、获取目的基因的方法：方法一：______________________________方法二：_____________________方法三________________________.十、cDNA文库：某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。

高中生物选修三基因工程主要知识点（1.1、1.2）1、基因工程：按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

1、基因工程的三大工具：限制性核酸内切酶—“分子手术刀”；DNA连接酶—“分子缝合针”；基因进入受体细胞的载体—“分子运输车”。

2、限制性核酸内切酶的特点：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且是每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键。

3、限制酶识别序列的特点：反向对称，重复排列。

4、限制酶在原核生物中的作用：切割外源DNA，保护细菌细胞。

5、为什么限制酶不剪切原核生物自身的DNA分子？原核生物本身不含相应特异性序列；对DNA分子进行甲基化修饰。

6、两种常见的DNA连接酶：E·coli DNA连接酶：源自大肠杆菌，只连接黏性末端；T4DNA连接酶：提取自T4噬菌体，两种末端均可连接，连接平末端效率低。

7、DNA连接酶和DNA聚合酶的相同点：都是蛋白质；都能生成3'磷酸二酯键。

不同：前者在两个片段之间形成3'磷酸二酯键，后者只能将单个核苷酸连接到已有片段上；前者不需要模版，后者需要。

8、载体需要满足的条件：有一到多个限制酶切点；对受体细胞无害；导入基因能在受体细胞内复制和表达；有某些标记基因；分子大小合适。

9、质粒：一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外，并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。

10、标记基因的作用：鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。

11、三类载体：质粒；λ噬菌体的衍生物；动植物病毒。

12、获取目的基因的方法：说法一：从自然界已有的物种中分体（鸟枪法、反转录法）、用人工的方法合成；说法二：从基因文库中获取（鸟枪法、反转录法）、利用PCR技术合成、用化学方法人工合成。

13、基因库：一个物种中全部个体的全部基因的总和；基因文库：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，个个受体菌分别含有这种生物的不同的基因；基因组文库：含有某种生物全部基因的基因文库；部分基因文库：只含有一种生物部分基因的基因文库；cDNA文库：用某种生物发育的某个时期的mRNA反转录产生的多种互补DNA片段，与载体连接后储存在一个受体菌群中。

2024年高中生物新教材同步选择性必修第三册第3章基因工程第1节重组DNA技术的基本工具课程内容标准核心素养对接1.简述重组DNA技术所需的三种基本工具及其作用。

2.认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。

3.进行DNA的粗提取与鉴定。

1.科学思维——模拟重组DNA分子的操作过程，说出合成新DNA分子的基本原理。

2.科学探究——结合实验室条件，对DNA进行粗提取和鉴定。

知识点1基因工程及其诞生与发展1.基因工程的概念2.基因工程的诞生和发展(1)基因工程的诞生(2)基因工程的发展知识点2重组DNA技术的基本工具1.限制性内切核酸酶(简称限制酶)——“分子手术刀”是一类酶而不是一种酶对所连接的DNA片段两端的碱基序列没有专一性要求2.DNA连接酶——“分子缝合针”(1)作用：将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开的磷酸二酯键。

(2)种类3.基因进入受体细胞的载体——“分子运输车”(1)常用载体——质粒①化学本质：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外，并具有自我复制能力的环状双链DNA分子。

②质粒作为载体所具备的条件及原因(2)其他载体：噬菌体、动植物病毒等。

(3)功能①相当于一种运输工具，将外源基因送入受体细胞。

②携带外源基因在受体细胞内大量复制。

(1)基因工程是人工操作导致的染色体变异，变异是不定向的(×)(2)S型细菌的DNA进入R型细菌并使R型细菌转化为S型细菌，发生了基因重组(√)(3)DNA连接酶可以连接目的基因与载体的氢键，形成重组DNA(×)(4)E.coli DNA连接酶既能连接黏性末端，又能连接平末端(×)(5)限制性内切核酸酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(×)(6)新冠病毒(RNA病毒)可以作为基因工程的载体(×)教材P71图示拓展1.已知限制酶Eco RⅠ和SmaⅠ识别的碱基序列和酶切位点分别为和，分析回答下列问题：(1)在图中画出两种限制酶切割DNA后产生的末端。

专题一基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

黏性末端：当限制酶从识别序列的中心轴线两侧切开时，被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，他们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。

平末端：当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时，切开的DNA两条单链的切口，是平整的，这样的切口叫平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coli DNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coli DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶DNA聚合酶不同点连接的DNA双链单链模板不要模板要模板连接的对象2个DNA片段单个脱氧核苷酸加到已存在的单链DNA片段上相同点作用实质形成磷酸二酯键化学本质蛋白质3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

高中生物必背知识点——选修3一、基因工程1、（a）基因工程的诞生（一）基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

2、（a）基因工程的原理及技术原理：基因重组技术：（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。

（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。

高中生物选修三知识点总结填空版选修3易考知识点：基因工程专题1：基因工程的概念基因工程是指按照人们的意愿，通过严格的设计，对生物进行基因的改造和创造，以实现特定的目的。

基因工程是在分子水平上进行设计和实现的，也被称为分子遗传工程。

一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性内切酶1）来源：主要从细菌中分离纯化得到。

2）功能：能够识别双链DNA中特定的核苷酸序列，并使链中间的两个核苷酸之间断裂，因此具有切割DNA的作用。

3）结果：经限制性内切酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：粘性末端和平滑末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶1) 两种DNA连接酶（大肠杆菌DNA连接酶和T4 DNA 连接酶）的比较：①相同点：都能缝合DNA。

②区别：大肠杆菌DNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将互补的双链DNA片段之间的磷酸二酯键连接起来；而T4 DNA连接酶能缝合非互补的DNA片段，但连接平末端的效率较低。

2) 与DNA聚合酶作用的异同：DNA聚合酶只能将核苷酸加到已有的DNA片段末端，形成磷酸二酯键。

而DNA连接酶则是连接DNA末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——基因载体1）载体具备的条件：①能够在宿主细胞中繁殖；②具有多个限制性内切酶切割位点；③能够携带目的基因和其他必要的元件。

2）最常用的载体是质粒，它是一种环状的DNA分子。

3）其他载体：病毒、人工染色体等。

二）基因工程的基本操作程序第一步：获得目的基因1.目的基因是指：需要进行改造或创造的特定基因。

2.原核基因采用PCR技术获得，真核基因则需要人工合成。

常用的人工合成方法有化学合成和酵母表达系统。

3.PCR技术扩增目的基因：1）原理：利用DNA聚合酶在一定条件下，以目的基因的引物为模板，扩增出目的基因的多个复制品。

2）过程：第一步：加热至90～95℃，使DNA变性；第二步：冷却到55～60℃，使引物与目的基因的两条链互补结合；第三步：加热至70～75℃，使DNA聚合酶在引物的引导下，在目的基因两条链之间合成新的DNA链。

选修3复习提纲一、基因工程1、（a）基因工程的诞生（一）基因工程的概念基因工程是指依据人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因技术，给予生物以新的遗传特性，创建出更符合人们须要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

2、（a）基因工程的原理与技术原理：基因重组技术：（一）基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分别纯化出来的。

（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶（E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区分：E·coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——载体（1）载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2）最常用的载体是质粒,它是一种袒露的、结构简洁的、独立于细菌染色体之外，并具有自我复制实力的双链环状DNA分子。

（3）其它载体：噬菌体的衍生物、动植物病毒(二)基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获得1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因实行干脆分别获得，真核基因是人工合成。

基因工程知识点填空一、基因工程的概念：基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过和等技术，赋予生物以，从而创造出更符合人们需要的。

基因工程是在上进行设计和施工的，又叫做。

也叫技术。

二、基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——（1）来源：主要是从中分离纯化出来的。

（2）功能：能够双链DNA分子的某种的核苷酸序列，并且使每一条链中部位的两个核苷酸之间的断开，因此具有性。

（3）结果：产生：和。

2.“分子缝合针”——(1)两种DNA连接酶①E·coliDNA连接酶：来源：只能连接，形成键；②T4-DNA连接酶：来源：，能连接和，形成键。

(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接的末端，形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——（1）载体具备的条件：①。

②。

③。

（2）作用：携带进入受体细胞，使目的基因在受体细胞中稳定存在并表达。

（3）最常用的载体是,它是一种裸露的、结构简单的、独立于，很小的双链DNA 分子。

（4）其它载体：三、基因工程的基本操作程序（一）第一步：1、目的基因主要是指也可以是。

2、获取目的基因的方法有（1）从自然界中，（2）。

①从基因文库中获取目的基因：基因文库的类型：a ，包含了某种生物的全部基因。

B ，（如：cDNA文库）包含了某种生物的基因。

②PCR技术扩增目的基因a.原理：b.前提条件：,c.酶：;d.原料：;e.反应条件：;f.仪器：③人工合成目的基因:适用于基因，又已知。

仪器：(二)第二步（核心）：1.目的：使目的基因在受体细胞中，并且可以，使目的基因能够。

2.组成：、、、、（1）启动子：是一段有特殊结构的，位于基因的，是识别和结合的部位，能驱动基因，最终获得所需的。

（2）终止子：也是一段有特殊结构的，位于基因的。

使在所需要的地方停止。

（3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中，从而将筛选出来。

常用的标记基因是。

专题1 基因工程基因工程的概念基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。

基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，又叫做DNA重组技术。

（一)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”—-限制性核酸内切酶(限制酶）（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

（2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性.（3）结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针"——DNA连接酶（1）两种DNA连接酶(E·coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶）的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E·coliDNA连接酶来源于大肠杆菌，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来；而T4DNA连接酶来源于T4噬菌体,能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低.(2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端，形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端，形成磷酸二酯键。

3。

“分子运输车”-—载体（1）载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入。

③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择。

（2)最常用的载体是质粒，它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状D NA分子。

（3)其它载体:入噬菌体的衍生物、动植物病毒（二）基因工程的基本操作程序第一步：目的基因的获取1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因。

2.原核基因采取直接分离获得，真核基因是人工合成。

人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。

3。

基因工程知识点(一)生物基因工程简介基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术。

所谓基因工程是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术，是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内，使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。

基因工程是生物工程的一个重要分支，它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。

重组DNA：重组DNA技术是指将一种生物体(供体)的基因与载体在体外进行拼接重组，然后转入另一种生物体(受体)内，使之按照人们的意愿稳定遗传并表达出新产物或新性状的DNA体外操作程序，也称为分子克隆技术。

因此，供体、受体、载体是重组DNA技术的三大基本元件。

(二)生物基因工程特征1)跨物种性外源基因到另一种不同的生物细胞内进行繁殖。

2)无性扩增外源DNA在宿主细胞内可大量扩增和高水平表达。

优点：基因工程最突出的优点是打破了常规育种难以突破的物种之问的界限，可以使原核生物与真核生物之间、动物与植物之间，甚至人与其他生物之间的遗传信息进行重组和转移。

人的基因可以转移到大肠杆菌中表达，细菌的基因可以转移到植物中表达。

(三)基因工程的基本工具1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)(1)来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。

(3)结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式：黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶(1)两种DNA连接酶(E•coliDNA连接酶和T4-DNA连接酶)的比较：①相同点：都缝合磷酸二酯键。

②区别：E•coliDNA连接酶来源于T4噬菌体，只能将双链DNA片段互补的黏性末端之间的磷酸二酯键连接起来;而T4DNA连接酶能缝合两种末端，但连接平末端的之间的效率较低。

3.“分子运输车”——载体(1)载体具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存。

专题 1 基因工程1．基因工程又叫做或。

就是按照人们的愿望，把一种生物的某种基因提取出来，加以，然后放到另一种生物的细胞里，改造生物的。

2．基因工程是在上进行的设计施工，基本工具是：基因的剪刀（分子手术刀）——；基因的针线（分子缝合针）——；基因的（分子运输车）——。

3．限制酶（又称）：主要从中分离纯化出来；能够识别双链DNA 分子的某种，并且使每一条链中的两个核苷酸之间的断开，因此具有。

DNA分子经限制酶切割产生的DNA片段末端有和两种形式。

例如，EcoRⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割；SmaⅠ限制酶识别的序列是，在之间切割。

4．DNA连接酶的作用是将拼接（即形成，注意不是黏合或形成氢键）成新的DNA分子（注意DNA聚合酶只能在有的条件下将加到DNA片段的，形成磷酸二酯键）；E·coli DNA连接酶来源于，只能将双链DNA片段之间连接起来；而T4 DNA连接酶能缝合，但连接平末端的之间的效率。

5. 最常用的载体是，它是一种、结构简单、独立于细菌之外，并的很小的。

6．真正被用作载体的质粒都是在天然质粒的基础上进行过的，其上有一个至多个，供外源DNA 片段（基因）插入其中；还有特殊的供。

7．重组质粒进入受体细胞后，在细胞中进行自我复制（具有），或上，随染色体DNA进行同步复制；在基因工程中使用的载体除质粒外，还、8．基因工程的基本操作流程：9．目的基因主要是指，也可以是一些；目的基因可以从自然界中已有的物种中分离出来（，建立从中获取或通过获取，一般只适合于，真核基因因为含有不适合该类方法），也可以用人工的方法合成（，通过mRNA反转录得到cDNA，然后建立从中获取或通过获取；如果基因比较小且核苷酸序列已知，也可以通过用化学方法直接人工合成）。

10．基因组文库的构建： 将某种生物体内的 DNA 提取出来， 选用适当的 ，将 DNA12． cDNA 文库属于。

与基因组文库比较： cDNA 文库较小， ，仅15．基因表达载体的组成：、 、 、 、 。