各种化学成分过柱子经验

“照方抓药式”过柱子经验总结1、选柱子：现在见到的柱子径高比一般在1：5～10。

2、称量：00-300目硅胶，称30-70倍于上样量；如果极难分，也可以用100倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。

如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶。

3、选洗脱剂：一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂。

极性小的用乙酸乙酯：石油醚系统；极性较大的用甲醇：氯仿系统；极性大的用甲醇：水：正丁醇：醋酸系统。

要使所需点在rf0.2～0.3左右的比较好。

常用溶剂的极性顺序：石油醚〈环己烷/己烷〈苯〈乙醚〈氯仿〈乙酸乙酯〈正丁醇〈丙酮〈乙醇〈甲醇〈水。

一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂。

拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸。

乙酸乙酯：石油醚= 4：1可用TLC分开。

乙酸乙酯和石油醚(60~90)。

4、搅成匀浆：先把硅胶泡在烧杯中，用干硅胶体积一倍的溶剂泡，用超声波超半个小时，中间看到气泡时用玻璃棒搅一下。

如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系，就用石油醚拌；如果洗脱剂是氯仿/醇体系，就用氯仿拌。

5、装柱：a用溶剂把柱子饱和一次，因溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解。

b将柱底用棉花塞紧，不必用海沙，加入约1/3体积石油醚（氯仿），装上蓄液球，打开柱下活塞，将匀浆一次倾入蓄液球内。

随着沉降，有一些硅胶沾在蓄液球内，用石油醚（氯仿）将其冲入柱中。

c装柱时一定要保证无气泡，同时敲打柱体使柱体更均匀、紧凑，装毕，用洗脱液冲三次。

6、压实：装柱完后，加入更多的石油醚，用双联球或气泵加压，直至流速恒定。

柱床约被压缩至9/10体积。

无论走常压柱或加压柱，都应进行这一步，可使分离度提高很多，且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂。

7、上样：干法湿法都可以。

a在硅胶上层加少量无水硫酸钠（以免样品被洗脱剂冲散），取适量样溶液上样。

有机化学实验中关于过柱的实验方法和技巧关于过柱的实验方法和技巧(注意：有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行！！常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。

我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。

由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。

1、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。

所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。

减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。

以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。

加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。

压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。

特别是在容易分解的样品的分离中适用。

压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。

个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。

2、关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好柱子长了，相应的塔板数就高。

柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。

试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。

而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。

当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。

现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。

关于过柱的实验方法和技巧(注意：有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行！！常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。

我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。

由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。

1、柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。

所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。

减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。

以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。

加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。

压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。

特别是在容易分解的样品的分离中适用。

压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。

个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。

2、关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好柱子长了，相应的塔板数就高。

柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。

试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。

而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。

当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。

现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。

过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。

我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。

由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。

柱子可以分为：加压，常压，减压。

压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。

所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。

减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。

以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。

加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。

压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。

特别是在容易分解的样品的分离中适用。

压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。

个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。

关于柱子的尺寸，应该是粗长的最好。

柱子长了，相应的塔板数就高。

柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。

试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。

而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。

当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。

现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体择要具体分析。

如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在 0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。

过柱的实验方法和技巧常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。

我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。

由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。

一：柱子可以分为：加压，常压，减压压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。

所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。

减压柱能够减少硅胶的使用量，感觉能够节省一半甚至更多，但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱子外面有水汽凝结），以及有些比较易分解的东西可能得不到，而且还必须同时使用水泵抽气（很大的噪音，而且时间长）。

以前曾经大量的过减压柱，对它有比较深厚的感情，但是自从尝试了加压后，就几乎再也没动过减压的念头了。

加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。

压力的提供可以是压缩空气，双连球或者小气泵（给鱼缸供气的就行）。

特别是在容易分解的样品的分离中适用。

压力不可过大，不然溶剂走的太快就会减低分离效果。

个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的。

二：关于柱子的尺寸应该是粗长的最好。

柱子长了，相应的塔板数就高。

柱子粗了，上样后样品的原点就小（反映在柱子上就是样品层比较薄），这样相对的减小了分离的难度。

试想如果柱子十厘米，而样品就有二厘米，那么分离的难度可想而知，恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了。

而如果样品层只有0.5厘米，那么各组分就比较容易得到完全分离了。

当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费）。

现在见到的柱子径高比一般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。

如果所需组分和杂质分的比较开（是指在所需组分rf在0.2～0.4，杂质相差0.1以上），就可以少用硅胶，用小柱子（例如200毫克的样品，用2cm×20cm的柱子）；如果相差不到0.1，就要加大柱子，我觉得可以增加柱子的直径，比如用3cm的，也可以减小淋洗剂的极性等等。

过柱子的经验总结单一溶剂的极性大小顺序为：石油醚（小）→环己烷→四氯化碳→三氯乙烯→苯→甲苯→二氯甲烷→氯仿→乙醚→乙酸乙酯→乙酸甲酯→丙酮→正丙醇→甲醇→吡啶→乙酸（大）混合溶剂的极性顺序：苯∶氯仿（1+1）→环己烷∶乙酸乙酯（8+2）→氯仿∶丙酮（95+5）→苯∶丙酮（9+1）→苯∶乙酸乙酯（8+2）→氯仿∶乙醚（9+1）→苯∶甲醇（95+5）→苯∶乙醚（6+4）→环己烷∶乙酸乙酯（1+1）→氯仿∶乙醚（8+2）→氯仿∶甲醇（99+1）→苯∶甲醇（9+1）→氯仿∶丙酮（85+15）→苯∶乙醚（4+6）→苯∶乙酸乙酯（1+1）→氯仿∶甲醇（95+5）→氯仿∶丙酮（7+3）→苯∶乙酸乙酯（3+7）→苯∶乙醚（1+9）→乙醚∶甲醇（99+1）→乙酸乙酯∶甲醇（99+1）→苯∶丙酮（1+1）→氯仿∶甲醇（9+1）过柱子经验总结1, 选柱子:现在见到的柱子径高比一般在 1:5-10.2, 称量:100-300 目硅胶,称 30-70 倍于上样量;如果极难分,也可以用 100 倍量的硅胶书中写硅胶量是样品量的 30-40 倍,具体的选择要具体分析.如果所需组分和杂质分的比较开(是指在所需组分 Rf 在 0.2--0.4,杂质相差 0.1 以上) ,就可以少用硅胶.3, 选洗脱剂:一般淋洗剂是采用 TLC 分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂.极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统.要使所需点在 Rf 值在 0.2-0.3 左右的比较好.常用溶剂的极性顺序:石油醚<环己烷/己烷<苯乙醚<氯仿<乙酸乙酯 <正丁醇<丙酮<乙醇<甲醇<水. 一般把两种溶剂混合时, 采用高极性/低极性的体积比为 1/3 的混合溶剂. 拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸. 乙酸乙酯/石油醚= 4:1 可用 TLC 分开.乙酸乙酯和石油醚(60-90).4, 搅成匀浆:先把硅胶泡在烧杯中,用干硅胶体积一倍的溶剂泡,用超声波超半个小时,中间看到气泡时用玻璃棒搅一下.如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是氯仿/醇体系,就用氯仿拌.5, 装柱: A, 用溶剂把柱子饱和一次, 因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量可能使产品分解. B,将柱底用棉花塞紧,不必用海沙,加入约 1/3 体积石油醚(氯仿),装上蓄液球,打开柱下活塞,将匀浆一次倾入蓄液球内.随着沉降,会有一些硅胶沾在蓄液球内,用石油醚(氯仿)将其冲入柱中. C,装柱时一定要保证无气泡,同时敲打柱体使柱体更均匀,紧凑,装毕,用洗脱液冲三次.6, 压实:装柱完后,加入更多的石油醚,用双联球或气泵加压,直至流速恒定. 柱床约被压缩至 9/10 体积.无论走常压柱或加压柱,都应进行这一步,可使分离度提高很多,且可以避免过柱时由于柱床萎缩产生开裂.7, 上样:干法湿法都可以. A,在硅胶上层加少量无水硫酸钠(以免样品被洗脱剂冲散)取适量样溶液上样.上样后,加入一些洗脱剂,再将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面.然后就可以放心地加入大量洗脱剂,而不会冲坏硅胶表面. B,用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了.加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离(2～4cm 就够了) ,再加压,这样避免了溶剂(如二氯甲烷等)夹带样品快速下行.8, 过柱和收集:柱层析实际上是在扩散和分离之间的权衡.太低的洗脱强度并不好,推荐用梯度洗脱.收集的例子:10mg 上样量,1g 硅胶 H,0.5ml 收集馏分;1-2g 上样量,50g 硅胶(200-300 目) ,20-50ml 收集馏分.接收瓶一定要用可密封的.柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的.9, 用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开.10,检测.要更多地使用专用喷显剂,如果仅用紫外灯,会损失较多产品,紫外的灵敏度一般比喷显剂底 1-2 个数量级.11, 送谱. 收集的产品旋干, 在送谱前通常需要重结晶. 如果样品太少或为液体, 可过一小凝胶柱,作为送谱前的最后纯化手段.可除去氢谱 1.5ppm 左右所谓的 "硅胶"峰.过柱子的经验常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。

1.苯乙烯在做本体聚合时，怎么有效去除阻聚剂？有几种方法可以选择.1.重蒸2.碱洗3.树脂活性炭等吸附4.反应时通氮气.如果采用前三种方法,那可以放在冰箱里保存.1.用碱性氧化铝过柱子（比较简单）2.先用5%的NaOH水溶液反复洗涤，干燥剂干燥除水后减压蒸馏保存的话放冰箱冷藏holysong(站内联系TA)我的方法先是碱洗，溶液变黄，再蒸馏。

不过储存要避光储存，在常温光照下很容易聚合。

gonemrc(站内联系TA)这个看你聚合的目的是什么？如果只是为了聚些PS，而且不是很在乎分子量什么的，那就随便处理下;如果是要研究聚合的一些因素的影响，那就老实地处理下吧。

qinggua427(站内联系TA)谢谢各位的指教，我是来学的，哈哈，顶一个冷面猎手(站内联系TA)学习了，但是如果影响不大的情况下，不用处理吧还有上面的一位仁兄提到的MQ是不是就是阻聚剂对苯二酚啊？笋尖(站内联系TA)就碱洗就好了吧，减压蒸馏有点麻烦啦，我们实验室的就是用碱洗的，然后用无水CaCl干燥就好了，在冰箱里低温保存的。

kkcc(站内联系TA)可以先碱洗，然后分离苯乙烯单体，干燥蒸馏纯化。

至于保存，肯定要放到阴暗处，低温。

但由于苯乙烯可以热引发，因此，放置时间长了，肯定要变质的，到时再纯化吧。

sunjy825(站内联系TA)碱洗-碳酸氢钠洗-水洗-旋蒸yanlong02(站内联系TA)Originally posted by leesire at 2010-04-08 16:40:29:一般处理苯乙烯单体有两种方法：1.用碱性氧化铝过柱子（比较简单）2.先用5%的NaOH水溶液反复洗涤，干燥剂干燥除水后减压蒸馏就碱洗就好了吧，减压蒸馏有点麻烦啦，我们实验室的就是用碱洗的，然后用无水CaCl干燥就好了，在冰箱里低温保存的。

请问用无水CaCl干燥这步怎么操作啊，俺一直很困惑，从来没接触过，请明示一下，用哪些仪器，怎么组装装置:P，谢谢zhangl321(站内联系TA)先用5%NaOH碱洗，再用蒸馏水洗至中性，加入无水硫酸钠干燥3天以上，再减压蒸馏，密封避光放冰箱中储存nesimon(站内联系TA)我也是来学习的。

过柱经验2008-09-17 20:59常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱;我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱;由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助;柱子可以分为：加压,常压,减压;压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数;所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的,但是时间也最长,比如天然化合物的分离,一个柱子几个月也是有的;减压柱能够减少硅胶的使用量,感觉能够节省一半甚至更多,但是由于大量的空气通过硅胶会使溶剂挥发有时在柱子外面有水汽凝结,以及有些比较易分解的东西可能得不到,而且还必须同时使用水泵抽气很大的噪音,而且时间长;以前曾经大量的过减压柱,对它有比较深厚的感情,但是自从尝试了加压后,就几乎再也没动过减压的念头了;加压柱是一种比较好的方法,与常压柱类似,只不过外加压力使淋洗剂走的快些;压力的提供可以是压缩空气,双连球或者小气泵给鱼缸供气的就行;特别是在容易分解的样品的分离中适用;压力不可过大,不然溶剂走的太快就会减低分离效果;个人觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是比较适用的;关于柱子的尺寸,应该是粗长的最好;柱子长了,相应的塔板数就高;柱子粗了,上样后样品的原点就小反映在柱子上就是样品层比较薄,这样相对的减小了分离的难度;试想如果柱子十厘米,而样品就有二厘米,那么分离的难度可想而知,恐怕要用很低极性的溶剂慢慢冲了;而如果样品层只有厘米,那么各组分就比较容易得到完全分离了;当然采用粗大的柱子要牺牲比较多的硅胶和溶剂了,不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了有些不环保的说,不过溶剂回收重蒸后也就减小了部分浪费;现在见到的柱子径高比一般在1：5～10,书中写硅胶量是样品量的30～40倍,具体的选择要具体分析;如果所需组分和杂质分的比较开是指在所需组分rf在～,杂质相差以上,就可以少用硅胶,用小柱子例如200毫克的样品,用2cm×20cm的柱子；如果相差不到,就要加大柱子,我觉得可以增加柱子的直径,比如用3cm的,也可以减小淋洗剂的极性等等;关于无水无氧柱,适用于对氧,水敏感,易分解的产品;可以湿柱,也可以干柱;不过在样品之前至少要用溶剂把柱子饱和一次,因为溶剂和硅胶饱和时放出的热量有可能是产品分解,毕竟要分离的是敏感的东东,小心不为过;也是因为分离的东西比较敏感,所以接收瓶一定要用可密封的,遵循schlenk操作;至于是加压、常压、减压,随需而定;因为是schlenk操作,所以点板是个问题,如果样品是显色的,恭喜了,不用点板,直接看柱子上的色带就行了;如果样品无色,只好准备几十个schlenk瓶,一瓶一瓶的点,不过几次之后就知道样品在哪,也就可以省些了;像我以前过一根无水无氧柱,需要六个schlenk,现在只一个就能把所要的全收集到;无水无氧柱中用的比较多的是用氧化铝作固定相;因为硅胶中有大量的羟基裸露在外,很容易是样品分解,特别是金属有机化合物和含磷化合物;而氧化铝可以做成碱性、中性和酸性的,选择余地比较大,但是比硅胶要贵些;听说有个方法,就是用石英做柱子,然后用HF254做固定相,这样在柱子外面用紫外灯一照就知道产品在哪里了,没有验证过;哪位做过可以提出来大家参详参详;关于湿法、干法上样;湿法省事,一般用淋洗剂溶解样品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等,但溶剂越少越好,不然溶剂就成了淋洗剂了;很多样品在上柱前是粘乎乎的,一般没关系;可是有的上样后在硅胶上又会析出,这一般都是比较大量的样品才会出现,是因为硅胶对样品的吸附饱和,而样品本身又是比较好的固体才会发生,这就应该先重结晶,得到大部分的产品后再柱分,如果不能重结晶那就不管它了,直接过就是了,样品随着淋洗剂流动会溶解的;有些样品溶解性差,能溶解的溶剂又不能上柱比如DMF,DMSO等,会随着溶剂一起走,显色是一个很长的脱尾,这时就必须用干法上柱了;样品和硅胶的量有一种说法是1：1,我觉得是越少越好,但是要保证在旋干后,不能看到明显的固体颗粒那说明有的样品没有吸附在硅胶上;溶剂的选择;当然是最便宜,最安全,最环保的了;所以大多选用石油醚,乙酸乙酯;文献中有写用正己烷的,太贵了,除非特别需要不要用不然银子哗哗的,流的比淋洗剂还快,不过因为极性很小,有时还是非它不可;乙醚也可以用,但是就是容易睡觉,注意保持清醒别让溶剂流干了,那样柱子也就不爽了;二氯甲烷也有用的,但是要知道,它和硅胶的吸附是一个放热过程,所以夏天的时候经常会在柱子里产生气泡,天气冷的时候会好一些;甲醇,据说能溶解部分的硅胶,所以产品如果想过元素分析的话要留神,应该经过后继处理,比如说重结晶等;其他的溶剂用的相对较少,要依个人的不同需要选择了;由于某些原因,用到的淋洗剂多是大包装的便宜嘛,我们这里是用10升或25升的塑料桶装的,就要注意这些工业品的纯度是较低的;经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质,其他的杂质就可想而知了,所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸;当然过原料时就可以免去这一步了,反正下面还有提纯的方法;另外溶剂在过柱子后最好也回收使用,一方面环保,另一方面也能节省部分经费,缺点是要消耗一定的人工;这里要注意的是,一般在过柱同时进行的是减压旋蒸,石油醚和乙酸乙酯的比例由于挥发度的不同会导致极性的变化,一般会使得极性变大,在梯度淋洗时比较合适,正好极性越来越大了;在过完柱子后,溶剂最后回收要采用常压,因为在减压旋蒸时会有部分低沸点的杂质一起出来,常压时就会减少这种现象,如果杂质和你下面要过的样品有反应那就惨了;关于操作问题1 装柱;柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的;干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行;装完的柱子应该要适度的紧密太密了淋洗剂走的太慢,一定要均匀不然样品就会从一侧斜着下来;书中写的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气泡就全下来了;当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了;但是柱子更忌讳的是开裂,甭管竖的还是横的,都会影响分离效果,甚至作废2 加样;用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了;加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离2～4cm就够了,再加压,这样避免了溶剂如二氯甲烷等夹带样品快速下行;3 淋洗剂的选择;感觉上要使所需点在～左右的比较好;不要认为在板上爬高了分的比较开,过柱子就用那种极性,如果rf在,即使相差也不容易在柱子上分开,因为柱子是一个多次爬板的状态,可以通过公式的比较：一次的分离度,肯定不如的三次方或四次方大;4 样品的收集;用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡;所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话,就不容易流出;这样就会发生,后面的点先出,而前面的点后出;这时可以采用氧化铝作固定相;另外,收集的试管大小要以样品量而定,特别是小量样品,如果用大试管,可能一根就收到了三个样品,wuwu;如果都用小试管那工作量又太大;5 最后的处理;柱分后的产品,由于使用了大量的溶剂,其中的杂质也会累积到产品中,所以如果想送分析,最好用少量的溶剂洗涤一下,因为大部分的杂质是溶在溶剂里的,一洗基本就没了,必要时进行重结晶;过柱经验关于操作问题;装柱柱子下面的活塞一定不要涂润滑剂,会被淋洗剂带到产品中的,可以采用四氟节门的;干法和湿法装柱觉得没什么区别,只要能把柱子装实就行;装完的柱子应该要适度的紧密太密了淋洗剂走的太慢,一定要均匀不然样品就会从一侧斜着下来;书中写的都是不能见到气泡,我觉得在大多数情况下有些小气泡没太大的影响,一加压气泡就全下来了;当然如果你装的柱子总是有气泡就说明需要多练习了;但是柱子更忌讳的是开裂,甭管竖的还是横的,都会影响分离效果,甚至作废加样用少量的溶剂溶样品加样,加完后将下面的活塞打开,待溶剂层下降至石英砂面时,再加少量的低极性溶剂,然后再打开活塞,如此两三次,一般石英砂就基本是白色的了;加入淋洗剂,一开始不要加压,等溶样品的溶剂和样品层有一段距离2～4cm就够了,再加压,这样避免了溶剂如二氯甲烷等夹带样品快速下行;淋洗剂的选择感觉上要使所需点在～左右的比较好;不要认为在板上爬高了分的比较开,过柱子就用那种极性,如果rf在,即使相差也不容易在柱子上分开,因为柱子是一个多次爬板的状态,可以通过公式的比较：一次的分离度,肯定不如的三次方或四次方大;样品的收集用硅胶作固定相过柱子的原理是一个吸附与解吸的平衡;所以如果样品与硅胶的吸附比较强的话,就不容易流出;这样就会发生,后面的点先出,而前面的点后出;这时可以采用氧化铝作固定相;另外,收集的试管大小要以样品量而定,特别是小量样品,如果用大试管,可能一根就收到了三个样品,wuwu;如果都用小试管那工作量又太大;最后的处理柱分后的产品,由于使用了大量的溶剂,其中的杂质也会累积到产品中,所以如果想送分析,最好用少量的溶剂洗涤一下,因为大部分的杂质是溶在溶剂里的,一洗基本就没了,必要时进行重结晶;另外,再过柱的时候,有时会出现气泡,一是和使用的溶剂有关,如果是易挥发的溶剂,如乙醚、二氯甲烷等,在室温稍高的情况下,很容易出现这种现象,因此,在室温高的时候,可以选择沸点较高,挥发相对小的溶剂;还有,使用混合溶剂时,使用的两种溶剂的沸点应该相差不大,如：乙酸乙酯和石油醚60~90,而乙醚却要选择30－60的石油醚;二是：不论是用带砂板的还是塞棉花的,在装柱之前,都要将空气用加压的方法将空气排干,这样就可避免柱中有空气过柱子需要耐心,不要着急;注意：有机溶剂对身体特有害别是心肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱里进行一、装柱装柱子添硅胶时,常用的有两种方法：即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣;不论干法还是湿法,硅胶称为固定相更为广义的上表面一定要平整,并且硅胶固定相的高度一般为15cm左右长度没有绝对之说,根据自身情况而定,制备的大柱可以长达一米,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好;湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压土方法可以用养鱼的氧气泵加压或是用氮气,当然不加压也可以用淋洗剂"走柱子",本法最大的优点是一般柱子装的比较结实,没有气泡; 我一般都用湿法装柱干法装柱则是直接往柱子里填入硅胶,然后再轻轻敲打柱子两侧湿法也要敲的,效果好点,至硅胶界面不再下降为止,然后再填入硅胶至合适高度,最后再用油泵直接抽,这样就会使得柱子装的很结实一般柱子不敢用油泵抽,怕把柱子抽裂了;接着是用淋洗剂"走柱子",一般淋洗剂是采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂;通常上面加压,下面再用油泵抽,这样可以加快速度;干法装柱较方便,但最大的缺陷在于"走柱子"时,由于溶剂和硅胶之间的吸附放热可以用手摸柱子明显感觉到梯度洗脱时,湿法装柱也会出现该情况,比较不好处理,可以缓慢改变溶剂,且置于通风处,容易产生气泡,这一点在使用低沸点的淋洗剂时如乙醚用乙醚最最明显,二氯甲烷更为明显;虽然产生的气泡在加压的情况下不易察觉,但是,一旦撤去压力,如在上样、加溶剂等操作的时候,气泡就会释放出来,严重时,整个柱子变花,样品不可能平整地通过,当然也就谈不上分离了;解决的办法是：第一、硅胶一定要压结实；第二、一定要用较多的溶剂"走柱子",一定要到柱子的下端不再发烫,恢复到室温后再撤去压力;也有介绍在硅胶的最上层填上一小层石英砂我一般垫张滤纸,撒上石英砂,再放些棉花,防止添加溶剂的时候,使得样品层不再整齐;但我的感觉是如果小心上样,添加溶剂,则没有这个必要;二、上样上样也有干法和湿法之分：干法也称硅胶制沙就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂;如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层;干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整;我一般喜欢用这种方法,除非不能用湿法上样就是用少量溶剂最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量将样品溶解后,再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁均匀加入;然后用少量溶剂洗涤后,再加入;湿法较方便,但不溶剂让其完全被硅胶均匀吸附,不容易跑的很平整柱层析关键在于柱子是否装好这是最大影响因素和淋洗剂是否选择恰当;而淋洗剂的选择则是通过TLC确定;这里要指出的一点是：TLC作用还是很大的的作用除了跟踪反应进程,检测试剂和原料纯度外,一个重要的用途就是为柱层析选择适当的淋洗剂;上样完毕后,接着即用淋洗剂淋洗;淋洗剂一般采用TLC分析得到的展开剂的比例再稀释一倍后的溶剂;由于层析柱和薄板的不同,即使两者使用的硅胶都相同,但是在把TLC分析得到的展开剂用在柱层析时,也显得极性偏大,所以要稀释一倍,但又不能稀释太多,否则成了靠扩散作用来分离,效果也不会好;这一点很实用,不过有些特殊情况也不一定,如果要保险可以先做根小柱子跑一下,这样最安全,就是花点时间三、收集主要依靠TLC据说国外有石英柱,直接用荧光灯照能看出来,不过太贵了,在国内不一定适用,需要切记的是：第一、某种样品在这种展开剂中只显示一个点,并不等于在别的展开剂中也只显示一个点;因此在寻找展开剂时,多尝试几种比例不同,成分不同的展开剂;展开剂的极性太小,点分不开,极性太大,也分不开.一般以目标产物的Rf值在左右为最佳;第二、点不能点得太浓在最后时应该点的浓点,这样看看有无收尽产品,否则容易重叠,不易判断,因为如果两个点相近的话,一浓就变成一个点了;第三、板上点的展开的清晰程度和溶剂的极性和物质在该溶剂中的溶解性有关,只有两者比较合适才能有一个交好的分离效果;选择适当的展开剂是首要任务.一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概为：石油迷<己烷<苯<乙醚展开剂的比例要靠尝试.一般根据文献这是首选中报道的该类化合物用什么样的展开剂,就首先尝试使用该类展开剂,然后不断尝试比例,直到找到一个分离效果好的展开剂;很多时候,展开剂的选择要靠自己不断变换展开剂的组成来达到最佳效果;不行可以尝试两两混合,三者混合,一般把两种溶剂混合时,采用高极性/低极性的体积比为1/3的混合溶剂,如果有分开的迹象,再调整比例,达到最佳效果,如果没有分开的迹象,最好是换溶剂;在利用TLC跟踪反应时,在点板的时候往往是反应体系的混和溶液点一个点A,每种难挥发的原料各点一个点B,C, D等等,然后所有的原料和反应体系的混合溶剂再共同点一个混合点X,这些点在板上的位置如图所示： A X B C D这样的好处是展开后可以清楚地看见每个点的位置,把A这个点展开后的各个层份的点与B,C,等原料比较,从而判断原料消失没有,点混合点X的目的在于,方便观察,因为有时候,板展开后,各点的位置有些变形,或者由于边缘效应等等,使得判断不易;我喜欢用小板,跑的快,很快见到结果,为了避免小板的边缘,用机器板较好利用TLC判断物质的纯度时,如果不能完全确定,可以再结合其他检测手段,如NMR,因为某种样品在这种展开剂中只显示一个点,并不等于在别的展开剂中也只显示一个点;但有趣的是,由于H-NMR可鉴别的纯度也就在95%左右,有时候H NMR现示较纯的东西,一点板就会发现有几个点;所以,两者要结合使用;如果有标准品或是以前做过的,对个对照最方便;。

这些合成经验总结超实⽤过柱的实验⽅法和技巧注意：有机溶剂对⾝体特有害别是⼼肺；肝脏等所有过柱操作都要在通风橱⾥进⾏！！常说的过柱⼦应该叫柱层析分离，也叫柱⾊谱。

我们常⽤的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。

由于柱分的经验成分太多，所以下⾯我就⼏年来过柱的体会写些⼼得，希望能有所帮助。

1、柱⼦可以分为：加压，常压，减压压⼒可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱⼦的塔板数。

所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最⾼的，但是时间也最长，⽐如天然化合物的分离，⼀个柱⼦⼏个⽉也是有的。

减压柱能够减少硅胶的使⽤量，感觉能够节省⼀半甚⾄更多，但是由于⼤量的空⽓通过硅胶会使溶剂挥发（有时在柱⼦外⾯有⽔汽凝结），以及有些⽐较易分解的东西可能得不到，⽽且还必须同时使⽤⽔泵抽⽓（很⼤的噪⾳，⽽且时间长）。

以前曾经⼤量的过减压柱，对它有⽐较深厚的感情，但是⾃从尝试了加压后，就⼏乎再也没动过减压的念头了。

加压柱是⼀种⽐较好的⽅法，与常压柱类似，只不过外加压⼒使淋洗剂⾛的快些。

压⼒的提供可以是压缩空⽓，双连球或者⼩⽓泵（给鱼缸供⽓的就⾏）。

特别是在容易分解的样品的分离中适⽤。

压⼒不可过⼤，不然溶剂⾛的太快就会减低分离效果。

个⼈觉得加压柱在普通的有机化合物的分离中是⽐较适⽤的。

2、关于柱⼦的尺⼨，应该是粗长的最好柱⼦长了，相应的塔板数就⾼。

柱⼦粗了，上样后样品的原点就⼩（反映在柱⼦上就是样品层⽐较薄），这样相对的减⼩了分离的难度。

试想如果柱⼦⼗厘⽶，⽽样品就有⼆厘⽶，那么分离的难度可想⽽知，恐怕要⽤很低极性的溶剂慢慢冲了。

⽽如果样品层只有0.5厘⽶，那么各组分就⽐较容易得到完全分离了。

当然采⽤粗⼤的柱⼦要牺牲⽐较多的硅胶和溶剂了，不过这些成本相对于产品来说也许就不算什么了（有些不环保的说，不过溶剂回收重蒸后也就减⼩了部分浪费）。

现在见到的柱⼦径⾼⽐⼀般在1：5～10，书中写硅胶量是样品量的30～40倍，具体的选择要具体分析。

硅胶柱层析一些心得常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。

我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。

由于柱分离的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望能有所帮助。

１．吸附剂常用的吸附剂有氧化铝、硅胶、氧化镁、碳酸钙和活性炭等：吸附剂一般要经过纯化和活性处理，颗粒大小应当均匀。

对吸附剂来说粒子小、表面积大，吸附能力就高，但是颗粒小时，溶剂的流速就太慢，因此应根据实际分离需要而定。

供柱色谱使用的氧化铝有酸性、中性和碱性3种。

酸性氧化铝是用1％盐酸浸泡后，用蒸馏水洗至氧化铝的悬浮液pH为4，用于分离酸性物质；中性氧化铝的pH约为7．5，用于分离中性物质；碱性氧化铝的pH约为10，用于胺或其它碱性化合物的分离。

因硅胶略带酸性，只能用于对酸不敏感的化合物的分离。

常用300-400目的柱硅胶或H 硅胶。

若化合物的R f值相差较大，则可考虑使用２00-３00目硅胶以加快层析速度。

另：因吸附剂的比表面较大，天气潮湿时或长期放置中吸附的水分会对分离效果产生极大的影响（相当于大大增加了固定相的极性导致样品分不开），因此应将吸附剂放入９０～１００度烘箱内烘２小时后，取出在干燥器中冷却后再使用。

使用的硅胶，不用时一定要密封，防止吸潮。

TLC所用的硅胶板一定要保存在干燥器里面，或使用前在红外烘箱里干燥一段时间。

2．溶质的结构与吸附能力的关系化合物的吸附性与它们的极性成正比，化合物分子中含有极性较大的基团时，吸附性也较强，氧化铝对各种化合物的吸附性按以下次序递减：酸和碱>醇、胺、硫醇>酯、醛、酮>芳香族化合物>卤代物、醚>烯>饱和烃３．柱子可以分为：加压，常压，减压。

压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。

所以其他条件相同的时候，常压柱是效率最高的，但是时间也最长，比如天然化合物的分离，一个柱子几个月也是有的。

加压柱是一种比较好的方法，与常压柱类似，只不过外加压力使淋洗剂走的快些。