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生化实验总结

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1 / 15 生化实验总结

生化实验总结

1.酶的活性中心：指在一级结构上可能相距甚远，甚至位于不同肽链上的少数几个氨基残基或这些残基上的基团通过肽链的盘绕折叠而在三维结构上相互靠近，形成一个能与底物结合并催化其形成产物的位于酶蛋白表面的特化的空间区域。对需要辅酶的酶来说，辅酶分子或其上的某一部分结构常是活性中心的组成部分。

2.酶原：酶原是有催化活性的酶的前体。通过蛋白酶的有限水解，可以将无活性的酶原转变成有催化活性的酶。

3.同工酶：指催化同一种化学反应，而其酶蛋白本身的分子结构组成及理化性质有所不同的一组酶。4.变构酶：一种一般具多个亚基，在结构上除具有酶的活性中心外，还具有可结合调节的别构中心的酶，活性中心负责酶对底物的结合与催化，别构中心负责调节酶反应速度。

5.竞争性抑制作用：竞争性抑制剂因具有与底物相似的结构所以与底物竞争酶的活性中心，与酶形成可逆的EI复合物，而使EI不能与S结合，从而降低酶反应速度的可逆抑制作用。这种抑制作用可通过增加底物浓度来解除。

6.超二级结构：在球状蛋白质分子的一级结构的顺序上，相邻的二级结构常常在三维折叠中相互折叠，彼此作用，在局部区域形成的二级结构聚合体，就是超二级结构

7.等电点：氨基酸所带静电荷为零，主要以两性离子存在时，在电场中，不向任何一级移动，此时溶液的PH叫做氨基酸的等电点 本文来源：网络收集与整理|word可编辑

2 / 15 8.酰胺平面：肽键主链的肽键C-N具有双键性质，因而不能自由转动，使连接在肽键上的六个原子共处于一个平面上，这个平面称酰胺平面

9.分子杂交：在退火条件下，不同来源的DNA互补区域形成双链，或DNA单链和RNA单链的互补形成DNA-RNA杂合双链的过程称分子杂交10.透析：小分子可以通过半透膜，大分子不能透过半透膜。这种分离物质的方法叫做透析。11.Tm：当核酸分子加热变性时，其在260nm处的紫外吸收会急剧增加，当紫外吸收变化达到最大变化的一半时所对应的温度称作解链温度，用Tm表示

12.Southern印迹法：将电泳分离的DNA片段从凝胶转移到适当的膜（如硝酸纤维素膜或尼龙膜）上，再进行杂交操作

13.Northern印迹法：将电泳分离后的变性RNA吸

引到适当的膜上再进行分子杂交的技术。1.磷酸戊糖途径：指机体某些组织以6-磷酸葡萄糖为起始物，在6-磷酸葡萄糖脱氢酶催化下形成6-磷酸葡萄糖酸，进而代谢生成磷酸戊糖为中间代谢物的过程，又称为磷酸己糖旁路。

2.三羧酸循环：又称柠檬酸循环、Krebs循环。即在线粒体中，糖、脂、氨基酸等有机物代谢的共同中间体乙酰辅酶A首先与草酰乙酸合成柠檬酸，再经过脱氢、脱羧等一系列的酶促反应，将乙酰辅酶A转变成CO2并生成NADH和FADH2的过程。它是生物体内糖、脂、氨基酸等有机物代谢的枢纽。3.呼吸链：代谢物上的氢原子被脱氢酶激活脱落后，经过一系列传递体，最后传递给被激活的氧分子，并与之结合生成水的全部体系。 本文来源：网络收集与整理|word可编辑

3 / 15 4.糖异生：糖异生：非糖物质（区丙酮酸，如酸，甘油，生糖氨基酸等）转变为葡萄糖或糖原的过程。机体内只有肝，肾能通过糖异生补充血糖。5.氧化磷酸化：生物体通过生物氧化所产生的能量，除一部分用以维持体温外，大部分可以通过磷酸化作用转移至高能磷酸化合物ATP中，这种伴随放能的氧化作用而进行的磷酸化作用称为氧化磷酸化。1.结合酶由结合部位和催化部位两部分构成，两者结合成的复合物又称酶活性中心，在结合酶中决定反映特异性的是结合部位，决定反映种类和性质的是催化部位。

2.竞争性抑制剂不改变酶促反应Vmax,非竞争性抑制剂不改变酶促反应Km

3.若同一种酶有n个底物，就有n个Km值，其中Km值最小的底物，一般为该酶的最适底物。4.生物胞素是生物素的辅酶，在有关催化过程中起传递和固定CO2的作用。

5.磺胺类药物能抑制细菌生长，因为它是对氨基苯甲酸的结构类似物，能竞争性的抑制二氢叶酸酶的活性。

6.EC3.1.1.11应为水解酶类

7.如果一个酶对A、B、C三种底物的米氏常数分别为Kma、Kmb和Kmc，且Kma>Kmb>Kmc，则此酶的最适底物是C，与酶亲和力最小的底物是A。8.维生素B1构成的辅酶是TPP，如果缺乏，糖代谢发生障碍，丙酮酸和乳酸在神经组织中堆积，形成脚气病。

9.B族维生素都包括：维生素B1，维生素B2，维生素B6，维生素B12，维生素PP，泛酸，生物素，叶酸。10.蛋白质分子中氮的平均含量为16%，故样品中蛋白质含量常以所测含氮量乘以6.25 本文来源：网络收集与整理|word可编辑

4 / 15 11.实验室中常用的甲醛滴定是利用氨基酸的氨基与中性甲醛反映，然后用碱（NaOH）来滴定NH3+放出的H+

12.在α螺旋中C=O和N-H之间形成的氢键与螺旋轴基本平行，每圈螺旋包含3.6个氨基酸残基，高度为0.15nm,每个氨基酸残基使螺旋轴上升0.54nm，并沿轴旋转100度

13.蛋白质变性时空间结构改变，而一级结构不变。变形后蛋白质的溶解度一般会降低，生物学功能丧失

14.核酸和蛋白质对紫外线的最大吸收峰分别为260nm和280nm。

15.虾壳的主要成分为几丁质，是天然多糖中唯一大量存在的带正电荷的氨基多糖，具有生物相溶性好，毒性低，以及被生物降解和可使用的功能16.直链淀粉遇碘呈蓝色，支链淀粉遇碘呈紫红色，糖原遇碘呈红紫色。17.RNA的三级结构为倒L型

18.脯氨酸为环状亚氨基酸，遇茚三酮反应呈黄色。一、选择题

1.转氨酶的辅酶是下列化合物中的哪一个？D

A.尼克酸B.泛酸C.硫胺素D.磷酸吡哆醛E核黄素

2.米氏方程，不符合[S]和Km关系的是EA当[S]>>Km时，反应速度与底物浓度无关，成零级反应

B.当[S]A.产物反馈抑制B.产物阻遏抑制C.非竞二、单选题

争性抑制D.竞争性抑制E.不可逆抑制18.有机磷农药所结合的胆碱酯酶上的基团是A

A.-OHB.-COOHC.-SHD.-CH3D.-NH2 本文来源：网络收集与整理|word可编辑

5 / 15 19.葡萄糖的连接方式为β1-4糖苷键

20.A型DNA和B型DNA产生差别的原因是D

A.A型DNA是双链，B型DNA是单链BA型DNA是右旋，B型DNA是左链C.A型DNA和B型DNA碱基组成不同D.两者的结晶状态不同

21.下列有关温度对酶促反应速度的影响作用的叙述中，错误的是C

A.温度对酶促反应速度的影响不仅包括升高温度使速度加快，也同时会使酶逐步变性B.在一定范围内，在最适温度时，酶促反应速度最快

C.最适温度是酶的特征常数

D.最适温度不是一个固定值，而与酶作用时间长短有关

E.一般植物酶的最适温度比动物酶的最适温度稍高1.糖酵解过程中产生的NADH+H+必须依靠甘油-α-磷酸穿梭系统或苹果酸穿梭系统才能进入线粒体，分别转变成线粒体中的FADH2和NADH。

2.糖原合成的关键酶是糖原合酶，糖原分解的关键酶是糖原磷酸化酶。

3.磷酸戊糖途径中的四碳化合物是赤藓糖-4-磷酸，七碳化合物是景天庚酮糖-7-磷酸。4.EMP途径中的己糖激酶、果糖磷酸激酶和丙酮酸激酶不在糖异生中起催化作用。5.乙醛酸循环不同于三羧酸循环的两个关键酶是异柠檬酸裂解酶和苹果酸合酶。6.糖酵解途径中最重要的关键酶是果糖磷酸激酶

7.1mol葡萄糖的有氧氧化是生成2mol丙酮酸，再转变为2mol乙酰CoA进入三羧酸循环。8.植物细胞质中的NADH，经穿梭后的P/O（磷氧比）为2.5或1.5，若在细胞中加入2，4-二硝基苯酚其P/O值变为0。 本文来源：网络收集与整理|word可编辑

6 / 15 9.糖酵解途径唯一的脱氢反应是甘油醛-3-磷酸脱下氢由NAD+递氢体接受。

1.在三羧酸循环中，下列哪个反应不是可逆反应（D）

A.柠檬酸异柠檬酸B.琥珀酸延胡索酸C.延胡索酸苹果酸D.草酰乙酸+乙酰CoA柠檬酸

2.不能经糖异生合成葡萄糖的物质是（D）A.α-磷酸甘油B.丙酮酸C.乳酸D.乙酰CoA

3.以NADP做辅助因子的酶是（C）

A.3-磷酸甘油醛脱氢酶B.果糖二磷酸酶C.6-磷酸-葡萄糖脱氢酶D.醛缩酶4.下列各中间产物中哪一个是磷酸戊糖途径所特有的（D）

A.丙酮酸B.3-磷酸甘油醛C.6-磷酸果糖D.6-磷酸葡萄糖酸

5.在肝脏中2mol乳酸转变成1mol葡萄糖，需消耗多少mol的高能化合物（E）A.2B.3C.4D.5E.6

6.下列哪种酶既在糖酵解中发挥作用，又在糖异生作用中发挥作用？（A）

A.3-磷酸甘油醛脱氢酶B.果糖-1，6-二磷酸酶C.丙酮酸激酶D.己糖激酶

7.每摩尔葡萄糖有氧氧化生成30或32ATP摩尔数的关键步骤取决于（D）

A.苹果酸氧化为草酰乙酸B.异柠檬酸氧化为α-酮戊二酸C.丙酮酸氧化为乙酰CoAD.3-磷酸甘油醛氧化为1，3-二磷酸甘油酯8.三羧酸循环的第一步反应产物是（A）A.柠檬酸B.草酰乙酸C.乙酰CoAD.二氧化碳 本文来源：网络收集与整理|word可编辑

7 / 15 9.下列属于TCA循环中的调控酶的是（D）A.醛缩酶B.磷酸甘油酸激酶C.转醛酶D.异柠檬酸脱氢酶

10.TCA循环与呼吸链相偶联产生高能键最多的步骤范围是（C）

A.柠檬酸→异柠檬酸B.异柠檬酸→α-酮戊二酸C.α-酮戊二酸→琥珀酸D.琥珀酸→苹果酸

11.在HMP（PPP）途径中，催化5-磷酸核酮糖转变为5-磷酸木酮糖的酶是（D）A.转酮酶B.转醛酶C.异构酶D.表异构酶

12.从乙酰CoA开始的TCA循环中，共有几

种酶（躲酶复合体算一种）（C）A.6种B.7种C.8种D.9种13.丙酮酸脱氢酶复合体最终接受底物脱下的2H的辅助因子是（D）

A.FADB.硫辛酸C.辅酶AD.NAD14.乳酸脱氢酶在骨骼肌中主要是生成（B）A.丙酮酸B.乳酸C.3-磷酸甘油醛D.3-磷酸甘油酸

15.糖酵解过程中NADH+H+的去路（A）A.是丙酮酸还原为乳酸B.经α-磷酸甘油穿梭系统进入线粒体氧化

C.经苹果酸穿梭系统进入线粒体氧化D.2-磷酸甘油酸还原为3-磷酸甘油醛16.人体不能水解的糖苷键是（A）

A.α-1，4-糖苷键B.α-1，6-糖苷键C.

β-1，4糖苷键D.α-1，β-4糖苷键

17.下列化合物不属于高能磷酸化合物的是（C）

A.PEPB.ATPC.F6PD.1,3-二磷酸甘油酸

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生化实验

生化实验

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生物化学实验指导书（精简本）

11 第一部分 生理生化实验目的要求

一、实验课的目的

植物生理生化实验课在我院作为一门独立的课程开设。通过实验课，学生可验证和巩固课堂理论知识，初步掌握有关植物生理生化的实验方法和操作技术，培养分析问题和解决问题的能力。

二、实验教学安排及评分方法

根据教学大纲及各类学生的不同要求，对本科生开设5个单位时间的实验内容既有定量的，又有定性实验。本科生成绩按百分制计算，实验课成绩主要按（1）预习报告（包括提问）；（2）操作；（3）实验结果和结果分析；（4）思考题；（5）态度（包括卫生情况）方面进行综合评分，侧重操作和结果。

三、实验课的具体要求

（一）植物生理生化实验的要求

1、充分预习：预习是做好实验的关键，实验前必须详细阅读实验指导，参考有关理论知识，弄清原理，了解实验过程中的各个环节，注意事项及其仪器使用方法，在自己所备的预习报告书上写一简单提纲，内容包括（1）原理；（2）实验步骤；（3）注意事项等，教师课前检查预习报告，发现不做预习报告者一律不给予做实验。

2、认真操作：严格地按照实验步骤独立进行操作，掌握每个实验地关键，明确操作原理，同事细心观察实验中出现的现象。若对实验步骤、材料等有不同看法，提出修改者，需在预习报告中写明，取得老师同意后，方可进行。

3、详细记录实验结果：每次实验过程中，应及时、详细地记录自己实验的一切数据及现象，杜绝抄袭等现象，一经发现该次成绩按0计算。在实验结束后，应交上一份原始记录，经老师阅后，再洗仪器，切记先清洗仪器，以免发现有错时，难以弥补。

4、认真写好实验报告：实验结束后，按照自己的实验结果及老师布置的思考题独立写好实验报告，文字要求简练、明了、准确。实验报告必须独立完成，发现抄袭者、抄袭者和被抄袭者，一律不给予评分。

（二）生理生化实验室规则

1、参加实验者，一律穿鞋进入实验室，实验室禁止抽烟，对待实验操作应认真严肃，并且冷静思考问题，不得在实验室谈笑，喧哗！

生化实验报告

生化实验报告

生化实验报告

引言：

生化实验是现代生物科学研究中不可或缺的一部分。通过生化实验，可以深入了解生物体的分子组成和功能，揭示生物体的生理过程和相关疾病的发生机制。本报告将就我们进行的一系列生化实验结果进行总结和分析。

实验一：蛋白质浓度测定实验

蛋白质是生物体的重要组成部分，也是许多生理过程的关键调节因子。通过本实验，我们采用比色法测定了不同样本中的蛋白质含量，并得出以下结论：

1. 样本A的蛋白质浓度明显高于样本B，表明样本A可能含有更多的蛋白质。

2. 样本C的蛋白质浓度最低，可能是由于样本C中存在其他干扰物质，影响了测定结果。

实验二：酶活性测定实验 酶是生物体内参与代谢反应的重要分子，其活性的变化可以反映生物体的生理状态。本实验中，我们通过测定不同条件下酶的活性，得出以下结论：

1. 酶活性随着温度的升高呈先增加后下降的趋势，说明酶在适宜温度下具有最高的活性。

2. pH值的变化对酶活性也有一定影响，酶活性在酸性和碱性条件下均降低，表明酶对于特定pH值有一定的适应性。

3. 离子浓度的改变可以显著影响酶的活性，高浓度的阳离子对酶活性的抑制效果较大。

实验三：DNA提取实验

DNA是生物体内存储遗传信息的重要分子，在基因研究和生物技术中应用广泛。本实验中，我们采用了几种常见的DNA提取方法，得出以下结论：

1. 不同提取方法对于不同样本的DNA提取效果有所差异，需要根据实际情况选择合适的方法。

2. 样本中其他杂质的存在会干扰DNA的提取，需要进行适当的纯化步骤以提高提取纯度。 3. 所得到的DNA质量可以通过比色法或荧光法进行检测，得出相对准确的结果。

实验四：酸碱滴定实验

酸碱滴定是一种常用的分析方法，在酸碱度测定和沉淀反应等方面有广泛应用。本实验中，我们进行了一系列的酸碱滴定实验，得出以下结论：

1. 强酸和强碱的滴定过程呈现出明显的酸碱中和点，通过计算可以得到溶液中目标物质的浓度。

生化实验心得体会实习报告

生化实验心得体会实习报告

一、前言

作为一名大学生，我有幸在xx大学实验室进行生化实验实习。这次实习让我深刻体会到了生化实验的重要性，也让我对实验室的工作有了更深入的了解。以下是我对这次实习的心得体会。

二、实习内容

1. 实验室环境及设备

实验室环境整洁，设备齐全，为我们的实验提供了良好的条件。实验室里有离心机、显微镜、电泳仪、分光光度计等仪器设备，这些都是进行生化实验必不可少的。

2. 实验项目

实习期间，我们进行了多个生化实验，主要包括以下项目：

（1）蛋白质的提取与鉴定

通过学习蛋白质的提取方法，我们掌握了从生物组织中提取蛋白质的技巧。同时，我们还学习了蛋白质的鉴定方法，如SDS-PAGE电泳、考马斯亮蓝染色等。

（2）核酸的提取与鉴定

实习期间，我们学习了从生物组织中提取核酸的方法，并掌握了核酸的鉴定方法，如琼脂糖凝胶电泳、核酸杂交等。

（3）酶活性测定

通过学习酶活性测定实验，我们了解了酶活性的影响因素，并掌握了测定酶活性的方法。

（4）生物分子相互作用研究

我们学习了生物分子相互作用的研究方法，如荧光共振能量转移（FRET）实验等。

三、实习心得体会

1. 实验技能的提高

通过这次实习，我掌握了多种生化实验技能，如蛋白质提取、核酸提取、电泳、分光光度计操作等。这些技能将为我今后的学习和研究打下坚实的基础。

2. 实验方法的创新 在实习过程中，我了解到实验方法的重要性。针对不同的实验目的，我们需要选择合适的实验方法。在老师的指导下，我学会了如何根据实验目的创新实验方法。

3. 团队合作与沟通

在实验室实习过程中，我们经常需要与团队成员协作完成实验。这让我认识到团队合作的重要性。同时，我也学会了如何与团队成员有效沟通，确保实验顺利进行。

4. 实验伦理与规范

在实习过程中，我了解到实验伦理和规范的重要性。遵守实验伦理和规范，既能保证实验结果的准确性，又能保护实验者的权益。

5. 对科研工作的认识

通过这次实习，我对科研工作有了更深入的了解。科研工作需要严谨的态度、丰富的知识、创新的精神和坚持不懈的努力。

生化实验整理

生化实验整理

1) 互补光圈 （自添）

2) 标准血清Cs 7% 70mg/ml

3) lg（I0/I）=KCL A=KCL （I0 为入射光强度，I为透射光强度，A是吸光度，K为吸光系数，C为溶液的浓度，L为液层的厚度） 同种物质的A不变，一般采用改变溶液浓度的方法，控制吸光度在0.05—1.0的范围内

4) 维持亲水胶体稳定的因素有：表面电荷，水化膜（蛋白质溶液中加入硫酸铵，使蛋白表面电荷被中和，水化膜被破坏）

5) 752分光光度计的两种光源，在波长320-1000nm应该使用钨灯，在200-320应该使用氢灯（氘灯）

6) 双缩脲法测蛋白质，蛋白质样本和双缩脲试剂的反应时间不能少于30分钟，比色时多用波长520nm

7) 比色分析法中，波长选择原则 吸收最大，干扰最小

8) 长度为A:10kb B:6.8kb C:4.3kb D:22kb 的四种DNA片段，电泳后由前到后顺序为 CBAD （即长度由小到大）

9) 防止DNA酶解的方法：加入EDTANa2 （乙二胺四乙酸二钠）

10) 适量冷无水乙醇可使DNA析出

11) 氯仿-异丙醇可以将蛋白质除去：离心后形成三层，上层DNA 异丙醇 和水。中层蛋白质沉淀。下层氯仿

12) 亲和层析最大特点，特异性强，简便和高效，能在温和条件下操作，对含量少又不稳定的活性物质更为有效

13) 影响带电质点电荷量的外界因素：介质的PH值，缓冲液的离子强度

14) 凝胶过滤层析中，小分子量的蛋白质在前进的道路上通过凝胶时路径长，遇到的阻力大，所以流速慢，而大分子量的蛋白质不能进入胶粒内部，所以比较顺利的通过胶粒间的空隙而流出，路径短，阻力小，流速快

15) SDS作用：使蛋白变性，消除电荷影响，使蛋白质空间构象趋于一致

16) 待测溶液浓度计算测定方法

标准曲线法计算待测溶液浓度

标准管法计算待测溶液浓度

标准系数法计算待测溶液浓度 标准系数=标准液浓度/标准液平均吸光度 待测液浓度=待测溶液吸光度*标准系数