药用植物墨旱莲的组织培养研究

㊀基金项目:国家重点研发计划(Ｎｏ.２０１９ＹＦＣ１７１１００８)ꎻ∗同为通信作者㊀作者简介:焦广洋ꎬ男ꎬ研究方向:生药学ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｊｉａｏｇｕａｎｇｙａｎｇ＠ａｌｉｙｕｎ.ｃｏｍ㊀通信作者:陈军峰ꎬ男ꎬ博士研究生ꎬ副研究员ꎬ研究方向:中药学ꎬＴｅｌ:０２１－５１３２２４０３ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｃｊｆ１２３４７８３１＠ｆｏｘｍａｉｌ.ｃｏｍꎻ张凤ꎬ女ꎬ博士研究生ꎬ副主任药师ꎬ研究方向:生药学㊁临床药学ꎬＴｅｌ:０２１－５１３２２４０３ꎬＥ－ｍａｉｌ:ｆｅｎｇｚｈａｎｇｋｙ＠ａｌｉｙｕｎ.ｃｏｍ墨旱莲及其化学成分的药理作用㊁体内代谢及质量控制研究进展焦广洋１ꎬ２ꎬ李澍坤３ꎬ邓易４ꎬ殷军１ꎬ陈万生２ꎬ４ꎬ陈军峰２∗ꎬ张凤４∗(１.沈阳药科大学中药学院ꎬ辽宁沈阳１１００１６ꎻ２.上海中医药大学中药研究所ꎬ上海２０１２０３ꎻ３.海军军医大学基础医学院学员六大队十七队ꎬ上海２００４３３ꎻ４.中国人民解放军海军军医大学第二附属医院药材科ꎬ上海２００００３)摘要:墨旱莲为菊科植物鳢肠(ＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.)的干燥地上部分ꎬ作为传统药用植物在世界范围内均有广泛的临床应用ꎮ本文基于近年来公开发表的文献ꎬ对墨旱莲及其化学成分的药理作用㊁体内代谢及质量控制研究进展进行归纳总结ꎬ以期为墨旱莲的临床应用及质量研究提供参考ꎮ关键词:墨旱莲ꎻ药理作用ꎻ体内代谢ꎻ质量控制中图分类号:Ｒ２８５㊀文献标识码:Ａ㊀文章编号:２０９５－５３７５(２０２１)１０－０６７３－００６ｄｏｉ:１０.１３５０６/ｊ.ｃｎｋｉ.ｊｐｒ.２０２１.１０.０１１ＲｅｖｉｅｗｏｆｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓꎬｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ａｎｄｉｔｓｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓＪＩＡＯＧｕａｎｇｙａｎｇ１ꎬ２ꎬＬＩＳｈｕｋｕｎ３ꎬＤＥＮＧＹｉ４ꎬＹＩＮＪｕｎ１ꎬＣＨＥＮＷａｎｓｈｅｎｇ２ꎬ４ꎬＣＨＥＮＪｕｎｆｅｎｇ２∗ꎬＺＨＡＮＧＦｅｎｇ４∗(１.ＳｃｈｏｏｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａꎬＳｈｅｎｙａｎｇＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈｅｎｙａｎｇ１１００１６ꎬＣｈｉｎａꎻ２.ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＳｈａｎｇｈａｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅꎬＳｈａｎｇｈａｉ２０１２０３ꎬＣｈｉｎａꎻ３.ＳｅｖｅｎｔｅｅｎｔｈＴｅａｍꎬＳｉｘｔｈＢｒｉｇａｄｅꎬＢａｓｉｃＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅꎬＮａｖａｌＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈａｎｇｈａｉ２００４３３ꎬＣｈｉｎａꎻ４.ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｙꎬＳｅｃｏｎｄＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＳｈａｎｇｈａｉ２００００３ꎬＣｈｉｎａ)Ａｂｓｔｒａｃｔ:ＥｃｌｉｐｔａｅＨｅｒｂａꎬｔｈｅｄｒｙａｅｒｉａｌｐａｒｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.(Ｆａｍｉｌｙａｓｔｅｒａｃｅａｅ).Ａｓａｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔꎬｉｔｈａｓｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙｕｓｅｄｉｎｃｌｉｎｉｃａｌａｌｌｏｖｅｒｔｈｅｗｏｒｌｄ.Ｂａｓｅｄｏｎｔｈｅｌｉｔｅｒａｔｕｒｅｐｕｂｌｉｓｈｅｄｉｎｒｅｃｅｎｔｙｅａｒｓꎬｔｈｉｓｐａｐｅｒｒｅ￣ｖｉｅｗｅｄｔｈｅｐｒｏｇｒｅｓｓｉｎｔｈｅｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｏｆｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓꎬｍｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ａｎｄｉｔｓｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓꎬｉｎｏｒｄｅｒｔｏｐｒｏｖｉｄｅｒｅｆｅｒｅｎｃｅｆｏｒｔｈｅｓｔｕｄｙｏｆｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎａｎｄｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａ￣ｔａＬ..Ｋｅｙｗｏｒｄｓ:ＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ꎻＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌｅｆｆｅｃｔｓꎻＭｅｔａｂｏｌｉｓｍꎻＱｕａｌｉｔｙｃｏｎｔｒｏｌ㊀㊀墨旱莲又称旱莲草㊁水旱莲ꎬ为一年生菊科植物鳢肠(ＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.)的干燥地上部分ꎬ在我国各地均有分布ꎮ墨旱莲所含化学成分丰富ꎬ主含噻吩㊁黄酮㊁香豆草醚㊁三萜皂苷及挥发油类成分ꎬ临床主要用于肝肾阴虚㊁牙齿松动㊁外伤出血等疾病的治疗[１]ꎬ在我国及印度㊁巴西等地拥有悠久的用药历史ꎬ现已被«中国药典»«英国药典»«欧洲药典»等收载[２－３]ꎬ也是国家卫健委批准的可用于保健食品的中药[４]ꎮ因其具有较高的药用价值ꎬ近年来ꎬ国内外学者对墨旱莲的药理作用㊁体内代谢及质量控制方面做了大量研究ꎬ本文就上述研究内容进行整理和分析ꎬ以期为墨旱莲的进一步深入研究及临床应用提供参考ꎮ１㊀药理作用研究表明墨旱莲具有多种药理作用ꎬ其中保肝㊁凉血止血㊁抗蛇毒等作用属于墨旱莲的传统功效ꎬ而现代研究也在墨旱莲丰富的化学成分[５]中发现其具有降血脂㊁抗肿瘤㊁抗炎㊁抑菌等多种药理活性ꎬ这使人们对墨旱莲药用价值有了更为清晰的认识ꎬ也为墨旱莲的临床应用提供了极具价值的参考ꎮ１.１㊀保肝作用㊀保肝作用为墨旱莲的传统功效ꎬ现代药理学研究从细胞及动物等多个层面探究了墨旱莲的保肝作用及其可能机制ꎮ墨旱莲不具有肝毒性ꎬ但能通过抑制ＣＣｌ４诱导的肝细胞脂质过氧化㊁调节氨基比林Ｎ－脱甲基酶及膜结合葡萄糖６－磷酸酶等肝微粒体药物代谢酶的水平来发挥保肝作用[７－８]ꎮ其所含成分蟛蜞菊内酯已被证明能够通过ＮＦ－κＢ信号通路缓解小鼠肝炎症状ꎬ保护肝细胞[９]ꎮ墨旱莲在治疗非酒精性脂肪肝上同样具有较好的活性ꎬＨｅｌｍｙ等[１０]发现高剂量(３００ｍｇ ｋｇ－１)的墨旱莲甲醇提取物对非酒精性脂肪肝大鼠的肝功能和血脂水平有明显改善作用ꎬ利用靶向代谢组学技术证实墨旱莲及所含有的槲皮素[１１]及蟛蜞菊内酯[１２]可通过调节肠道菌群及脂质代谢来改善脂肪肝症状ꎮ体外研究证实ꎬ墨旱莲对丙型肝炎病毒[１３]㊁Ｈｅｐ－Ｇ２肝癌细胞[１４]等同样有较好的抑制作用ꎮ１.２㊀降血脂作用㊀墨旱莲是印度等地的传统降血脂药物ꎮＧｕｐｔａ等[１５]发现墨旱莲乙酸乙酯部位可能通过抑制了ＡＫＴ/ｍＴＯＲ通路激活从而抑制３Ｔ３－Ｌ１前体脂肪细胞和ｈＭＳＣ衍生的脂肪细胞的分化ꎬ并能显著降低高脂血症金黄地鼠体内血清甘油三酯㊁总胆固醇和低密度脂蛋白等指标ꎬ抑制成脂过程的转录因子和蛋白在附睾脂肪组织中的表达ꎮ高血脂也是诱发动脉粥样硬化和冠心病的重要原因ꎬ墨旱莲正丁醇提取物连续给药六周后可显著降低小鼠血清中总胆固醇和甘油三酯水平ꎬ并改善动脉粥样硬化和冠心病症状[１６]ꎮ１.３㊀抗肿瘤作用㊀Ｙａｄａｖ等[１７]研究了墨旱莲乙醇提取物对７种不同癌细胞株ＭＤＡ－ＭＢ－２３１(乳腺)㊁ＨｅＬａ(宫颈)㊁ＳＫ－ＯＶ－３(卵巢)㊁ＳＷ６２０(结肠)㊁ＤＵ１４５(前列腺)㊁Ａ５４９(肺)和ＰＡＮＣ－１(胰腺)的抑制作用ꎬ发现其通过破坏线粒体膜电位和ＤＮＡ的方式能够对菌株的生长产生抑制作用ꎬ且对乳腺癌细胞株生长和迁移的抑制最为明显ꎬ并通过体外及体内安全性评价实验证明墨旱莲乙醇提取物无明显的毒性作用ꎮ已有研究表明ꎬ从墨旱莲中分离得到的a－三联噻吩甲醇可以通过调节ＮＡＤＰＨ氧化酶产生活性氧来诱导人子宫内膜癌细胞(Ｈｅｃ１Ａ和Ｉｓｈｉｋａｗａ)的凋亡(ＩＣ５０值分别为０.３８μｍｏｌ Ｌ－１和０.３５μｍｏｌ Ｌ－１)ꎬ可能为子宫内膜癌的药物研发提供依据[１８]ꎮ研究发现ꎬ蟛蜞菊内酯对前列腺㊁乳腺等肿瘤细胞[１９－２０]具有一定的抑制生长和诱导凋亡的作用ꎮ１.４㊀抗炎与镇痛作用㊀墨旱莲叶甲醇提取物对卡拉胶和蛋清所致的大鼠足肿胀均有明显的抗炎作用ꎬ且呈剂量依赖性ꎬ其抗炎活性与吲哚美辛(１０ｍｇ ｋｇ－１)和赛庚啶(８ｍｇ ｋｇ－１)相当[２１]ꎮ墨旱莲甲醇提取物还能够降低哮喘小鼠支气管及肺部中的炎症细胞因子浓度[２２]ꎮ从墨旱莲中分离得到的刺囊酸可通过ＮＦ－kＢ信号通路来抑制脂多糖诱导的小鼠ＲＡＷ２６４.７细胞炎症因子的表达[２３]ꎻ蟛蜞菊内酯可通过抑制ＮＦ－kＢ信号通路的关键激酶ＩＫＫ来抑制脂多糖诱导的ｃａｓｐａｓｅ－１１的表达[２４]ꎮ１.５㊀抗氧化作用㊀林朝鹏等[２５]发现墨旱莲黄酮类提取物可增强血清中ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ的活性ꎬ降低血清中ＭＤＡ含量ꎬ发挥抗氧化作用ꎮＳｉｎｇｈ等[２６]发现甲醇提取物与其他溶剂提取物相比ꎬ含有较高的多酚和黄酮类成分ꎬ在ＤＰＰＨ㊁ＡＢＴＳ㊁ＳＯＤ㊁Ｃａｔａｌａｓｅ㊁ＧＳＴ等活性实验中发挥了最强的抗氧化活性ꎮＵｎｎｉｋｒｉｓｈｎａｎ等[２７]的实验结果与上类似ꎮ１.６㊀抑菌作用㊀Ｒａｕｔ等[２８]采用抑菌圈法和最小抑菌浓度法测试表明ꎬ墨旱莲甲醇提取物在最低浓度１２.５ｍｇ ｍＬ－１时即可对大肠杆菌和玫瑰微球菌产生抑制作用ꎬ强于其石油醚提取物ꎻ也有研究认为其石油醚提取物对多种真菌的抑制作用最佳[２９]ꎮ实验表明ꎬ在ｐＨ５.５~９.０条件下ꎬ墨旱莲总皂苷可通过破坏细菌细胞膜的方式达到对枯草芽孢杆菌和铜绿假单胞菌生长的抑制作用[３０]ꎮＧｕｒｒａｐｕ等[３１]发现墨旱莲叶中含有的生物碱对大肠杆菌㊁铜绿假单胞菌㊁鲍氏志贺菌㊁金黄色葡萄球菌和粪链球菌等５种菌株均有抑制作用ꎬ且呈浓度依赖性ꎬ但最高浓度５００μｇ ｍＬ－１时的抑菌能力仍不及环丙沙星ꎮ１.７㊀其他活性㊀据文献报道ꎬ墨旱莲在抗骨质疏松[３２]㊁调节免疫[３３]㊁抗糖尿病[３４]㊁驱蚊[３５]㊁止血[３６]㊁抗蛇毒[３７]等方面同样具有一定的治疗效果ꎮ此外ꎬ蟛蜞菊内酯可通过调节ＮＦ－κＢ通路显著抑制ＬＰＳ介导的人肾小球系膜细胞异常增殖炎症反应ꎬ治疗肾损伤[３８]ꎮ墨旱莲石油醚提取物还能够显著的改善毛囊环境[３９]ꎬ促进毛发生长ꎬ治疗效果优于２％的米诺地尔[４０]ꎮ２㊀体内代谢Ｌｉ等[４１]通过ＵＨＰＬＣ/Ｑ－Ｏｒｂｉｔｒａｐ－ＭＳ技术分析了大鼠口服墨旱莲乙醇提取物(１ｇ ｋｇ－１)后入血成分ꎬ鉴别得２４种原型成分和２００种代谢产物ꎬ均以黄酮类化合物为主ꎬ代谢途径包括氧化㊁氢化㊁甲基化㊁葡萄糖醛酸化和磺化等ꎬ其中以葡萄糖醛酸化等Ⅱ相代谢途径为主ꎮ文献报道ꎬ墨旱莲提取物给药后血浆中的黄酮类化合物大部分以结合物形式存在ꎬ因此采用了酶解法处理大鼠血浆ꎬ基于液相分析方法检测木犀草素㊁野黄芩素㊁芹菜素和香叶木素的游离和结合总浓度ꎬ血药浓度－时间曲线呈双峰或多峰现象[４２]ꎮＣｈｅｒｕｖｕ等[４３]测定了墨旱莲三氯甲烷提取物灌胃给药后大鼠血浆木犀草素㊁蟛蜞菊内酯和芹菜素的药动学行为ꎬ大鼠血浆采用液液萃取进行前处理ꎬ结果表明上述成分在体内１ｈ左右出现血药峰浓度ꎬ半衰期为５ｈ左右ꎬ且血药浓度－时间曲线存在双峰现象ꎬ与Ｃｈｅｎ等[４４]的报道类似ꎬ这表明芹菜素和蟛蜞菊内酯等在体内可能存在肝－肠循环现象ꎮＣｈｅｎ等[４５]发现大鼠在口服５.００ｍｇ ｋｇ－１蟛蜞菊内酯代谢情况与上述报道类似ꎬ并通过体外肝微粒体孵育实验验证了其在体内代谢的规律ꎮ３㊀质量控制«中国药典»２０２０年版[２]主要通过观察性状和薄层色谱法(ＴＬＣ)以及测定水分㊁灰分㊁酸不溶性灰分来对墨旱莲进行鉴别和检查ꎬ而含量测定方面仅以对蟛蜞菊内酯进行高效液相分析方法(ＨＰＬＣ)为标准ꎬ但是墨旱莲化学成分及药理作用复杂多样ꎬ仅对蟛蜞菊内酯这一种化学成分进行含量测定并不能够完全评价其质量的优劣ꎮ近年来关于墨旱莲的质量控制方法从传统的显微㊁薄层以及ＨＰＬＣ逐渐发展到液相色谱－质谱联用(ＨＰＬＣ－ＭＳ)和毛细管电色谱法(ＣＥＣ)等ꎬ为墨旱莲所含成分分析提供了各种科学数据ꎮ３.１㊀ＴＬＣ㊀ＴＬＣ主要用于墨旱莲药材及其制剂的定性鉴别以及对旱莲苷Ａ㊁α－醛基三聚噻吩㊁蟛蜞菊内酯等指标性成分的含量测定ꎬ增强了墨旱莲质量控制方法的灵活性和可执行性ꎮＴＬＣ在墨旱莲质量控制中的应用见表１ꎮ表１㊀ＴＬＣ在墨旱莲质量控制中的应用样品对照品固定相展开剂显色条件９０％甲醇提取物α－醛基三联噻吩硅胶Ｇ环己烷－三氯甲烷－乙酸乙酯(８ʒ２ʒ１)ＵＶ３６６ｎｍ乙醚提取物[４７]槲皮素硅胶Ｇ甲苯－醋酸乙酯－甲酸(５ʒ４ʒ０.５)１％三氯化铝乙醇溶液ꎬＵＶ３６５ｎｍ乙酸乙酯提取物[４８]墨旱莲对照药材硅胶Ｇ正己烷－乙酸乙酯(９ʒ１)ＵＶ３６５ｎｍ甲醇提取物[４９]蟛蜞菊内酯硅胶６０Ｆ－２５４甲苯ʒ乙酸乙酯(９ʒ１)ＵＶ３６６ｎｍ水提取物[５０]蟛蜞菊内酯硅胶６０Ｆ－２５４甲苯ʒ乙酸乙酯ʒ丙酮ʒ甲酸(６ʒ２ʒ１ʒ１)ＵＶ３５１ｎｍ３.２㊀ＨＰＬＣ㊀ＨＰＬＣ是墨旱莲多指标性成分同时测定的常用方法ꎮ从表２可以看出ꎬＨＰＬＣ主要对墨旱莲中的香豆素类(蟛蜞菊内酯㊁去甲蟛蜞菊内酯)㊁三萜皂苷类(旱莲苷Ⅰ㊁旱莲苷Ⅶ)㊁黄酮类(木犀草素㊁芹菜素)㊁噻吩类(α－三联噻吩甲醛㊁α－三联噻吩甲醇)等化合物进行检测ꎮ发现不同产地㊁批次的墨旱莲中化学成分含量差异较大ꎬ如:蟛蜞菊内酯的含量范围为０.０１７０％~０.０１９０％ꎬ旱莲苷Ｉ为０.０１４０％~０.０１６０％ꎬ旱莲苷ＶＩＩ为０.００４３％~０.００５９％ꎬ木犀草素为０.０１７０％~０.０４８０％ꎬα－三联噻吩甲醛为０.０１２５％~０.１８４５％ꎬα－三联噻吩甲醇为０.００６３％~０.０７７７％ꎮ此外ꎬ吴红霞等[６４]通过高效液相色谱法建立了墨旱莲药材的指纹图谱ꎬ并对来自不同产地的墨旱莲进行质量分析ꎬ发现此方法可应用于墨旱莲的质量控制当中ꎮ表２㊀ＨＰＬＣ在墨旱莲质量控制中的应用检测对象检测化合物色谱柱流动相检测波长颗粒[５２]原儿茶酸㊁原儿茶醛１８(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.１％磷酸水溶液ＵＶꎬ２８０ｎｍ药材[５３]木犀草素ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈－０.１％磷酸水溶液ＤＡＤꎬ３４８ｎｍ墨旱莲配方颗粒[５４]绿原酸㊁咖啡酸ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＥｃｌｉｐｓｅＸＤＢ－Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.１％磷酸水溶液ＤＡＤꎬ３２７ｎｍ药材[５５]α－三联噻吩甲醛㊁α－三联噻吩甲醇ＡｇｉｌｅｎｔＺｏｒｂａｘＳＢ－Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈－０.５％甲酸水溶液ＶＷＤꎬ３９５ｎｍ药材[５６]木犀草素㊁芹菜素Ｎｕｃｌｅｏｄｕｒ１００－５Ｃ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.２％磷酸水溶液ＵＶꎬ３５０ｎｍ药材正丁醇提取部位[５７]墨旱莲皂甙Ａ㊁齐墩果酸㊁芹菜素㊁木犀草素㊁α－三联噻吩㊁(丁烯－３－炔－卜基)２ꎬ２－二联噻吩㊁蟛蜞菊内酯㊁去甲基蟛蜞菊内酯ＩｎｅｒｔｓｉｌＯＤＳ－２柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈:０.５％乙酸水溶液－甲醇:０.４％的磷酸水溶液ＳＰＤ－１０Ａｖｐꎬ２１０ｎｍ药材[５８]木犀草素ＳｙｍｍｅｔｒｙＯＤＳＣ１８柱(４.６ｍｍˑ２５０ｍｍꎬ５μｍ)甲醇－０.２％磷酸水溶液ＰＤＡꎬ３５０ｎｍ药材[５９]木犀草素㊁芹菜素Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋＣＬＣ－ＯＤＳ柱(６ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ５μｍ)乙腈－２％的醋酸水溶液ＳＰＤ－１０Ａｖｐꎬ３４０ｎｍ药材[６０]旱莲苷Ｃꎬ旱莲苷ＩＶꎬ旱莲苷Ａꎬ刺囊酸－２８－Ｏ－β－Ｄ－葡萄糖苷ＷａｔｅｒｓＡＣＱＵＩＴＹＵＰＬＣＢＥＨＣ１８柱(２.１ｍｍˑ１５０ｍｍꎬ１.７μｍ)乙腈－水溶液ＰＤＡꎬ２１０ｎｍ药材[６１]木犀草素㊁芹菜素ＡｃｑｕｉｔｙＢＥＨＣ１８柱(２.１ｍｍˑ５０ｍｍꎬ１.７μｍ)乙腈－１％乙酸水溶液ＰＤＡꎬ３４０ｎｍ药材[６２]异槲皮苷㊁木犀草苷㊁异去甲蟛蜞菊内酯㊁异绿原酸Ａ㊁异绿原酸Ｃ㊁木犀草素㊁蟛蜞菊内酯㊁芹菜素ＷａｔｅｒｓＡｃｑｕｉｔｙＵＰＬＣＢＥＨＣ１８柱(２.１ｍｍˑ１００ｍｍꎬ１.７μｍ)乙腈－０.１％甲酸水溶液ＤＡＤꎬ３５０ｎｍ测器ꎻＰＤＡ－光电二极管阵列检测器３.３㊀ＨＰＬＣ－ＭＳ㊀Ｈａｎ等[６５]通过ＨＰＬＣ－ＭＳ/ＭＳ建立了同时测定墨旱莲中９种化合物的方法ꎬ所检测化合物包括木犀草苷㊁旱莲苷Ｃ㊁木犀草素㊁旱莲苷ＩＶ㊁芹菜素㊁旱莲苷Ａ㊁刺囊酸２８－Ｏ－β－Ｄ－吡喃葡萄糖苷㊁刺囊酸㊁３－氧代－１６α－羟基齐墩果烷－１２－烯－２８－酸ꎻ并通过测定１３个产地的墨旱莲对该方法进行验证ꎬ证实该方法可应用于墨旱莲的质量控制ꎮ夏爱军等[６６]通过ＵＨＰＬＣ－Ｑ－ＴＯＦ/ＭＳ方法对对不同产地旱莲草药材中的５个指标性成分同时进行含量测定的方法ꎬ发现芹菜素㊁十六烷酸㊁木樨草素㊁蟛蜞菊内酯㊁木樨草苷在不同产地墨旱莲的测定结果存在着较大差异ꎮ３.４㊀其他方法㊀刘海兴等[６７]通过ＣＥＣ测得旱莲莲中总黄酮的平均含量最高为０.５４４ｍｇ ｋｇ－１ꎮＰｕｋｕｍｐｕａｎｇ等[６８]通过ＵＶ对墨旱莲不同提取物的总酚含量进行测定ꎬ测得正丁醇部位的总酚含量为(９０.２８８ʃ０.２４０)ｍｇ ｋｇ－１ꎮ综上分析可见ꎬ每种检测方法均有其优势与不足ꎬ如薄层色谱法凭借其操作简便㊁成本低廉㊁方法成熟㊁检测效率高等优势ꎬ至今仍为«中国药典»对墨旱莲鉴别的主要方法ꎬ但是由于其在结果的重复性㊁试剂毒性以及对生物高分子分离效果差㊁准确度低等不足ꎬ还需要不断的改进和完善ꎻ由于中药质量控制的指标成分需满足药材特有㊁临床效应明确㊁可定性㊁定量等条件ꎬ而２０１０年版«中国药典»[６９]首次通过ＨＰＬＣ对墨旱莲指标性成分蟛蜞菊内酯进行含量测定ꎬ弥补了先前药典仅通过显微㊁薄层等方法对墨旱莲进行真伪鉴别而无法进行含量测定的不足ꎬ成为墨旱莲质量控制和评价的重要手段ꎮ但是目前«中国药典»仅以蟛蜞菊内酯为检测指标进行高效液相色谱的含量测定ꎬ检测指标单一ꎬ而前期研究报道中通过ＨＰＬＣ法对墨旱莲中α－三联噻吩甲醛㊁木犀草素㊁芹菜素等多种活性成分为指标对墨旱莲进行质量控制为«中国药典»的更新和完善提供了借鉴ꎬ相信未来多指标成分测定将成为墨旱莲质量控制的必要内容ꎮ４　结语与展望墨旱莲药食同源ꎬ在临床应用及养生保健上具有一定的地位ꎮ目前对于墨旱莲的研究主要是在化学成分提取分离的基础上ꎬ开展提取物及单体的药理活性考察ꎬ以及少数化合物的体内代谢和药材的质量控制方法等ꎮ但是对于墨旱莲药效物质与其传统功效的关联性仍需进一步明确ꎬ未来需加强对其特征性成分如噻吩类㊁旱莲苷类㊁黄酮类等成分的功效和代谢特征进行全面㊁综合的分析ꎬ明确其成分与功效的关联性ꎬ建立更为科学的质量控制体系ꎬ才能为墨旱莲的药用价值及临床应用提供了更有力的科学依据ꎮ参考文献:[１]㊀程敏ꎬ胡正海.墨旱莲的生物学和化学成分研究进展[Ｊ].中草药ꎬ２０１０ꎬ４１(１２):２１１６－２１１８.[２]国家药典委员会.中华人民共和国药典２０２０年版(一部)[Ｓ].北京:中国医药科技出版ꎬ２０２０:３９１.[３]ＷＡＮＧＭꎬＦＲＡＮＺＧ.ＴｈｅｒｏｌｅｏｆｔｈｅＥｕｒｏｐｅａｎＰｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ(ＰｈＥｕｒ)ｉｎＱｕａｌｉｔｙＣｏｎｔｒｏｌｏｆＴｒａｄｉｔｉｏｎａｌＣｈｉｎｅｓｅＨｅｒｂａｌＭｅｄｉｃｉｎｅｉｎＥｕｒｏｐｅａｎＭｅｍｂｅｒＳｔａｔｅｓ[Ｊ].ＷＪＴＣＭꎬ２０１５ꎬ１(１):５－１５. [４]国家卫生计生委公布１０１种药食同源品种征求意见[Ｊ].山东中医杂志ꎬ２０１５ꎬ３４(１):７６.[５]ＸＩＯＮＧＨＰꎬＸＩＦＭꎬＣＨＥＮＷＳꎬｅｔａｌ.ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ[Ｊ].ＣｈｅｍＮａｔＣｏｍｐｏｕｎｄꎬ２０２１ꎬ５７(１):１－３. [６]ＹＵＳＪꎬＹＵＪＨꎬＨＥＦꎬｅｔａｌ.ＮｅｗａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｔｈｉｏｐｈｅｎｅｓｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ[Ｊ].Ｆｉｔｏｔｅｒａｐｉａꎬ２０２０(１４２):１０４４７１.[７]徐汝明ꎬ邓克敏ꎬ陆阳.中药墨旱莲扶正固本和保肝作用的研究[Ｊ].上海交通大学学报(医学版)ꎬ２００９ꎬ２９(１０):１２００－１２０４. [８]ＳＡＸＥＮＡＡＫꎬＳＩＮＧＨＢꎬＡＮＡＮＤＫＫ.ＨｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｏｎｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒｌｅｖｅｌｓｉｎｒａｔｓ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ１９９３ꎬ４０(３):１５５－１６１.[９]ＬＵＯＱꎬＤＩＮＧＪꎬＺＨＵＬꎬｅｔａｌ.ＨｅｐａｔｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｏｆＷｅｄｅｌｏ￣ｌａｃｔｏｎｅａｇａｉｎｓｔＣｏｎｃａｎａｖａｌｉｎＡ－ＩｎｄｕｃｅｄＬｉｖｅｒＩｎｊｕｒｙｉｎＭｉｃｅ[Ｊ].ＡｍＪＣｈｉｎＭｅｄꎬ２０１８ꎬ４６(４):８１９－８３３.[１０]ＨＥＬＭＹＡＳꎬＳＨＥＲＩＦＮＭꎬＧＨＡＮＥＭＨＺꎬｅｔａｌ.Ｔａｒｇｅｔｅｄｍｅｔａｂｏ￣ｌｏｍｉｃｓｒｅｖｅａｌｓｔｈｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｉｍｐａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａｏｎｄｉｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｉｎｒａｔｓ[Ｊ].ＪＡｐｐｌｉｅｄＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅꎬ２０１９ꎬ９(Ｓ１):７７－９０.[１１]ＰＯＲＲＡＳＤꎬＮＩＳＴＡＬＥꎬＭＡＲＴÍＮＥＺ－ＦＬÓＲＥＺＳꎬｅｔａｌ.Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｆｅｃｔｏｆｑｕｅｒｃｅｔｉｎｏｎｈｉｇｈ－ｆａｔｄｉｅｔ－ｉｎｄｕｃｅｄｎｏｎ－ａｌｃｏｈｏｌｉｃｆａｔｔｙｌｉｖｅｒｄｉｓｅａｓｅｉｎｍｉｃｅｉｓｍｅｄｉａｔｅｄｂｙｍｏｄｕｌａｔｉｎｇｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｍｉｃｒｏｂｉｏｔａｉｍｂａｌａｎｃｅａｎｄｒｅｌａｔｅｄｇｕｔ－ｌｉｖｅｒａｘｉｓａｃｔｉｖａｔｉｏｎ[Ｊ].ＦｒｅｅＲａｄｉｃａｌＢｉｏＭｅｄꎬ２０１７(１０２):１８８－２０２.[１２]ＺＨＡＯＹꎬＰＥＮＧＬꎬＹＡＮＧＬꎬｅｔａｌ.ＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅＲｅｇｕｌａｔｅｓＬｉｐｉｄＭｅｔａｂｏｌｉｓｍａｎｄＩｍｐｒｏｖｅｓＨｅｐａｔｉｃＳｔｅａｔｏｓｉｓＰａｒｔｌｙｂｙＡＭＰＫＡｃｔｉ￣ｖａｔｉｏｎａｎｄＵｐ－ＲｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＰＰＡＲα/ＬＰＬａｎｄＬＤＬＲ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１５ꎬ１０(７):ｅ１３２７２０.[１３]ＭＡＮＶＡＲＤꎬＭＩＳＨＲＡＭꎬＫＵＭＡＲＳꎬｅｔａｌ.Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎａｎｄｅｖａｌ￣ｕａｔｉｏｎｏｆａｎｔｉＨｅｐａｔｉｔｉｓＣｖｉｒｕｓｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｓｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１２ꎬ１４４(３):５４５－５５４.[１４]ＣＨＵＮＧＩꎬＲＡＨＵＭＡＮＡＡꎬＭＡＲＩＭＵＴＨＵＳꎬｅｔａｌ.ＡｎＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｔｈｅＣｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙａｎｄＣａｓｐａｓｅ－ＭｅｄｉａｔｅｄＡｐｏｐｔｏｔｉｃＥｆｆｅｃｔｏｆＧｒｅｅｎＳｙｎ￣ｔｈｅｓｉｚｅｄＺｉｎｃＯｘｉｄｅＮａｎｏｐａｒｔｉｃｌｅｓＵｓｉｎｇＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａｏｎＨｕｍａｎＬｉｖｅｒＣａｒｃｉｎｏｍａＣｅｌｌｓ[Ｊ].Ｎａｎｏｍａｔｅｒｉａｌｓ(ＢａｓｅｌꎬＳｗｉｔｚｅｒｌａｎｄ)ꎬ２０１５ꎬ５(３):１３１７－１３３０.[１５]ＧＵＰＴＡＡꎬＫＵＭＡＲＡꎬＫＵＭＡＲＤꎬｅｔａｌ.ＥｔｈｙｌａｃｅｔａｔｅｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ:ａｐｏｔｅｎｔｉａｌｐｈｙｔｏｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｔａｒｇｅｔｉｎｇａｄｉｐｏｃｙｔｅｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ[Ｊ].ＢｉｏｍｅｄＰｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒꎬ２０１７(９６):５７２－５８３. [１６]ＫＩＭＤꎬＬＥＥＳꎬＣＨＯＩＪꎬｅｔａｌ.ＴｈｅｂｕｔａｎｏｌｆｒａｃｔｉｏｎｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓ￣ｔｒａｔａ(Ｌｉｎｎ)ｅｆｆｅｃｔｉｖｅｌｙｒｅｄｕｃｅｓｓｅｒｕｍｌｉｐｉｄｌｅｖｅｌｓａｎｄｉｍｐｒｏｖｅｓａｎ￣ｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎＣＤｒａｔｓ[Ｊ].ＮｕｔｒＲｅｓꎬ２００８ꎬ２８(８):５５０－５５４.[１７]ＹＡＤＡＶＮＫꎬＡＲＹＡＲＫꎬＤＥＶＫꎬｅｔａｌ.ＡｌｃｏｈｏｌｉｃＥｘｔｒａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａＳｈｏｗｓＩｎＶｉｔｒｏＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｎｄＡｎｔｉｃａｎｃｅｒＡｃｔｉｖｉｔｙｗｉｔｈｏｕｔＥｘｈｉｂｉｔｉｎｇＴｏｘｉｃｏｌｏｇｉｃａｌＥｆｆｅｃｔｓ[Ｊ].ＯｘｉｄＭｅｄＣｅｌｌＬｏｎｇｅｖꎬ２０１７(２０１７):９０９４６４１.[１８]ＬＥＥＪꎬＡＨＮＪꎬＣＨＯＹꎬｅｔａｌ.α－ＴｅｒｔｈｉｅｎｙｌｍｅｔｈａｎｏｌꎬｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａꎬｉｎｄｕｃｅｓａｐｏｐｔｏｓｉｓｂｙｇｅｎｅｒａｔｉｎｇｒｅａｃｔｉｖｅｏｘｙｇｅｎｓｐｅｃｉｅｓｖｉａＮＡＤＰＨｏｘｉｄａｓｅｉｎｈｕｍａｎｅｎｄｏｍｅｔｒｉａｌｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１５(１６９):４２６－４３４.[１９]ＳＡＲＶＥＳＷＡＲＡＮＳꎬＧＡＵＴＡＭＳＣꎬＧＨＯＳＨＪ.Ｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅꎬａｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔ－ｄｅｒｉｖｅｄｃｏｕｍｅｓｔａｎꎬｉｎｄｕｃｅｓｃａｓｐａｓｅ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｐｏｐｔｏｓｉｓｉｎｐｒｏｓｔａｔｅｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｖｉａｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｉｏｎｏｆＰＫＣｅｐｓｉｌｏｎｗｉｔｈｏｕｔｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇＡｋｔ[Ｊ].ＩｎｔＪＯｎｃｏｌꎬ２０１２ꎬ４１(６):２１９１－２１９９. [２０]ＮＥＨＹＢＯＶＡＴꎬＳＭＡＲＤＡＪꎬＤＡＮＩＥＬＬꎬｅｔａｌ.Ｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎｄｕｃｅｓｇｒｏｗｔｈｏｆｂｒｅａｓｔｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｓｂｙｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｏｆｅｓｔｒｏｇｅｎｒｅ￣ｃｅｐｔｏｒｓｉｇｎａｌｌｉｎｇ[Ｊ].ＪＳｔｅｒｏｉｄＢｉｏｃｈｅｍＭｏｌＢｉｏｌꎬ２０１５(１５２):７６－８３.[２１]ＡＲＵＮＡＣＨＡＬＡＭＧꎬＳＵＢＲＡＭＡＮＩＡＮＮꎬＰＡＺＨＡＮＩＧＰꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉ－ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｍｅｔｈａｎｏｌｉｃｅｘｔｒａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.(Ａｓｔｅａｒａｃｅａｅ)[Ｊ].ＡｆｒｉｃａｎＪＰｈａｒｍａｃｙＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙꎬ２００９ꎬ３(３):９７－１００.[２２]ＤＥＦＲＥＩＴＡＳＭＯＲＥＬＬＪꎬＤＥＡＺＥＶＥＤＯＢＣꎬＣＡＲＭＯＮａＦꎬｅｔａｌ.ＡｓｔａｎｄａｒｄｉｚｅｄｍｅｔｈａｎｏｌｅｘｔｒａｃｔｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ(Ｌ.)Ｌ.(Ａｓ￣ｔｅｒａｃｅａｅ)ｒｅｄｕｃｅｓｂｒｏｎｃｈｉａｌｈｙｐｅｒｒｅｓｐｏｎｓｉｖｅｎｅｓｓａｎｄｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＴｈ２ｃｙｔｏｋｉｎｅｓｉｎａｍｕｒｉｎｅｍｏｄｅｌｏｆａｓｔｈｍａ[Ｊ].ＪＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１７(１９８):２２６－２３４.[２３]ＲＹＵＳꎬＳＨＩＮＪＳꎬＪＵＮＧＪＹꎬｅｔａｌ.ＥｃｈｉｎｏｃｙｓｔｉｃａｃｉｄｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｉｎｄｕｃｅｄｉＮＯＳꎬＴＮＦ－ａｌｐｈａꎬａｎｄＩＬ－６ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｖｉａＮＦ－ｋａｐｐａＢｉｎａｃｔｉｖａｔｉｏｎｉｎＲＡＷ２６４.７ｍａｃｒｏｐｈａｇｅｓ[Ｊ].ＰｌａｎｔａＭｅｄꎬ２０１３ꎬ７９(１２):１０３１－１０３７. [２４]ＫＯＢＯＲＩＭꎬＹＡＮＧＺꎬＧＯＮＧＤꎬｅｔａｌ.ＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓＬＰＳ－ｉｎｄｕｃｅｄｃａｓｐａｓｅ－１１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｂｙｄｉｒｅｃｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｔｈｅＩＫＫｃｏｍｐｌｅｘ[Ｊ].ＣｅｌｌＤｅａｔｈＤｉｆｆｅｒꎬ２００４ꎬ１１(１):１２３－１３０.[２５]林朝朋ꎬ芮汉明ꎬ许晓春.墨旱莲黄酮类提取物抗自由基作用及体内抗氧化功能的研究[Ｊ].军事医学科学院院刊ꎬ２００５ꎬ２９(４):３４４－３４５.[２６]ＳＩＮＧＨＬꎬＡＮＴＩＬＲꎬＫＵＭＡＲＤꎬｅｔａｌ.ＰｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌａｎａｌｙｓｉｓａｎｄＩｎ－ｖｉｔｒｏａｓｓａｙｓｆｏｒａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｎｄａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＢｈｒｉｎｇｒａｊｈｅｒｂＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａ(Ｌ.)[Ｊ].ＪＰｈａｒｍＰｈｙｔｏｃｈｅｍꎬ２０１９ꎬ８(３):４５２７－４５３３.[２７]ＵＮＮＩＫＲＩＳＨＮＡＮＫＰꎬＦＡＴＨＩＭＡＡꎬＨＡＳＨＩＭＫＭꎬｅｔａｌ.Ａｎｔｉｏｘｉ￣ｄａｎｔＳｔｕｄｉｅｓａｎｄＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＪＰｌａｎｔＳｃｉꎬ２００７ꎬ２(４):４５９－４６４.[２８]ＲＡＵＴＳꎬＲＡＵＴＳꎬＧＨＡＤＡＩＡ.Ｐｈｙｔｏｃｅｕｔｉｃａｌｅｖａｌｕａｔｉｏｎａｎｄａｎｔｉ￣ｍｉｃｒｏｂｉａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａａｎｄＴｙｌｏｐｈｏｒａｉｎｄｉｃａ[Ｊ].ＩｎｔＪＭｉｃｒｏｂｉｏｌＲｅｓꎬ２０１２ꎬ４(５):２２７－２３０.[２９]ＮＡＧＡＢＨＵＳＨＡＮꎬＲＡＶＥＥＳＨＡＫＡꎬＳＨＲＩＳＨＡＤＬ.Ａｎｔｉｄｅｒｍａｔｏ￣ｐｈｙｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａＬ.ａｇａｉｎｓｔｈｕｍａｎｉｎｆｅｃｔｉｖｅＴｒｉｃｈｏ￣ｐｈｙｔｏｎａｎｄＭｉｃｒｏｓｐｏｒｕｍｓｐｐ[Ｊ].ＩｎｔＪＣｈｅｍＡＮａｌｙｔＳｃｉꎬ２０１３ꎬ４(２):１３６－１３８.[３０]ＲＡＹＡꎬＢＨＡＲＡＬＩＰꎬＫＯＮＷＡＲＢＫ.ＭｏｄｅｏｆＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥｃｌａｌｂａｓａｐｏｎｉｎＩｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＡｐｐｌＢｉｏ￣ｃｈｅｍＢｉｏｔｅｃｈꎬ２０１３ꎬ１７１(８):２００３－２０１９.[３１]ＧＵＲＲＡＰＵＳꎬＭＡＭＩＤＡＬＡＥ.ＩｎｖｉｔｒｏＡｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＡｌ￣ｋａｌｏｉｄｓＩｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍＬｅａｖｅｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａＡｇａｉｎｓｔＨｕｍａｎＰａｔｈｏ￣ｇｅｎｉｃＢａｃｔｅｒｉａ[Ｊ].ＰｈａｒｍａｃｏｇｎｏｓｙＪꎬ２０１７ꎬ９(４):５７３－５７７. [３２]ＤＥＮＧＹＴꎬＫＡＮＧＷＢꎬＺＨＡＯＪＮꎬｅｔａｌ.ＯｓｔｅｏｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｏｆＥｃｈｉｎｏｃｙｓｔｉｃＡｃｉｄꎬａＴｒｉｔｅｒｐｏｎｅＣｏｍｐｏｎｅｎｔｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａꎬｉｎＯｖａｒｉｅｃｔｏｍｙ－ＩｎｄｕｃｅｄＯｓｔｅｏｐｏｒｏｔｉｃＲａｔｓ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１５ꎬ１０(８):ｅ１３６５７２.[３３]ＣＨＲＩＳＴＹＢＡＰＩＴＡＤꎬＤＩＶＹＡＧＮＡＮＥＳＷＡＲＩＭꎬＭＩＣＨＡＥＬＲＤ.ＯｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｌｅａｆａｑｕｅｏｕｓｅｘｔｒａｃｔｅｎｈａｎｃｅｓｔｈｅｎｏｎ－ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｍｍｕｎｅｒｅｓｐｏｎｓｅｓａｎｄｄｉｓｅａｓｅｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＯｒｅｏ￣ｃｈｒｏｍｉｓｍｏｓｓａｍｂｉｃｕｓ[Ｊ].ＦｉｓｈＳｈｅｌｌｆｉｓｈＩｍｍｕｎꎬ２００７ꎬ２３(４):８４０－８５２.[３４]ＫＵＭＡＲＤꎬＧＡＯＮＫＡＲＲＨꎬＧＨＯＳＨＲꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏ－ａｓｓａｙｇｕｉｄｅｄｉ￣ｓｏｌａｔｉｏｎｏｆａｌｐｈａ－ｇｌｕｃｏｓｉｄａｓｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ.[Ｊ].ＮａｔＰｒｏｄＣｏｍｍｕｎꎬ２０１２ꎬ７(８):９８９－９９０.[３５]ＤＡＳＳＫꎬＭＡＲＩＡＰＰＡＮＰ.ＬａｒｖｉｃｉｄａｌＡｃｔｉｖｉｔｙｏｆＣｏｌｏｃａｓｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａꎬＥｃｌｉｐｔａｐｒｏｓｔｒａｔａａｎｄＷｒｉｇｈｔｉａｔｉｎｃｔｏｒｉａＬｅａｆＥｘｔｒａｃｔＡｇａｉｎｓｔＣｕｌｅｘｑｕｉｎｑｕｅｆａｓｃｉａｔｕｓ[Ｊ].ＰｒｏｃｅｅｄＮａｔＡｃａｄＳｃｉＩｎｄｉａꎬ２０１６ꎬ８６(１):１３９－１４３.[３６]庄晓燕ꎬ杨菁ꎬ李华侃ꎬ等.热盛胃出血小鼠模型的制作及墨旱莲对其止血作用机制的研究[Ｊ].数理医药学杂志ꎬ２０１０ꎬ２３(１):３５－３７.[３７]ＤＩＯＧＯＬＣꎬＦＥＲＮＡＮＤＥＳＲＳꎬＭＡＲＣＵＳＳＩＳꎬｅｔａｌ.ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＳｎａｋｅＶｅｎｏｍｓａｎｄＰｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅｓＡ２ｂｙＥｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍＮａｔｉｖｅａｎｄＧｅｎｅｔｉｃａｌｌｙＭｏｄｉｆｉｅｄＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ:ＩｓｏｌａｔｉｏｎｏｆＡｃｔｉｖｅＣｏｕｍｅｓｔａｎｓ[Ｊ].ＢａｓｉｃＣｌｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌꎬ２００９ꎬ１０４(４):２９３－２９９.[３８]ＳＨＥＮＰꎬＹＡＮＧＸꎬＪＩＡＮＧＪꎬｅｔａｌ.ＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｉｎｈｉｂｉｔｓｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ－ｅｎｈａｎｃｅｄｃｅｌｌｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｏｆｈｕｍａｎｒｅｎａｌｍｅｓａｎｇｉａｌｃｅｌｌｓｖｉａＮＦ－κＢｓｉｇｎａｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙ[Ｊ].ＡｍＪＴｒａｎｓｌＲｅｓꎬ２０１７ꎬ９(５):２１３２.[３９]ＢＥＧＵＭＳꎬＬＥＥＭＲꎬＧＵＬＪꎬｅｔａｌ.ＥｘｏｇｅｎｏｕｓｓｔｉｍｕｌａｔｉｏｎｗｉｔｈＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｐｒｏｍｏｔｅｓｈａｉｒｍａｔｒｉｘｋｅｒａｔｉｎｏｃｙｔｅｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎａｎｄｄｏｗｎｒｅｇｕｌａｔｅｓＴＧＦ－ｂｅｔａ１ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｉｎｎｕｄｅｍｉｃｅ[Ｊ].ＩｎｔＪＭｏｌＭｅｄꎬ２０１５ꎬ３５(２):４９６－５０２.[４０]ＲＯＹＲＫꎬＴＨＡＫＵＲＭꎬＤＩＸＩＴＶＫ.ＨａｉｒｇｒｏｗｔｈｐｒｏｍｏｔｉｎｇａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｉｎｍａｌｅａｌｂｉｎｏｒａｔｓ[Ｊ].ＡｒｃｈＤｅｒｍａｔｏｌＲｅｓꎬ２００８ꎬ３００(７):３５７－３６４.[４１]ＬＩＭꎬＳＩＤꎬＦＵＺꎬｅｔａｌ.Ｅｎｈａｎｃｅｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｔｈｅｉｎｖｉｖｏｍｅ￣ｔａｂｏｌｉｔｅｓｏｆＥｃｌｉｐｔａｅＨｅｒｂａｉｎｒａｔｐｌａｓｍａｂｙｉｎｔｅｇｒａｔｉｎｇｕｎｔａｒｇｅｔｅｄｄａｔａ－ｄｅｐｅｎｄｅｎｔＭＳ２ａｎｄｐｒｅｄｉｃｔｉｖｅｍｕｌｔｉｐｌｅｒｅａｃｔｉｏｎｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ－ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎｄｅｐｅｎｄｅｎｔａｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ－ｅｎｈａｎｃｅｄｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎｓｃａｎ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢꎬ２０１９(１１０９):９９－１１０.[４２]邓斌ꎬ韦炳华ꎬ黄盛超ꎬ等.ＨＰＬＣ法同时测定大鼠口服墨旱莲提取物后血浆中四种黄酮类化合物[Ｊ].中药材ꎬ２０１４ꎬ３７(９):１６３６－１６４０.[４３]ＣＨＥＲＵＶＵＨＳꎬＹＡＤＡＶＮＫꎬＶＡＬＩＣＨＥＲＬＡＧＲꎬｅｔａｌ.ＬＣ－ＭＳ/ＭＳｍｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｌｕｔｅｏｌｉｎꎬｗｅｄｅｌｏ￣ｌａｃｔｏｎｅａｎｄａｐｉｇｅｎｉｎｉｎｍｉｃｅｐｌａｓｍａｕｓｉｎｇｈａｎｓｅｎｓｏｌｕｂｉｌｉｔｙｐａｒａｍ￣ｅｔｅｒｓｆｏｒｌｉｑｕｉｄ－ｌｉｑｕｉｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ:ＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｔｏｐｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍｆｒａｃｔｉｏｎ[Ｊ].ＪＣｈｒｏｍａｔｏｇｒＢꎬ２０１８(１０８１/１０８２):７６－８６.[４４]ＣＨＥＮＴꎬＬＩＬＰꎬＬＵＸＹꎬｅｔａｌ.ＡｂｓｏｒｐｔｉｏｎａｎｄｅｘｃｒｅｔｉｏｎｏｆｌｕｔｅｏｌｉｎａｎｄａｐｉｇｅｎｉｎｉｎｒａｔｓａｆｔｅｒｏｒａｌａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆＣｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍｍｏｒｉｆｏｌｉｕｍｅｘｔｒａｃｔ[Ｊ].ＪＡｇｒｉｃＦｏｏｄＣｈｅｍꎬ２００７ꎬ５５(２):２７３－２７７. [４５]ＣＨＥＮＱꎬＷＵＸꎬＧＡＯＸꎬｅｔａｌ.ＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｎｄＶａｌｉｄａｔｉｏｎｏｆａｎＵｌｔｒａ－ＰｅｒｆｏｒｍａｎｃｅＬｉｑｕｉｄＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙＭｅｔｈｏｄｆｏｒｔｈｅＤｅｔｅｒｍｉ￣ｎａｔｉｏｎｏｆＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎＲａｔＰｌａｓｍａａｎｄｉｔｓＡｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｉｎａＰｈａｒｍａｃｏｋｉｎｅｔｉｃＳｔｕｄｙ[Ｊ].Ｍｏｌｅｃｕｌｅｓꎬ２０１９ꎬ２４(４):７６２.[４６]张朝凤ꎬ孙志华ꎬ张勉ꎬ等.墨旱莲的质量标准研究:２０１０全国知名中医院院长暨道家文化与中医药养生论坛论文集[Ｃ].２０１０:４４－４７.[４７]黄诺嘉ꎬ肖树雄.墨旱莲与其混淆品元宝草的鉴别[Ｊ].中药材ꎬ１９９７(９):４５６－４５７.[４８]李铮ꎬ傅欣彤ꎬ张小茜.养血安神丸质量标准研究[Ｊ].中国中医药信息杂志ꎬ２００９ꎬ１６(７):４８－４９.(下转第６８３页)ｈｅｐａｔｏｃｙｔｅｓ:ｃｏｒｅ－ｓｈｅｌｌｓｔｒｕｃｔｕｒｅｄｃｏ－ｃｕｌｔｕｒｅｓｗｉｔｈｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｓｆｏｒｅｎｈａｎｃｅｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙ[Ｊ].ＳｃｉＲｅｐꎬ２０２１ꎬ１１(１):１－１８.[５８]ＫＡＮＧＫꎬＫＩＭＹꎬＪＥＯＮＨꎬｅｔａｌ.Ｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｂｉｏｐｒｉｎｔｉｎｇｏｆｈｅｐａｔｉｃｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓｗｉｔｈｄｉｒｅｃｔｌｙｃｏｎｖｅｒｔｅｄｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅｃｅｌｌｓ[Ｊ].ＴｉｓｓｕｅＥｎｇｉＰａｒｔＡꎬ２０１８ꎬ２４(７/８):５７６－５８３.[５９]ＷＡＮＧＪＺꎬＸＩＯＮＧＮＹꎬＺＨＡＯＬＺꎬｅｔａｌ.Ｒｅｖｉｅｗｆａｎｔａｓｔｉｃｍｅｄｉｃａｌｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓｏｆ３Ｄ－ｐｒｉｎｔｉｎｇｉｎｌｉｖｅｒｓｕｒｇｅｒｉｅｓꎬｌｉｖｅｒｒｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎꎬｌｉｖｅｒｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎａｎｄｄｒｕｇｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｔｅｓｔｉｎｇ:ａｒｅｖｉｅｗ[Ｊ].ＩｎｔＪＳｕｒｇꎬ２０１８(５６):１－６.[６０]ＦＡＵＬＫＮＥＲ－ＪＯＮＥＳＡꎬＦＹＦＥＣꎬＣＯＲＮＥＬＩＳＳＥＮＤＪꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏ￣ｐｒｉｎｔｉｎｇｏｆｈｕｍａｎｐｌｕｒｉｐｏｔｅｎｔｓｔｅｍｃｅｌｌｓａｎｄｔｈｅｉｒｄｉｒｅｃｔｅｄｄｉｆｆｅｒｅｎ￣ｔｉａｔｉｏｎｉｎｔｏｈｅｐａｔｏｃｙｔｅ－ｌｉｋｅｃｅｌｌｓｆｏｒｔｈｅｇｅｎｅｒａｔｉｏｎｏｆｍｉｎｉ－ｌｉｖｅｒｓｉｎ３Ｄ[Ｊ].Ｂｉｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎꎬ２０１５ꎬ７(４):０４４１０２.[６１]ＮＧＵＹＥＮＤＧꎬＦＵＮＫＪꎬＲＯＢＢＩＮＳＪＢꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏｐｒｉｎｔｅｄ３ＤＰｒｉｍａｒｙＬｉｖｅｒＴｉｓｓｕｅｓＡｌｌｏｗＡｓｓｅｓｓｍｅｎｔｏｆＯｒｇａｎ－ＬｅｖｅｌＲｅｓｐｏｎｓｅｔｏＣｌｉｎｉｃａｌＤｒｕｇＩｎｄｕｃｅｄＴｏｘｉｃｉｔｙＩｎＶｉｔｒｏ[Ｊ].ＰＬｏＳＯｎｅꎬ２０１６ꎬ１１(７):ｅ０１５８６７４.[６２]ＭＡＺＺＯＣＣＨＩＡꎬＤＥＶＡＲＡＳＥＴＴＹＭꎬＨＵＮＴＷＯＲＫＲꎬｅｔａｌ.Ｏｐｔｉ￣ｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｃｏｌｌａｇｅｎｔｙｐｅＩ－ｈｙａｌｕｒｏｎａｎｈｙｂｒｉｄｂｉｏｉｎｋｆｏｒ３Ｄｂｉｏ￣ｐｒｉｎｔｅｄｌｉｖｅｒｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔｓ[Ｊ].Ｂｉｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎꎬ２０１８ꎬ１１(１):０１５００３.[６３]ＭＡＳＳＡＳꎬＳＡＫＲＭＡꎬＳＥＯＪꎬｅｔａｌ.Ｂｉｏｐｒｉｎｔｅｄ３Ｄｖａｓｃｕｌａｒｉｚｅｄｔｉｓ￣ｓｕｅｍｏｄｅｌｆｏｒｄｒｕｇｔｏｘｉｃｉｔｙａｎａｌｙｓｉｓ[Ｊ].Ｂｉｏｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓꎬ２０１７ꎬ１１(４):０４４１０９.[６４]ＬＥＥＫꎬＬＥＥＪꎬＬＥＥＳ.３Ｄｌｉｖｅｒｍｏｄｅｌｓｏｎａｍｉｃｒｏｐｌａｔｆｏｒｍ:ｗｅｌｌ－ｄｅｆｉｎｅｄｃｕｌｔｕｒｅꎬｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇｏｆｌｉｖｅｒｔｉｓｓｕｅａｎｄｌｉｖｅｒ－ｏｎ－ａ－ｃｈｉｐ[Ｊ].ＬａｂＣｈｉｐꎬ２０１５ꎬ１５(１９):３８２２－３８３７.[６５]ＤＥＮＧＪꎬＺＨＡＮＧＸꎬＣＨＥＮＺꎬｅｔａｌ.Ａｃｅｌｌｌｉｎｅｓｄｅｒｉｖｅｄｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｌｉｖｅｒｍｏｄｅｌｆｏｒｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆｈｅｐａｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙｉｎｄｕｃｅｄｂｙｄｒｕｇ－ｄｒｕｇｉｎ￣ｔｅｒａｃｔｉｏｎ[Ｊ].Ｂｉｏｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓꎬ２０１９ꎬ１３(２):０２４１０１.[６６]ＫＡＬＣＨＭＡＮＪꎬＦＵＪＩＯＫＡＳꎬＣＨＵＮＧＳꎬｅｔａｌ.Ａｔｈｒｅｅ－ｄｉｍｅｎｓｉｏｎａｌｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｔｕｍｏｒｃｅｌｌｍｉｇｒａｔｉｏｎａｓｓａｙｔｏｓｃｒｅｅｎｔｈｅｅｆｆｅｃｔｏｆａｎｔｉ－ｍｉｇｒａｔｏｒｙｄｒｕｇｓａｎｄｉｎｔｅｒｓｔｉｔｉａｌｆｌｏｗ[Ｊ].ＭｉｃｒｏｆｌｕｉｄＮａｎｏｆｌｕｉｄｉｃｓꎬ２０１３ꎬ１４(６):９６９－９８１.[６７]ＢＨＩＳＥＮＳꎬＭＡＮＯＨＡＲＡＮＶꎬＭＡＳＳＡＳꎬｅｔａｌ.Ａｌｉｖｅｒ－ｏｎ－ａ－ｃｈｉｐｐｌａｔｆｏｒｍｗｉｔｈｂｉｏｐｒｉｎｔｅｄｈｅｐａｔｉｃｓｐｈｅｒｏｉｄｓ[Ｊ].Ｂｉｏｆａｂｒｉｃａｔｉｏｎꎬ２０１６ꎬ８(１):０１４１０１－０１４１０１.[６８]ＭＥＮＯＮＮＶꎬＬＩＭＳＢꎬＬＩＭＣＴ.Ｍｉｃｒｏｆｌｕｉｄｉｃｓｆｏｒｐｅｒｓｏｎａｌｉｚｅｄｄｒｕｇｓｃｒｅｅｎｉｎｇｏｆｃａｎｃｅｒ[Ｊ].ＣｕｒｒＯｐｉｎＰｈａｒｍａｃｏｌꎬ２０１９(４８):１５５－１６１.(上接第６７７页)[４９]ＳＡＶＩＴＡＫꎬＰＲＡＫＡＳＨＣＨＡＮＤＲＡＫ.ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆＥｘｔｒａｃｔｉｏｎＣｏｎｄｉｔｉｏｎｓａｎｄＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆａＳｅｎｓｉｔｉｖｅＨＰＴＬＣＭｅｔｈｏｄｆｏｒＥｓ￣ｔｉｍａｔｉｏｎｏｆＷｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎｄｉｆｆｅｒｅｎｔｅｘｔｒａｃｔｓｏｆＥｃｌｉｐｔａａｌｂａ[Ｊ].ＩｎｔＪＰｈａｒｍＳｃｉＤｒｕｇＲｅｓꎬ２０１１ꎬ３(１):５６－６１.[５０]ＷＡＮＩＮＳꎬＤＥＳＨＭＵＫＨＴＡꎬＰＡＴＩＬＶＲ.ＡｒａｐｉｄｄｅｎｓｉｔｏｍｅｔｒｉｃｍｅｔｈｏｄｆｏｒｑｕａｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｉｎｈｅｒｂａｌｆｏｒｍｕｌａｔｉｏｎｓｕｓｉｎｇＨＰＴＬＣ[Ｊ].ＪＣｈｅｍＭｅｔｒｏｌꎬ２０１０ꎬ４(１):２８－３３.[５１]夏天一ꎬ张凤ꎬ韩强ꎬ等.ＨＰＬＣ－ＥＬＳＤ法同时测定墨旱莲中蟛蜞菊内酯㊁旱莲苷Ｉ和旱莲苷ＶＩＩ的含量[Ｊ].沈阳药科大学学报ꎬ２０１７ꎬ３４(１):５７－６１.[５２]周燕园ꎬ吴怀恩ꎬ梁臣艳ꎬ等.ＨＰＬＣ测定墨旱莲配方颗粒中的原儿茶酸和原儿茶醛[Ｊ].华西药学杂志ꎬ２０１３ꎬ２８(５):５１４－５１６.[５３]陈腾飞ꎬ萧伟ꎬ尚强ꎬ等.ＨＰＬＣ法测定不同产地墨旱莲药材中木犀草素含量[Ｊ].南京中医药大学学报ꎬ２０１１ꎬ２７(２):１５８－１６０.[５４]周燕园.ＨＰＬＣ法测定墨旱莲配方颗粒中绿原酸和咖啡酸[Ｊ].中成药ꎬ２０１２ꎬ３４(２):３７４－３７７.[５５]韩强ꎬ习峰敏ꎬ张凤ꎬ等.ＨＰＬＣ法测定墨旱莲中两个噻吩类化合物的含量[Ｊ].沈阳药科大学学报ꎬ２０１５ꎬ３２(４):２８５－２８８. [５６]邓斌ꎬ韦炳华ꎬ黄盛超ꎬ等.ＨＰＬＣ法同时测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量[Ｊ].中国药房ꎬ２０１４ꎬ２５(３９):３６８５－３６８７. [５７]孔燕凌.ＨＰＬＣ同时测定墨旱莲正丁醇有效部位含量分析[Ｊ].实验与检验医学ꎬ２０１７ꎬ３５(４):４７５－４７８.[５８]房信胜ꎬ王建华ꎬ蕾魏ꎬ等.不同提取条件下墨旱莲的ＨＰＬＣ－ＰＡＤ图谱分析[Ｊ].天然产物研究与开发ꎬ２０１０ꎬ２２(Ｂ０８):５５－５９.[５９]杨海英ꎬ王雪梅ꎬ杜刚ꎬ等.高效液相色谱法测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量[Ｊ].时珍国医国药ꎬ２００８ꎬ１９(１２):２９９４－２９９５.[６０]赵晶ꎬ夏明辉ꎬ李莉ꎬ等.ＵＰＬＣ－ＰＤＡ测定不同产地墨旱莲中的４种皂苷[Ｊ].中国实验方剂学杂志ꎬ２０１６ꎬ２２(３):６３－６６. [６１]杨海英ꎬ曾程ꎬ杜刚.ＵＰＬＣ法测定旱莲草中木犀草素和芹菜素的含量[Ｊ].中药材ꎬ２０１０ꎬ３３(８):１２７５－１２７６.[６２]侯雪峰ꎬ孙帅ꎬ汪刚ꎬ等.ＵＰＬＣ同时测定墨旱莲药材中８种成分的含量[Ｊ].中国中药杂志ꎬ２０１６ꎬ４１(２１):３９８２－３９８７. [６３]ＰＡＴＩＬＡＡꎬＳＡＣＨＩＮＢＳꎬＳＨＩＮＤＥＤＢꎬｅｔａｌ.ＯｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆｓａｍｐｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｖａｒｉａｂｌｅｓｆｏｒｗｅｄｅｌｏｌａｃｔｏｎｅｆｒｏｍＥｃｌｉｐｔａａｌｂａｕ￣ｓｉｎｇＢｏｘ－ＢｅｈｎｋｅｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｅｓｉｇｎｆｏｌｌｏｗｅｄｂｙＨＰＬＣｉｄｅｎｔｉｆｉ￣ｃａｔｉｏｎ[Ｊ].ＡｎｎａｌｅｓＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｑｕｅｓＦｒａｎçａｉｓｅｓꎬ２０１３ꎬ７１(４):２４９－２５９.[６４]吴红霞ꎬ高晓霞ꎬ赵云丽ꎬ等.墨旱莲药材的高效液相指纹图谱及聚类分析[Ｊ].沈阳药科大学学报ꎬ２００６ꎬ２３(２):９７－１００. 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墨旱莲颗粒制造工艺的研究作者：解秀平来源：《科学与财富》2018年第32期摘要：本实验对墨旱莲颗粒的制备工艺进行研究并对其质量标准进行研究。

采用高校液相测定了墨旱莲颗粒的含量。

方法：采用安捷伦十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），0.2%甲酸-乙腈（94∶6），检测波长为327nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。

绿原酸在0.1～3.2mg·mL-1范围内呈良好的线性关系。

关键词：墨旱莲颗粒；工艺；研究墨旱莲别名金陵草（《千金月令》），猢孙头（《居家必用事类全集》），莲草（《滇南本草》），墨斗草（《医学正传》），莲子草（《唐本草》），旱莲草、旱莲子（《本草图经》），白旱莲（《履巉岩本草》），野水凤仙（《药材资料汇编》），水风仙草（《江苏植药志》），黑墨草（《广西药植图志》），白花蟛蜞菊（《岭南采药录》），墨记菜（《现代实用中药》），古城墨（《广西中药志》）等。

墨旱莲具有滋补肝肾，凉血止血的功效。

《生草药性备要》记载：“治跌打伤，理酒顶，化痰，杀螆，止痒，干水。

”墨旱莲用于牙齿松动、腰膝酸软、崩漏下血、须发早白、眩晕耳鸣、外伤出血等。

墨旱莲含有维生素A，鳢肠素，2-（丁二炔基）-5-（乙烯乙炔基）噻吩，2-（丁-二炔基）-5-（4-氯-3-羟丁炔-1-基）噻吩，乙酸（丁烯-3-炔-1-基）二联噻吩基甲醇酯等。

墨旱莲具有保肝、抗纤维化、抗炎镇痛、免疫调节、抗自由基抗氧化、抗肿瘤和酶激活等药理作用。

本实验对墨旱莲颗粒的制备工艺进行研究。

1 仪器与试药vertex高效液相色谱仪（上海禾工科学仪器有限公司）；YP1004万分之一电子分析天平（南京麒麟分析仪器有限公司）；Orion Star A 台式/便携式基础型pH测量仪（赛默飞世尔科技水质分析仪器）；US-30M超声波清洗器（中科仪（北京）仪器有限公司）；通微EasySep-1020高效液相色谱仪（上海通微分析技术有限公司）；SPECORD 250 PLUS紫外可见分光光度计（德国耶拿分析仪器股份公司）；RE-2000E型旋转蒸发器（西安禾普生物科技有限公司）。

墨兰组织培养研究进展XXX xx学院【摘要】墨兰在中国栽培历史可谓悠久。

它具有很高的观赏性,同时也有良好的药用价值。

为此，研究墨兰的组织培养及快速繁殖技术的发展进程，以期其在市场获得长足的发展。

【关键词】墨兰；组织培养；研究进展Research Progress on Tissue Culture of Cymbidium sinense[Abstract] Cymbidium sinense has a long history in China. It is ornamental and at the same time it’s of great medicinal value. Therefore, we had a research on the progress of tissue culture of cymbidium sinense and technique of rapid multiplication, in order to obtain a long-term develop-ment in the cymbidium market.[Keywords] Cymbidium sinense; Tissue culture; Research progress墨兰在我国由来已久，它属于中国传统的观赏性植物，常常被叫做“报岁兰”，多为文人墨客吟诗作画的题材，同时也具有良好的药用价值。

现花枝常常用作插花观赏，在台湾墨兰盆花更是成为亲朋好友间馈赠的佳礼，市场前景可说十分广阔。

然而此前墨兰一直采用传统的分枝繁殖法，生长速度比较慢，繁殖率低，并且在栽培过程中常常染上软腐病、霉菌病等，观赏性因此降低，因而大大限制了墨兰的产业化发展。

对此本文将浅谈墨兰组织培养条件的研究改进和快速繁殖技术的进程，希望提高墨兰的繁殖系数，增加种子萌发率，降低植株发病率，促进墨兰产业化进一步发展。

1.组织培养1.1外植体的选择和消毒处理1.1.1 外植体的选择图1 外植体类型所占比例Fig.1 The proportion of explants type据不完全资料统计发现，选用墨兰蒴果中的种子作为外植体所占的比例较高（见图１），约为５０％。

墨旱莲提取物抑菌活性初步研究欧阳蒲月;梁永枢;莫小路;陈功锡;沈龙强【摘要】Through the bacteriostatic test of extract from Eclipta prostrata, one of medical plants in the west of Hunan, the results are as follows. (1) The antibacterial substance only exists in the petiole and rhizome. (2) The minimal inhibitory concentration of the extract on Staphylococcus aureus, Escheichia coli, Bacillus subtilis, Micrococcus luteus are 0.6, 2.0, 0.8, 1.0g/mL respectively; the minimal bactericidal concentration all are 1.0g/mL;but it is ineffective on Aspergillus niger. (3) In order to get the extract that has the optimum antibacterial effect, the solvent should be alkaline 65%ethyl alcohol. The bacteriostatic test by different polar solvent shows that the antibacterial substance easily dissolved in non-polar solvent such as petroleum ether, ethyl ether. (4) The extract may be flavone substance.%对药用植物墨旱莲Eclipta prostrata提取物的抑菌活性物质进行研究。

15Journal of China Prescription Drug Vol.16 No.8·综述·墨旱莲为菊科植物體肠Eclipta prostrata L.的干燥地上部分，其作为常用中药收载于中国药典，据2015版中国药典记载，墨旱莲具有滋补肝肾、凉血止血的功效[1]。

本文主要从化学成分、药理作用、加工炮制和临床应用四个方面阐述近年来墨旱莲的研究成果，为对其进行进一步的开发研究提供参考。

1 化学成分1.1黄酮类主要有芹菜素（1）、木犀草素（2）、槲皮素（3）以及芹菜素-7-O-葡萄糖苷（4）、木犀草素-7-O-葡萄糖苷（5）（图1）、蒙花苷（6）等。

异黄酮类有：3-羟基鹰嘴豆素 A （7）、3'-O-甲基香豌豆酚（8）等。

旱莲的化学成分、药理作用、加工炮制及临床应用研究进展图1：5. 木犀草素-7-O-葡萄糖苷1.2 三萜及其苷类汤海峰等[2]从墨旱莲的甲醇提取液中分离出5种三萜皂苷，分别为eclalbasaponins Ⅱ（9）， I （10），Ⅲ（11）， 3-O-[b-D-吡喃葡糖（12）-b-D-吡喃葡糖]-16a-乙氧基-齐墩果酸-28-O-b-D-吡喃葡糖苷（12）和 3-O-[（2-O-硫酰基-b-D-吡喃葡糖）（12）-b-D-吡喃葡糖]-刺囊酸-28-O-b-D-吡喃葡糖苷（13）。

化合物12和13为新化合物，分别命名为eclalbasaponins Ⅺ和eclalbasaponins Ⅻ。

原红霞等[3]2011年从墨旱莲的乙醇提取液中分离出9种化合物，其中包含4种三萜皂苷，分别为3-酮-16α-羟基-12-烯-28-齐墩果酸（14）、刺囊酸（15）、3，16，21-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸（16）、旱莲苷A （17）。

除上述这些之外，还包括旱莲皂苷B （18）、旱莲皂苷C （19）、旱莲皂苷D （20）、熊果酸（21）（图2）等。

图2：21. 熊果酸1.3噻吩类化合物噻吩类化合物主要分为单噻吩、二联噻吩和三联噻吩3类噻吩类化合物。

(10)申请公布号 CN 102247420 A(43)申请公布日 2011.11.23C N 102247420 A*CN102247420A*(21)申请号 201110184589.1(22)申请日 2011.07.04A61K 36/28(2006.01)A61P 1/02(2006.01)A61P 1/14(2006.01)A61P 1/16(2006.01)A61P 3/06(2006.01)A61P 7/04(2006.01)A61P 29/00(2006.01)A61P 37/04(2006.01)A61P 39/00(2006.01)(71)申请人浙江大学地址310027 浙江省杭州市西湖区浙大路38号(72)发明人田景奎 马鲁豫 戚中杰 李锡敏郑雯 傅之容(74)专利代理机构杭州求是专利事务所有限公司 33200代理人张法高(54)发明名称一种墨旱莲提取物的制备方法及用途(57)摘要本发明公开了一种墨旱莲提取物的制备方法及用途。

它的步骤如下：1）选取鳢肠属植物墨旱莲，用体积百比浓度为5～95%的乙醇/水浸泡0.5小时后，乙醇/水是墨旱莲药材20倍重量的提取1h 和乙醇/水是墨旱莲药材16倍重量的提取0.5h ，合并提取液，提取液浓缩成0.25～1.0g生药/mL ，静置6h ，过滤，得到墨旱莲提取液；2）墨旱莲提取液采用预处理好的大孔树脂进行吸附，墨旱莲提取液与大孔树脂的重量比为1:1～1:5上样流速1～3BV/h ，树脂柱径高比1:4～1:7，吸附后先用水洗3～6BV ，洗脱流速为2～4BV/h ，水洗脱液弃去；再用体积百分比浓度为20～90%乙醇/水洗脱3～6BV ，流速为2～4BV/h ，收集乙醇/水洗脱液，浓缩，干燥，得到墨旱莲提取物。

本发明降低了纯化成本，容易实现工业化生产，并且对环境无污染。

(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 7 页 附图 1 页权 利 要 求 书CN 102247420 A1/1页1.一种墨旱莲提取物的制备方法，其特征在于它的步骤如下：1）选取鳢肠属植物墨旱莲药材，用体积百比浓度为5～95%的乙醇/水浸泡0.5小时后，乙醇/水是墨旱莲药材20倍重量的提取1h和乙醇/水是墨旱莲药材16倍重量的提取0.5h，合并提取液，提取液浓缩成0.25～1 g生药/mL，静置6h，过滤，得到墨旱莲提取液；2）墨旱莲提取液采用预处理好的大孔树脂进行吸附，墨旱莲提取液与大孔树脂的重量比为1:1～1:5上样流速1～3 BV/h，树脂柱径高比1:4～1:7，吸附后先用水洗3～6 BV，洗脱流速为2～4BV/h，水洗脱液弃去；再用体积百比浓度为20～90%乙醇/水洗脱3～6 BV，流速为2～4BV/h，收集乙醇/水洗脱液，浓缩，干燥，得到墨旱莲提取物。

墨旱莲中总黄酮的提取工艺研究进展吕雪【摘要】在查阅、收集国内墨旱莲中总黄酮提取工艺文献的基础上,综述近几年墨旱莲中总黄酮的提取工艺研究进展,介绍常规提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、表面活性剂辅助提取法的提取原理及试验结论,为进一步开展相关墨旱莲研究提供参考.【期刊名称】《农业科技与装备》【年(卷),期】2016(000)011【总页数】2页(P61-62)【关键词】总黄酮;提取工艺;墨旱莲;超声波【作者】吕雪【作者单位】本溪市化学工业学校,辽宁本溪 117004【正文语种】中文【中图分类】R932墨旱莲（Eclipta prostrasta L.）为菊科植物鳢肠（Eclipta prostrasta L.）的干燥地上部分，在食用及药用方面均有较广泛的应用，有“亦蔬亦药”的说法。

总黄酮是墨旱莲的有效成分之一，具有消除自由基、抗氧化等功效，是一种天然的食品抗氧化剂。

近年来，国内对墨旱莲中总黄酮的提取工艺进行了大量研究。

在查阅收集大量文献的基础上，综述近年来墨旱莲中总黄酮的提取工艺研究进展，旨在为未来的研究提供理论参考。

1.1 常规提取法用溶剂提取墨旱莲中总黄酮是较为常规的提取工艺，按提取介质分为水提法和醇提法，按提取方式分为煎煮法和回流法。

水提法虽然成本低、操作简单，但提取物中的蛋白质、多糖、鞣质等杂质比较多，提取液易发霉，因此目前较少。

在醇提过程中，得率会随提取温度、提取时间、乙醇浓度的增加而提高，但温度过高会导致得率下降；最佳的醇提工艺为提取温度80 ℃、提取时间 3 h、乙醇浓度70%，此工艺的总黄酮得率达 2.97%。

与水提法相比，该法虽耗用大量有机溶剂进而加大生产成本，但提取物中的水溶性杂质少，且提取液不易发霉变质、后期处理较方便。

目前较为常用的是醇提回流法。

1.2 超声波辅助提取法超声波辅助提取是在水浸提的同时加超声波辅助提取。

此法不仅能够缩短提取时间、提高提取率，且能避免高温对有效成分的影响。

(OCH3)。

1HNMR(CDCl3)δ:1.01(3H,t,J= 7Hz,NCH2CH3),3.23,3.31,3.39,3.42(各3H,s,OCH3×4),3.57(H,t,J=7Hz, NCH2CH3)。

与文献[3]比较对照确认为lycoc2 tonine。

碱Ⅴ　块状结晶(乙醇)。

MS m/z:631 (C33H45O11N,M+)。

mp224℃～225℃,[α]25D +27.0°(0.22,CHCl3)。

IR(K Br)cm-1:3560, 3536(OH),3255(N H),1701(C O),1686 (C O),1587(C6H6),1263,1087, 763。

1HNMR(CDCl3)δ:1.11(3H,t,J=7Hz, NCH2CH3),2.20(3H,s,N HCOCH3),3.28 (6H,s,OCH3×2),3.39(3H,s,OCH3),7.02,7.50(各1H,t),7.92,8.64(各1H,d),11.05 (H,s,N HCOCH3)。

根据文献[4]的数据确认为刺乌头碱(lappaconitine)。

4　参考文献1　陈泗英1滇乌碱的结构1化学学报,1979;37(1):152　中国科学院中国植物志编辑委员会1中国植物志11979: 27,2023　蒋山好,沈竞康,薛兰珍,等1中国乌头的研究Ⅷ1紫草乌 生物碱的研究1化学学报,1989;47:11784　蒋山好,洪山海,周炳南,等1中国乌头的研究Ⅸ1紫草乌 甲的化学结构的研究1化学学报,1987;45:11015　杨崇仁,郝小江,王德祖,等1黄草乌的生物碱研究Ⅰ1黄 草乌甲和碱丙的化学结构1化学学报,1981;39(2):1476　Wang Fengpeng and Fang Qisheng.Alkaloids from Roots of Aconit um crassicaule.Planta Med,1981;42:3751997211212收稿墨旱莲化学成分及药理活性的初步研究韩英　夏超　陈小媛　向仁德(江苏省药物研究所植化室　南京210009)刘桦　闫清　许德义(南京铁道医学院药理室　南京210009) 摘要　目的:中药墨旱莲植物抗肝炎活性成分的研究。

墨旱莲的化学成分与药理作用研究进展陈　献,王艳红(玉林制药有限责任公司,广西玉林　537001) 关键词:墨旱莲;化学成分;药理作用;综述 中图分类号:R28217　文献标识码:A　文章编号:1008-7486(2008)01-0076-03 墨旱莲(Herba Ecliptae)为菊科一年生草本植物鳢肠(E2 clipta prost rata L1)的干燥地上部分,又名旱莲草、鳢肠草、金陵草等,中国各地均有出产。

花开时采割,晒干生用。

性寒,味甘、酸。

归肝,肾经;功能凉血止血,滋阴益肾;用于阴虚内热,血热妄行引起的吐血、衄血、咳血、尿血、崩漏出血和外伤出血及肝肾阴虚出现头晕目眩、牙齿松动、须发早白、腰痛筋软等证。

1　化学成分 赵越平等[1]采用硅胶柱色谱和HPLC进行分离,根据IR,MS,HNMR,CNMR等光谱技术和水解等方法鉴定化合物的结构,研究了中药墨旱莲的化学成分,结果鉴定出4个化合物,分别为刺囊酸(Ⅰ)、刺囊酸232O2β2D2吡喃葡萄糖醛酸甲酯苷(Ⅱ)、豆甾醇232O2β2D2吡喃葡萄糖苷(Ⅲ)和槲皮素(Ⅳ)。

他们还应用柱色谱和HPLC法分离纯化,通过光谱分析(IR,MS,HNMR,CNMR,DEPT,HMOC和HMBC)鉴定其化学结构,结果分离并鉴定了5个三萜皂苷,分别为:eclal2 basaponinsⅡ,Ⅰ,Ⅲ,eclalbasaponinsⅪ和Ⅻ[2]。

其中1和5具有诱导稻瘟霉菌丝变形活性。

余建清等[3]采用水蒸汽蒸馏提取挥发油,用GC2MS进行成分分析,对墨旱莲挥发油化学成分进行了研究,结果鉴定出37个化合物,占挥发油总量的84157%。

墨旱莲挥发油的主要成分为1,5,5,82四甲基2 122氧双环[9,1,0]十五碳23,72双烯(10182%)、6,10,142三甲基222十五酮(9127%)、δ2愈创木烯(7173%)、新二氢香芹醇(7150%)、3,7,Ⅱ,152四甲基222十六烯212醇(6167%)、十六烷酸(5182%)、环氧石竹烯(5139%)、十七烷(5134%)、原红霞[4]等采用高效液相色谱法同时测定了墨旱莲中香豆素醚类成分蟛蜞菊内酯和异去甲基蟛蜞菊内酯含量。