HPLC操作规程
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HPLC操作规程
1 适用范围
适用于分析醛酮类不易气化以及大分子的有机物，如汽车内饰件，家具等挥发的醛酮化合物。
2 操作规程
2.1 开机
开机前准备：检测溶剂瓶的流动相的量，水相换成新鲜的高纯水，防止长菌或长藻类。
开机：打开仪器各模块的电源，打开电脑，点击桌面上Agilent1260联机软件，仪器自检，进入工作站，待各个模块（进样器、四元泵、柱温箱、检测器）进入就绪状态。
平衡、排气泡：如果长时间没用仪器或者流动相管路有气泡，需要排气（打开purge阀，右击四元泵，选择方法，进入界面把流速调为5mL/min，把A、B溶剂各设置成100%，平衡五分钟，再把流速调成1mL/min，关闭purge阀。
如果管路没有气泡直接按方法参数运行直到压力平稳。
2.2 方法参数的编辑
右击进样器、四元泵、柱温箱、检测器各个模块，选择方法进入各个模块参数的编辑（包括进样量，流速，梯度洗脱，柱温以及检测器的波长），编辑好之后，保存方法。
2.3 序列的编辑及运行
序列编辑：左击序列指令，选择新建序列模板或者调用序列模板，进入序列编辑界面，根据样品的数量及需要选择添加删除行与列，序列包括几个必要的信息（样品位置、样品名称，运行方法，数据储存路径），编辑好之后保存序列。
序列运行：检查序列参数设置，检查ok后，样品放到进样盘对应的位置，点击运行序列。
2.4 关机：待序列运行完，然后分别用H2O(95%)/有机相冲洗30min，再换成100% 有机相冲洗30-60min，然后关泵，退出工作站，关电电源。
3 注意事项
3.1 仪器设备要放在温度、湿度适宜的房间里（T:10-30 ℃湿度≤80%）。
3.2 有机流动相要用色谱纯，水相需经常更换（一般不超过2天）。
3.3 色谱柱的使用要详读说明书，注意适用条件及范围，柱子不用时，应该用有机相去封存柱子。
3.4 进样针进样后要清洗，防止堵塞。
3.5 色谱柱不能弯曲，碰撞及强烈震动。
4 维护保养
4.1 定期检查管路是否有漏液。
4.2 定期清洗溶剂瓶中的过滤芯头。
4.3 每次分析进样后，要反复冲洗进样口，防止样品交叉污染。
4.4 分析前打开检测器，样品分析完要关闭检测器，延长寿命。
