下载文档原格式
基于网络药理学和体外实验验证木犀草素抑制膀胱癌细胞的增殖1. 内容概要本研究旨在通过网络药理学和体外实验验证木犀草素(Luteolin)对膀胱癌细胞增殖的抑制作用。
通过文献综述和网络药理学分析，筛选出与木犀草素相关的靶点和通路。
利用体外实验方法，如MTT法、CCK8法等。
结合体内外实验结果，探讨木犀草素抑制膀胱癌细胞增殖的可能机制。
本研究将为进一步揭示木犀草素在抗肿瘤药物研发中的应用提供理论依据和实验基础。
1.1 研究背景膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，其发病率逐年上升，给患者及其家庭带来沉重的心理和经济负担。
针对膀胱癌的主要治疗方法包括手术切除、放疗、化疗等，但这些方法在治疗过程中可能会产生一定的副作用，且部分患者的治疗效果并不理想。
寻找一种能够有效抑制膀胱癌细胞增殖的天然药物成为了研究的重要方向。
随着生物技术的发展，网络药理学逐渐成为药物研究的新领域。
网络药理学通过分析大量药物靶点相互作用数据，揭示药物作用机制及潜在靶点，为药物研发提供新的思路。
本研究拟运用网络药理学方法筛选出具有抗膀胱癌活性的天然化合物，并进一步通过体外实验验证其对膀胱癌细胞的抑制作用。
木犀草素作为一种具有抗肿瘤活性的天然化合物，已被证实在多种癌症中具有良好的抑制作用。
本研究将首次探讨木犀草素在膀胱癌细胞中的抗增殖作用，以期为膀胱癌的治疗提供新的理论依据和实验支持。
1.2 研究意义随着现代医学技术的不断发展，癌症已成为全球范围内的主要健康威胁之一。
膀胱癌是其中一种常见的恶性肿瘤，其发病率逐年上升，给患者及其家庭带来了巨大的心理和经济压力。
寻找有效的治疗方法和药物成为临床医生和研究人员的迫切需求。
木犀草素作为一种天然植物化合物，具有广泛的生物活性，包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤等作用。
近年来的研究发现，木犀草素对多种肿瘤细胞具有抑制增殖的作用，且毒副作用小。
本研究旨在通过网络药理学和体外实验验证木犀草素对膀胱癌细胞的增殖的抑制作用，为进一步探索其在治疗膀胱癌方面的潜力提供理论依据和实验数据支持。
体外药敏试验ATP-TCA在大肠癌中的应用
袁兵;黄剑飞;王华
【期刊名称】《交通医学》
【年(卷),期】2008(22)3
【摘要】目的:采用三磷酸腺生物荧光法(ATP-TCA)研究大肠癌体外药敏试验的异质性和个体化疗的可行性.方法:用ATP-TCA技术检测24份大肠癌标本对6种抗癌药单药或联用药的敏感性.其中应用20倍的氟尿嘧啶模拟希罗达.结果:不同标本的药物敏感性存在明显差异,单药中最有效的药物依次为氟尿嘧啶、丝裂霉素、顺铂,敏感率分别为20.8%、l6.7%、l2.5%.最有效联合用药方案是20倍氟尿嘧啶+草酸铂,敏感率为83.3%,其次是草酸铂+氟尿嘧啶和氟尿嘧啶+阿霉素+丝裂霉素(FAM).结论:ATP-TCA技术可用于为大肠癌患者选择合适的化疗药物.
【总页数】3页(P297-298,300)
【作者】袁兵;黄剑飞;王华
【作者单位】如东县人民医院外科,江苏,226400;南通大学附属医院;如东县人民医院外科,江苏,226400
【正文语种】中文
【中图分类】R735.3+4
【相关文献】
1.ATP-TCA在大肠癌化疗药物敏感性检测中的应用 [J], 戴晓宇;李克强;杨峂;毛联钢;乐东海;冯伟云
2.肿瘤体外药敏试验三磷酸腺苷生物发光法(ATP-TCA)检测技术在化疗中的应用[J], 苏承武;蔡捷;李佳荃;邱庆明
3.体外药敏试验ATP-TCA在胃癌中的应用 [J], 袁兵;黄剑飞;王华
4.大肠癌细胞的联合用药体外药敏试验 [J], 翟晓波;鲍思蔚;晏马成
5.宫颈鳞状细胞癌ATP-TCA法体外药敏试验与耐药相关蛋白表达的关系 [J], 刘志茹;孔为民
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
莪术油注射液对膀胱癌T24细胞作用的实验研究莪术油注射液对膀胱癌T24细胞作用的实验研究摘要：本实验旨在探究莪术油注射液对膀胱癌T24细胞的影响以及其可能的作用机制。
通过体外细胞实验，我们发现莪术油注射液可以显著抑制T24细胞的增殖，并且诱导细胞凋亡。
进一步的研究表明，莪术油注射液通过抑制PI3K/Akt信号通路和活化线粒体相关团脂酸酶激酶而实现其抗癌效果。
综上所述，本实验结果表明莪术油注射液可能成为膀胱癌治疗的一种新型药物。
关键词：莪术油注射液，膀胱癌，T24细胞，增殖抑制，凋亡，PI3K/Akt信号通路引言膀胱癌是一种常见的泌尿系统肿瘤，对人类健康造成了严重的威胁。
尽管目前已有多种治疗手段可供选择，但由于膀胱癌发病机制的复杂性以及部分患者对现有治疗方法的耐药性，寻找新的治疗策略仍然是研究热点。
自古以来，中药一直是中国人民预防和治疗疾病的重要方法之一。
莪术油作为一种常用的中药，具有抗炎、抗菌、抗肿瘤等多种功效，在临床上得到了广泛的应用。
然而，莪术油注射液在膀胱癌治疗中的作用及其作用机制仍未完全明确。
材料与方法1. 实验材料- T24细胞，来源于膀胱癌患者，存储于实验室的细胞库中。
- 莪术油注射液，购自XX药店。
2. 细胞培养与处理- T24细胞培养：将T24细胞接种于含有DMEM培养基的培养皿中，放置于37 ℃、5% CO2的恒温培养箱中培养。
- 莪术油注射液处理：将T24细胞分为对照组和实验组，实验组细胞在培养基中加入莪术油注射液，对照组细胞加入等量的生理盐水作为对照。
3. 细胞增殖试验- CCK-8法：用CCK-8试剂检测不同处理组细胞的增殖情况。
结果用OD值表示。
4. 细胞凋亡分析- Annexin V/PI染色：通过流式细胞术，用Annexin V/PI染色检测细胞凋亡的情况。
5. PI3K/Akt信号通路活性检测- Western blot：通过Western blot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达情况。
人膀胱癌多药耐受性细胞亚系BIU87PR的建立及生物学特征关中宏;鲁功成;赵军;张齐钧;熊旭林;屈伸;熊平;徐勇;龚非力
【期刊名称】《临床泌尿外科杂志》
【年(卷),期】1992(7)2
【摘要】多药耐受肿瘤细胞系是研究肿瘤多药耐受性的良好实验模型。
本研究通过使用单一浓度阿霉素短时冲击诱导的方法,历时5月,成功地诱导建立了人膀胱移行上皮癌多药耐受细胞亚系BIU-87PR。
生物学鉴定表明,BIU-87PR对阿霉素的耐药性较敏感细胞BIU-87提高了2.1倍。
对足叶乙■的耐药性提高了4倍.对长春新碱的敏感性提高了2.4倍.BIU-87PR的生物学特性与BIU-87相似,生长速率较慢,融合密度略降低,细胞轻度异形性,染色体分析显示双微体略增多.
【总页数】3页(P67-69)
【关键词】膀胱肿瘤;多药耐受性;细胞亚系
【作者】关中宏;鲁功成;赵军;张齐钧;熊旭林;屈伸;熊平;徐勇;龚非力
【作者单位】同济医科大学协和医院泌尿外科;同济医科大学基础医学部
【正文语种】中文
【中图分类】R737.14
【相关文献】
1.人骨肉瘤MG63多药耐药细胞亚系建立及生物学特性分析 [J], 刘岩;张德宝;杨华;孙大辉
2.人膀胱癌多药耐受细胞亚系的建立及生物学特性 [J], 关中宏;屈伸
3.不同诱导方法建立的人膀胱癌多药耐受细胞系BIU-87R和BIU-87PR的生物学特性比较 [J], 关中宏
4.六亚甲基二乙酰胺对人膀胱癌细胞系BIU-87细胞生物学特性的影响 [J], 郝俊文
5.人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及其生物学特征 [J], 陈杰;钱桂生;黄桂君;熊玮因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
膀胱癌的免疫治疗耐药性机制标题：膀胱癌免疫治疗抵抗机制的研究一、研究背景与意义膀胱癌是全球范围内常见的恶性肿瘤之一，常规治疗方法如手术切除、放疗和化疗等虽然在一定程度上提高了患者的生存率，但对晚期膀胱癌缓解和治愈的效果有限，且常常伴随着较高的复发和转移率。
因此，寻找新的治疗策略是当前膀胱癌研究的热点。
免疫治疗作为近年来快速发展的治疗手段，通过激活机体的免疫系统，协助抗癌作用从而实现对肿瘤的治疗。
然而，临床实践中发现，部分膀胱癌患者对免疫治疗产生耐药性。
因此，针对膀胱癌免疫治疗耐药性机制的研究意义重大，有助于提高膀胱癌免疫治疗的相应疗效，并为临床治疗提供依据。
二、研究目标与方法本课题旨在研究膀胱癌免疫治疗抵抗机制，具体研究目标如下：1. 分析膀胱癌免疫治疗耐药性形成的分子机制；2. 探讨免疫治疗后肿瘤免疫逃逸机制；3. 研究免疫治疗后肿瘤微环境的变化；4. 分析肿瘤细胞对免疫治疗的免疫耐受机制；5. 寻找针对膀胱癌免疫治疗耐药性的逆转策略。
研究方法主要包括以下几个方面：1. 临床样本采集与分析：收集一定数量的膀胱癌患者免疫治疗前后的组织样本和外周血样本，应用免疫组化和单细胞测序技术等手段对样本进行分析；2. 动物模型的建立：建立合适的膀胱癌小鼠模型，应用单克隆抗体及药物等对模型进行免疫治疗，并观察治疗后的效果；3. 数据分析和统计学处理：利用生物信息学分析和统计学方法分析实验数据，找出相关关键基因和通路，并探讨其与免疫耐药性的关系；4. 体外实验研究：应用相关细胞学和分子生物学技术，评估不同细胞系中的免疫相关分子的表达，并通过基因编辑方法等筛选免疫耐受相关基因。
三、研究预期结果通过以上研究目标和方法的实施，我们预期取得以下研究结果：1. 阐明了免疫治疗耐药性在膀胱癌中的分子机制，包括潜在的信号通路、免疫相关基因及其调控等；2. 揭示了免疫治疗后膀胱癌肿瘤免疫逃逸机制以及肿瘤微环境的变化；3. 识别出多个与膀胱癌免疫治疗耐药性相关的免疫耐受基因；4. 探索出针对膀胱癌免疫治疗耐药性的逆转策略。
膀胱癌肿瘤干细胞增殖的影响因素研究进展李红琼1，奎敬跃2，王群1，孙雨欣1，施鸿金1，付什1，王剑松1，王海峰11 昆明医科大学第二附属医院泌尿外科云南省泌尿外科研究所，昆明650101；2 通海县人民医院泌尿外科摘要：膀胱癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，治疗手段有限且患者五年生存率不理想。
膀胱癌肿瘤干细胞（BC‐SCs）被认为与膀胱癌的发生、进展、复发等密切相关，逐渐成为膀胱癌靶向治疗的研究热点。
目前研究表明，吸烟、前列腺素E2、角蛋白、S100A4、泛素偶联酶9、蛋白磷酸酶抑制分子、蛋白激酶1、B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1基因等可促进BCSCs增殖；部分具有抗癌作用的药物（如阿克拉霉素A、塞来昔布、二甲双胍、苦参碱等）、miR-139-5p、miR-142-3p、lnc-DILC、表没食子儿茶素没食子酸酯等能够抑制BCSCs增殖。
影响BCSCs增殖的因素有望作为BCSCs靶向治疗及相关研究的切入点，但在应用之前还需通过反复实验来确定其安全性和有效性。
关键词：膀胱癌；肿瘤干细胞；细胞增殖doi：10.3969/j.issn.1002-266X.2023.32.026中图分类号：R737.14 文献标志码：A 文章编号：1002-266X（2023）32-0109-04膀胱癌来源于膀胱黏膜上皮细胞及组成膀胱的各种组织，是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一［1-2］。
随着医学研究技术的不断发展，膀胱癌的治疗研究不断趋于精准化、个性化。
肿瘤干细胞是肿瘤细胞中的一个亚群，通过对称或不对称的细胞分裂进行自我更新或分化，参与肿瘤发生、细胞增殖、转移扩散和肿瘤复发过程，具有自我更新、多系分化、耐药的特征［3］。
膀胱癌肿瘤干细胞（BCSCs）是膀胱癌组织中具有多向分化潜能的肿瘤细胞，被认为是膀胱癌发病的起始细胞［4］。
研究认为，BCSCs与膀胱癌的发生、发展、复发等有着密切关联，关于BCSCs增殖影响因素的研究也逐渐增多。
膀胱癌是最常见的恶性肿瘤之一，膀胱癌中约５５％～６０％为浅表性膀胱癌，其中５０％～７０％术后出现复发，约２５％～３０％的复发病例伴有恶性程度增高或浸润能力增强。
到目前为止已有３０多种药物用于临床，包括细胞毒药物、免疫调节剂和维生素等，但仅有少数几种药物较为有效［１］。
近年来，人们试图摆脱膀胱肿瘤的“菜谱式”治疗，通过药物敏感实验，建立“量体裁衣式”的治疗方法。
而其中四氮唑蓝（ｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ，ＭＴＴ）比色分析法是目前最常用的体外肿瘤药敏试收稿日期：２００８－０１－０７修订日期：２００８－０２－２６作者简介：王剑松（１９６３～）男，教授，主要从事泌尿外科临床与基础研究。
项目研究：云南省科技攻关项目（２００２ＮＧ－１８）子课题。
・论著・人膀胱癌细胞原代培养及体外药物敏感性实验研究王剑松１，卢永伟２，王超３，詹辉１，袁龙４（１．昆明医学院第二附属医院泌尿外科，云南省泌尿外科研究室，云南昆明６５０１０１；２．福建省肿瘤医院；３．华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科；４．河南省肿瘤医院外科）摘要：目的研究不同个体表浅性膀胱癌组织对抗癌药物及其联合应用的敏感性。
方法采用肿瘤细胞原代培养技术和ＭＴＴ比色法测定了５９例膀胱癌组织对灌注抗癌药物及其联合应用的抑制率和敏感性。
结果１４例失败，４５例获得成功，总体可评价率为７６．３％，不同个体对不同抗癌药物的抑制率存在明显差异；除ＭＴＸ对膀胱癌Ｇ１和Ｇ３级平均抑制率差异有统计学意义外，其它抗癌药物对不同个体膀胱癌细胞的平均抑制率与膀胱癌的病理分级、分期均无关；抗癌药物对初发膀胱癌的敏感率和平均抑制率均高于复发膀胱癌；２种不同作用机制的抗癌药物联合应用对不同个体膀胱癌细胞的敏感率和平均抑制率均高于单一药物，二者敏感率和平均抑制率差异有统计学意义。
结论应根据药敏结果，选择相对敏感的抗癌药物，并将作用于不同机制、细胞不同周期的抗癌药物联合，制订个体化膀胱灌注治疗方案，以提高疗效，最大限度减少副反应，减少肿瘤复发率。
关键词：膀胱肿瘤；癌细胞体外培养；抗癌药物敏感实验中图分类号：Ｒ７３７．１４文献标识码：Ａ文章编号：１００６－４１４１（２００８）０３－０２２６－０４Ｐｒｉｍａｒｙｂｌａｄｄｅｒｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｔｉｔｕｍｏｒｄｒｕｇｓｉｎｖｉｔｒｏ．ＷＡＮＧＪｉａｎ－ｓｏｎｇ，ＬＵＹｏｎｇ－ｗｅｉ，ＷＡＮＧＣｈａｏ，ｅｔａｌ．（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＵｒｏｌｏｇｙ，ＴｈｅＳｅｃｏｎｄＡｆｆｉｌｉａｔｅｄＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＫｕｎｍｉｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌ－ｌｅｇｅ，Ｋｕｎｍｉｎｇ，Ｙｕｎｎａｎ６５０１０１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｂｌａｄｄｅｒｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｔｏｅｖａｌｕａｔｅｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｏｆａｎｔｉｔｕｍｏｒｄｒｕｇｓｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｌｙａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｉｎｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌｂｌａｄｄｅｒｃａｎｃｅｒ．ＭｅｔｈｏｄｓＴｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｒａｔｅｓｏｆａｎｔｉｔｕｍｏｒｄｒｕｇｓａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｉｎ５９ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌｂｌａｄｄｅｒｃａｎｃｅｒｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｗｅｒｅｓｔｕｄｉｅｄｂｙｍｅａｎｓｏｆｐｒｉｍａｒｙｔｕｍｏｒｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＭＴＴａｓｓａｙ．ＲｅｓｕｌｔｓＯｆ５９ｓｕｐｅｒｆｉｃｉａｌｂｌａｄｄｅｒｃａｎｃｅｒｓａｍｐｌｅｓ，ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙｔｅｓｔｓｗｅｒｅｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｐｅｒｆｏｒｍｅｄｉｎ４５ｓａｍｐｌｅｓ，ａｎｄｔｈｅｏｔｈｅｒｓｆａｉｌｅｄ，ｔｈｅｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｒａｔｅｗａｓ７６．３％．ＤｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｒａｔｅｓｏｆａｎｔｉｔｕｍｏｒｄｒｕｇｓｗａｓｏｂｓｅｒｖｅｄｉｎｓａｍｐｌｅｓｆｒｏｍｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｓｅｘｃｅｐｔＭＴＸｉｎｓｔａｇｅｏｆＧ１ａｎｄＧ３．Ｎｏｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎｈａｄｂｅｅｎｆｏｕｎｄｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｓｓａｙａｎｄｔｈｅｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌｇｒａｄｅａｎｄｓｔａｇｅ．Ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｍｅａｎｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｒａｔｅｓｏｆａｎｔｉｔｕｍｏｒｄｒｕｇｓｉｎｔｈｅｐｒｉｍａｒｙｇｒｏｕｐｗｅｒｅｎｏｔａｂｌｙｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｔｈａｔｉｎｔｈｅｒｅｃｕｒｒｅｎｔｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｏｆｔｗｏｔｈｅｒａｐｙａｇｅｎｔｓ，ｗｈｉｃｈｈａｄｄｉｆｆｅｒｅｎｔｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｏｒｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｅｌｌ－ｃｙｃｌｅｔａｒｇｅｔｓ，ｓｈｏｗｅｄｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙｍｏｒｅｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｎｄｈｉｇｈｅｒｍｅａｎｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇｒａｔｅｓｔｈａｎｓｉｎｇｌｅｏｎｅ．ＣｏｎｃｌｕｓｉｏｎＴｈｅｉｎｄｉｖｉｄｕａｌｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，ｔｈｅｒｅｌａｔｉｖｅｓｅｎｓｉｔｉｖｅｄｒｕｇｓａｎｄｔｈｅｉｒｃｏｍｂｉｎａｔｉｏｎｓｈｏｕｌｄｂｅｄｅｓｉｇｎｅｄａｎｄｓｅｌｅｃｔｅｄｓｏａｓｔｏｉｎｃｒｅａｓｅｔｒｅａｔｍｅｎｔｅｆｆｅｃｔ，ｄｅｃｒｅａｓｅｓｉｄｅｅｆｆｅｃｔｓｔｏｔｈｅｌｅａｓｔ，ａｎｄｄｅｃｒｅａｓｅｔｈｅｔｕｍｏｒｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｂｌａｄｄｅｒｃａｎｃｅｒｃｅｌｌｃｕｌｔｕｒｅ；Ａｎｔｉｔｕｍｏｒｄｒｕｇｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙａｓｓａｙ验方法，它是在１９８３年由Ｍｏｓｍａｎｎ首先应用于鼠淋巴瘤细胞系中研究ＩＬ－２等细胞因子对细胞存活和增殖的影响［２］。
本研究以人膀胱癌细胞为研究对象，采用ＭＴＴ法检测膀胱癌细胞体外药物敏感性，并比较不同个体膀胱癌细胞对不同抗癌方案的敏感性，以期为临床合理用药提供依据。
材料与方法一、实验材料标本取自２００５年４月～２００６年２月接受手术治疗的５９例膀胱癌患者。
男性３８例，女性２１例；年龄３５～９２岁，平均６７．７岁；均经手术探查病理确诊为膀胱移行细胞癌。
分级：Ｇ１２１例，Ｇ２１９例，Ｇ３１９例。
分期：Ｔａ期１８例，Ｔ１期４１例。
初发４４例，复发１５例。
采用的实验药物有：ＣＴＸ－１２（蛇毒膜毒素－１２），ＨＣＰＴ（羟基喜树碱），ＭＴＸ（氨甲蝶呤），ＥＰＩ（表阿霉素）和ＤＤＰ（顺铂）等。
抗癌药物试验浓度以生理盐水配成浓度为１ｍｇ／ｍｌ的溶液，－３０℃冻存（不超过３个月），临用前解冻。
二、实验方法采用细胞原代培养方法：肿瘤标本均取自手术切除的新鲜癌组织，进行原代细胞培养，利用肿瘤细胞贴壁比成纤维细胞慢的特点，用短暂培养反复贴壁的方法将二者分开［３］。
通过光镜下细胞形态学特点观察及免疫组织化学检验，对培养肿瘤细胞进行生物学鉴定，确定系移行上皮肿瘤。
对原代培养细胞进行ＭＴＴ比色法药敏实验操作：参照Ｍｏｓｍａｎｎ［３］的方法略加修改，将上述细胞悬液（５×１０５／ｍｌ）接种于９６孔无菌培养板，每孔１００μｌ（含５×１０４个细胞）。
设无药对照孔、空白对照孔和测定孔，每种药物均设３个复孔，置入３７℃，５％ＣＯ２培养箱中培养２４ｈ后，弃去上清液，测定孔内加入不同浓度的各组化疗药物１００μｌ（ＣＴＸ－１２，ＨＣＰＴ，ＭＴＸ，ＥＰＩ，ＤＤＰ，ＣＴＸ１２＋ＨＣＰＴ，ＣＴＸ１２＋ＭＴＸ，ＣＴＸ１２＋ＥＰＩ及ＣＴＸ１２＋ＤＤＰ），空白对照孔加入含１０％小牛血清等量的ＲＰＭＩ－１６４０完全培养液，３７℃，５％ＣＯ２，重新放入培养箱中培养２ｈ后取出，去上清液，每孔加入不含血清的ＲＰＭＩ１６４０液配成的ＭＴＴ液１００μｌ，５％ＣＯ２条件下继续培养４ｈ，去上清，每孔加入ＤＭＳＯ１００μｌ，轻度震荡溶解甲攒（ｆｏｒｍａｚａｎ）结晶１０～１５ｍｉｎ，使紫蓝色甲臜结晶完全溶解，即在酶标仪上测定波长５７０ｎｍ为检测波长，测各孔的ＯＤ值。
根据下列公式计算抑制率：１－（药物组ＯＤ值－空白组ＯＤ值）／（无药对照组ＯＤ值－空白组ＯＤ值）×１００％；肿瘤细胞的存活率＝１－肿瘤细胞的抑制率。
采用１９７８年全国抗癌药物会议制定的抗肿瘤药物通用指标：对膀胱癌细胞的抑制率（ＩＲ）＞７０％为高度敏感，５０％～７０％为中度敏感，３０％～４９％为低度敏感，＜３０％为不敏感或耐药，并选择抑制率最高的化疗药物供临床治疗参考［４］。
统计学处理：选用ＳＰＳＳ１０．０统计软件包进行数据处理，数值以均数±标准差表示，组间比较用配对ｔ检验，其余用单因素方差分析检验，各组结果以α＝０．０５为检验水准。
结果一、形态学观察１．相差显微镜观察：筛选原代培养细胞，４８～７２ｈ后贴壁生长的细胞数量明显增多，并可见有较长突起的成纤维细胞，当培养至第５～７ｄ时，细胞已大部分融合，长满瓶底。
２．组织学观察（Ｇｉｅｍｓａ染色）：肿瘤细胞贴壁生长，呈上皮样，细胞形态和大小有差异。
多呈圆形及多角形，细胞核大。
核仁清晰，多为２～３个。
胞浆内可见颗粒和空泡，细胞失去接触抑制并易脱落。
可见有较长突起的成纤维细胞，经过纯化后，有较长突起的成纤维细胞较少或不见。
二、生物学特征检测细胞角蛋白２０（Ｃｙｔｏｋ－ｅｒａｔｉｎ２０，ＣＫ２０）特异地分布于上皮细胞及其来源的肿瘤，而正常膀胱组织无表达［５］。
免疫组化检查结果：免疫组化染色肿瘤细胞染色阳性，胞浆呈黄色，胞核呈蓝色。
非肿瘤细胞染色阴性。
三、药物敏感性检测１．用ＭＴＴ法对５９例膀胱癌标本进行体外药敏试验，１４例失败，４５例获得成功，总体可评价率为７６．３％。
２．抗癌药物对不同个体膀胱癌细胞抑制率的比较，通过对４５例膀胱癌细胞的抗癌药物敏感性实验，发现抗癌药物对不同个体膀胱肿瘤细胞的抑制率差异很大，ＭＴ１２的抑制率为７．４％～８５．７％，ＨＣＰＴ的抑制率为３．７％～８５．７％，ＭＴＸ的抑制率为２．０％～７２．１％，ＥＰＩ的抑制率为２．０％～９４．５％，ＣＤＤＰ的抑制率为０～８９．２％。
３．膀胱癌病理分级、分期与抗癌药物抑制率的关系：分别对ＣＴＸ－１２，ＨＣＰＴ，ＭＴＸ，ＥＰＩ，ＤＤＰ，ＣＴＸ１２＋ＨＣＰＴ，ＣＴＸ１２＋ＭＴＸ，ＣＴＸ１２＋ＥＰＩ及ＣＴＸ１２＋ＤＤＰ各单药及两药联合的检测发现在４５例膀胱癌中，除ＭＴＸ对膀胱癌Ｇ１和Ｇ３级平均抑制率差异有统计学意义外（Ｐ＜０．０５），其余抗癌药物对不同个体膀胱癌细胞的平均抑制率与膀胱癌的病理分级、分期均无关（Ｐ均＞０．０５）。
４．抗癌药物对膀胱癌的初发与复发平均抑制率的比较：在３５例初发膀胱癌和１０例复发膀胱癌中，抗癌药物对其敏感率和平均抑制率均不同，抗癌药物对初发膀胱癌的敏感率和平均抑制率均高于复发膀胱癌，且二者平均抑制率差异有统计学意义（Ｐ均＜０．０５）。
