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---------------------------------------------------------------最新资料推荐------------------------------------------------------ 实验动物染毒途径和方法(染毒技术)(一) 实验动物染毒途径和方法(染毒技术) 染毒的途径和方法多种多样，可根据实验目的、动物种类和药物剂型等情况确定。
当研究外来化学物的毒性时，实验动物接触化学物途径的选择，应以人类在生产和生活环境中接触该化学物的途径为依据。
通常使用以下四种染毒方法，即经口，经呼吸道，经皮肤，注射染毒。
1、经口染毒目的：研究外来化学物能否经胃肠道吸收及求出经口接触的致死剂量(LD50)。
由于外来化学物可以污染饮水及食物，因此，此种染毒方式在卫生毒理学研究中占有重要地位。
经胃肠道接触又因实验动物的种属不同，外源化学物理化性质不同，分为以下几种具体的接触方式。
(1)、灌胃在急性毒性试验中，经口染毒多用灌胃法，此法剂量准确，适用于小鼠、大鼠、家兔等动物。
灌胃法是将外源化学物用灌胃器灌到实验动物胃内。
灌胃器由注射器和特殊的灌胃针构成。
小鼠的灌胃针长约 4～5 cm，直径为1 mm，大鼠的灌胃针长约 6～8 cm，直径约 1.2 mm。
灌胃针的尖端焊有一小圆形中空的金属球。
1 / 7焊金属球的目的是防止针头刺入气管或损伤消化道。
针头金属球端弯曲成 20左右的角度，以适应口腔、食道的生理弯曲度走向。
图 11 灌胃针食道食道气管气管By LASCOBy LASCO面向自己,沿着门牙左边滑入边滑入面向自己,沿着门牙左图 12 鼠类灌胃、腹腔注射① 剂量：在每一实验系列中，同种实验动物的灌胃体积最好一致，即以单位体重计算所给予的毫升数应该一致，即 ml/kg 或 ml/g 计。
因为成年动物胃容积与体重之间有一定的比例，按单位体重计算灌胃量，受试化学物的吸收速度相对稳定。
实验四实验动物的染毒技术
实验四实验动物的染毒技术
一、实验目的
掌握小鼠的经口（胃肠道）染毒技术
二、实验材料
小鼠若干、防护手套（帆布或硬皮质）、注射器、注射针头、
三、实验原理
在毒理学试验中染毒途径的选择，应尽可能模拟人在接触该受试物的方式。
最常用的染毒途径为经口、经呼吸道、经皮及注射途径。
染毒的途径和方法根据实验目的、实验动物种类和药物剂型等情况确定。
不同途径的吸收速率，一般是静脉注射>吸入>肌内注射>腹腔注射>皮下注射>经口>皮内注射>其他途径（如经皮等）。
四、实验步骤
小鼠灌胃法：左手拇指和食指捏住小鼠头部两耳后皮肤，无名指或小指将尾部紧压在手上，使小鼠腹部向上。
右手持灌胃管（注射器上连接灌胃针头）。
操作时，经口角将灌胃管插人口腔，再将胃管沿上腭壁轻轻插入食管内，当推进约2~3cm左右时，灌胃管前端约到膈肌水平，此时可稍感有抵抗。
如此时动物无呼吸异常，即可将药注入。
如遇阻力或动物憋气则应抽出重插管。
如误插入气管注药时可引起动物立即死亡。
药液注完后轻轻退出胃管。
操作时宜轻柔，以防损伤食管及膈肌。
五、注意事项
灌胃法，应注意不要将灌胃管误插入气管，以免造成动物死亡。
操作时宜轻柔，以防损伤食管及膈肌。
六、实验报告
详细记录染毒途径和动物的反应。
实验七 动物试验法目的要求掌握实验动物的保定、接种、采血以及剖检的方法。
在微生物实验研究中，除了应用形态学、生物学和血清学检查外，有时动物试验也很重要。
通常它可用于鉴别分离病原微生物、病原微生物毒力的测定及毒力的增强或减弱、制备诊断血清、疫苗、抗毒素及补体。
微生物学实验室常用的实验动物有家兔、豚鼠、小白鼠等。
操作步骤一、实验动物保定法（一）小白鼠保定法 先用右手抓住尾巴，提起后肢，令其前爪抓住饲养笼的铁丝盖，然后用左手的拇指和食指捏住两耳及头顶部皮肤，并翻转左手，背部皮肤固定于左手中指、无名指及拇指基部之间，以小指压住其尾根，小白鼠即仰卧保定于左手上，消毒术部后，即可进行注射，见图实7-1。
（二）豚鼠保定法助手用左手拇指挟住豚鼠右前肢基部，用食指和中指挟住左前肢，然后用右手紧握其腹部和两后肢，使其腹部朝上，术者即可进行注射，见图实7-2。
图7-2 豚鼠的保定及心脏采血（三）家兔保定法 较小的家兔,基本上和豚鼠的保定法一样，但大家兔须用仰卧或保定器保定。
如果进行耳静脉注射，让家兔卧在手术台上，由助手把握住前后躯即可。
也可用筒式金属保定器保定（见图实7-3）。
二、实验动物接种法接种时，使用干热灭菌的注射器。
吸取接种材料时，吸取量应比使用量稍多些。
注射器内不可留有气泡，吸取接种物后，倒转注射器使针头向上，在针头上插一个无菌棉花球，使注射器内气泡上升，并慢慢推出，再将此棉球投入煮沸消毒器内，或予以焚烧。
注射器用过后，先在煮沸消毒器内吸水冲洗一次，再将针头用镊子取下，注射器拔出筒心后，一并放入煮沸消毒器内，进图7-1 小白鼠的保定及注射图7-3 家兔的保定及静脉注射行煮沸消毒，然后将其洗净备用。
接种部位，先进行去毛（剪毛或剃毛），再以碘酒或酒精进行局部消毒。
接种后，针头拔出处，应以酒精棉球轻轻按压片刻，以防注射物外溢。
（一）皮下接种注射部位，多选择腹股沟、腹壁中线或背部，局部去毛消毒后，用左手拇指和食指将局部皮肤提起，右手将注射器针头刺入提起的皮肤下，然后左手放松，将接种物缓缓注入，此时可见在注射处皮肤有片状的隐起，迅速拔针头，并以酒精棉球压按片刻，防止注射物外溢。
4-1急性毒性试验概述及染毒方法第一节急性毒性试验概述及染毒方法一、概念和试验目的(一) 急性毒性概念急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24小时内多次)接触外来化合物之后所引起的中毒效应，甚至引起死亡。
但须指出化合物使实验动物发生中毒效应的快慢和剧烈的程度，可因所接触的化合物的质与量不同而异。
有的化合物在实验动物接触致死剂量的几分钟之内，就可发生中毒症状，甚至死亡。
而有的化合物则在几天后才显现中毒症状和死亡，即迟发死亡。
此外，实验动物接触化合物的方式或途径不同，“一次”的含义也有所不同。
凡经口接触和各种方式的注射接触，“一次”是指在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内。
而经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程，所以“一次”含有时间因素。
(二) 实验目的1.求出受试化合物对一种或几种实验动物的致死剂量(通常以LD50为主要参数)，以初步估计该化合物对人类毒害的危险性。
2.阐明受试化合物急性毒性的剂量－反应关系与中毒特征。
3.利用急性毒性试验方法研究化合物在机体内的生物转运和生物转化过程及其动力学变化。
也可用于研究急救治疗措施。
二、实验动物和染毒方法(一) 实验动物选择在卫生毒理学领域中，体内试验以实验动物为研究对象，最终是为了阐明受试外来化合物对人的急性危害性质和危害强度。
所以选择实验动物时，要求在其接触化合物之后的毒性反应，应当与人接触该化合物的毒性反应基本一致，虽然利用任何一种或几种实验动物的急性毒性结果向人外推都必须十分慎重，但这一选择实验动物的原则仍非常重要。
1.物种选择以选择哺乳动物为主。
目前实际应用中以大鼠和小鼠为主，尤以大鼠使用很多。
需指出大鼠并非对外来化合物都最敏感。
家兔常用于研究化合物的皮肤毒性，包括对粘膜的刺激。
猫、狗也用于急性毒性试验，但因价贵不易于大量使用。
猪为杂食动物，对一些化合物的生物效应表现与人有相似之处，尤其是皮肤结构与人较近似。
一、实验动物的捉拿、固定及给药方法1.小白鼠：右手抓住鼠尾，放在台上或鼠笼盖铁丝网下，然后用左手拇指沿其背部向前抓住其颈部皮肤，并以左手的小指和掌部夹住其尾固定在手上。
另一抓法是只用左手，先用食指和拇指抓住小鼠尾尖，后用手掌及小指夹住其尾巴，再以拇指及食指捉住其颈部皮肤。
前一方法易学，另一方法稍难，但便于快速捉拿给药。
小鼠灌胃（PO）法：将小鼠固定后，右手持装有灌胃器的注射器，自口角外插入口腔，沿上颚插入食道。
如遇阻力，可将注射器拔出再插，以免穿破食道或误入气管，造成动物死亡。
灌胃容量一般为0.1～0.2ml/10g，不超过0.5ml/只。
小鼠皮下注射法：两人合作，一人一手抓住小白鼠头部皮肤，另一手抓住鼠尾。
另一人注射药物。
注射部位在背部皮下组织。
如一人操作时，左手抓鼠尾，让鼠爬在铁丝笼上，右手将抽好药液的注射器针头插入背部皮下组织。
如一人操作时，左手抓鼠尾，让鼠爬在铁丝笼上，右手将抽好的药液的注射器针头插入背部皮下将药注入。
注射量不超过0.5ml/只。
小鼠腹腔注射法：左手持鼠，右手持注射器从下腹左或右侧（避开膀胱）朝头部方向刺入，宜先刺入皮下，经2～3mm再刺入腹腔，此时针头与腹壁的角度约45度。
针尖插入不宜太深或太近上腹部，避免刺破内脏，注射量一般为0.1～0.25ml/只。
小鼠尾静脉注射法：将小鼠置于固定器内，使其尾巴露出，用70%酒精擦尾部，或将鼠尾浸入50℃热水中。
待尾部静脉扩张后，左手拉尾，右手进针。
注射容量不超过0.5ml/只。
2.兔：用手抓起它脊背近后颈处皮肤，抓的面积越大其持重点越分散。
如家兔肥大，应再以另一手托住它的臀部，将持重点承托于手上。
将兔作仰卧位，一手仍抓住颈部皮肤，另一手顺其腹部抚摸至膝关节，压住关节。
另一人用绳带捆绑四肢，使兔腹部向上，固定在兔手术台上。
头部则用兔头固定夹固定。
兔灌胃法：二人合作，一人固定家兔于两膝之间，一手固定兔头，使头部后仰，另一手将开口器插入兔口，并向后翻转数次，使兔舌伸直并压在开口器下面。
