免疫细胞化学实验技能总结

医学检验免疫学检验归纳总结三大免疫结合反应直接凝集反应玻片凝集反应试管凝集反应间接凝集反应间接血凝试验胶乳凝集试验凝集反应P47 明胶凝集试验自身细胞凝集试验抗球蛋白试验直接coombs试验（RBC膜上的不完全抗原）间接coombs试验（血清中的游离抗原）液体内沉淀试验絮状沉淀试验抗原稀释法抗体稀释法方针滴定法免疫浊度测定沉淀反应凝胶内沉淀试验单向扩散试验双向扩散试验免疫电泳技术对流免疫电泳 CIEP火箭免疫电泳RIE免疫电泳IEP免疫固定电泳交叉免疫电泳三大标记技术一、放射免疫：放射免疫：免疫放射：二、荧光免疫技术P81 荧时间分辨荧光免疫测定（方法）双抗体夹心法光免固相抗体竞争法疫分固相抗原竞争法析类型荧光偏振免疫测定测定荧光酶免疫测定（方法）双抗体夹心法双抗原夹心法固相抗原竞争法三、酶免疫技术 P95 酶免疫技术分类均相酶免疫测定EMIT克隆酶测定分析异相酶免疫测定异相液相酶免疫测定固相酶免疫测定酶联免疫吸附试验ELISA （方法）Ab 双抗体夹心法双位点一步法竞争法Ag 间接法双抗体夹心法竞争法捕获法其他标记技术化学发光免疫分析技术 CLIA 直接化学发光免疫分析CLIAP109类型化学发光酶免疫分析CLEIA电化学发光免疫分析ECLIA 生物素，亲和素放大技术固相膜免疫测定免疫试验IFA免疫层析试验 ICA膜免疫测定的种类斑点酶免疫吸附试验 DOT-ELISE酶联免疫斑点试验 ELISPOT免疫印迹法 IBT/EITB放射免疫浊度试验 RIPA免疫细胞1、分离方法外周血单个核细胞分离 PBMCP161淋巴细胞分离贴壁粘附法吸附柱滤过法磁铁吸引法Percoll分离液法T细胞和B 细胞的分离 E花环沉降法尼龙毛柱分离法T细胞亚群分离亲和板结合分离法磁性微球分离法荧光激法细胞分离仪分离法2、免疫细胞表面标志的检测方法抗体致敏细胞花环法P174 免疫细胞化学法免疫荧光法FCM3、功能检测 T 细胞增殖试验方法形态学P178 3H-TdR掺入法淋巴细胞 T细胞 MTT比色法CFSE（活细胞染料）T细胞分泌功能检测T细胞介导的细胞毒性试验体内试验B细胞：B细胞增殖试验、溶血空斑实验、ELISPOT、体内试验NK细胞：..........。

大学生免疫实验报告范文实验目的本次实验的目的是了解和研究大学生免疫系统的功能和特点。

通过分析大学生的免疫能力，有助于提高我们的健康意识和掌握自身免疫系统的保护机制。

实验材料和方法实验材料- 大学生志愿者- 免疫分析仪器- 免疫实验试剂盒实验方法1. 采集志愿者的血液样本。

2. 提取血液中的白细胞进行免疫分析。

3. 使用免疫分析仪器对样本中的免疫细胞数量和活性进行检测。

4. 根据实验结果分析大学生免疫系统的状态和免疫能力。

实验结果经过对志愿者血液样本的免疫分析，我们得到了以下结果：1. 白细胞数量：与正常数值相比，大学生的白细胞数量整体偏低，但仍处于正常范围内。

2. 免疫细胞活性：大学生的免疫细胞活性相对较高，表明其免疫系统对外界侵袭具有较好的响应能力。

3. 免疫抗体水平：志愿者的免疫抗体水平相对偏低，可能是由于日常生活中的不良生活习惯或营养不均衡所致。

实验分析与讨论通过对大学生免疫系统的实验分析，我们可以得出以下结论：1. 大学生免疫系统相对脆弱：大学生处于高强度的学习和生活压力之下，缺乏充足的休息和锻炼，容易导致免疫系统的不稳定，降低身体的抵抗力。

2. 免疫系统活性受到积极影响：尽管大学生面临许多应激因素，但他们的免疫细胞活性较高，可能与年轻人的新陈代谢活跃有关。

3. 不良生活习惯可能影响免疫系统：不规律的作息时间、饮食不平衡以及缺乏运动等不良生活习惯可能导致大学生免疫抗体水平相对较低，容易受到感染和疾病侵袭。

实验结论通过本次实验的研究和分析，得出以下结论：1. 大学生免疫系统整体较为脆弱，需要更加注重健康管理和保护自身的免疫系统。

2. 充足的休息、良好的饮食和适量的运动对大学生的免疫系统具有积极的影响。

3. 需要加强大学生对免疫系统的认识和健康教育，培养良好的生活习惯和健康意识。

参考文献- [免疫学基础教程](- [大学生免疫系统调查研究](。

免疫学实验技巧分享免疫学实验是生命科学研究中的重要组成部分，对于揭示免疫机制、诊断疾病以及研发免疫治疗方法都具有至关重要的意义。

在进行免疫学实验的过程中，掌握一些实用的技巧可以大大提高实验的成功率和准确性。

接下来，我将为大家分享一些在免疫学实验中积累的宝贵经验。

一、实验前的准备（一）实验设计在开始实验之前，一定要进行详细的实验设计。

明确实验的目的、预期结果以及所需的实验步骤。

同时，要考虑到可能出现的误差和干扰因素，并制定相应的应对措施。

合理的实验设计是实验成功的基础。

（二）试剂和材料的选择选择高质量、可靠的试剂和材料至关重要。

对于抗体、细胞因子等关键试剂，要选择知名品牌，并仔细查看其说明书，了解其适用范围、保存条件和使用方法。

此外，实验中使用的耗材，如移液器枪头、离心管等，也要确保无菌、无杂质。

（三）仪器设备的校准和维护定期对实验中使用的仪器设备进行校准和维护，如移液器、离心机、酶标仪等。

确保仪器的准确性和稳定性，能够有效减少实验误差。

二、细胞培养技巧（一）细胞的复苏细胞复苏是细胞培养的第一步，操作不当容易导致细胞死亡。

从液氮中取出细胞冻存管后，要迅速放入 37℃水浴中，轻轻摇动使其快速融化。

融化过程中要避免水没过管盖，以免造成污染。

待细胞完全融化后，将其转移至离心管中，加入适量的培养基，离心去除冻存液，然后将细胞重悬并接种到培养瓶中。

（二）细胞的传代当细胞生长至 80%－90%汇合度时，需要进行传代。

传代前要先对细胞进行消化处理，常用的消化酶有胰蛋白酶和 EDTA 等。

消化时间要根据细胞的类型和状态进行调整，一般控制在 1-5 分钟。

消化结束后，加入适量的培养基终止消化，轻轻吹打细胞使其分散，然后按照适当的比例进行传代。

（三）细胞的冻存为了长期保存细胞，需要进行冻存。

冻存细胞时，要先将细胞消化、离心，然后用含有 10%DMSO 的冻存液重悬细胞，将细胞分装至冻存管中，缓慢降温至－80℃，最后转移至液氮中保存。

免疫组化常用方法介绍及个人经验总结1 、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学（immunohistochemistry）技术或免疫细胞化学（immunocytochemistry）技术。

2 、原理根据抗原抗体反应和化学显色原理，组织切片或细胞标本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与标记生物素、荧光素等的二抗进行反应，前者再用标记辣根过氧化物酶（HRP）或碱性磷酸酶（AKP）等的抗生物素（如链霉亲和素等）结合，最后通过呈色反应或荧光来显示细胞或组织中化学成分，在光学显微镜或荧光显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞爬片或组织切片上原位确定某些化学成分的分布和含量。

3 、分类1）按标记物质的种类，如荧光染料、放射性同位素、酶（主要有辣根过氧化物酶和碱性磷酸酶）、铁蛋白、胶体金等，可分为免疫荧光法、放射免疫法、免疫酶标法和免疫金银法等。

2）按染色步骤可分为直接法（又称一步法）和间接法（二步、三步或多步法）。

与直接法相比，间接法的灵敏度提高了许多。

3）按结合方式可分为抗原-抗体结合，如过氧化物酶-抗过氧化物酶（PAP）法；亲和连接，如卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法、链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结（SP）法等，其中SP 法是比较常用的方法；聚合物链接，如即用型二步法，此方法尤其适合于内源性生物素含量高的组织抗原检测。

4 、目前几种常用免疫组化方法简单介绍1）免疫荧光方法是最早建立的免疫组织化学技术。

它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。

当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。

由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用较广。

免疫组化实验结果分析免疫组化实验是一种常用的生物学实验方法，用于检测细胞或组织中特定蛋白质的表达情况。

通过特定的抗体与目标蛋白质结合的方式，可以在光学显微镜下观察到颜色反应，从而得出关于该蛋白质表达水平的结论。

本文将对免疫组化实验结果进行详细分析。

一、实验结果描述在分析免疫组化实验结果之前，首先需要对实验结果进行描述。

描述应该包括实验样本的来源、处理方法、实验抗体及其稀释倍数、染色方式以及显微镜下观察到的颜色和形态特征等信息。

例如，可以描述实验使用的抗体是针对肿瘤标志物CA125的，样本来源于人体卵巢癌组织，实验过程中使用了免疫组化染色试剂盒，并观察到染色结果具有明显的细胞膜表达。

二、结果分析1. 强阳性表达：强阳性表达意味着目标蛋白质在细胞或组织中高水平表达。

在显微镜下观察到明亮的染色，通常是在细胞膜、细胞质或核内。

这种结果表明目标蛋白质与相关疾病或生物学过程密切相关，可以作为潜在的治疗靶点或疾病诊断标记物。

2. 弱阳性表达：弱阳性表达意味着目标蛋白质在细胞或组织中低水平表达。

在显微镜下观察到的染色较为淡色，并且通常在少数细胞中出现。

这种结果可以表示目标蛋白质在特定细胞类型或条件下的表达受到抑制，或者表达水平较低对于疾病进展的影响较小。

3. 阴性表达：阴性表达意味着目标蛋白质在细胞或组织中未被检测到。

在显微镜下观察不到明显的染色。

这种结果可能表明目标蛋白质在该细胞类型或该疾病中不表达，或者实验方法存在技术问题导致无法检测到目标蛋白质。

4. 零值控制：在免疫组化实验中，通常会设置阴性对照或零值对照来验证实验结果的准确性。

零值控制是指阴性对照样本在实验中未出现任何染色反应。

这一结果证明实验方法的特异性良好，不会对非特异性信号产生干扰。

三、结果解释对实验结果进行解释是免疫组化实验结果分析的重要环节。

在解释时，需要结合实验目的、已有的相关研究和临床实际进行综合考虑。

根据实验结果的阳性或阴性表达情况，可以推测目标蛋白质在疾病发生发展中的作用以及其潜在的临床应用前景。

从基础知识到操作技巧：医学检验免疫实习经验总结从基础知识到操作技巧：医学检验免疫实习经验总结随着科技的不断发展和医学技术的越来越先进，医学检验在疾病诊断和治疗中扮演着越来越重要的角色。

作为一名医学检验专业的学生，我在实习过程中受益匪浅，从基础的理论知识到操作技巧都得到了极大的提升和实践。

因此，在这里我想与大家分享一下我的免疫实习经验，并总结一些在实习中需要注意的问题，希望对各位同学有所帮助。

一、实验室安全在进入实验室之前，我们首先需要了解的是实验室安全常识。

实验室中存在着许多危险因素，比如有毒物质、放射性物质、高压电等，这些都需要我们特别注意。

我们需要认真学习实验室的基本规定和操作指导，并严格按照操作程序和安全要求进行实验。

遵守实验室的规定和操作流程，正确使用实验设备和仪器，是确保实验室安全的基本保障。

二、实验前准备在进入实验室之前，需要做好充分的准备工作。

首先，我们需要认真学习相关的理论知识，了解实验的目的、原理、方法和技术操作要点，同时对实验设备和仪器进行充分的了解和掌握。

其次，我们需要安排好实验时间、材料和药品，并准备好所需的实验仪器和装置。

最后，我们还需要注意个人卫生，穿戴干净整洁的实验衣、手套和鞋套，确保实验环境的清洁和卫生。

三、实验操作技巧在进行实验操作时，我们需要掌握一些基本的操作技巧，以确保实验的准确性和可靠性。

首先，我们需要按照操作规程正确地配制试剂和药品，严格控制操作的时间和温度，以避免误差的出现。

其次，我们需要善于观察和记录实验数据，及时进行实验记录和数据整理，以保证实验结果的准确性和可靠性。

此外，需要根据实验的不同要求，采取不同的实验操作技巧，如吸取精细液体时，需要善于使用微量移液管等精细操作工具。

四、实验中需要注意的问题在实验中需要注意的问题较多，其中最重要的是实验的质量控制。

在进行实验之前，需要对所用的试剂、药品、仪器和材料进行检验和质量控制，以确保实验结果的准确性和可靠性。

免疫组织化学技术考点总结免疫组织化学技术又称免疫细胞化学技术，是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。

第一节概述免疫组织化学的基本过程包括：①抗原的提取与纯化；②免疫动物或细胞融合，制备特异性抗体以及抗体的纯化；③将标志物与抗体结合形成标记抗体；④标本的处理与制备；⑤抗原抗体免疫学反应以及标志物呈色反应；⑥观察结果。

一、标本的处理（一）标本的主要来源1.活体组织：应取材于病变组织及病变与正常组织交界处，大小适中。

减少对组织标本的损伤与挤压。

2.体液、穿刺液：可直接涂片或经离心后取沉淀物涂片。

3.培养细胞：悬浮培养的细胞经离心沉淀后做细胞涂片，盖玻片上的单层培养细胞直接固定。

（二）标本的固定与保存1.标本固定的目的：使细胞内蛋白质凝固，细胞内分解酶反应终止，以防止细胞自溶，保持细胞形态和结构；保存组织细胞抗原性；防止标本脱落；除去妨碍抗体结合的类脂，便于保存；抑制组织中细菌的繁殖，防止组织腐败和在后续组织制备中的细胞结构和成分的改变。

标本的固定应以不损伤细胞形态，不干扰固定后抗原的识别和结合为原则。

2.固定剂的选择：蛋白质类抗原，可用乙醇或甲醇固定；微生物抗原可用丙酮或三氯化碳固定；如需除去病毒的蛋白质外壳，可使用胰蛋白酶；多糖类抗原用10%福尔马林固定或以微火加热固定；如有黏液物质存在，应用透明质酸酶等处理除去；类脂质丰富的组织进行蛋白、多糖抗原检测时，需用有机溶剂（乙醚、丙酮等）处理除去类脂。

组织标本常规固定液为中性缓冲甲醛。

3.制片方法的评价：冷冻和石蜡切片是免疫组化最常用的制片方法。

首选冷冻切片。

其操作简便，可避免石蜡切片因固定（甲醛）、脱水、浸蜡等对抗原所造成的损失，适用于不稳定的抗原。

石蜡切片是研究形态学的主要制片方法，它不但是观察组织细胞结构的理想方法，而且可用在陈旧石蜡包埋材料免疫组化的回顾性研究。